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第1節(jié)、什么是克隆,克隆羊“多利”,多利羊誕生于1996年7月5日,1997年首次向公眾披露。2001年發(fā)現(xiàn)多利羊的左后腿患上了典型的“高齡病癥”關(guān)節(jié)炎,2002年發(fā)現(xiàn)多利患有嚴(yán)重的進行性肺病,經(jīng)羅斯林研究所決定為多利實施“安樂死”。,多利的一生,姓名:多利性別:雌種族:哺乳綱、??啤⒕d羊生日:1996年7月5日出生地:蘇格蘭基因父親:無基因母親:一只芬蘭白綿羊線粒體母親:一只蘇格蘭黑臉羊生育母親:另一只蘇格蘭黑臉羊進入社交圈時間:1997年2月23日子女:生育6名,存活5名死亡:2003年2月14日,細胞核移植,多莉羊的培育過程:,胚胎細胞克隆,體細胞克隆,精子,卵細胞,繁殖的類型:,(一)有性繁殖(二)無性繁殖,特點:具備了雙親的遺傳特性具有更強的生活能力和變異性,定義:,特點:其個體保持了親本的遺傳性狀,產(chǎn)生后代數(shù)量多,舉例:許多植物、海洋生物、多數(shù)微生物等,應(yīng)用:,克隆技術(shù),原因:,由于細胞核具有基因組全套遺傳信息,生物的體細胞有潛力直接發(fā)育成胚胎和核供體完全相同的個體克隆。,一、無性繁殖與克隆,1、克隆的概念:,只要不通過兩個分子、兩個細胞或兩個個體的結(jié)合,只由一個模板分子、母細胞或母體直接形成新一代分子、細胞或個體,就是無性繁殖,即克隆。,分子水平基因克隆,細胞水平細胞克隆,個體水平組織培養(yǎng)成新個體,一、克隆的層次:,1、在分子水平上2、在細胞水平上3、在個體水平上,重組載體通過宿主細胞的無性繁殖使目的基因擴增,再用某探針選取、釣取目的基因。,單克隆抗體:利用動物細胞融合技術(shù)將骨髓瘤細胞和能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞融合得到雜交瘤細胞,再去培養(yǎng),篩選到雜交瘤細胞系。,基因克隆,細胞系的培養(yǎng)(制備單克隆抗體),繁殖出生物個體,目的基因在受體細胞內(nèi)擴增,DNA的復(fù)制,分子水平的克隆,單克隆抗體制備過程,細胞融合、篩選,足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細胞群,單克隆抗體,細胞水平的克隆,自然界的許多生物都具有先天的無性繁殖(克隆)能力。,(草履蟲的分裂生殖),(酵母菌的出芽生殖),個體水平的克隆,草霉,營養(yǎng)生殖,馬鈴薯,落地生根,水螅的出芽生殖,植物克隆,組織培養(yǎng)的過程,(無菌)切下根尖,中國首例異體克隆動物克隆北山羊,綿羊“多利”問世(圖1),世界首例胚胎克隆波爾山羊津生,從理論上說,細胞核具有基因組全套遺傳信息,生物的體細胞有潛力發(fā)育成胚胎和形成與核供體完全相同的克隆個體。,二、克隆技術(shù)的發(fā)展,1、微生物克隆,2、遺傳工程克隆,3、個體水平上的克隆,.20世紀(jì)50年代,美國兩棲動物的魚類細胞核移植技術(shù)。,.20世紀(jì)80年代以來,世界各國應(yīng)用胚胎細胞克隆技術(shù),克隆出羊、牛、鼠、兔、猴等動物。,.1997年蘇格蘭羅斯林研究所完成首例體細胞克隆動物克隆羊“多利”,為什么胚胎細胞的克隆不屬于嚴(yán)格意義上的克?。?克隆技術(shù)的發(fā)展,動物克隆:由胚胎細胞克隆到體細胞克隆的發(fā)展過程,克隆動物就是不經(jīng)過生殖細胞的結(jié)合(受精)而直接由體細胞獲得新的個體。因此,胚胎細胞克隆不屬于嚴(yán)格意義上的動物個體克隆。,我國的克隆技術(shù)也毫不遜色。60年代,生物學(xué)家童第周對金魚、鯽魚進行細胞核移植,1978年又成功地進行了黑斑蛙的克隆試驗,他將黑斑蛙的紅細胞的核移入事先除去了核的黑斑蛙卵中,這種換核卵最后長成能在水中自由游泳的蝌蚪。1979年春,中國科學(xué)院武漢水生生物研究所的科學(xué)家克隆了魚。,小資料1,1990年5月,西北農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧所克隆一只山羊。1992年,江蘇農(nóng)科院克隆一只兔子。1993年,中科院發(fā)育生物學(xué)研究所與揚州大學(xué)農(nóng)學(xué)院合作,克隆一只山羊。1995年7月,華南師大與廣西農(nóng)大合作,克隆一頭奶牛、黃牛雜種牛。1995年10月,西北農(nóng)大克隆6頭豬。1996年12月,湖南醫(yī)大克隆6只老鼠。同年中國農(nóng)科院畜牧所克隆一頭公牛犢。1997年3月,中國科學(xué)院動物研究所研究員陳大元率先提出了克隆大熊貓的設(shè)想。1999年,陳大元領(lǐng)導(dǎo)的小組將大熊貓的體細胞植入去核后的兔卵細胞中,成功地培育出了大熊貓的早期胚胎,克隆大熊貓面臨的兩個關(guān)鍵問題中的一個已經(jīng)解決。,小資料2,三、克隆的條件,1、具有包含物種完整基因組的細胞核的活細胞。,2、能有效調(diào)控細胞核發(fā)育的細胞質(zhì)物質(zhì)。,3、完成胚胎發(fā)育

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