酵母菌霉菌常用培養(yǎng)基的配方[精制甲類]

1、酵母菌、霉菌常用培養(yǎng)基的配制一、目的要求 了解合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。學(xué)習(xí)和掌握麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的配制方法。二、基本原理 麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基有時(shí)也可用于培養(yǎng)放線菌。豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基也是培養(yǎng)酵母菌及霉菌的一種優(yōu)良培養(yǎng)基。察氏培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)霉菌觀察形態(tài)用。麥芽汁培養(yǎng)基為天然培養(yǎng)基，馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基二者均為半合成培養(yǎng)基，而察氏培養(yǎng)基則為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方中出現(xiàn)的自然pH系指培養(yǎng)基不經(jīng)酸、堿調(diào)節(jié)而自然呈現(xiàn)的pH。三、實(shí)驗(yàn)材料(一)藥品葡萄搪

2、、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO47H2O，F(xiàn)eS04、瓊脂。(二)儀器天平、高壓蒸汽滅菌鍋。(三)玻璃器皿移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。(四)其他物品藥匙、pH試紙、稱量紙、記號(hào)筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報(bào)紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(一)麥芽汁培養(yǎng)基的配制1培養(yǎng)基成分新鮮麥芽汁一般為10-15波林。2配制方法 (1)用水將大麥或小麥洗凈，用水浸泡6-12h，置于15陰涼處發(fā)芽，上蓋紗布，每日早、中、晚淋水一次，待麥芽伸長至麥粒的兩倍時(shí)，讓其停止發(fā)芽，曬干或烘干，研磨成麥芽粉，貯存?zhèn)溆谩?(2)取一份麥芽粉加四份水，

3、在65水浴鍋中保溫3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如無藍(lán)色出現(xiàn)，即表示糖化完全)。 (3) 糖化液用4-6層紗布過濾，濾液如仍混濁，可用雞蛋清澄清(用一個(gè)雞蛋清，加水20 m1，調(diào)勻至生泡沫，倒入糖化液中，攪拌煮沸，再過濾)。 (4)用波美比重計(jì)檢測(cè)糖化液中糖濃度，將濾液用水稀釋到10-15波林，調(diào)pH至64。如當(dāng)?shù)赜衅【茝S，可用未經(jīng)發(fā)酵，未加酒花的新鮮麥芽汁，加水稀釋到10-15波林后使用。 (5)如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時(shí)，加入2瓊脂，加熱融化，補(bǔ)充失水。 (6)分裝、加塞、包扎。 (7)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。（二)馬鈴薯

4、葡萄糖培養(yǎng)基的配制1、培養(yǎng)基成分馬鈴薯 20g葡萄糖 2 g瓊脂 1.5-2g水 100ml自然pH 2配制方法 (1)配制20馬鈴薯浸汁 取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000m1。80浸泡lh，用紗布過濾，然后補(bǔ)足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20馬鈴薯浸汁，貯存?zhèn)溆?。?)配制時(shí)，按每100 m1馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖，加熱煮沸后加入2g瓊脂，繼續(xù)加熱融化并補(bǔ)足失水。 (3)分裝、加塞、包扎。 (4)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。 (三)豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基的配制1培養(yǎng)基成分黃豆芽 10g葡萄糖 5g瓊脂 1.5-2g水 100ml自然pH 2配制

5、方法 (1)稱新鮮黃豆芽10g，置于燒杯中，再加入100 m1水，小火煮沸30 min，用紗布過濾，補(bǔ)足失水，即制成10豆芽汁。（2)配制時(shí)，按每100 m1 10豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2 g瓊脂，繼續(xù)加熱融化，補(bǔ)足失水。 (3)分裝、加塞、包扎。 (4)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。 (四)察氏(czapck)培養(yǎng)基的配制1培養(yǎng)基成分蔗糖 3gNaN03 0.3gK2HP04 0.1gKCl 0.05gMgSO47H2O 0.05 gFeS04 0.001 g瓊脂 1.5-2g蒸餾水 100ml自然pH 2配制方法 (1)稱量及溶化 量取所需水量約23左右加入到燒杯中，分別稱取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養(yǎng)基加入1ml 0.1的FeS04溶液。（2）定容 候藥品全部溶解后，將溶液倒入量筒中，加水至所需體積。（3）加瓊脂 加