實驗五-白細(xì)胞分類計數(shù)ppt課件

1、實驗五 白細(xì)胞分類計數(shù),一、實驗?zāi)康?掌握顯微鏡外周血白細(xì)胞分類計數(shù)（DLC）的方法； 掌握外周血各類白細(xì)胞的正常形態(tài),二、實驗原理 將血液制成細(xì)胞分布均勻的血涂片，用瑞氏染液染色，根據(jù)各類細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)和顏色差異將白細(xì)胞區(qū)別并進(jìn)行計數(shù)。通常計數(shù)100個白細(xì)胞，計算得出各種白細(xì)胞所占的百分率,三、實驗器材與試劑 器材： 顯微鏡，香柏油，擦鏡紙，清潔液 試劑：Wright 染液。 四、實驗標(biāo)本：制備良好的血涂片,五、操作步驟 1.制備血涂片：按照正確的操作方法制備血涂片 2.染色：用Wright染液對血涂片染色，沖洗干凈，自然干燥后備用 。 3.低倍鏡觀察：低倍鏡下觀察全片，包括白細(xì)胞飛分布和染

2、色情況,4.油鏡觀察：選擇血涂片體尾交界處細(xì)胞分布均勻、著色良好的區(qū)域，滴加1滴香柏油，按一定的方向順序?qū)λ姷降拿總€白細(xì)胞進(jìn)行分類，并用白細(xì)胞分類計數(shù)器做好記錄，共計數(shù)100個白細(xì)胞,5.計算：求出各類白細(xì)胞所占的百分率。 6.報告方式： 百分率（,六、參考區(qū)間,WBC 百分率 （%） 絕對值（ 109/L ） 中性桿Nst 15 0.040.50 中性分Nsg 5070 2.007.00 嗜酸性 E 0.55 0.050.50 嗜堿性B 01 00.10 淋巴 L 2040 0.804.00 單核M 38 0.120.80,七、注意事項 1.計數(shù)區(qū)域：以體尾交界處最佳。 2.分類方法：遵循

3、一定的方向，以“城垛式”連續(xù)進(jìn)行，避免主觀選擇視野；結(jié)果的記錄可采用計數(shù)器、手工畫“正”字或“+”。 3.計數(shù)的白細(xì)胞數(shù)：白細(xì)胞總數(shù)在（3.015.0）109/L之間者，分類計數(shù)100個白細(xì)胞；總數(shù)在15.0109/L以上時，計數(shù)200個；總數(shù)低于3.0109/L時，應(yīng)選用兩張血涂片計數(shù)50100個白細(xì)胞,4.計數(shù)結(jié)果：用各類白細(xì)胞的百分率乘以白細(xì)胞總數(shù)，即可求得每升血液中各類白細(xì)胞數(shù)量的絕對值。 5.血涂片中有有核紅細(xì)胞時，應(yīng)逐個計數(shù)，但不計入100個白細(xì)胞內(nèi)，以分類100個白細(xì)胞過程中見到的有核紅細(xì)胞個數(shù)來報告，并注明其所屬階段。 6.分類中還應(yīng)注意觀察成熟紅細(xì)胞、血小板的形態(tài)、染色及其分

4、布情況，注意有無寄生蟲（如瘧原蟲）及其他異常所見,外周血各類白細(xì)胞的正常形態(tài),白細(xì)胞,粒細(xì)胞,淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞,一、白細(xì)胞的組成,中性粒細(xì)胞,嗜酸性粒細(xì)胞,嗜堿性粒細(xì)胞,白細(xì)胞是機(jī)體抵抗病原微生物等異物入侵的主要防線,全能干細(xì)胞,髓系干細(xì)胞,淋巴系干細(xì)胞,粒-單核系祖細(xì)胞,T淋巴系祖細(xì)胞,B淋巴系祖細(xì)胞,原粒細(xì)胞,T原淋巴細(xì)胞,B原淋巴細(xì)胞,分葉核粒細(xì)胞,單核細(xì)胞,T淋巴細(xì)胞,B淋巴細(xì)胞,漿細(xì)胞,GM-CSF,T幼淋巴細(xì)胞,B幼淋巴細(xì)胞,早幼粒細(xì)胞,中幼粒細(xì)胞,晚幼粒細(xì)胞,桿狀核粒細(xì)胞,幼單核細(xì)胞,原單核細(xì)胞,嗜酸性粒細(xì)胞,嗜堿性粒細(xì)胞,中性粒細(xì)胞（Neutrophil，N,具有趨化、變形、

5、黏附、吞噬、殺菌作用，防御和抵抗病原菌侵襲,二、白細(xì)胞的功能,淋巴細(xì)胞（Lymphocyte，L,B細(xì)胞 漿細(xì)胞 生成Ab 體液免疫 T細(xì)胞 免疫活性物質(zhì) 細(xì)胞免疫,單核細(xì)胞（Monocyte，M,吞噬，殺滅病原體 清除損傷或已死亡的細(xì)胞 處理抗原,嗜堿性粒細(xì)胞（Basophil，B,通過釋放嗜堿性顆粒（組胺、肝素、慢反應(yīng)物質(zhì)等）參與超敏反應(yīng),嗜酸性粒細(xì)胞（Eosinophil，E,抑制嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞合成和釋放活性物質(zhì)，吞噬其釋出顆粒，破壞組胺，限制過敏反應(yīng) 參與對寄生蟲的免疫反應(yīng),1.中性粒細(xì)胞(N,直徑10-15um,胞質(zhì)：粉紅色，含較多細(xì)小均勻的紫紅色中性顆粒,胞核：染色不均,三

6、、白細(xì)胞正常形態(tài),按胞核的形態(tài)分為,N桿狀核（Nst,N分葉核（Nsg,核徑最窄處大于最寬處1/3為桿狀核，核型多樣，可呈C形 、S形、V形或不規(guī)則形,核徑最窄處小于最寬處1/3為分葉核，細(xì)胞分25葉，甚至5葉以上,中性粒細(xì)胞,桿狀核,分葉核,2. 嗜酸性粒細(xì)胞（E,形態(tài)：略大于中性粒細(xì)胞,胞漿：胞漿內(nèi)充滿粗大、整齊、均勻、排列緊密、有立體感的桔紅色嗜酸性顆粒,胞核：長呈分葉狀，二葉居多，呈眼鏡狀，偶見34葉,染色質(zhì)粗，染深紫紅色,嗜酸性粒細(xì)胞 （血涂片,3. 嗜堿性粒細(xì)胞（B,胞體呈圓形，略小于中性粒細(xì)胞,胞漿：含粗大但大小不一、分布不均勻的紫黑色嗜堿性顆粒，顆粒常覆蓋于核上，致使核的輪廓與

7、結(jié)構(gòu)模糊不清,胞核：核分葉不明顯，形態(tài)不規(guī)則,嗜堿性粒細(xì)胞 （血涂片,顆粒特點(diǎn)大小不一分布不均嗜堿性強(qiáng),4. 淋巴細(xì)胞（L,形態(tài)：直徑6-15um，分為大L和小L,胞核：圓形或腎形，深紫紅色。染色質(zhì)粗糙，排列均勻，大淋巴細(xì)胞核常偏于一側(cè),胞漿：小淋巴極少,漿內(nèi)無顆粒，常呈裸核。大淋巴胞漿豐富 ，呈透明藍(lán)色，常有少量粗大、大小不均的紫紅色嗜天青顆粒,淋巴細(xì)胞 （血涂片,5.單核細(xì)胞（M,形態(tài)：為外周血中最大的細(xì)胞，直徑15-25um 胞體呈圓形或不規(guī)則形,胞漿：豐富，染淡藍(lán)色或灰藍(lán)色，呈毛玻璃樣半透明。胞漿內(nèi)含大量細(xì)小、彌散分布的灰塵樣淡紫紅色嗜天青顆粒，可見空泡,胞核：細(xì)胞核大，呈不規(guī)則圓形、腎形、馬蹄形或不規(guī)則分葉，有時折疊扭曲。染色質(zhì)細(xì)致、疏松如網(wǎng)狀，染為淡紫紅色,五類白細(xì)胞,外周血正常白細(xì)胞形態(tài)特征,四、一些異常結(jié)構(gòu)及細(xì)胞的認(rèn)識,1.核左移 外周血中桿狀核粒細(xì)胞增多或出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒、早幼粒細(xì)胞,2.核右移：主要見于營養(yǎng)性巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血等,3. 毒性變化,大小不均：病程長的化膿性炎癥 中毒顆粒：化膿菌感染及大面積燒傷 空泡：敗血癥 Dohle小體 （藍(lán)斑）：是核和胞質(zhì)發(fā)育不平衡表現(xiàn) 退行性變：核固縮、核腫脹 、核溶解,中性粒細(xì)胞大小不均,大小不均,中性粒細(xì)胞中毒顆粒,中毒顆粒：粗大、大小不等、分布不均勻的紫黑色或深紫紅色顆粒