無菌藥品檢查要點

1、無菌藥品gmp認證檢查要點,河北省食品藥品監(jiān)督管理局 藥品審評認證中心 劉長青,無菌藥品的概念及分類,無菌藥品是要求沒有活體微生物存在的藥品，也就是法定藥品標準中有無菌檢查項目的藥品。 為了達到產(chǎn)品中沒有活體微生物，在生產(chǎn)過程中，需要采取各種方法來去除制品中原有的微生物和防止制品受到微生物的污染。,無菌藥品的概念及分類,無菌藥品的分類 最終滅菌的無菌藥品：耐熱的產(chǎn)品，能通過熱處理的方式來去除制品中可能存在的微生物，通常采用濕熱滅菌法。如，大容量注射劑、小容量注射劑 非最終滅菌的無菌藥品：在工藝過程的最后內(nèi)包完畢后沒有一個單獨的滅菌過程，其無菌性主要依賴整個過程中保持對各個工序的無菌控制，避免生

2、產(chǎn)過程中的微生物污染。如，粉針劑、凍干粉針劑、部分小容量注射劑、滴眼劑、無菌原料藥等,無菌藥品的概念及分類,無菌藥品的生產(chǎn)方法的選擇 根據(jù)藥品的品種及工藝的開發(fā)，無菌藥品首選的辦法是最終滅菌，保證產(chǎn)品的無菌特性； 當滅菌可能會造成副產(chǎn)物等問題時，盡可能從工藝上創(chuàng)造條件，使滅菌成為可行； 由于熱不穩(wěn)定性，應決定使用一種替代方法：除菌過濾和/無菌生產(chǎn)。非最終滅菌無菌藥品的基本特征是：低安全+高成本,滅菌工藝的選擇,產(chǎn)品能否121濕熱滅菌15分鐘,產(chǎn)品能否濕熱滅菌f08分鐘，達到sal106,產(chǎn)品藥液能否除菌過濾,無菌原料，無菌配制 無菌灌封,選用濕熱滅菌12115分鐘,藥液除菌過濾和無菌灌封,否,

3、是,否,是,否,是,使用濕熱滅菌f08分鐘,從“欣弗”事件談無菌生產(chǎn)工藝選擇,克林霉素磷酸酯是國外20世紀70年代的專利產(chǎn)品，一直采用小容量注射劑。我國在1994年首先批準了華藥原料藥和小容量注射劑的仿制。該產(chǎn)品主要用于革蘭氏陽性菌和厭氧菌的感染，臨床療效好，注射不疼痛，不用做皮試。在本世紀初因便于臨床推廣，受到很多廠家重視，紛紛通過改變劑型、取得新藥證書，大量推向市場。,從“欣弗”事件談無菌生產(chǎn)工藝選擇,欣弗事件的發(fā)生 2006年7月 安徽華源 克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液 不良事件報告81例，涉及10個省份,克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查,克林霉素磷酸酯氯化鈉注射（100ml:0.6g） 采

4、用半無菌工藝生產(chǎn) 滅菌條件100、7分鐘 貯存條件陰涼 有效期1年 有些企業(yè)的處方中含有苯甲醇 穩(wěn)定性考察有一批留樣的有關物質為7.9 有關物質總雜不得過8.0 單雜不得過5.0,克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查,克林霉素磷酸酯注射液（2ml:0.3g） 滅菌條件100、310分鐘 貯存條件遮光、密閉保存 有效期2年 處方中含有苯甲醇 有關物質總雜不得過6.0（2004年底改為8.0） 單雜不得過4.0,克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查,注射用克林霉素磷酸酯（0.3g或0.6g） 凍干粉針 貯存條件遮光、密閉，在陰涼處保存 有效期2年 有的處方中含有苯甲醇 有關物質總雜不得過4.0 單雜不得過2.

5、5,克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品質量標準中有關物質項比較,克林霉素磷酸酯水溶液熱穩(wěn)定性研究,江蘇省的一家藥廠經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)，克林霉素磷酸酯水溶液加熱到60，含量下降86% 因無法采用滅菌工藝生產(chǎn)，該企業(yè)最終申報了克林霉素磷酸酯的凍干粉針劑,事件發(fā)生的原因,對滅菌的認識不正確 產(chǎn)品研發(fā)未考慮滅菌工藝的可行性 忽視工藝的可行性，盲目跟風報批 注射劑用原料藥的雜質控制不嚴 忽視產(chǎn)品的安全性,注射劑的特點,藥效迅速、作用可靠 可用于不宜口服給藥的患者 可用于不宜口服的藥物 發(fā)揮局部定位作用 注射給藥不方便且注射時疼痛 直接入血制劑，質量要求比其他劑型更嚴格，使用不當更易發(fā)生危險 制造過程復雜，生產(chǎn)費用較大，價

6、格較高,注射劑的一般質量要求,無菌 成品中不得含有任何活的微生物 無熱原 特別是供靜脈及脊椎注射的制劑 澄明度 不得有肉眼可見的渾濁或異物 安全性 不能引起對組織的刺激性或發(fā)生毒性反應，特別是一些非水溶劑及一些附加劑，必須經(jīng)過必要的動物實驗，以確保安全,注射劑的一般質量要求,滲透壓 與血漿的滲透壓相等或接近 ph 要求與血液相等或接近（血液ph7.4） 必要的物理和化學穩(wěn)定性，以確保產(chǎn)品在儲存期內(nèi)安全有效 降壓物質 有些注射液，如復方氨基酸注射液，其降壓物質必須符合規(guī)定，確保安全,無菌藥品生產(chǎn)中的污染來源,人員 人是無菌藥品生產(chǎn)中的主要污染源，在管理比較到位，生產(chǎn)設備自動化程度較好，操作人員素

7、質較高的企業(yè)，人員操作所致的污染率超過70% 水源性微生物 絕大多數(shù)為革蘭氏陰性菌，不會形成芽孢，不耐熱。其代謝產(chǎn)物及細胞的尸體及碎片均屬細胞內(nèi)毒素的污染源 空氣中的微生物 基本為革蘭氏陽性菌，有可能會形成芽孢使其耐熱性增大,無菌藥品生產(chǎn)的特殊要求,關鍵區(qū)域和關鍵表面：關鍵區(qū)域指無菌產(chǎn)品或容器/密封件所暴露的環(huán)境區(qū)域；關鍵表面是與無菌產(chǎn)品或容器/密封件相接觸的表面。 生產(chǎn)環(huán)境：通常應在100級潔凈區(qū)或萬級背景下的局部100級潔凈區(qū)。 操作人員：根據(jù)工藝規(guī)定的環(huán)境要求，穿著潔凈工作服或無菌工作服,無菌工作服式樣及穿戴方式,無菌藥品生產(chǎn)的特殊要求,原料及內(nèi)包裝材料：進入無菌區(qū)前，應根據(jù)材料的性質對

8、其采取除菌、滅菌和去熱原處理。 惰性氣體、壓縮空氣等介質：直接接觸藥品的均應經(jīng)除菌過濾達到無菌狀態(tài)。 生產(chǎn)設備與工器具：應能有效地進行在線或離線的清洗和滅菌。,無菌藥品生產(chǎn)的特殊要求,清潔工具：無菌藥品生產(chǎn)環(huán)境中的各種表面清潔中使用的器具工具，應能夠根據(jù)工藝要求有效地清潔滅菌或消毒處理。 消毒劑：應有相應的除菌或其他處理措施。 如：無菌室內(nèi)使用的75%酒精應經(jīng)除菌過濾后使用。,無菌藥品生產(chǎn)線廠房檢查的基本內(nèi)容,無菌藥品生產(chǎn)廠房與設施是實施藥品gmp、保證無菌藥品質量的先決條件，其布局、設計和建造應有利于避免交叉污染、便于清潔及日常維護 結合具體生產(chǎn)工藝，分清無菌操作區(qū)域與潔凈區(qū)域的聯(lián)系與區(qū)別

9、不同潔凈級別區(qū)應設相應的潔具間，清潔用具不得跨區(qū)使用,廠房設計、建造的原則,無菌生產(chǎn)設計就是為了減少在生產(chǎn)中對暴露的物料的潛在污染 人、物流一定要合理，以減少不必要的活動對暴露產(chǎn)品、容器、包裝材料和環(huán)境所造成的潛在污染。設備的設計安裝安排應合理，使得操作簡單易行。 無菌室的人員數(shù)量應最少，人流的設計應能夠減少人員在無菌室的穿越。 設備的設計應盡能減少人員數(shù)量以及人員操作時的活動量對環(huán)境的污染,廠房設計、建造的原則,產(chǎn)品應在合理的潔凈區(qū)條件下進行運輸 無菌生產(chǎn)中各個相互聯(lián)系的房間要維護好各個房間的獨立性，減少動態(tài)條件下的相互干擾 在無菌生產(chǎn)區(qū)域內(nèi)設置地漏被認為是不合適的,關鍵區(qū)域與關鍵表面的要求

10、,潔凈區(qū)的建筑材料應易于清洗和消毒，房間內(nèi)表面應無裂縫，墻與地面的連接處應采用圓弧角。地面、墻壁、頂棚材質應堅硬、光滑、易于清洗。頂棚與hepa過濾器邊框之間的縫隙應能夠保證嚴密，滿足無菌條件，防止污染 不應該存放不必要的物料和設備 設備的水平面以及支架上應不易積聚灰塵，在關鍵區(qū)域內(nèi)的設備不應影響氣流的方向，應能確保氣流的單向流,潔凈度級別比較,who gmp 2002 標準,注：新標準分為動態(tài)及靜態(tài)，差一個級別；a級沒有要求連續(xù)微粒測試 引自who技術報告902，2002,who gmp 2002 微生物指標,注：沉降碟的暴露時間，一般4小時，我國為0.5小時 引自who技術報告902，20

11、02,fda對潔凈區(qū)劃分的標準2004,所有級別均依據(jù)生產(chǎn)活動時在鄰近暴露物料/物品處測試的數(shù)據(jù) 浮游菌、沉降菌糾偏限度表示建議的環(huán)境質量水平。企業(yè)也可根據(jù)作業(yè)或分析方法的類型確定微生物糾偏措施標準 引自guidance for industry sterile drug products produced by aseptic processing current good manufacturing practice, fda,中國 gmp（1998 修訂）,我國百級標準采用了國際標準中b級（亂流百級）的限度標準 標準沒有闡明對氣流組織的要求,關鍵操作區(qū)空氣流向控制要求比較,預過濾器,空氣

12、處理單元,主過濾器,1,2,3,低位排風口,吊頂排風口,氣流組織形式,潔凈區(qū)壓差控制要求比較,潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)控要求比較,潔凈生產(chǎn)區(qū)域的衛(wèi)生設施,無菌操作區(qū)內(nèi)不應設置清洗間和帶水池的潔具間。 清潔用具應定期清洗或消毒 無菌操作百級區(qū)不得設置地漏，無菌操作萬級區(qū)應避免設置水池和地漏。,潔凈廠房衛(wèi)生要求,無菌潔凈室的送、回風過濾器的框架不得采用脫屑、產(chǎn)塵、長菌的材質。無菌操作區(qū)不得設置可開啟式窗戶。 無菌檢查室應按無菌操作區(qū)管理，應在萬級環(huán)境下的局部百級超凈工作臺上進行，不得與生物檢定、微生物限度檢查、污染菌鑒別和陽性對照試驗使用同一實驗室。,工藝用輔助用房的要求,無菌原料藥內(nèi)包裝材料的最終處理環(huán)境應

13、為萬級；非最終滅菌的無菌原料藥內(nèi)包裝材料的最終處理后的暴露環(huán)境應為百級或無菌萬級背景下的局部百級。 無菌操作區(qū)墻面與地面之間宜成弧形，便于清潔。 萬級無菌操作間不應設清潔間和清潔用具間,最終滅菌無菌藥品工藝平面檢查要點包括,最終可滅菌制品對生產(chǎn)過程的微生物控制要求不高，最后依靠一個滅菌工藝來保證制品的無菌性。因此，制品的生產(chǎn)檢查重點是放在對產(chǎn)品的滅菌過程的完整性進行驗證上。 物料處理應在萬級潔凈度條件下進行，目的是使微生物和塵埃微粒數(shù)較低。配料也可在10萬級潔凈度條件下進行，前提條件是在工藝過程的其他步驟中有降低污染可能的手段。無菌藥品灌裝時必須在層流罩下工作，潔凈度等級為百級。,非最終滅菌無

14、菌藥品工藝平面檢查關鍵有以下幾點,嚴格體現(xiàn)出未經(jīng)消毒滅菌處理的物料不可能進入無菌室內(nèi) 經(jīng)過消毒滅菌處理后的物料應直接出現(xiàn)在無菌操作區(qū)域內(nèi)，不應該再經(jīng)過非無菌操作區(qū)而受到再污染 清洗驗證和滅菌驗證的程序資料需完整,設備的檢查要點,工藝設備的基本要求,無菌藥品工藝設備與藥品直接接觸部分的材質，表面應光潔、平整、易清洗或消毒、耐腐蝕、不應脫屑、生銹、發(fā)霉、長蟲，不與藥品發(fā)生化學變化，不得吸附和污染藥品，耐于熱滅菌、濕熱滅菌或化學滅菌； 壓縮空氣、氮氣或真空設備應配備不得釋放纖維物質的過濾器或除塵器； 設備、容器和工藝管道應有恰當?shù)那逑础缇椒?，不能移動的設備應有在線清洗和滅菌的設施；,工藝設備的基

15、本要求,安裝位置應便于設備生產(chǎn)操作、清洗、消毒、滅菌、維護、保養(yǎng)，需要清洗和滅菌的零部件應易于拆裝； 塑料容器和膠塞在處理和貯存過程中應控制可能產(chǎn)生的熱源污染，因此應作去熱源處理。盡可能縮短清洗塑料容器和膠塞到滅菌之間的時間間隔。,設備的檢查要點,適用于產(chǎn)品的生產(chǎn)、清潔、消毒或滅菌 盡可能采用密閉系統(tǒng) 合理布置和安裝 關鍵參數(shù)控制和記錄儀表的校準 設備的確認、維護和維修 設備的清潔、消毒或滅菌 共用設備應有防止交叉污染的措施,密閉系統(tǒng)示例,工藝用水的檢查要點,水處理設施及其分配系統(tǒng)的設計、安裝和維護應能確保供水達到適當?shù)馁|量標準。水系統(tǒng)的運行不應超越其設計能力。 注射用水的生產(chǎn)、貯存和分配方式

16、應能防止微生物生長，例如，在70以上保持循環(huán) 水源、水處理設施及水的化學和生物學污染狀況應定期監(jiān)測，必要時還應監(jiān)測細菌內(nèi)毒素。監(jiān)測結果以及所采取糾偏措施的記錄應予歸檔,生產(chǎn)工藝,從上海華聯(lián)甲氨蝶呤事件看加強生產(chǎn)管理防止交叉污染的措施,7月6日 國家藥品不良反應監(jiān)測中心陸續(xù)收到廣西、上海等地部分醫(yī)院的藥品不良反應病例報告。患者共同使用了標示為上海醫(yī)藥(集團)有限公司華聯(lián)制藥廠生產(chǎn)的注射用甲氨蝶呤(批號為070403a、070403b，規(guī)格5mg)。為保證公眾用藥安全，國家藥監(jiān)局決定暫停上述批號產(chǎn)品的銷售和使用。 7月30日 上海華聯(lián)制藥廠070405b、070502b兩個批號注射用甲氨蝶呤(5m

17、g)被暫停用于鞘內(nèi)注射。 8月 北京、安徽、河北、河南等地醫(yī)院有關使用上海華聯(lián)藥品發(fā)生不良事件的報告，陸續(xù)上報到國家藥品不良反應監(jiān)測中心。此時，發(fā)生不良事件的藥品已涉及上海華聯(lián)甲氨蝶呤、鹽酸阿糖胞苷兩種注射劑,從上海華聯(lián)甲氨蝶呤事件看加強生產(chǎn)管理防止交叉污染的措施,8月31日 國家藥監(jiān)局和衛(wèi)生部決定，暫停上海華聯(lián)制藥廠生產(chǎn)的注射用甲氨蝶呤和注射用鹽酸阿糖胞苷用于鞘內(nèi)注射 9月5日 上海華聯(lián)制藥廠注射用甲氨蝶呤和注射用鹽酸阿糖胞苷的生產(chǎn)、銷售和使用，被暫停 。 9月14日 藥監(jiān)、衛(wèi)生部門的聯(lián)合專家組查明，上海華聯(lián)制藥廠在生產(chǎn)部分批號甲氨蝶呤和阿糖胞苷過程中，混入了硫酸長春新堿 。,從上海華聯(lián)甲氨

18、蝶呤事件看共用設備防止交叉污染的措施,12月13日公布：在衛(wèi)生部、國家食品藥品監(jiān)督管理局聯(lián)合調(diào)查組的指導和參與下，上海市政府相關部門近期基本查明上海醫(yī)藥（集團）有限公司華聯(lián)制藥廠生產(chǎn)的鞘內(nèi)注射用甲氨蝶呤和阿糖胞苷藥物損害事件原因。上海華聯(lián)制藥廠因造成重大藥品生產(chǎn)質量責任事故被依法吊銷藥品生產(chǎn)許可證，企業(yè)相關責任人已被公安部門拘留。相關賠付工作已啟動。,從上海華聯(lián)甲氨蝶呤事件看共用設備防止交叉污染的措施,華聯(lián)制藥廠在生產(chǎn)過程中，現(xiàn)場操作人員將硫酸長春新堿尾液混于注射用甲氨蝶呤及鹽酸阿糖胞苷等批號藥品中，導致了多個批次的藥品被硫酸長春新堿污染，造成重大的藥品生產(chǎn)質量責任事故。華聯(lián)制藥廠有關責任人在

19、前期的聯(lián)合調(diào)查組調(diào)查期間和后期公安機關偵察中，有組織地隱瞞違規(guī)生產(chǎn)的事實。,上海華聯(lián)甲氨蝶呤事件的教訓,忽視各種標志在防止差錯中起的重要作用 對于高風險品種，清潔驗證工作要逐品種進行；抗腫瘤類、激素類等產(chǎn)品要提高可接受標準 。 不同給藥途徑的藥品清場要徹底。 換品種后，嘗試增加上批產(chǎn)品殘留的監(jiān)測。 對于無菌藥品生產(chǎn)，生產(chǎn)人員的技能、所接受的培訓及其工作態(tài)度及其重要。,生產(chǎn)工藝,配制 過濾 無菌灌裝 凍干 滅菌工藝,配制工序的檢查要點,操作區(qū)的設置和潔凈度級別 配料處方 稱量操作 稱量記錄 防止污染和交叉污染的措施,稱量,必須按照注冊批準的處方配料 中國藥典（2005年版二部）凡例十五條規(guī)定：如

20、已知某儀成分在生產(chǎn)或貯存期間含量會降低，生產(chǎn)時可適當增加投料量，以保證在有效期內(nèi)含量能符合規(guī)定。 投料量可折算含量和水分，也可直接按100%投料。,稱量,稱量中應特別注意防止交叉污染 一次稱量一種物料 通常先稱量輔料，后稱量原料藥 活性炭應在單獨區(qū)域中稱量，稱量后放在水溶液中 衡器 使用前應檢查校準 稱量記錄 最好采用客觀的記錄 如實記錄衡器的讀數(shù) 復核,過濾工序的檢查要點,過濾器的安裝位置 過濾器的相關信息 過濾器完整性試驗的方法 過濾前后的完整性試驗和記錄 過濾器的更換、消毒或滅菌 發(fā)現(xiàn)過濾器出問題后的處理,過濾器的安裝,除菌過濾用過濾器通常使用2只串聯(lián)方式，確保過濾的可靠性 可能情況下，

21、應在緊挨灌裝點的位置，用除菌過濾器將所有藥液，特別是大容量注射劑進行除菌過濾 采用無菌制造工藝時，除菌過濾操作區(qū)域不得設在無菌操作區(qū)內(nèi)，可通過管道傳送濾液,過濾器的完整性試驗,過濾器的相關信息應具有可追溯性 完整性試驗的合格標準應參照供應商的說明書設定 應在過濾前、過濾后分別測試 測試方法 起泡點試驗 前進流試驗 微生物挑戰(zhàn)性試驗由供應商做，以避免污染產(chǎn)品,無菌灌裝檢查要點,關鍵操作區(qū)和生產(chǎn)設備 清潔、消毒或滅菌 無菌灌裝用各類物料、器具的準備或滅菌處理 生產(chǎn)用氣體 人員的無菌操作 裝量控制 培養(yǎng)基模擬灌裝驗證 無菌檢驗樣品的取樣 檢查時應不能影響正常的生產(chǎn),培養(yǎng)基模擬灌裝驗證,目的 確定實際

22、生產(chǎn)中（如開機前的調(diào)試、加入無菌原輔材料、無菌連接、灌裝和密封）產(chǎn)品污染的概率 基本思路 應綜合考慮生產(chǎn)線可能造成污染的各種因素，并能對工藝受控的狀態(tài)做出準確的評估 應盡可能模擬實際生產(chǎn)的無菌操作，可能時，應包括最差條件的相關活動，以挑戰(zhàn)無菌操作,培養(yǎng)基模擬灌裝驗證,常規(guī)的工藝驗證試驗包括培養(yǎng)基模擬灌裝驗證試驗，最少在線灌裝三批，每批的批量見下表，每瓶產(chǎn)品均應進行無菌檢查，判斷該試驗是否合格的標準見下表: 培養(yǎng)基灌裝試驗的批量與判斷合格的標準批量（瓶）3000475063007760允許染菌 0 1 2 3 的數(shù)量（瓶）,凍干檢查要點,凍干的優(yōu)點 簡單的液體過程，無菌處理簡單。 提高干粉的穩(wěn)定

23、性。 不需要過多的加熱產(chǎn)品就可以除去水分。 在干燥的情況下提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性。 快速簡單的產(chǎn)品復溶 凍干的缺點簡單的液體過程，無菌處理簡單。 增加操作和處理時間 還原時需要無菌液體,臨床使用不方便 復雜、昂貴的設備 較低的無菌保證值,凍干檢查要點,凍干產(chǎn)品關鍵控制要點 無菌和穩(wěn)定性問題與凍干產(chǎn)品的制造和控制密切聯(lián)系 ，現(xiàn)在公認復雜的技術與凍干制劑的制造和控制相互關聯(lián)。關鍵的步驟包括：溶液的處方、瓶子灌裝和灌裝操作的驗證、凍干機的滅菌和動力因素、按比例擴大和凍干周期的驗證、最終產(chǎn)品的測試,凍干檢查要點,凍干產(chǎn)品的包裝形式、裝量 凍干產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量 凍干工藝和曲線 凍干工藝的驗證 凍干產(chǎn)品

24、進出冷凍干燥室的操作 凍干機的滅菌 凍干機 關鍵參數(shù)控制和記錄儀表的校準 管路的連接 凍干的記錄,影響凍干產(chǎn)品質量的主要因素,凍結 產(chǎn)品溶液處方 冷凍速率 冷凍方式 是否退火 產(chǎn)品裝量和數(shù)量,干燥 擱板溫度 產(chǎn)品溫度 冷凝器溫度和真空度 冷凍干燥室的真空度 產(chǎn)品裝量和數(shù)量,凍干工藝的關鍵控制參數(shù),冷凍速率 擱板溫度 產(chǎn)品溫度 冷凝器溫度和真空度 冷凍干燥室的真空度,凍干機的滅菌,乙醇只能起到消毒的作用，不能做到滅菌 普遍認可的方法為濕熱滅菌法 氮氣、空氣過濾器和進氣口管道應滅菌完全 冷凍干燥室的滅菌應使蒸汽在擱板間自由流通 冷凍干燥室在各批次間應進行滅菌 滅菌程序的驗證應采用生物指示劑 冷凝器

25、應滅菌 滅菌應有完整的記錄,滅菌工藝的選擇,濕熱滅菌法 干熱滅菌法 除菌過濾法 環(huán)氧乙烷滅菌法 輻射滅菌法,無菌藥品常用滅菌工藝的比較,影響濕熱滅菌效果的因素,待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量 待滅菌產(chǎn)品的包裝形式 待滅菌產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量 濕熱滅菌工藝條件 濕熱滅菌設備,無菌保證水平sal,無菌保證水平（sterility assurance level） 表示物品被滅菌后的無菌狀態(tài) 按國際標準，濕熱滅菌法的無菌保證值不得低于10-6，即滅菌后微生物存活的概率不得大于百萬分之一。,滅菌工藝驗證的必要性,滅菌產(chǎn)品的無菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無菌檢驗，而是取決于生產(chǎn)過程中采用合格的滅菌

26、工藝、嚴格的gmp管理和良好的無菌保證體系 滅菌工藝的驗證是無菌保證的必要條件 滅菌工藝經(jīng)過驗證后，方可正式用于生產(chǎn),國內(nèi)企業(yè)滅菌工藝驗證常見缺陷,無包裝規(guī)格 無裝載方式 未對每一種產(chǎn)品每一種包裝規(guī)格的每一種裝載方式進行驗證 采用留點溫度計監(jiān)測溫度 無溫度探頭校準記錄 驗證的滅菌工藝與實際工藝不一致 未驗證最差滅菌條件 設定的驗證合格標準達不到無菌保證水平（sal）10-6 生物指示劑使用不規(guī)范,滅菌工藝檢查要點,生產(chǎn)環(huán)境和待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量研究和監(jiān)控 待滅菌產(chǎn)品的包裝形式、裝載方式和裝載數(shù)量 滅菌工藝條件 滅菌設備 關鍵控制參數(shù)的控制和記錄儀表的校準 設備維護和維修 滅菌的記

27、錄 滅菌工藝的驗證 選用的生物指示劑 熱分布試驗，找出最冷點位置 無菌檢驗樣品的取樣,無菌檢查,無菌檢查的局限性,無菌的定義 理論上：無菌沒有任何活的微生物 實際上：我們無法證明產(chǎn)品中沒有活微生物存在 無法對整批產(chǎn)品進行100%檢驗 無菌檢驗的結果只是一個基于“可能性”的判斷 無菌檢驗用培養(yǎng)基有其局限性 只進行細菌和真菌的檢驗 對實驗結果的判定是基于“是否在培養(yǎng)基中生長” 培養(yǎng)條件（如溫度和時間）是有限的 我們的工作環(huán)境及操作是在相對無菌的狀態(tài),美國非腸道藥物學會注射劑無菌測試結果,試驗目的：不合格的可能性(%) 試驗批量：60,000支 試驗方法：按美國藥典無菌測試方法,上述無菌測試結果的啟

28、示,含有少量微生物污染產(chǎn)品的批次也有可能“通過”無菌檢驗 一批產(chǎn)品的染菌率越低，根據(jù)無菌檢驗的結果來判定整批產(chǎn)品的無菌，其風險就越大,如何用無菌檢驗來證明整批產(chǎn)品無菌,要求有一個取樣計劃來涵蓋整個批號 有足夠的取樣量和檢驗量 選擇適用的培養(yǎng)基 采用經(jīng)驗證的無菌檢驗方法 良好的環(huán)境監(jiān)控,無菌檢驗的取樣計劃,何時取? 如何取?何處??？ 無菌灌裝產(chǎn)品 批開始、結束及重大故障和調(diào)整后 最多24小時為一批 usp 每天灌裝的產(chǎn)品應分別做無菌檢驗 最終滅菌產(chǎn)品 從滅菌柜中最冷點取樣 對經(jīng)不同滅菌柜滅菌的產(chǎn)品應分別進行無菌檢驗 連續(xù)工藝 產(chǎn)品被連續(xù)地單個滅菌，如：用電子束滅菌，一批不大于24小時,無菌檢驗的

29、取樣計劃,取多少樣品（檢驗數(shù)量）？ 取決于產(chǎn)品的批量 cp2005年版 大于500：取2%或20支（取少），用于每個培養(yǎng)基檢驗 小于等于100：取10%或4個（取多），用于每個培養(yǎng)基檢驗 取決于產(chǎn)品的數(shù)量 cp2005年版 劑量小于1毫升，就要取40支 同時要考慮檢驗耗損和復試的需要,無菌檢驗的取樣計劃,每個樣品測試多少數(shù)量（檢驗量）？ 藥典上規(guī)定了每次檢驗的供試品總量 裝量小于 1ml cp2005年版 每支樣接入每個培養(yǎng)基為全量 裝量大于等于 1ml ph.eur 半量，但不超過 20ml cp2005年版 半量， 2 - 500ml,無菌檢驗用培養(yǎng)基,培養(yǎng)基的種類 用于真菌培養(yǎng)的改良馬丁培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度23-28 用于厭氧和需氧細菌培養(yǎng)的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度30-35 培養(yǎng)基的適用性檢查 要有足夠的靈敏度 能夠支持代表性菌種的生長 培養(yǎng)基的儲存和控制 儲存條件和有效期,usp29無菌檢驗陽性對照菌的選擇,無菌檢驗方法,主要有兩種方法 直接接種法 薄膜過濾法 注意事項 采用直接接種法時應考慮產(chǎn)品是否有抑菌性,無菌檢驗的方法學驗證,驗證目的：驗證所采用的方法和條件是否適合于供試品的無菌檢查。即確認供試品在該檢驗量、該檢驗條件下無抑菌活性或其抑菌活性以被充分消除到可