臨床血液學(xué)檢驗：實驗四 過氧化物酶染色（POX）

1、實驗三,過氧化物酶染色（POX） 過碘酸-雪夫反應(yīng)（PAS）,細(xì)胞化學(xué)染色Cytochemical Staining,實質(zhì)是原位顯示細(xì)胞成分結(jié)構(gòu)，常為不移 動的有機(jī)化學(xué)物。 細(xì)胞化學(xué)染色包括三個步驟：,過氧化物酶染色Peroxidase Staining （POX）,1.原理： 傳統(tǒng)方法-聯(lián)苯胺法 過氧化氫 過氧化物酶 新生態(tài)氧 聯(lián)苯胺 聯(lián)苯胺藍(lán) 亞硝基鐵氰化鈉 穩(wěn)定的藍(lán)色化合物,然后,10分鐘,操作步驟,新鮮涂片,滴加A液3滴（覆蓋標(biāo)本即可）,滴加等量B液3滴,吹勻,水洗，甩干,甩干，鏡檢,滴加C液3滴，D液6滴混勻,5分鐘,注意事項 （1）標(biāo)本要新鮮 （2）試劑要室溫，用后要蓋好，防止揮發(fā)

2、 （3）加試劑要充分混勻，使染色均勻,結(jié)果判斷（100） 胞漿中出現(xiàn)紅棕色至藍(lán)黑色顆粒為陽性反應(yīng),（）無顆粒沉著 （弱+） 顆粒細(xì)小，分布稀疏 （+）顆粒較粗常呈局灶性分布 （+）顆粒粗大分布較密占胞漿1/22/3 （+）顆粒粗大，呈團(tuán)塊狀分布 （+）顆粒布滿細(xì)胞，可覆蓋胞核,正常參考值 正常人淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞、成熟嗜 堿性粒細(xì)胞，均無POX； 粒細(xì)胞系統(tǒng)：早幼粒以下階段細(xì)胞均為陽性，且逐漸加強(qiáng)，嗜酸粒細(xì)胞陽性最強(qiáng) 單核細(xì)胞內(nèi)POX呈弱陽性。,臨床意義1.輔助鑒別急性白血病的類型 急性粒細(xì)胞白血病 AML （+） 急性淋巴細(xì)胞白血病 ALL（-）(陽性率3) 急性單核細(xì)胞白血病 AM

3、OL（-/） 2. 輔助鑒別急性早幼粒細(xì)胞白血?。ˋPL)、急性 單核細(xì)胞白血病（AMOL)、惡性組織細(xì)胞?。∕H),A: APL B: AMML C: AMOL D: ALL,過碘酸是一種氧化劑，能使細(xì)胞內(nèi)含有乙二醇的糖類氧化產(chǎn)生雙醛基，醛基與schiff試劑中的品紅結(jié)合，形成紫紅色化合物，定位于含有多糖成分的部位。,Periodic Acid-Schiff (PAS) reaction,過碘酸雪夫反應(yīng)（糖原染色),操作步驟,結(jié)果 陽性反應(yīng)：胞質(zhì)內(nèi)染紅色或紫紅色，呈彌 散狀、顆?；驂K狀。胞核染成綠色。,正常血細(xì)胞PAS染色特點,臨床意義 1.鑒別淋巴系統(tǒng)增生的性質(zhì) 惡性增生時多呈強(qiáng)陽性-ALL、CLL、淋巴瘤（紅色顆?；驂K狀） 2.鑒別紅系增生的性質(zhì) 紅血病、紅白血病為強(qiáng)陽性 地中海貧血、IDA 、MDS為陽性 巨幼細(xì)胞性貧血、HA 、AA 陰性,3. 急粒大多數(shù)陰性/少數(shù)陽性（均勻分布顆粒） 4. 巨核系（血小板）陽性，有助于M7的診斷 5. Gaucher 細(xì)胞 (+)，Niemman-pick 細(xì)胞 (-/),注意事項： 1.試劑要在室溫 2.雪夫試劑及時使用 3.結(jié)果及時觀察，放置1周褪色,CLL,ALL,ALL,ALL中粗粗粒散在分布,A:紅白血病 B:巨幼貧,M6 PAS 染色,POX PAS,然后,10分鐘,新