乳制品質(zhì)量安全監(jiān)督抽查檢驗(yàn)細(xì)則

1、乳制品質(zhì)量安全監(jiān)督抽查檢驗(yàn)細(xì)則時(shí)間： 2007-08-31前言為保障人民群眾身體健康，全面推進(jìn) “無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品行動(dòng)計(jì)劃 ”，保證乳制品質(zhì)量安全， 指導(dǎo)有關(guān)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)進(jìn)行乳制品質(zhì)量安全監(jiān)督抽查檢驗(yàn)工作，特制定本檢驗(yàn)細(xì)則，作為組織監(jiān)督抽查的依據(jù)。本標(biāo)準(zhǔn)所列的檢驗(yàn)項(xiàng)目與法律、法規(guī)、規(guī)章有不一致時(shí)，應(yīng)以法律、法規(guī)、規(guī)章的規(guī)定為準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A 為規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由浙江省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢測(cè)協(xié)調(diào)會(huì)議辦公室提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單為：浙江方圓食品與農(nóng)副產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：何喬桑陳自力趙淑娟陳小珍盛華棟乳制品質(zhì)量安全監(jiān)督抽查檢驗(yàn)細(xì)則1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了乳制品的分類、檢驗(yàn)項(xiàng)目、檢驗(yàn)方法、抽樣

2、方法及判定原則。本標(biāo)準(zhǔn)適用于浙江省境內(nèi)生產(chǎn)或銷售的乳制品的質(zhì)量監(jiān)督抽查。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB 4789.2食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定GB 4789.3食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群測(cè)定GB 4789.4食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)GB 4789.5食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)志賀氏菌檢驗(yàn)GB 4789.10食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌檢

3、驗(yàn)GB 4789.11食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)溶血性鏈球菌檢驗(yàn)GB 4789.18食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)乳與乳制品檢驗(yàn)GB/T 5009.11食品中總砷的測(cè)定方法GB/T 5009.12食品中鉛的測(cè)定方法GB/T 5009.17食品中總汞的測(cè)定方法GB/T 5009.24食品中黃曲霉素 M 1 和 B 1 的測(cè)定方法GB/T 5009.29食品中山梨酸、苯甲酸的測(cè)定方法GB/T 5409牛乳檢驗(yàn)方法GB/T 5413.32乳粉硝酸鹽、亞硝酸鹽的測(cè)定3 產(chǎn)品分類乳制品分以下三類：巴氏殺菌乳、滅菌乳、酸牛奶。4 檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)項(xiàng)目見(jiàn)表 1、表 2、表 3。表 1 巴氏殺菌乳檢測(cè)項(xiàng)目序號(hào)檢驗(yàn)項(xiàng)目要求1鉛（以

4、 Pb 計(jì)）， mg/kg0.0512砷（以 As 計(jì)）， mg/kg0.23汞（以 Hg 計(jì)）， mg/kg0.01表 1(續(xù) )4硝酸鹽（以 NaNO 3 計(jì)）， mg/kg8.05亞硝酸鹽以 NaNO 2 計(jì)， mg/kg0.26黃曲霉毒素 M1 ，g/kg0.27菌落總數(shù)， cfu/mL300008大腸菌群， MPN/100mL909青霉素不得檢出10鏈霉素不得檢出12致病菌（指腸道致病菌和致病性球菌）不得檢出表 2 滅菌乳檢測(cè)項(xiàng)目序號(hào)檢驗(yàn)項(xiàng)目要求1鉛（以 Pb 計(jì)）， mg/kg0.052砷（以 As 計(jì)）， mg/kg0.23汞（以 Hg 計(jì)）， mg/kg0.014硝酸鹽（以 N

5、aNO3 計(jì)）， mg/kg8.05亞硝酸鹽（以 NaNO2 計(jì)）， mg/kg0.26黃曲霉毒素 M 1， g/kg0.27青霉素不得檢出8鏈霉素不得檢出9商業(yè)無(wú)菌商業(yè)無(wú)菌表 3酸牛乳檢測(cè)項(xiàng)目序號(hào)檢驗(yàn)項(xiàng)目要求鉛（以 Pb 計(jì)）， mg/kg0.052砷（以 As 計(jì)）， mg/kg0.23汞（以 Hg 計(jì)）， mg/kg0.014硝酸鹽（以 NaNO3 計(jì)）， mg/kg8.05亞硝酸鹽（以 NaNO2 計(jì)）， mg/kg0.26黃曲霉毒素 M 1， g/kg0.5純酸牛乳、調(diào)味酸牛乳70.03苯甲酸， g/kg果味酸牛乳 0.23純酸牛乳、調(diào)味酸牛乳80.001山梨酸， g/kg果味酸牛乳

6、 0.239大腸菌群， MPN/100mL9010致病菌（指腸道致病菌和致病性球菌）不得檢出25 檢驗(yàn)方法5.1 砷的測(cè)定按 GB/T 5009.11 執(zhí)行。5.2 鉛的測(cè)定按 GB/T 5009.12 執(zhí)行。5.3 汞的測(cè)定按 GB/T 5009.17 執(zhí)行。5.4 硝酸鹽及亞硝酸鹽的測(cè)定按 GB/T 5413.32 執(zhí)行。5.5 山梨酸、苯甲酸的測(cè)定按 GB/T 5009.29 執(zhí)行。5.6 黃曲霉素 M1 的測(cè)定按 GB/T 5009.24 執(zhí)行。5.7 青霉素的測(cè)定按 GB/T 5409 執(zhí)行。5.8 鏈霉素的測(cè)定按附錄 A 執(zhí)行5.9 菌落總數(shù)的測(cè)定按 GB 4789.2 和 GB

7、4789.18 執(zhí)行。5.10 大腸菌群的測(cè)定按 GB 4789.3 和 GB 4789.18 執(zhí)行。5.11 致病菌的測(cè)定按 GB 4789.4、GB 4789.5、 GB 4789.10、 GB 4789.11 和 GB 4789.18 執(zhí)行。6 抽樣方法6.1 抽樣方法采取隨機(jī)抽樣的方法進(jìn)行抽樣。6.2 樣品數(shù)量規(guī)格 250mL的樣品，抽取樣品數(shù)量為5 瓶（盒），其中3 瓶（盒）用作檢驗(yàn)， 2 瓶（盒）作為備樣封存留企業(yè)，規(guī)格250mL的樣品，抽取樣品數(shù)量加倍。6.3 注意事項(xiàng)，樣品用塑料袋包裝，貼好樣品標(biāo)志，并經(jīng)受檢單位或個(gè)人對(duì)其有效性進(jìn)行確認(rèn)。樣品標(biāo)志的格式統(tǒng)一，包括以下內(nèi)容：產(chǎn)品名

8、稱、種類、抽樣地點(diǎn)、抽樣時(shí)間、抽樣人姓名及簽字、見(jiàn)證人姓名及簽字。6.3.2 抽樣后應(yīng)盡快將樣品送至檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢驗(yàn)。6.3.3 抽樣單位或人員應(yīng)采取必要的措施，保證送檢樣品滿足檢驗(yàn)需要。7 判定原則抽檢全部項(xiàng)目符合標(biāo)準(zhǔn)要求，判定該批產(chǎn)品為合格；有一項(xiàng)或一項(xiàng)以上項(xiàng)目不符合標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)，判定該批產(chǎn)品為不合格。8 復(fù)檢受檢方對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果異議時(shí)，可申請(qǐng)復(fù)檢。復(fù)檢指對(duì)備樣進(jìn)行檢驗(yàn)。復(fù)檢申請(qǐng)向原檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)提出，原檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)在3 個(gè)工作日內(nèi)作出受理或不受理決定。若受檢方對(duì)不受理決定仍有異議，可向浙江省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢測(cè)協(xié)調(diào)會(huì)議辦公室提出。不合格結(jié)果以檢驗(yàn)結(jié)果通知書的形式送達(dá)受檢方，受檢方應(yīng)在收到不合格通知書

9、之日起3 日內(nèi)提出復(fù)檢申請(qǐng)，逾期不予受理。3附錄 A（規(guī)范性附錄）乳制品中鏈霉素殘留的測(cè)定A.1 測(cè)定原理測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)。微孔板包被有結(jié)合到蛋白上的鏈霉素（固相），鏈霉素抗體、鏈霉素酶標(biāo)記物、標(biāo)準(zhǔn)或樣品溶液或樣本加入后，游離鏈霉素與鏈霉素酶標(biāo)記物競(jìng)爭(zhēng)鏈霉素抗體。沒(méi)有被結(jié)合的酶標(biāo)記物在洗滌時(shí)被除去，將酶基質(zhì)（過(guò)氧化尿素）和發(fā)色劑（四甲基聯(lián)苯胺）加入到微孔中并孵育。結(jié)合的酶標(biāo)記物將無(wú)色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的物質(zhì)，加入反應(yīng)停止液后，使微孔中的顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。在450nm 處進(jìn)行吸光度測(cè)量，吸收度與樣品中的鏈霉素濃度成反比，通過(guò)計(jì)算比例可以獲得樣本中鏈霉素的濃度值。4A.2 試劑和材料A.

10、2.1酶標(biāo)免疫分析定量測(cè)定鏈霉素殘留試劑盒。德國(guó) R-Biopharm 公司制造。A.2.2正己烷。A.2.3Carrez I： 0.36mol/L 鐵氰化鉀（ II ） ?3 H 2O 。A.2.4CarrezII： 1.04 mol/L 硫酸鋅 ?7 H2 O。A.2.5PBS 緩沖液： (0.55g NaH2PO4?H2O;2.85g Na2HPO4 ?2H2O+9gNaCl + 0.1%吐溫 20, 加入蒸餾水至1000mL)。A.3儀器和設(shè)備A.3.1微孔板酶標(biāo)儀 (450nm)。A.3.2離心機(jī)。A.3.3振蕩器。A.3.4混合器。A.3.5磁攪拌器。A.3.625L， 50L,

11、100 L, 1000 L微量加樣器。A.4 樣品處理A.4.1脫脂牛奶用 PBS-Tween 緩沖液以 1:40(25 L牛奶 +975L緩沖液 ) 稀釋，取 50L進(jìn)行測(cè)定。A.4.2脂肪牛奶150C 離心 10 分鐘 （ 3000 轉(zhuǎn) /分鐘）， 去除脂肪 ( 如無(wú)冷凍離心機(jī)請(qǐng)予冷卻樣品)。去除上層脂肪 , 用 PBS-Tween緩沖液以 1:40 稀釋脫脂牛奶，取 50L進(jìn)行測(cè)定。A.5 工作液的準(zhǔn)備制備標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液： 50uLL標(biāo)準(zhǔn)濃縮液用450L緩沖液稀釋并混合均勻，不要用塑料瓶而用玻璃瓶。標(biāo)準(zhǔn)液 1： 50L標(biāo)準(zhǔn)濃縮液 1 用 450L緩沖液稀釋0g/kg。標(biāo)準(zhǔn)液 2： 50L標(biāo)準(zhǔn)

12、濃縮液 2 用 450L緩沖液稀釋0.5 g/kg。標(biāo)準(zhǔn)液 3： 50L標(biāo)準(zhǔn)濃縮液 3 用 450L緩沖液稀釋2g/kg。標(biāo)準(zhǔn)液 4： 50L標(biāo)準(zhǔn)濃縮液 4 用 450L緩沖液稀釋8g/kg。標(biāo)準(zhǔn)液 5： 50L標(biāo)準(zhǔn)濃縮液 5 用 450L緩沖液稀釋32g/kg。標(biāo)準(zhǔn)液 6： 50L標(biāo)準(zhǔn)濃縮液 6 用 450L緩沖液稀釋128g/kg。每一批實(shí)驗(yàn)所用的標(biāo)準(zhǔn)液應(yīng)當(dāng)按上述要求重新制備。A.6 實(shí)驗(yàn)步驟,標(biāo)準(zhǔn)和樣品做兩個(gè)平行實(shí)驗(yàn)，記錄下標(biāo)準(zhǔn)和樣品的位置。A.6.3 加入 50L稀釋了的酶標(biāo)記物到微孔底部, 再加入 50L的標(biāo)準(zhǔn)或處理好的樣品到各自的微孔中。標(biāo)準(zhǔn)和樣品做兩個(gè)平行實(shí)驗(yàn)。A.6.4加入 5

13、0L稀釋了的抗體溶液到每一個(gè)微孔底部充分混合，在室溫孵育2 小時(shí)，覆蓋上薄膜（防止蒸發(fā)）。A.6.5倒出孔中的液體 ,將微孔架倒置在吸水紙上拍打 (每行拍打 3 次)以保證完全除去孔中的液體 . 用 250L蒸餾水充入孔中 , 再次倒掉微孔中液體 ,再重復(fù)操作兩次。A.6.6加入 50L基質(zhì)和 50L發(fā)色試劑到微孔中 , 充分混合并在室溫暗處孵育30 分鐘。A.6.7加入 100L反應(yīng)停止液到微孔中 .，混合好在 450nm 處測(cè)量吸光度值，以空氣為空白。必須在加入停止液后60 分鐘內(nèi)讀取吸光度值。A.7結(jié)果計(jì)算所獲得的標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸光度值的平均值除以第一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0 標(biāo)準(zhǔn) )的吸光度值再乘以100。因此 0 標(biāo)準(zhǔn)等于 100%并且以百分比給出吸光度值。標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值 ( 或樣品 )。5計(jì)算的標(biāo)準(zhǔn)值繪成一個(gè)對(duì)應(yīng)鏈霉素濃度( g /kg)的半對(duì)數(shù)坐標(biāo)系統(tǒng)曲線圖,校正曲線在2ug/kg-32ug/kg 范圍內(nèi)應(yīng)當(dāng)成為線性 .。相對(duì)應(yīng)每一個(gè)樣品的濃度( g /kg)可以從校正曲線上讀出。本方法牛奶中鏈霉素的檢測(cè)限是20g/kg。A.8 注意事項(xiàng)A.8.1保存試劑盒于 20C -80C