Survivin與非小細(xì)胞肺癌預(yù)后的相關(guān)性研究

1、Survivin與非小細(xì)胞肺癌預(yù)后的相關(guān)性研究2O06年9月第22卷第9期ClinicalMedicineofChinaSurvivin與非小細(xì)胞肺癌預(yù)后的相關(guān)性研究劉孝民王紅巖陳建民李志娟董建堂【摘要】目的研究非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)組織中細(xì)胞凋亡抑制蛋白存活素(Survivin)的表達(dá)與其預(yù)后的關(guān)系.方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)100例手術(shù)標(biāo)本Survivin的表達(dá)狀態(tài)進(jìn)行檢測(cè).結(jié)果100例NSCLC石蠟標(biāo)本中Survivin陽(yáng)性率為63%,在不同耵M分期,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的NSCLC組織中,Survivin陽(yáng)性率的差異有顯著性(P<0.05),而與組織學(xué)類(lèi)型和分化程度無(wú)關(guān).多因素COX回

2、歸顯示:Survivin是NSCLC患者預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子.Survivin陽(yáng)性患者手術(shù)后死亡的相對(duì)危險(xiǎn)度是Survivin陰性患者的1.86倍;(似然比檢驗(yàn),P<0.05).結(jié)論Survivin表達(dá)狀態(tài)是NSCLC患者預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子,Survivin陽(yáng)性表達(dá)的肺癌患者預(yù)后不良.【關(guān)鍵詞】非小細(xì)胞肺癌;細(xì)胞凋亡抑制蛋白存活素;凋亡【中圖分類(lèi)號(hào)】R734.2【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1008-6315(2006)09-0822-04?論著?RelationshipsbetweenexpressionofSurvivinandprognosisofnon-small-cellLungC

3、ancer.L/uXiaomin,WangHongyan,ChenJianmin.eta1.FirstAffiliatedtlospitalofHenanUnrsltyofTechnologyandScience(Henan471003,China)【Abstract】ObjectiveTostudytherelationshipsbetweentheexpressionofsurvivinandtheprognosisofnon-smallcelllungcancer(NSCLC).MethodsTheexpressionofSurvivinin100cancerspecimenswered

4、eter-minedbymeRllSofimmunohistochmistry.ResultsThepositiveexpressionrateofSurvivininNSCLCwas63%.Theexpressionofsurvivinwassignificantlyassociatedwithpathologic-TNMstageandlymphnodalmetastases(P<0.05),butnotwithhistologicsubtypeanddifferentiation.COXregressionshowedthatSurvivinwastheindependentpro

5、gnosticfactorfortheprognosisofNSCLC.TheriskratioofdeathinSurvivinpositivepatientswas1.86timeofthatofnegativepatients(P<0.05).ConclusionSurvivinexpressionistheindependentprognosticfactorofclinicaloutcome,anditspositiveexpressionindicatesthepoorprognosis.【Keywords】Non-small-cellLungcancer;Survivin;

6、Apoptosis肺癌是當(dāng)今世界發(fā)病率和病死率增長(zhǎng)最快,對(duì)人類(lèi)健康和生命威脅最大的惡性腫瘤.Survivin是新近發(fā)現(xiàn)的一種新的凋亡抑制蛋白(IAP),與其他凋亡因子不同,除參與凋亡的控制外,還特異地在細(xì)胞周期G2/M期表達(dá),通過(guò)與細(xì)胞有絲分裂紡錘體的微管結(jié)合,參與對(duì)細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié).Survivin依賴(lài)細(xì)胞增殖信號(hào)介導(dǎo)而進(jìn)入核內(nèi),與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)子cdk4結(jié)合,導(dǎo)致cdk2/Cyclin的激活和Rb磷酸化,Survivin/Cdk4的形成使P21釋放,P21通過(guò)緊密結(jié)合于G1期和s期的蛋白激酶,抑制其活性,對(duì)細(xì)胞增殖停留在G1期具有重要的作用,P21的解離使qdk4活化,細(xì)胞進(jìn)入增殖周期,最

7、終導(dǎo)致大量細(xì)胞無(wú)限制增殖.為探討Survivin在非小細(xì)胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)中的表達(dá)及意義,我們采用免疫組化方法對(duì)100例患者肺癌標(biāo)本進(jìn)行了檢測(cè),現(xiàn)報(bào)告如下.1材料與方法1.1一般資料標(biāo)本取于100例NSCLC患者,其中作者單位:471003河南省洛陽(yáng)市,河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤科(劉孝民,王紅巖,陳建民,董建堂),心血管內(nèi)科(李志娟)男61例,女39例;年齡3O77歲,平均(54.69.3)歲.鱗癌43例,腺癌57例;TNM分期I期22例,期41例,期37例.接受根治性手術(shù)切除86例,接受非根治性手術(shù)14例;側(cè)肺切除4O例,肺葉切除6O例;5

8、0位患者在手術(shù)后接受了放療或化療.1.2檢測(cè)方法采用SP法行免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè),Suivin兔抗人多克隆抗體,即用型(福建邁新)鏈霉素抗生物素蛋白一過(guò)氧化酶(Streptavidin/pemxidase,SP)染色試劑盒(Zymed,SP-9001).SUrvivin的表達(dá)位于細(xì)胞漿內(nèi),呈棕黃色.Sur-vivin陽(yáng)性細(xì)胞染色強(qiáng)度分為3級(jí):淺黃色為弱陽(yáng)性(+),棕黃色為中度陽(yáng)性(+),棕褐色為強(qiáng)陽(yáng)性(+).1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用x檢驗(yàn)分析Survivin的表達(dá)狀態(tài)與肺癌患者年齡,性別,肺癌TNM分期,組織學(xué)分期,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分化程度的關(guān)系;采用相關(guān)分析檢測(cè)Survivin的相關(guān)性,采用壽命表法

9、(Lifetable法)估計(jì)患者的生存率,選用秩和檢驗(yàn)(Logranktest)驗(yàn)證生存率差異的顯著性;選用COX比例風(fēng)險(xiǎn)模型(proportionalhazardmodel,又稱(chēng)COX回歸)進(jìn)行中國(guó)綜合臨床2006年9月第22卷第9期ClinicalMedicineofChina.September2006.Vo1.22.No.9多因素的生存分析【2J.2結(jié)果2.1Survivin與NSCLC臨床病理參數(shù)關(guān)系見(jiàn)表1.Survivin陽(yáng)性信號(hào)為棕褐色顆粒狀染色,均分布于細(xì)胞漿中,Survivin陽(yáng)性表達(dá)有部分在細(xì)胞核內(nèi).胞漿內(nèi)出現(xiàn)陽(yáng)性信號(hào)的細(xì)胞稱(chēng)為Survivin陽(yáng)性細(xì)胞.NSCLC的腫瘤組織

10、中Survivin表達(dá)陽(yáng)性率為63%,在不同TNM分期,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的NSCLC組織中,Survivin陽(yáng)性率的差異有顯著性(P<0.05).表1Survivin表達(dá)與NSCLC臨床病理參數(shù)及生存期的關(guān)系(例)2.2臨床因素對(duì)NSCLC患者1,3,5,10年生存率的影響見(jiàn)表2.淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,Survivin表達(dá)狀態(tài)以及TNM分期等因素對(duì)NSCLC患者手術(shù)后生存率有顯著性影響(表2).其中,Survivin陽(yáng)性患者的術(shù)后1,3,5,1O年生存率明顯低于Survivin陰性患者(均P<0.01);淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對(duì)NSCLC患者的遠(yuǎn)期生存率有顯著性影響,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的NSCLC患者的遠(yuǎn)期生存率

11、明顯高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性的患者(P<0.01).2.3鱗癌與腺癌患者1,3,5,10年生存率見(jiàn)表3.雖然組織分化較好的NSCLC患者的遠(yuǎn)期生存率高于組織分化較差的患者,但是經(jīng)Logrank檢驗(yàn)此差異無(wú)顯著性(見(jiàn)表3).淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,TNM分期以及Survivin表達(dá)狀態(tài)對(duì)NSCLC患者預(yù)后的影響有顯著性.而年齡,性別,手術(shù)性質(zhì),手術(shù)方式以及肺癌組織分化程度等因素對(duì)NSCLC患者預(yù)后的影響差異無(wú)顯著性.淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Survivin是NSCLC患者預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子,Survivin陽(yáng)性患者死于肺癌的相對(duì)危險(xiǎn)度是Survivin陰性患者的1.86倍;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性的NSCLC患者其死亡的相對(duì)危險(xiǎn)

12、度是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的的3.2O倍.3討論凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosisprotein,IAP)是抑制細(xì)胞凋亡的重要成分.Survivin是IAP家族的新成員,是經(jīng)效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體1(effeetorproteasereceptor一1,EPR一1)cDNA在人類(lèi)基因組庫(kù)的雜交篩選中分離出來(lái)的.人類(lèi)Survivin基因定位于染色體17q25,編碼142個(gè)氨基酸蛋白,相對(duì)分子質(zhì)量為165000KD,其結(jié)構(gòu)上僅含有單一的BIR功能區(qū),而缺少末端環(huán)指結(jié)構(gòu).Survivin在組織分布上具有明顯細(xì)胞選擇性,通常只表達(dá)胚胎和發(fā)育的胎兒組織,除胸腺外不見(jiàn)于其他正常終末分化的成人組織.

13、相反大多數(shù)腫瘤組織均可見(jiàn)Survivin的表達(dá).Survivin以周期調(diào)節(jié)的方式表達(dá)于細(xì)胞周期的G2/M期,凋亡的調(diào)控也被認(rèn)為多數(shù)發(fā)生在G2/M期,在有絲分裂早期,Survivin與有絲分裂紡錘體的微管有特異性的可飽和反應(yīng),并受微管動(dòng)力的調(diào)節(jié).半胱天冬蛋白酶一3(Caspase一3),Caspase-7在凋亡過(guò)程中起重要作用,是凋亡推進(jìn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié).Survivin與激活的Caspase一3和Caspase一7結(jié)合,阻止由Caspases激活劑或凋亡誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的細(xì)胞DEVDcleaving自殺酶的累積.Survivin抑制Caspases活性受Survivin分子中Caspases結(jié)合域分子裂解

14、的調(diào)節(jié).Survivin蛋白缺乏鋅指結(jié)構(gòu),而不能直接參與Caspases的結(jié)合J,是通過(guò)與有絲分裂的微管(Microtube)結(jié)合,從而抑制Caspases的活性,當(dāng)Survivinmierotube結(jié)合解開(kāi)時(shí),Survivin抗凋亡的功能消失,同時(shí)Caspases的活性增強(qiáng)J.另外Survlvln也可通過(guò)P21間接抑制Caspases.其機(jī)制是Survivin與細(xì)胞周期調(diào)控因子cdk4形成Survivincdk4復(fù)合體,使得P21以cdk4的復(fù)合體釋放出來(lái),P21進(jìn)一步與線(xiàn)粒體Caspase-3結(jié)合,抑制其活性,組織細(xì)胞凋亡【6J.此外,Survivin還可通過(guò)抑制細(xì)胞色素c的釋放在線(xiàn)粒水平

15、參與凋亡調(diào)節(jié).Survivin作用于各種凋亡通路末端效應(yīng)子【4J.Survivin過(guò)度表達(dá),細(xì)胞失去了正常增殖周期中凋亡開(kāi)關(guān)(Checkpoint)的限制,造成細(xì)胞增殖增加,凋亡減少,細(xì)胞增殖與凋亡平衡打破,最后導(dǎo)致癌癥的增加.我們的研究結(jié)果顯示:NSCLC組織中Survivin陽(yáng)性率為63%,與白莉等r報(bào)道的肺癌組織中Survivin表達(dá)的陽(yáng)性率61%結(jié)果相似,I,期Survivin陽(yáng)性率分別為36.36%,82.93%,56.76%(P<0.05),說(shuō)明Survivin陽(yáng)性表達(dá)率與分期關(guān)系密切;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性的NSCLC組織中Survivin陽(yáng)性表達(dá)率(70.13%)顯著高于無(wú)淋巴結(jié)

16、轉(zhuǎn)移(39.13%)(P<中國(guó)綜合臨床2006年9月第22卷第9期ClinicalMedicineofChina.September2006,Vo1.22.No.90.05),Survivin表達(dá)陽(yáng)性的患者5年生存率(39.34%)明顯低于Survivin表達(dá)陰性的患者(60.6l%)(P<0.01),說(shuō)明Survivin對(duì)肺癌的發(fā)生,發(fā)展起著促進(jìn)作用.測(cè)定NSCLC組織中Survivin表達(dá)率對(duì)判斷預(yù)后有指導(dǎo)作用.我們的研究結(jié)果顯示,Survivin在NSCLC細(xì)胞中的陽(yáng)性信號(hào)主要位于細(xì)胞漿內(nèi),但有幾位患者的癌組織,僅在癌細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)Survivin陽(yáng)性信號(hào)或在細(xì)胞漿和細(xì)胞

17、核內(nèi)同時(shí)出現(xiàn)Survivin陽(yáng)性信號(hào).以往國(guó)外的研究也出現(xiàn)了Survivin在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)的情況.這表明Survivin基因在腫瘤中存在不穩(wěn)定表達(dá),我們分析造成Survivin在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)的原因有以下幾種可能性:使用針對(duì)Survivin蛋白不同氨基酸序列的抗體,免疫組化試驗(yàn)可顯示Survivin存在不同的細(xì)胞內(nèi)定位.由于Survivin抗凋亡作用必須依賴(lài)于與有絲分裂紡錘體結(jié)合,因而這種不同的亞細(xì)胞分布提示在抑制凋亡的過(guò)程中,Survivin可能存在從胞漿到胞核的易位.在制作石蠟包埋標(biāo)本中,處理不當(dāng),造成細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的損傷,引起Sur-vivin異位表達(dá).表2100例患者肺癌臨床病理學(xué)特征對(duì)遠(yuǎn)

18、期生存率的影響(%)表3癌組織分化程度對(duì)患者遠(yuǎn)期生存率的影響(%)肺癌的發(fā)生是一個(gè)多因素多階段的過(guò)程,影響預(yù)后的因素較多,同一腫瘤可能同時(shí)存在基因的異常,我們僅選擇了Survivin并且僅從蛋白表達(dá)的水平加以研究,存在一定的局限性,不能全面反映肺癌發(fā)生,發(fā)展的分子機(jī)制.今后可以從幾個(gè)方面加以研究:對(duì)同一種肺癌同時(shí)檢測(cè)多種基因的表達(dá)狀態(tài)(P16,P21,P53,GF等);繼續(xù)運(yùn)用分子流行病學(xué)的方法,從基因水平研究Survivin在肺癌發(fā)生,發(fā)展中的作用;構(gòu)建有效的Survivin基因載體,對(duì)染瘤動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)性的早期診斷和基因治療.參考文獻(xiàn):1殷擁軍.古寶亮.楊梅懷.等.P53,P16基因蛋白在非

19、小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及意義J.實(shí)用癌癥雜志,1999,14(2):96-98.2KonnoR,YamakawaH,UtsunomiyaH,eta1.ExpressionofsurvivinandBcl-2inthenormalhumanendometriumJ.MolHumRepred,2000,6(6):529.3ShibuyaM.StructureandfunctionofVEGF/VEGF-receptorsysteminvolvedinangiogenesisJ.CellStructFunet,2001.26(1):25-35.4閻羽,蔡兵.崔承彬.生存蛋白的研究進(jìn)展J.國(guó)外醫(yī)學(xué)藥學(xué)分合

20、l隨床2006年9月第22卷第9期ClinicalMedicineofChina冊(cè),2001,28(16):329-332.5張勤,陳志偉,王麗,等.非小細(xì)胞肺癌Survivin表達(dá)及其預(yù)后關(guān)系的研究J.中國(guó)綜合臨床,2002,18(10):925-926.6WangMei,WangBing,WangXiaoli,eta1.Aprdiminarystudyonsurvivinandbd-2expressionincervicalcarcinomasJ.XIANMEDUNIV,2001,13(2):107.109.酷似膠質(zhì)瘤的腦膿腫38例分析馮世宇祖朝輝白云池崔永鵬7白莉,孫燕,李申德.Mye家

21、族癌基因與肺癌預(yù)后J.肺癌雜志,1998,1(5):29.31.收稿:2006-0316(本文編輯代小菊)【摘要】目的分析不典型腦膿腫的臨床特點(diǎn),總結(jié)在腦膿腫不同發(fā)展階段的正確的治療方法.方法對(duì)38例不典型腦膿腫患者的臨床表現(xiàn),實(shí)驗(yàn)室檢查,影像學(xué)特點(diǎn),診斷及治療進(jìn)行回顧性研究.結(jié)果20例腦膿腫腦炎期患者l7例保守治療治愈,3例手術(shù)后給予抗炎治療治愈;18例腦膿腫包膜形成期患者l6例手術(shù)加抗炎治療治愈,2例經(jīng)保守治療好轉(zhuǎn).結(jié)論不典型腦膿腫與膠質(zhì)瘤在臨床上往往不易鑒別,對(duì)于考慮膠質(zhì)瘤不除外腦炎期腦膿腫的病例,給予診斷性抗炎治療.對(duì)于考慮膠質(zhì)瘤不除外包膜形成期腦膿腫患者,直接手術(shù)治療,抗炎治療效果不

22、佳.【關(guān)鍵詞】腦膿腫;膠質(zhì)瘤【中圖分類(lèi)號(hào)】R742.7【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1008-6315(2006)09-0825-02腦膿腫為常見(jiàn)的顱內(nèi)感染性疾病,近年來(lái),感染征象不明顯隱源性腦膿腫有所增加,臨床易誤診,甚至經(jīng)歷不必要的手術(shù),尤其是臨床及影像學(xué)表現(xiàn)均不典型的腦炎期,包膜期腦膿腫與膠質(zhì)瘤不易區(qū)分.我們對(duì)1995年8月至2005年5月收治的38例經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)及經(jīng)非手術(shù)診斷性治療診斷的非典型腦膿腫進(jìn)行了回顧性研究,目的在于增加對(duì)非典型腦膿腫的認(rèn)識(shí),提高腦膿腫的正確診斷率,采取合理的治療手段.1資料與方法1.1一般資料男2l例,女l7例;年齡l678歲.均以顱內(nèi)占位收人院.1例人院3個(gè)月前曾牙齦腫脹,5例2個(gè)月前有發(fā)熱病史,3例有中耳炎病史,2例有慢性咽炎病史,其余均無(wú)明確感染史.首發(fā)癥狀有頭痛,嘔吐等顱內(nèi)壓增高表現(xiàn)23例;癲癰發(fā)作l5例,其中大發(fā)作9例,局灶發(fā)作6例.言語(yǔ)障礙4例,肢體偏癱11例,偏身感覺(jué)減退3例,偏盲2例,共濟(jì)運(yùn)動(dòng)障礙7例,11例患者無(wú)明顯神經(jīng)系統(tǒng)定位體征.均無(wú)寒戰(zhàn),發(fā)熱,周身疼痛等全身中毒癥狀,亦無(wú)腦膜刺激征.1.2實(shí)驗(yàn)室檢查血常規(guī)檢查白細(xì)胞>1010/Ll