第七章 芳胺類藥物的分析

.,第七章芳香胺類藥物的分析,第一節(jié)芳胺類藥物的分析,第二節(jié)苯乙胺類藥物分析,基本要求,練習與思考,.,基本要求,一、掌握芳胺類、苯乙胺類藥物的鑒別和含量測定的基本原理與方法。,.,第一節(jié)芳胺類藥物的分析,芳胺類藥物分為兩類,芳伯氨基未被取代,芳伯氨基被?；?一、對氨基苯甲酸酯類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學性質(zhì),（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物,.,苯佐卡因,鹽酸普魯卡因,.,鹽酸丁卡因,鹽酸普魯卡因胺,.,1.芳伯氨基特性：重氮化偶合反應(yīng)；芳醛縮合成Schiff堿；易氧化變色等。鹽酸丁卡因無此特性。,（二）主要理化性質(zhì),水解特性：分子結(jié)構(gòu)中的酯鍵或酰胺鍵易水解，除鹽酸丁卡因外水產(chǎn)物為對丁基氨基苯甲酸外，上述均為對氨基苯甲酸。,弱堿性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的側(cè)鏈，故具有弱堿性。,4.其它特性：因結(jié)構(gòu)中有芳伯氨基或同時具有脂烴胺側(cè)鏈，其游離堿多為堿型油狀液體或低熔點固體，難溶于水，可溶于有機溶劑。其鹽酸鹽則易溶于水。,.,二、酰胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物,.,對乙酰氨基酚（撲熱息痛）,.,鹽酸布比卡因,鹽酸利多卡因,.,1.水解后顯芳伯氨基特性：分子結(jié)構(gòu)中含有芳酰氨基，酸水解后顯芳伯氨基的特性反應(yīng)。注意空間位阻的影響。2.水解產(chǎn)物易酯化：對乙酰氨基酚，酸水解生成醋酸，在硫酸中與乙醇反應(yīng)，發(fā)出醋酸乙酯香味。,（二）主要化學性質(zhì),.,3.酚羥基特性：對乙酰基酚有游離酚羥基，可與FeCl3發(fā)生顯色反應(yīng)。4.弱堿性：利多卡因和布比卡因烴胺側(cè)鏈有叔胺氮，顯堿性，可與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)，可相互區(qū)別。5.與金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)：利多卡因和布比卡因酰氨基上氮可與Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。,.,三、鑒別試驗,（一）重氮化-偶合反應(yīng)分子結(jié)構(gòu)中含有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生此反應(yīng)。,Ar-NH2,HCl,NaNO2,重氮鹽,OH-,-萘酚,橙黃猩紅色,.,直接反應(yīng)：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺,間接反應(yīng)：對乙酰氨基酚,利多卡因和布比卡因由于空間位阻很難發(fā)生此反應(yīng)。,丁卡因雖無芳伯氨基，但可與NaNO2反應(yīng)生成N亞硝基化合物的乳白色沉淀。,.,.,.,（二）與三氯化鐵反應(yīng),對乙酰氨基酚+FeCl3,藍紫色化合物,.,1.與銅和鈷離子反應(yīng)：利多卡因與硫酸銅生成藍紫色配位化合物；與氯化鈷生成亮綠色沉淀。,（三）與金屬離子反應(yīng),.,.,2.羥肟酸鐵鹽反應(yīng)基于普魯卡因胺分子中的芳酰胺結(jié)構(gòu)。,.,3.與汞離子反應(yīng),鹽酸利多卡因+H2NO3+Hg(NO3)2,黃色,對氨基苯甲酸酯H2NO3+Hg(NO3)2,紅色或橙黃色,.,1.鹽酸普魯卡因的鑒別,(四)水解產(chǎn)物反應(yīng),.,.,2.苯佐卡因的鑒別,苯佐卡因+NaOH,乙醇,乙醇+I2+NaOH,CHI3（碘仿臭氣，黃色沉淀）,.,(五)紫外特征吸收光譜法,1.在max處測定供試液的百分吸收系數(shù)。例如：對乙?；釉?.4%NaOH中于max=240nm;E1%1cm=715在HCl(0.1nol/L)-甲醇于max=249nm;E1%1cm=880,2.在規(guī)定的濃度測定max例如：鹽酸普魯卡因胺5g/ml;max=280nm,(六)紅外吸收光譜法（略）,.,（一）對乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查1.乙醇溶液的澄清度與顏色：因其生產(chǎn)工藝用鐵粉作還原劑，可能帶入，致使乙醇溶液產(chǎn)生混濁，中間體對氨基酚易氧化產(chǎn)生有色化物，在乙醇溶液中顯橙紅色或棕色。,四、特殊雜質(zhì)檢查,.,檢查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液應(yīng)澄清，無色；如顯混濁，與1號濁度標準液比較，不得更濃；如顯色，與棕紅色2號或橙紅色2號標準液比較，不得更深。,2.有關(guān)物質(zhì)檢查：Ch.P是以對氯苯乙酰胺為對照品，采用TLC法中的雜質(zhì)對照品法。,3.對氨基酚檢查：利用對氨基酚在堿性條件下可與亞硝基鐵氰化鈉生成藍色配位化合物，采用比色法。,1.乙醇溶液的澄清度與顏色：,.,(二)鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查,為什么要檢查？,怎樣檢查？,原中國藥典采用TLC法中的雜質(zhì)對照品法進行檢查。（現(xiàn)行中國藥典采用HPLC法檢查）,.,（一）亞硝酸鈉滴定法Ar-NH2;Ar-NHCOR;Ar-NO2均可采用此法Ch.P中的苯佐卡因；鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺及其制劑可直接采用本法。,五、含量測定,.,.,1.原理：,Ar-NHCOR+H2O,Ar-NH2+RCOOH,H+,Ar-NH2+NaNO2+2HCl,Ar-N2+Cl-+NaCl+2H2O,.,測定主要條件：,(1)加KBr增加反應(yīng)速度,重氮化的反應(yīng)歷程為：,NaNO2+HCl,HNO2+NaCl,HNO2+HCl,NOCl+H2O,KHCl,.,.,KBr+HCl,HBr+KCl,HNO2+HBr,NOBr+H2O,KHBr,KHBr比KHCl大300倍,生成NOBr量大得多加快反應(yīng)速度,.,(2)加過量HCl加速反應(yīng)：重氮化速度加快；重氮鹽在酸性介質(zhì)中穩(wěn)定；防止生成氨基偶氮化合物。Ar-N2+Cl-+H2N-ArAr-N=N-NH-Ar+HCl一般摩爾比為Ar-NH2:HCl=1:2.56。,.,(3)室溫條件下滴定:溫度高反應(yīng)速度快；每升高10加快2.5倍,太高,可使Ar-N2+Cl-+H2O,Ar-OH+N2+HCl,(4)滴定管尖端插入液面下滴定,.,3.指示終點的方法(1)永停滴定法溶液檢流計終點前：無過量無電流HNO2終點時：有過量有電流（使指針偏離零HNO2永停在某一位置）(2)外指示劑法用KI-淀粉指示劑指示終點的原理：2NaNO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O,.,(二）非水溶液滴定法(略),.,1.對乙酰基酚原料的含量測定在0.4%NaOH介質(zhì)中；257nmD%E1%1cm樣E1%1cm標100；E1%1cm7152.對乙酰基酚片溶出度測定（測定條件同上）1片稀HCl24ml+H2O1000ml精密量取5ml+0.4%NaOH10ml+H2O100ml257nm測定A。W110005100100C（g/100ml)W(g)=200C;C=A/715溶出度W標示量10080為合格,（三）分光光度法,.,此法主要用于鹽酸普魯卡因注射液的測定。因該注射液中常含有降解產(chǎn)物對氨基苯甲酸；可以苯甲酸為內(nèi)標同時測定兩者的含量，該法簡單準確。色譜條件：色譜柱為BondapakC18300mm4mm流動相為甲醇1HAc(40:60);UV檢測器250nm.,（四）HPLC法,.,第二節(jié)苯乙胺類藥物的分析,一、苯乙胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物,*,.,常見的苯乙胺類藥物,.,.,.,.,（二）主要化學性質(zhì),1.弱堿性本類藥物結(jié)構(gòu)中有烴氨基側(cè)鏈，為仲胺氮顯弱堿性。2.酚羥基特性本類藥物結(jié)構(gòu)中有酚羥基，可與FeCl3;發(fā)生氧化。3.光學活性多數(shù)藥物結(jié)構(gòu)中有手性碳原子，具有旋光性。,.,二、鑒別試驗,(一)與三氯化鐵反應(yīng),Ar-OHFeCl3,絡(luò)合顯色堿液,紫紅色,.,。(二）甲醛硫酸反應(yīng)在此試劑中形成醌式結(jié)構(gòu)而顯色。藥物三氯化鐵甲醛硫酸腎上腺素0.1mol/LHCl顯綠色,甲氨試液顯紅紫紅紅色重酒石酸去甲腎上腺素綠色,加NaCO3試液顯紫色紅色淡紅色鹽酸去氧腎上腺素紫色玫瑰紅橙紅棕紅鹽酸異丙腎上腺素深綠色,加5NaCO3試液顯藍紫色紅色棕色暗紫色,.,(三）氧化反應(yīng),本類藥物具有Ar-OH，易被氧化劑I2,H2O2,K3Fe(CN)6氧化而顯色，例如：腎上腺素在中性或酸性條件下，被I2,H2O2氧化后，生成腎上腺素紅；鹽酸異丙腎上腺素在酸性條件下，被I2氧化，生成異丙腎上腺素紅。,.,(四）紫外特征吸收與紅外吸收光譜,例如：鹽酸異丙腎上腺素0.05mg/mlmax=280nmA=0.50,這一類藥物均可采用紅外吸收光譜進行鑒別,.,(一)酮體檢查本類藥物在生產(chǎn)過程中多采用酮體氫化制得，若氫化不完全，易引入酮體雜質(zhì)。采用UV法檢查：利用酮體在310nm有吸收，本類藥物無吸收。例如：腎上腺素本項檢查配2.0mg/ml=310nmA0.05鹽酸去氧腎上腺素配2.0mg/ml=310nmA0.02鹽酸異丙腎上腺素配2.0mg/ml=310nmA0.15,三、特殊雜質(zhì)檢查,.,220260300nm,腎上腺酮及腎上腺素的紫外吸收曲線,max310nm,.,(二)有關(guān)物質(zhì)的檢查采用TLC法（或HPLC）中的高低濃度對比法進行檢查。,(三)鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍的檢查采用PC法中的雜質(zhì)對照法進行檢查。,.,(一)非水溶液滴定法本類藥物的原料藥多采用此法。本法重點將在第八章討論。1.重酒石酸去甲腎上腺素的測定相當于B的有機酸鹽可直接滴定。2.鹽酸克侖特羅的測定相當于B的HX酸鹽不能直接滴定，需加Hg(Ac)2處理后滴定。3.硫酸沙丁醇的測定相當于B的H2SO4鹽可直接滴定,也可處理后滴定。,四、含量測定,.,(二)溴量法本類藥物重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素及其注射液用此法。,基本原理：,.,(三)比色法利用藥物分子結(jié)構(gòu)中的Ar-OH與Fe3絡(luò)合顯色，進行比色測定；也可利用藥物分子結(jié)構(gòu)中的Ar-NH2重氮化偶合顯色，進行比色。,.,例如：鹽酸克倫特羅栓的含量測定,.,(四)HPLC法例一、重酒石酸去甲腎上腺素注射液的測定采用RPIP-HPLC-UV法；用外標一點法進行定量測定。例二、血漿中兒茶酚胺類（腎上腺素類）藥物的測定采用RPIP-HPLC-EChD法；用標準曲線法進行定量測定。,.,練習與思考,A型題,1鹽酸普魯卡因注射液中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛B.間氨基酚C.水楊酸D.對氨基苯甲酸E.氨基酚2對乙酰氨基酚中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛B.間氨基酚C.對氨基酚D.苯甲酸E.苯酚3腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛B.間氨基酚C.對氨基酚D.酮體E.苯甲酸,.,B型題,A。硫酸銅反應(yīng)B.氧化反應(yīng)C.還原反應(yīng)D.水解后重氮化-偶合反應(yīng)E.重氮化-偶合反應(yīng)1.鹽酸利多卡因2.腎上腺素3.鹽酸普魯卡因4對乙酰氨基酚,A,B