免疫球蛋白與抗體

1、 第一節(jié)第一節(jié) 免疫球蛋白與抗體的概念免疫球蛋白與抗體的概念( (重點(diǎn)重點(diǎn)) ) 第二節(jié)第二節(jié) 免疫球蛋白的分子結(jié)構(gòu)免疫球蛋白的分子結(jié)構(gòu)( (重點(diǎn)重點(diǎn)) ) 第三節(jié)第三節(jié) 免疫球蛋白的種類與抗原決定簇免疫球蛋白的種類與抗原決定簇( (重點(diǎn)重點(diǎn)) ) 第四節(jié)第四節(jié) 免疫球蛋白的生物學(xué)功能免疫球蛋白的生物學(xué)功能( (重點(diǎn)重點(diǎn)) ) 第五節(jié)第五節(jié) 各類免疫球蛋白的主要特性與功能各類免疫球蛋白的主要特性與功能 第六節(jié)第六節(jié) 抗體的人工制備抗體的人工制備 一、抗體的發(fā)現(xiàn)和研究歷史：一、抗體的發(fā)現(xiàn)和研究歷史： 18891889年：年： 感染 感染 動(dòng)物血清動(dòng)物血清 凝集反應(yīng)凝集反應(yīng) （凝集素）（凝集素）

2、18901890年年(Behring):(Behring): 白喉類毒素白喉類毒素 免疫 免疫 動(dòng)物血清動(dòng)物血清 中和毒素中和毒素 ( (抗毒素抗毒素) ) 并發(fā)現(xiàn)在血清蛋白中主要是并發(fā)現(xiàn)在血清蛋白中主要是 -球蛋白（丙種球蛋白）球蛋白（丙種球蛋白） 具有抗體活性。具有抗體活性。 (antibody(antibody，Ab)Ab) 凝集素凝集素 抗毒素抗毒素 溶菌素溶菌素 沉淀素沉淀素 19301930年發(fā)現(xiàn)：年發(fā)現(xiàn)： 白蛋白白蛋白球蛋白球蛋白 ab g g ab g g ab g g 未免疫動(dòng)物血清未免疫動(dòng)物血清 免疫動(dòng)物血清免疫動(dòng)物血清 免疫動(dòng)物血清免疫動(dòng)物血清 + +抗原處理吸收抗原處理

3、吸收后后 二、抗體的概念二、抗體的概念( (重點(diǎn)重點(diǎn)) ) 抗體（抗體（antibody,Ab)antibody,Ab)：動(dòng)物機(jī)體受到抗原物質(zhì)：動(dòng)物機(jī)體受到抗原物質(zhì) 刺激后，由刺激后，由B B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞而產(chǎn)生的，能與淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞而產(chǎn)生的，能與 相應(yīng)抗原發(fā)生特異性反應(yīng)的免疫球蛋白。相應(yīng)抗原發(fā)生特異性反應(yīng)的免疫球蛋白。 將抗體介導(dǎo)的免疫稱為將抗體介導(dǎo)的免疫稱為體液免疫體液免疫, ,將含有抗體的將含有抗體的 血清稱為血清稱為抗血清抗血清或或免疫血清免疫血清。 三、免疫球蛋白的概念三、免疫球蛋白的概念(重點(diǎn)重點(diǎn)) 19641964年世界衛(wèi)生組織召開會(huì)議，將年世界衛(wèi)生組織召開會(huì)議，將具

4、有抗體具有抗體 活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)稱為統(tǒng)稱為免疫免疫 球蛋白球蛋白（immunoglobulinimmunoglobulin，簡稱簡稱IgIg ）。）。 免疫球蛋白除分布于體液中之外，還可存在免疫球蛋白除分布于體液中之外，還可存在 于于B B細(xì)胞膜上。細(xì)胞膜上。 免疫球蛋白可分為免疫球蛋白可分為兩種兩種類型：類型： 分泌性分泌性IgIg ：存在于血清、體液以及分泌液中，具有：存在于血清、體液以及分泌液中，具有 抗體的各種功能。抗體的各種功能。 膜型膜型IgIg ：位于：位于B B淋巴細(xì)胞的表面，即膜表面免疫球淋巴細(xì)胞的表面，即膜表面免疫球 蛋白（

5、蛋白（mIgmIg），是），是B B淋巴細(xì)胞的抗原識(shí)別受體（淋巴細(xì)胞的抗原識(shí)別受體（BCRBCR）。）。 抗體的化學(xué)本質(zhì)是抗體的化學(xué)本質(zhì)是免疫球蛋白免疫球蛋白，但并非所有免疫，但并非所有免疫 球蛋白都具有球蛋白都具有抗體的活性抗體的活性。 Ig Ab Ab=Ig Ig Ab IgIg與與AbAb的關(guān)系的關(guān)系 抗體抗體= 生物學(xué)功能上的概念生物學(xué)功能上的概念 IgIg = 化學(xué)結(jié)構(gòu)上的概念化學(xué)結(jié)構(gòu)上的概念 四、抗體的分類四、抗體的分類 （一）根據(jù)所對應(yīng)的抗原分：（一）根據(jù)所對應(yīng)的抗原分： （二）根據(jù)（二）根據(jù)有無抗原刺激分有無抗原刺激分： （三）根據(jù)與抗原反應(yīng)的性質(zhì)分：（三）根據(jù)與抗原反應(yīng)的性質(zhì)

6、分： （四）根據(jù)根據(jù)抗原性分：（四）根據(jù)根據(jù)抗原性分： 主要根據(jù)重鏈的不同主要根據(jù)重鏈的不同 一、免疫球蛋白的單體分子結(jié)構(gòu)一、免疫球蛋白的單體分子結(jié)構(gòu) 由由兩條相同兩條相同的較大的的較大的重鏈重鏈和和兩條相同兩條相同的較的較 小的小的輕鏈輕鏈4 4條肽鏈通過輕鏈與重鏈之間的條肽鏈通過輕鏈與重鏈之間的二硫鍵二硫鍵 連接起來構(gòu)成的連接起來構(gòu)成的“Y Y”字形的分子結(jié)構(gòu)。字形的分子結(jié)構(gòu)。 （一）重鏈和輕鏈（一）重鏈和輕鏈 1 1重鏈（重鏈（heavy chainheavy chain，H H鏈）鏈） 由由450-550450-550個(gè)氨基酸殘基組成，分子量個(gè)氨基酸殘基組成，分子量55-75KD55-

7、75KD， 有有4-54-5個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵組成的環(huán)肽，兩重鏈之間由一個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵組成的環(huán)肽，兩重鏈之間由一 對或兩對以上的二硫鍵互相連接。對或兩對以上的二硫鍵互相連接。 根據(jù)根據(jù)IgIg重鏈抗原性的差異，重鏈抗原性的差異，IgIg可分為可分為5 5類：類： IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE和和IgDIgD，相應(yīng)相應(yīng)H H鏈為鏈為、 、鏈，鏈，不同免疫球蛋白的差別就由重鏈所決定。不同免疫球蛋白的差別就由重鏈所決定。 2 2輕鏈（輕鏈（light chainlight chain，L L鏈）鏈） 由由214214個(gè)氨基酸殘基組成，分子量為個(gè)氨基酸殘基組成，分子量為24KD24K

8、D，有，有 兩個(gè)由鏈內(nèi)二硫鍵組成的環(huán)肽，在羧基端靠二硫兩個(gè)由鏈內(nèi)二硫鍵組成的環(huán)肽，在羧基端靠二硫 鍵分別與兩條重鏈連接。鍵分別與兩條重鏈連接。 各類免疫球蛋白的輕鏈都相同，均可分為：各類免疫球蛋白的輕鏈都相同，均可分為： KappaKappa（）與）與lambdalambda（）2 2個(gè)型。個(gè)型。 （二）可變區(qū)和恒定區(qū)（二）可變區(qū)和恒定區(qū) 1 1、H H鏈：鏈：N N端開始的最初端開始的最初110110個(gè)氨基酸為個(gè)氨基酸為可變區(qū)可變區(qū) （VHVH），之后一直到），之后一直到C C端的氨基酸稱為端的氨基酸稱為恒定區(qū)恒定區(qū) （CHCH）。在）。在VHVH中有中有3 3個(gè)區(qū)域的氨基酸變異最大，稱個(gè)區(qū)

9、域的氨基酸變異最大，稱 為為高（超）變區(qū)高（超）變區(qū)（HVRHVR），其余的氨基酸變化較小，），其余的氨基酸變化較小， 稱為稱為骨架區(qū)骨架區(qū)。 2 2、L L鏈：鏈：N N端開始的端開始的109109個(gè)氨基酸為個(gè)氨基酸為可變區(qū)可變區(qū)(VL(VL），）， 其余的為其余的為恒定區(qū)（恒定區(qū)（CLCL）， 在在VLVL中也有中也有3 3個(gè)高變區(qū)個(gè)高變區(qū)。 （三）功能區(qū)（三）功能區(qū) 1 1、基本含義、基本含義 免疫球蛋白的多肽鏈分子可折疊形成免疫球蛋白的多肽鏈分子可折疊形成 幾個(gè)由鏈內(nèi)二硫鍵連接成的環(huán)狀球形結(jié)構(gòu)，此即其幾個(gè)由鏈內(nèi)二硫鍵連接成的環(huán)狀球形結(jié)構(gòu)，此即其 IgIg的的功能區(qū)（或結(jié)構(gòu)域功能區(qū)（或結(jié)

10、構(gòu)域），每一功能區(qū)約有），每一功能區(qū)約有110110個(gè)個(gè) 氨基酸組成，其順序具有高度的同源性。氨基酸組成，其順序具有高度的同源性。 2 2、L L鏈功能區(qū)鏈功能區(qū) 有兩個(gè)，即有兩個(gè)，即VLVL和和CLCL，分別位于可變，分別位于可變 區(qū)和恒定區(qū)。區(qū)和恒定區(qū)。 3 3、H H鏈功能區(qū)鏈功能區(qū) IgGIgG、IgAIgA、IgDIgD有有4 4個(gè)個(gè)（V V區(qū)區(qū)1 1個(gè)，個(gè)，VHVH， C C區(qū)區(qū)3 3個(gè)，個(gè)，CH1CH1、CH2CH2和和CH3CH3）；）；IgMIgM、IgEIgE有有5 5個(gè)個(gè)（增加（增加 一個(gè)一個(gè)CH4CH4）。）。 4 4、功能區(qū)作用、功能區(qū)作用 （1 1）VHVH和和VL

11、:VL:特異性識(shí)別特異性識(shí)別 和結(jié)合抗原，和結(jié)合抗原，由由VHVH和和VLVL內(nèi)的內(nèi)的 高變區(qū)構(gòu)成抗體分子的抗原高變區(qū)構(gòu)成抗體分子的抗原 結(jié)合點(diǎn)。結(jié)合點(diǎn)。 （2 2）CH1CH1和和CL :CL :同種異型同種異型 的遺傳標(biāo)記的遺傳標(biāo)記。 （3 3）IgGIgG的的CH2CH2和和IgMIgM的的CH3 CH3 是抗體分子的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)，是抗體分子的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)， 與補(bǔ)體的活化有關(guān)。與補(bǔ)體的活化有關(guān)。 （4 4）CH3/ CH4:CH3/ CH4:細(xì)胞結(jié)合細(xì)胞結(jié)合 位點(diǎn)，位點(diǎn)，是同免疫活性細(xì)胞是同免疫活性細(xì)胞 （如巨噬細(xì)細(xì)胞、（如巨噬細(xì)細(xì)胞、B B細(xì)胞、細(xì)胞、NKNK 細(xì)胞）的細(xì)胞）的FCFC受體

12、的結(jié)合部位。受體的結(jié)合部位。 二、免疫球蛋白的特殊分子結(jié)構(gòu)二、免疫球蛋白的特殊分子結(jié)構(gòu) （一）絞鏈區(qū)（一）絞鏈區(qū) 1 1、含義、含義 在兩條重鏈之間二硫鍵連接處附近的重鏈恒在兩條重鏈之間二硫鍵連接處附近的重鏈恒 定區(qū)，即定區(qū)，即CH1CH1尾部和尾部和CH2CH2頭部的小段肽鏈；與抗體分子頭部的小段肽鏈；與抗體分子 的構(gòu)型變化有關(guān)的構(gòu)型變化有關(guān), ,稱為稱為絞鏈區(qū)絞鏈區(qū)。 2 2、功能、功能 含有豐富的含有豐富的脯氨酸脯氨酸，因此易伸展彎曲，當(dāng)因此易伸展彎曲，當(dāng) 抗體與抗原結(jié)合時(shí)，該區(qū)可轉(zhuǎn)動(dòng)，一方面使可變區(qū)的抗體與抗原結(jié)合時(shí)，該區(qū)可轉(zhuǎn)動(dòng)，一方面使可變區(qū)的 兩個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)盡量與抗原結(jié)合，另一方面

13、可使抗體兩個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)盡量與抗原結(jié)合，另一方面可使抗體 分子變構(gòu)，使補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn)暴露出來分子變構(gòu)，使補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn)暴露出來。且易被且易被木瓜蛋木瓜蛋 白酶、胃蛋白酶白酶、胃蛋白酶等水解。等水解。 （二）（二）J J鏈和分泌成分鏈和分泌成分 1 1、J J鏈鏈 即連接鏈即連接鏈 是一條多肽鏈，富含半胱氨酸是一條多肽鏈，富含半胱氨酸; ; 由漿細(xì)胞合成由漿細(xì)胞合成; ; 以二硫鍵的形式共價(jià)結(jié)合到以二硫鍵的形式共價(jià)結(jié)合到IgIg的重鏈上的重鏈上; ; 在在IgMIgM和分泌型和分泌型IgAIgA單體之間起連接作用。單體之間起連接作用。 2 2、分泌成份（、分泌成份（SC)SC) （1 1）是二聚體）是

14、二聚體IgAIgA上的一個(gè)輔助成分；上的一個(gè)輔助成分； （2 2）由上皮細(xì)胞合成，化學(xué)本質(zhì)為糖蛋白）由上皮細(xì)胞合成，化學(xué)本質(zhì)為糖蛋白 （3 3）以共價(jià)形式結(jié)合到）以共價(jià)形式結(jié)合到IgAIgA分子，并一起被分泌分子，并一起被分泌 到粘膜表面，又稱分泌片（到粘膜表面，又稱分泌片（secretory piece, secretory piece, SPSP）；）； （4 4）可抵抗外分泌液中的蛋白水解酶對二聚體）可抵抗外分泌液中的蛋白水解酶對二聚體 IgAIgA的降解。的降解。 （三）單體、雙體（三）單體、雙體 和五聚體和五聚體 1 1、單體、單體 由一對由一對L L 鏈和鏈和H H鏈組成的基鏈組成

15、的基 本結(jié)構(gòu)。本結(jié)構(gòu)。 2 2、雙體、雙體 分泌型的分泌型的 IgAIgA由由J J鏈連接的兩鏈連接的兩 個(gè)單體。個(gè)單體。 3 3、五聚體、五聚體 IgMIgM是是 由由J J鏈和二硫鍵連鏈和二硫鍵連 接的五個(gè)單體。接的五個(gè)單體。 （一）木瓜蛋白酶酶切結(jié)果（一）木瓜蛋白酶酶切結(jié)果 木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶可將可將H H鏈鉸鏈區(qū)二硫鍵的近鏈鉸鏈區(qū)二硫鍵的近N N端切斷，端切斷， 得到大小相近的得到大小相近的3 3個(gè)片段；其中有兩個(gè)相同的片段，個(gè)片段；其中有兩個(gè)相同的片段， 稱稱抗原結(jié)合片段（抗原結(jié)合片段（FabFab），另一個(gè)為另一個(gè)為FCFC片段片段，可形成，可形成 蛋白結(jié)晶。蛋白結(jié)晶。 三、免疫

16、球蛋白的水解片段與生物學(xué)活性三、免疫球蛋白的水解片段與生物學(xué)活性 （二）胃蛋白酶酶切結(jié)果（二）胃蛋白酶酶切結(jié)果 胃蛋白酶胃蛋白酶可將可將H H鏈從鉸鏈區(qū)二硫鍵的近鏈從鉸鏈區(qū)二硫鍵的近C C端切端切 斷，得到一個(gè)具有雙價(jià)活性的斷，得到一個(gè)具有雙價(jià)活性的F(ab)F(ab)2 2片片段和若段和若 干個(gè)小分子多肽碎片干個(gè)小分子多肽碎片（pFcpFc）。）。F(ab)2F(ab)2片段與片段與 抗原結(jié)合可發(fā)生凝集和沉淀反應(yīng)，抗原結(jié)合可發(fā)生凝集和沉淀反應(yīng)，pFcpFc片段失去片段失去 生物學(xué)活性。生物學(xué)活性。 一、免疫球蛋白的種類一、免疫球蛋白的種類 免疫球蛋白可區(qū)分為類、亞類、型、亞型等。免疫球蛋白可

17、區(qū)分為類、亞類、型、亞型等。 （一）類（一）類 免疫球蛋白免疫球蛋白類類的區(qū)分是依據(jù)其的區(qū)分是依據(jù)其重鏈重鏈C C區(qū)的理化特性及區(qū)的理化特性及 抗原性抗原性的差異，在同種系所有個(gè)體內(nèi)的免疫球蛋白可分為的差異，在同種系所有個(gè)體內(nèi)的免疫球蛋白可分為 IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE、IgDIgD五大類五大類(class),(class),重鏈分別稱為重鏈分別稱為 ,鏈鏈。 （二）亞類（二）亞類 同一種類免疫球蛋白，又可根據(jù)其同一種類免疫球蛋白，又可根據(jù)其重鏈恒定區(qū)的微細(xì)重鏈恒定區(qū)的微細(xì) 結(jié)構(gòu)、二硫鍵的位置與數(shù)目及抗原特性結(jié)構(gòu)、二硫鍵的位置與數(shù)目及抗原特性的不同，進(jìn)一步分的不同

18、，進(jìn)一步分 為為亞類亞類（subclasssubclass）。如人的）。如人的IgGIgG有有IgG1IgG1、IgG2IgG2、IgG3IgG3和和 IgG4IgG4四個(gè)亞類。四個(gè)亞類。 第三節(jié)第三節(jié) 免疫球蛋白的種類與抗原決定簇免疫球蛋白的種類與抗原決定簇 （三）型（三）型 根據(jù)輕鏈恒定區(qū)的抗原性不同，各類免疫根據(jù)輕鏈恒定區(qū)的抗原性不同，各類免疫 球蛋白的輕鏈分球蛋白的輕鏈分為為和和兩個(gè)型兩個(gè)型（typetype），任），任 何種類的免疫球蛋白均有兩型輕鏈分子。何種類的免疫球蛋白均有兩型輕鏈分子。 （四）亞型（四）亞型 根據(jù)根據(jù)型輕鏈型輕鏈N N端恒定區(qū)上氨基酸排列順序端恒定區(qū)上氨基酸排列

19、順序 的差異，免疫球蛋白又的差異，免疫球蛋白又可分為若干亞型可分為若干亞型 （subtypesubtype），），型輕鏈無亞型。型輕鏈無亞型。 （五）亞群（五）亞群 根據(jù)免疫球蛋白根據(jù)免疫球蛋白V V區(qū)的一級結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，可將區(qū)的一級結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，可將 免疫球蛋白免疫球蛋白分為分為3 35 5個(gè)亞群個(gè)亞群（subgroupsubgroup）。）。 二、免疫球蛋白的抗原決定簇（血清型）二、免疫球蛋白的抗原決定簇（血清型） （一）同種型決定簇（一）同種型決定簇 指在同一種屬動(dòng)物所有個(gè)體指在同一種屬動(dòng)物所有個(gè)體 的的IgIg分子共同具有的抗原特異性標(biāo)志，為分子共同具有的抗原特異性標(biāo)志，為種屬型種屬型 標(biāo)志標(biāo)

20、志。即是說在同一種動(dòng)物不同個(gè)體之間同時(shí)存。即是說在同一種動(dòng)物不同個(gè)體之間同時(shí)存 在不同類型的免疫球蛋白，不表現(xiàn)出抗原性，只在不同類型的免疫球蛋白，不表現(xiàn)出抗原性，只 是在異種動(dòng)物之間才表現(xiàn)出抗原性。同種型抗原是在異種動(dòng)物之間才表現(xiàn)出抗原性。同種型抗原 決定基存在于決定基存在于Ig CIg C區(qū)，表現(xiàn)在全部區(qū)，表現(xiàn)在全部IgIg的類、亞類、的類、亞類、 型、亞型分子上。型、亞型分子上。 （二）同種異型決定簇二）同種異型決定簇 指免疫球蛋白在同一種動(dòng)指免疫球蛋白在同一種動(dòng) 物不同個(gè)體之間呈現(xiàn)出的抗原性，為物不同個(gè)體之間呈現(xiàn)出的抗原性，為個(gè)體型標(biāo)志個(gè)體型標(biāo)志。 同種異型抗原決定基廣泛存在于同種異型抗

21、原決定基廣泛存在于Ig CHIg CH和和CLCL區(qū)。區(qū)。 （三）獨(dú)特型決定簇（三）獨(dú)特型決定簇 由抗體分子的可變區(qū)呈現(xiàn)出的抗原性就稱為免由抗體分子的可變區(qū)呈現(xiàn)出的抗原性就稱為免 疫球蛋白（抗體）的疫球蛋白（抗體）的獨(dú)特型獨(dú)特型( (重點(diǎn)重點(diǎn)) )，或稱個(gè)體基因或稱個(gè)體基因 型型，可變區(qū)內(nèi)的抗原決定簇稱為，可變區(qū)內(nèi)的抗原決定簇稱為獨(dú)特型決定簇獨(dú)特型決定簇，是，是 每個(gè)免疫球蛋白分子所特有的抗原特異性標(biāo)志。每個(gè)免疫球蛋白分子所特有的抗原特異性標(biāo)志。其其 中單個(gè)的抗原決定簇，又稱為中單個(gè)的抗原決定簇，又稱為獨(dú)特位獨(dú)特位。 獨(dú)特型在異種、同種異體乃至同一個(gè)體內(nèi)均可獨(dú)特型在異種、同種異體乃至同一個(gè)體內(nèi)

22、均可 刺激產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，這種抗體稱為刺激產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，這種抗體稱為抗獨(dú)特型抗體抗獨(dú)特型抗體。 一、免疫球蛋白一、免疫球蛋白V V區(qū)的功能：區(qū)的功能： 主要是識(shí)別和結(jié)合特異性抗原主要是識(shí)別和結(jié)合特異性抗原 （一）（一） 激活補(bǔ)體激活補(bǔ)體 IgG1-3IgG1-3和和IgMIgM與相應(yīng)抗原與相應(yīng)抗原 結(jié)合后，可因構(gòu)型改變而結(jié)合后，可因構(gòu)型改變而 使其使其CH2/CH3CH2/CH3功能區(qū)內(nèi)的功能區(qū)內(nèi)的 補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴露，從而激補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴露，從而激 活補(bǔ)體活補(bǔ)體經(jīng)典途徑經(jīng)典途徑。 IgG4IgG4、IgAIgA和和IgEIgE的凝聚物的凝聚物 可激活補(bǔ)體可激活補(bǔ)體旁路途徑旁路途徑。 二、免疫球蛋

23、白二、免疫球蛋白C C區(qū)的功能區(qū)的功能 1.1.調(diào)理作用調(diào)理作用( (重點(diǎn)重點(diǎn)) )IgGIgG與細(xì)菌等顆粒性抗原結(jié)合后，與細(xì)菌等顆粒性抗原結(jié)合后， 可通過其可通過其FcFc段與巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞表面相應(yīng)段與巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞表面相應(yīng) IgG FcIgG Fc受體結(jié)合，促進(jìn)吞噬細(xì)胞對細(xì)菌等顆?？乖荏w結(jié)合，促進(jìn)吞噬細(xì)胞對細(xì)菌等顆?？乖?的吞噬，此即抗體的調(diào)理吞噬作用。的吞噬，此即抗體的調(diào)理吞噬作用。 （二）結(jié)合（二）結(jié)合FcFc受體受體 2.2.抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCCADCC）(重點(diǎn)重點(diǎn)). IgGIgG與腫瘤或病毒感染的靶細(xì)胞結(jié)合后，可通過與

24、腫瘤或病毒感染的靶細(xì)胞結(jié)合后，可通過 其其FcFc段與段與NKNK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞表面相應(yīng)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞表面相應(yīng) IgG FcIgG Fc受體結(jié)合，增強(qiáng)受體結(jié)合，增強(qiáng)NKNK細(xì)胞和觸發(fā)吞噬細(xì)胞對靶細(xì)細(xì)胞和觸發(fā)吞噬細(xì)胞對靶細(xì) 胞的殺傷作用，此即胞的殺傷作用，此即ADCCADCC效應(yīng)。效應(yīng)。 3.3.介導(dǎo)介導(dǎo)I I型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng) IgEIgE引起引起I I型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng) （三）穿過胎盤和粘膜（三）穿過胎盤和粘膜 IgGIgG、sIgAsIgA 一、一、IgGIgG 人和動(dòng)物中人和動(dòng)物中含量最高含量最高的免疫球蛋白，的免疫球蛋白， 占血清總占血清總IgIg的的75%

25、75%80%80%，半衰期約，半衰期約20202323天；天； 主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿細(xì)胞產(chǎn)主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿細(xì)胞產(chǎn) 生，大部分存在于血液中（生，大部分存在于血液中（45%45% 50%50%），）， 其余存在于組織液和淋巴液中；其余存在于組織液和淋巴液中； IgGIgG是是惟一可通過人和兔胎盤的抗體惟一可通過人和兔胎盤的抗體，在新生動(dòng)物，在新生動(dòng)物 抗感染中起重要作用?？垢腥局衅鹬匾饔?。 IgGIgG是動(dòng)物自然感染和人工主動(dòng)免疫后，機(jī)體所產(chǎn)是動(dòng)物自然感染和人工主動(dòng)免疫后，機(jī)體所產(chǎn) 生的主要抗體，生的主要抗體，是動(dòng)物機(jī)體抗感染免疫的主力是動(dòng)物機(jī)體抗感染免疫的主力，大多數(shù)抗，大多數(shù)抗

26、菌、抗病毒抗體和抗菌素都為菌、抗病毒抗體和抗菌素都為IgGIgG類，因而也是類，因而也是血清學(xué)診斷血清學(xué)診斷 和疫苗免疫后監(jiān)測的主要抗體和疫苗免疫后監(jiān)測的主要抗體； IgGIgG還參與抗腫瘤免疫，同時(shí)也是引起還參與抗腫瘤免疫，同時(shí)也是引起型、型、型型 變態(tài)反應(yīng)及自身免疫病的抗體變態(tài)反應(yīng)及自身免疫病的抗體。 IgGIgG通過經(jīng)典途徑活化補(bǔ)體，具有調(diào)理吞噬、介導(dǎo)通過經(jīng)典途徑活化補(bǔ)體，具有調(diào)理吞噬、介導(dǎo) ADCCADCC、結(jié)合、結(jié)合SPASPA和結(jié)合鏈球菌和結(jié)合鏈球菌G G蛋白的作用。蛋白的作用。 動(dòng)物機(jī)體初次免疫后動(dòng)物機(jī)體初次免疫后產(chǎn)生最產(chǎn)生最 早早的免疫球蛋白；但含量僅占血清的免疫球蛋白；但含量

27、僅占血清 IgIg的的10%10%左右，左右， 主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿 細(xì)胞產(chǎn)生，一般不能通過血管壁，細(xì)胞產(chǎn)生，一般不能通過血管壁， 主要分布于血液中；主要分布于血液中； IgMIgM是是5 5個(gè)單體組成的五聚體個(gè)單體組成的五聚體 （pentamerpentamer）, ,又稱為又稱為巨球蛋白巨球蛋白（macroglobulinmacroglobulin）。）。 IgMIgM在體內(nèi)產(chǎn)最早，但持續(xù)時(shí)間短，不是抗感染在體內(nèi)產(chǎn)最早，但持續(xù)時(shí)間短，不是抗感染 免疫的主力，但對免疫的主力，但對早期抗感染免疫和早期血清學(xué)診斷早期抗感染免疫和早期血清學(xué)診斷十十 分重要，并且分重要，

28、并且IgMIgM有多個(gè)抗原結(jié)合部位，其單個(gè)的殺菌、有多個(gè)抗原結(jié)合部位，其單個(gè)的殺菌、 溶菌、溶血、促進(jìn)吞噬及凝集作用，均較溶菌、溶血、促進(jìn)吞噬及凝集作用，均較IgGIgG高；高； IgMIgM同樣具有抗腫瘤作用，也是同樣具有抗腫瘤作用，也是型型型變態(tài)反型變態(tài)反 應(yīng)及自身免疫病的抗體應(yīng)及自身免疫病的抗體。 膜表面膜表面IgMIgM是是BCRBCR的主要成分。只表達(dá)的主要成分。只表達(dá)mIgMmIgM是未成是未成 熟熟B B細(xì)胞的標(biāo)志，記憶細(xì)胞的標(biāo)志，記憶B B細(xì)胞表面的細(xì)胞表面的mIgMmIgM逐漸消失。逐漸消失。 二、二、IgMIgM IgAIgA以單體和二以單體和二 聚體兩種分子形式存在聚體兩

29、種分子形式存在, , 單體單體存在于血清中，稱存在于血清中，稱 為血清型為血清型IgA,IgA,占血清占血清IgIg 的的10% 10% 20%20%，二聚體為分泌型二聚體為分泌型IgA,IgA,是由呼吸道、消化道、是由呼吸道、消化道、 泌尿生殖道等部位粘膜固有層中的漿細(xì)胞所產(chǎn)生。主要存泌尿生殖道等部位粘膜固有層中的漿細(xì)胞所產(chǎn)生。主要存 在于呼吸道、消化道、生殖道的外分泌液及初乳、唾液、在于呼吸道、消化道、生殖道的外分泌液及初乳、唾液、 淚液等分泌物中。淚液等分泌物中。 分泌型分泌型IgAIgA是是參與粘膜局部免疫參與粘膜局部免疫的主要抗體，在傳的主要抗體，在傳 染病預(yù)防接種中，經(jīng)滴鼻、點(diǎn)眼、

30、飲水及噴霧途徑免疫，染病預(yù)防接種中，經(jīng)滴鼻、點(diǎn)眼、飲水及噴霧途徑免疫， 均可產(chǎn)生分泌型均可產(chǎn)生分泌型IgAIgA，從而建立相應(yīng)的粘膜免疫力。，從而建立相應(yīng)的粘膜免疫力。嬰幼嬰幼 兒和幼畜禽從母乳中可獲得兒和幼畜禽從母乳中可獲得sIgA sIgA 產(chǎn)生產(chǎn)生自然被動(dòng)免疫自然被動(dòng)免疫，新新 生兒和幼畜禽易患呼吸道、胃腸道感染可能與生兒和幼畜禽易患呼吸道、胃腸道感染可能與IgAIgA合成不合成不 足有關(guān)。足有關(guān)。 三、三、IgA IgEIgE產(chǎn)生部位與分泌型產(chǎn)生部位與分泌型IgAIgA相似，是血清中含量最低的相似，是血清中含量最低的IgIg。 IgEIgE的重鏈多一個(gè)功能區(qū)的重鏈多一個(gè)功能區(qū)CH4CH

31、4，此區(qū)是細(xì)胞結(jié)合的部位，此區(qū)是細(xì)胞結(jié)合的部位， 因而它是一種親細(xì)胞性抗體。因而它是一種親細(xì)胞性抗體。 結(jié)合在肥大細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞上的結(jié)合在肥大細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞上的IgEIgE與抗原結(jié)合后，能與抗原結(jié)合后，能 引起這些細(xì)胞脫顆粒，釋放組織氨等活性介質(zhì)，從而引起引起這些細(xì)胞脫顆粒，釋放組織氨等活性介質(zhì)，從而引起I I 型過敏反應(yīng)型過敏反應(yīng)。 IgEIgE在抗寄生蟲感染在抗寄生蟲感染中具有重要作用，研究表明，蠕蟲、中具有重要作用，研究表明，蠕蟲、 血吸蟲和旋毛蟲等寄生蟲病以及某些真菌感染后，均可誘導(dǎo)血吸蟲和旋毛蟲等寄生蟲病以及某些真菌感染后，均可誘導(dǎo) 機(jī)體產(chǎn)生大量的機(jī)體產(chǎn)生大量的IgEIgE抗體。

32、抗體。 五、五、IgDIgD IgD IgD在個(gè)體發(fā)育的任何時(shí)候產(chǎn)生，在血清中濃度極低，平在個(gè)體發(fā)育的任何時(shí)候產(chǎn)生，在血清中濃度極低，平 均約均約0.03mg/ml0.03mg/ml，且極不穩(wěn)定，容易降解，半衰期僅，且極不穩(wěn)定，容易降解，半衰期僅3 3天；天； 主要作為成熟主要作為成熟B B細(xì)胞膜上的抗原特異性受體，是細(xì)胞膜上的抗原特異性受體，是B B細(xì)胞分細(xì)胞分 化發(fā)育成熟的標(biāo)志化發(fā)育成熟的標(biāo)志，成熟，成熟B B細(xì)胞活化后，或者變成記憶細(xì)胞活化后，或者變成記憶B B細(xì)胞細(xì)胞 時(shí)，時(shí)，mIgDmIgD逐漸消失。逐漸消失。 對防止免疫耐受有一定作用對防止免疫耐受有一定作用 四、四、IgEIgE

33、各類免疫球蛋白的生物學(xué)活性各類免疫球蛋白的生物學(xué)活性 免疫球蛋白免疫球蛋白IgGIgGIgAIgAIgMIgMIgDIgDIgEIgE 重鏈名稱重鏈名稱 重鏈功能區(qū)數(shù)目重鏈功能區(qū)數(shù)目4 44 45 54 45 5 主要存在形式主要存在形式單體單體單體、雙體單體、雙體五聚體五聚體單體單體單體單體 分子量分子量(KD)(KD)146-170146-170160160，400400970970175175188188 碳水化合物（碳水化合物（% %）4 41010121218181212 血清濃度血清濃度(mg/dl)(mg/dl)1150115030030021021050501501500.3-

34、40.3-40.0020.002 血清總血清總Ig (%)Ig (%)757510105-105-10110.0010.001 外分泌液外分泌液- -+ +- - - 經(jīng)典途徑活化補(bǔ)體經(jīng)典途徑活化補(bǔ)體+- -+- - - 代替途徑活化補(bǔ)體代替途徑活化補(bǔ)體+ + +? ?+ + + 半衰期（天）半衰期（天）20-2320-235.85.85.15.12.82.82.52.5 合成部位合成部位 脾、淋巴結(jié)漿細(xì)脾、淋巴結(jié)漿細(xì) 胞胞 粘膜相關(guān)淋巴粘膜相關(guān)淋巴 樣組織樣組織 脾、淋巴結(jié)漿細(xì)脾、淋巴結(jié)漿細(xì) 胞胞 扁桃體、脾漿扁桃體、脾漿 細(xì)胞細(xì)胞 粘膜固有層漿粘膜固有層漿 細(xì)胞細(xì)胞 通過胎盤通過胎盤+ +

35、- - - - - 免疫作用免疫作用 抗菌、抗病毒、抗菌、抗病毒、 抗毒素、自身抗抗毒素、自身抗 體體 粘膜局部免疫粘膜局部免疫 作用，抗菌、作用，抗菌、 抗病毒，免疫抗病毒，免疫 排除功能排除功能 早期防御作用，早期防御作用， 溶菌，溶血，溶菌，溶血， SmIgMSmIgM，天然血，天然血 型抗體，類風(fēng)濕型抗體，類風(fēng)濕 因子因子 確切功能目前確切功能目前 不清楚不清楚 抗寄生蟲感染，抗寄生蟲感染， I I型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng) 一、多克隆抗體（第一代抗體）一、多克隆抗體（第一代抗體） （一）概念（一）概念( (重點(diǎn)重點(diǎn)).). 采用傳統(tǒng)的免疫方法，將抗原物質(zhì)經(jīng)不同途采用傳統(tǒng)的免疫方法，將抗原物

36、質(zhì)經(jīng)不同途 徑注入動(dòng)物體內(nèi)后，經(jīng)數(shù)次免疫后采取動(dòng)物血液，徑注入動(dòng)物體內(nèi)后，經(jīng)數(shù)次免疫后采取動(dòng)物血液， 分離出血清，由此獲得的抗血清即為分離出血清，由此獲得的抗血清即為多克隆抗體多克隆抗體 （polyclonal antibody, PcAbpolyclonal antibody, PcAb），該抗血清是），該抗血清是 一種多克隆的混合抗體，具有高度的異質(zhì)性，即一種多克隆的混合抗體，具有高度的異質(zhì)性，即 針對同一抗原決定簇的抗體仍是由不同針對同一抗原決定簇的抗體仍是由不同B B細(xì)胞克細(xì)胞克 隆產(chǎn)生的不同質(zhì)的抗體所組成。隆產(chǎn)生的不同質(zhì)的抗體所組成。 （二）基本制備過程（二）基本制備過程 抗原制備抗

37、原制備動(dòng)物免疫動(dòng)物免疫檢測血清抗體檢測血清抗體 效價(jià)效價(jià)血清分離與保存。血清分離與保存。 第六節(jié)第六節(jié) 抗體的人工制備抗體的人工制備 二、單克隆抗體（第二代抗體）二、單克隆抗體（第二代抗體） ( (重點(diǎn)重點(diǎn)).). （一）概念（一）概念 由一個(gè)由一個(gè)B B細(xì)胞分化增殖的子代細(xì)胞細(xì)胞分化增殖的子代細(xì)胞 （漿細(xì)胞）克隆、產(chǎn)生的針對單一抗原決定簇的（漿細(xì)胞）克隆、產(chǎn)生的針對單一抗原決定簇的 抗體，或者說是由一個(gè)識(shí)別一種抗原表位的抗體，或者說是由一個(gè)識(shí)別一種抗原表位的B B細(xì)細(xì) 胞克隆產(chǎn)生的同源抗體，胞克隆產(chǎn)生的同源抗體，稱為單克隆抗體稱為單克隆抗體 （McAbMcAb）。）。 （二）優(yōu)點(diǎn)（二）優(yōu)點(diǎn)

38、1.1.有高度的有高度的單一性、均一性單一性、均一性； 2.2.純度高純度高，制備時(shí)不需純化抗原就可得到純抗體；，制備時(shí)不需純化抗原就可得到純抗體； 3.3.效價(jià)高效價(jià)高； 4.4.產(chǎn)量高產(chǎn)量高，且可連續(xù)生產(chǎn)特異性強(qiáng)；，且可連續(xù)生產(chǎn)特異性強(qiáng)； 5.5.特異性強(qiáng)特異性強(qiáng)，少或無血清交叉反應(yīng)。，少或無血清交叉反應(yīng)。 （三）制備單克隆抗體的基本原理（三）制備單克隆抗體的基本原理 （1 1）DNADNA合成的合成的2 2條途徑條途徑 主要途徑：可被主要途徑：可被氨基喋呤氨基喋呤(A)(A)所阻斷所阻斷 旁路途徑：利用旁路途徑：利用次黃嘌呤次黃嘌呤(H)(H)和和胸腺嘧啶核苷胸腺嘧啶核苷(T)(T) l 次黃嘌呤次黃嘌呤- -鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT)(HGPRT) l 胸腺嘧啶核苷激酶胸腺嘧啶核苷激酶(TK)(TK)。 所需要的酶所需要的酶 （2 2）所用的細(xì)胞）所用的細(xì)胞 （3 3）所用培養(yǎng)基）所用培養(yǎng)基 （三）基本制備過程（三）基本制備過程 制備抗原制備抗原 免疫動(dòng)物免疫動(dòng)物 免疫脾細(xì)胞和骨髓瘤免疫脾細(xì)胞和骨髓瘤 細(xì)胞的制備細(xì)胞的制備 細(xì)胞