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文檔簡介

二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建（核心步驟,先用同一種限制酶分別切割目的基因和質(zhì)粒，再用DNA連接酶將二者連接，形成重組DNA分子,三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（轉(zhuǎn)化,常用的受體細(xì)胞： 有大腸桿菌、枯草桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等,1、受體細(xì)胞是植物細(xì)胞,農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：主要侵染雙子葉植物（傷口分泌酚類化合物吸引農(nóng)桿菌） 基因槍法 花粉管通道法,1）土壤農(nóng)桿菌法,2）基因槍法,3）花粉管通道法,2、受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞,顯微注射法 注入動(dòng)物受精卵,1982年，世界上第一例體型比普通小鼠大1.8倍的轉(zhuǎn)基因超級(jí)小鼠誕生,3、受體細(xì)胞是微生物,將目的基因?qū)朐松锏暮锰幨鞘裁矗?繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少 要想使重組DNA順利進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)，最大的難題是什么？ 一般用CaCl2處理，改變細(xì)胞膜的通透性，使得重組DNA能夠進(jìn)入細(xì)胞,四、目的基因的檢測與鑒定,檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA是否插入目的基因 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 檢測性狀,分子水平,個(gè)體水平,1、檢測目的基因,DNA分子雜交技術(shù) 提取轉(zhuǎn)基因生物的DNA 制作分子探針（目的基因的一段單鏈序列） 進(jìn)行分

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