用高效液相滲透凝膠色譜法法分析動物皮膚和兔關(guān)節(jié)液中透明質(zhì)酸.

1、文獻 1:ANALYSIS BY HIGH-PERFORMANCE GEL PERMEATION CHROMATOGRAPHYOF HYALURONIC ACID IN ANIMAL SKINS AND RABBIT SYNOVIAL FLUID用高效液相滲透凝膠色譜法法分析動物皮膚和兔關(guān)節(jié)液中透明質(zhì)酸文獻來源 :正式出版物 Journal of Chromatography A Volume 435, 1988,Pages 335342文獻摘要:作者描述了用兩根色譜柱同時測定生物樣品中透明質(zhì)酸的濃度和分子量。作者 在開頭的介紹中這樣說 :我們曾經(jīng)用 Shodex OHpak B-806成功把

2、 HA 跟其他多糖分離 ,并且測定了它的 分子量。但是 ,要測定 HA 的濃度需要 HA 跟其他物質(zhì)完全分離 ,因此我們用兩根柱 子(Shodex OHpak 和 B-806 and B-805合用來達到更高的分離度和覆蓋不同的分子 量范圍。色譜條件equipped with two Shodex OHpak columns (Showa Denko, Tokyo,Japan, B-806 and B-805 (50 cm x 8 mm I.D., a guard column of Shodex OHpak800P (50 mm x 6 mm I.D. The eluent was 0.02

3、 M sodium chloride,The flow-rate was 0.5 ml/min.對照品作者自制不同分子量的 HA(過特定的柱子或者透析 ,HA 的濃度是作者用咔唑法 測糖醛酸的方法測定。標準曲線的制備作者用不同分子量的自制 HA 做曲線,結(jié)果如下 :1:DNA,M=3 千1百萬;2 :純化的 HA,M=1 百萬;3:純化的 HA,M=61 萬;4:純化的 HA,M=33.5 萬;5:純化的 HA,M=25.7 萬;結(jié)果表明:在分子量 60萬和 20萬之間是成線性關(guān)系的 ;作者同時進了 Pullulan (GPC 葡聚糖標準品 ,結(jié)果發(fā)現(xiàn)用上述曲線測出來的 Pullulan 分子

4、量跟實際的分子量有差別 ,說明 HA 的標準曲線應(yīng)該用 HA 標準品校 正。結(jié)論這個結(jié)果證明了可用此方法同時測定生物樣品中 HA 的分子量和濃度。然而 此色譜技術(shù)對于大于 1 百萬分子量的 HA 卻不能提供精確的分子量。文獻 2 Analysis of Over 15 Million Dalton Polymers by Aqueous SEC Method用水性凝膠滲透色譜法分析超過 1500 萬分子量的多聚體文獻來源:SHODEX 公司網(wǎng)站下載文獻摘要:這篇文章主要是 SHODEX公司介紹用 Shodex? OHpak SB -807 HQ 色譜柱來分析高分子量 HA（ 大于 100萬,主要介紹了兩個試驗 :一.分別用 SB-807柱子和 SB-806柱子分析了 Mw=550 萬的 HA,結(jié)果如下 （綠色 曲線為 806,紅色為 807:結(jié)果:用806峰形不對稱（拖尾,作者分析原因為 HA超出了 806的排阻限度 ,高分 子量的 HA 在同一時間流出的結(jié)果 ;807 峰形對稱 ,可以準確的表示出樣品的分子量 分布,同時,807的大顆?？梢员Ｗo潛在的剪切降解。.用 SB-807分析了三