SOP-液相色譜崗位分析方法性能標(biāo)準(zhǔn)、其他要求和步驟

1、AAAAAA精品文檔你我共享中華人民共和國安徽出入境檢驗(yàn)檢疫局The Chemical Laboratory of AHCIQ標(biāo)準(zhǔn)操作程序Sta ndard Operati on Procedure液相色譜崗位分析方法性能標(biāo)準(zhǔn)、其他要求和步驟Concerning the Performa nee of An alytical Methodsand the Interpretation of Results at LC Post方法編號(hào)SOP-LC-XXX批準(zhǔn)人起草人版本/版次簽發(fā)人修訂次數(shù)簽發(fā)日期驗(yàn)證人實(shí)施日期驗(yàn)證日期精品文檔你我共享AAAAAA安徽出入境檢驗(yàn)檢疫局化學(xué)技術(shù)中心液相色譜崗位分析

2、方法性能標(biāo)準(zhǔn)、其他要求和步驟1 定義1.1準(zhǔn)確度檢測結(jié)果與可接受參考值之間的符合度。通過測定真實(shí)性和精密度來確定。1.2誤差指測試樣品符合規(guī)定的概率，盡管獲得的是不符合規(guī)定的測定（是一個(gè)假的不 符合規(guī)定的決定）。1.3分析物將要檢測、鑒別和/或定量的物質(zhì)以及分析過程中產(chǎn)生的衍生物。1.4誤差測試樣品確實(shí)不符合規(guī)定的概率，盡管獲得的是符合規(guī)定的測定（是一個(gè)假的 符合規(guī)定的決定）。1.5偏差指檢測結(jié)果與可接受參考值之間的差異。1.6標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)用參考基準(zhǔn)值的測量值來代表所測物質(zhì)量的測量手段。1.7認(rèn)證過的基準(zhǔn)物質(zhì)（CRM）CRM指一種有特定分析物含量賦值的物質(zhì)材料。1.8共色譜法指一個(gè)將提取物在進(jìn)行色

3、譜分離之前分成兩個(gè)部分的過程。第一部分進(jìn)行色 譜分離。第二部分與要測定的標(biāo)準(zhǔn)分析物混合。然后將該混合物也進(jìn)行色譜分離。 所加標(biāo)準(zhǔn)分析物的量必須與提取物中分析物的估計(jì)值相差不大。設(shè)計(jì)此方法是要提高采用色譜法時(shí)分析物的鑒別，特別是在沒有適宜的內(nèi)標(biāo)物可用時(shí)。1.9協(xié)同試驗(yàn)用相同的方法對(duì)相同的樣品進(jìn)行分析以確定該方法的性能特性。該試驗(yàn)包括 隨機(jī)測定誤差和實(shí)驗(yàn)室偏差。1.10確認(rèn)方法精品文檔你我共享AAAAAA能提供全面或補(bǔ)充信息使物質(zhì)得到明確地鑒定，并且能在感興趣的水平進(jìn)行 定量的方法。1.11決定限度（CCa）CCa指等于和高于此值時(shí)，可以用a誤差概率得出認(rèn)為樣品不符合規(guī)定的結(jié)論的限度。1.12檢測

4、容量（CCB）CCB指可以用B誤差概率檢測、鑒別和/或定量樣品中物質(zhì)的最小含量。 對(duì) 于未確定允許限量的物質(zhì)，檢測容量是指用1B統(tǒng)計(jì)學(xué)概率方法能夠檢測出真正污染的樣品的最低濃度。對(duì)于已經(jīng)建立允許限量的物質(zhì)，檢測容量則是指用 1B統(tǒng)計(jì)學(xué)概率方法能夠檢測出允許限量濃度的濃度。1.13添加樣品材料被已知量的待測物強(qiáng)化的樣品。1.14實(shí)驗(yàn)室間試驗(yàn)（比對(duì)）由兩個(gè)或多個(gè)實(shí)驗(yàn)室依照預(yù)先確定的測定檢測性能條件，對(duì)同一樣品的檢測 進(jìn)行組織、性能和評(píng)價(jià)測試。根據(jù)目的，試驗(yàn)可以分為協(xié)作試驗(yàn)和熟練程度試驗(yàn)。1.15 內(nèi)標(biāo)（IS）一種理化特性與待測分析物盡可能相同，并且樣品中不存在的物質(zhì)。它被加 到每份樣品中及每一個(gè)校

5、準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)中。1.16實(shí)驗(yàn)室樣品被送到實(shí)驗(yàn)室作檢查和測試而準(zhǔn)備的一種樣品。1.17關(guān)心水平樣品中明顯地確定其符合法規(guī)規(guī)定的物質(zhì)或分析物的濃度。1.18最低要求性能限度（MRPL）樣品中至少必須檢測和確認(rèn)的分析物的最低含量。1.19性能特點(diǎn)可以歸結(jié)于分析方法的使用特點(diǎn)。這可以是特異性、準(zhǔn)確性、真實(shí)性、精密 度、重復(fù)性、重現(xiàn)性、回收率、檢測性能和抗耐性。1.20分析方法的性能標(biāo)準(zhǔn)可以來判斷該方法是否適合于其目的、并產(chǎn)生可靠結(jié)果的性能特點(diǎn)要求。1.21允許限度法規(guī)中確定的物質(zhì)的最高殘留限量、最高水平和其他最大耐受量。精品文檔你我共享AAAAAA1.22精密度在規(guī)定（預(yù)先確定）條件下，獲得的相互獨(dú)立的檢測

6、結(jié)果之間的一致程度。精 密度測定通常用不精確性表示并以檢測結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差來計(jì)算。標(biāo)準(zhǔn)偏差大則精密度就低。1.23熟練試驗(yàn)允許實(shí)驗(yàn)室選擇其自己的方法來分析同一個(gè)樣品，假設(shè)這些方法在常規(guī)條件下使用。試驗(yàn)必須按照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序來設(shè)計(jì)或執(zhí)行，并可用來評(píng)價(jià)方法的 重現(xiàn)性。1.24定性方法一種可以根據(jù)物質(zhì)的化學(xué)、生物學(xué)或物理特性鑒別該物質(zhì)的分析方法。1.25定量方法一種可以確定物質(zhì)的數(shù)量或質(zhì)量特性，以便可以用適當(dāng)單位的數(shù)值表示的分 析方法。1.26試劑空白測定不用測試物或用相當(dāng)數(shù)量的溶劑替代測試物而進(jìn)行的全部分析過程。1.27回收率在分析過程中回收到物質(zhì)的實(shí)際濃度百分比。如果是沒有認(rèn)證過的基準(zhǔn)物 質(zhì)，

7、應(yīng)在方法確認(rèn)試驗(yàn)中予以測定。1.28基準(zhǔn)物質(zhì)指其一種或幾種特性已經(jīng)被確認(rèn)方法所證實(shí)，從而可以用來校正設(shè)備或校驗(yàn) 測定方法的物質(zhì)。1.29重復(fù)性在重復(fù)條件下的精密度。1.30重復(fù)條件在同一個(gè)試驗(yàn)室由同一個(gè)操作人，用相同的儀器、相同的方法對(duì)同一個(gè)檢測 項(xiàng)目進(jìn)行檢測，獲得的獨(dú)立檢測結(jié)果的條件。1.31重現(xiàn)性在重現(xiàn)條件下的精密度。1.32重現(xiàn)條件在不同試驗(yàn)室由不同的操作人，用不同的儀器、相同的方法對(duì)同一個(gè)檢測項(xiàng) 目進(jìn)行檢測，獲得的獨(dú)立檢測結(jié)果的條件。精品文檔你我共享AAAAAA1.33抗耐性分析方法對(duì)試驗(yàn)條件，可以表示為樣品材料、分析物、貯存條件、環(huán)境和或 樣品制備條件等改變的敏感性，在此條件下，該方

8、法可以按現(xiàn)有方法應(yīng)用或作特 別的輕微修正。對(duì)于實(shí)際中可能遇到的各種變化 （如試劑的穩(wěn)定性、樣品的組分、 酸度、溫度）的所有試驗(yàn)條件，任何能夠影響分析結(jié)果的變化都應(yīng)盡可能的指出。 1.34樣品空白測定對(duì)不含分析物的樣品的測試部分進(jìn)行的完整分析過程。1.35篩選方法用來測定關(guān)注水平的某一物質(zhì)或某類物質(zhì)的存在方法。這些方法具有對(duì)樣品的高吞吐量能力，并被用來對(duì)大量的樣品進(jìn)行審定，以確定是否潛在地不符合規(guī) 定。它們應(yīng)該特別地設(shè)計(jì)，以避免出現(xiàn)符合的假結(jié)果。1.36單一實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（室內(nèi)確認(rèn)）一種由一個(gè)實(shí)驗(yàn)室在適當(dāng)長的時(shí)間間隔內(nèi)，在不同的條件下，用一種方法來分析相同或不同的測試材料的分析試驗(yàn)。1.37特異性一

9、種區(qū)別被測分析物與其他物質(zhì)的能力的方法。這種特性是所述測定技術(shù)的主要功能，但是可以根據(jù)化合物或基質(zhì)的類別而變化。1.38標(biāo)準(zhǔn)添加指測試樣品被分為兩個(gè)（或多個(gè)）測試部分的過程。其中一部分直接分析，另 一部分在分析前被添加了已知數(shù)量的標(biāo)準(zhǔn)分析物。 所加標(biāo)準(zhǔn)分析物的量必須是樣 品中估計(jì)的分析物的量的2倍到5倍之間?？紤]到分析過程的回收率，設(shè)計(jì)此 步驟是要確定樣品中的分析物的含量。1.39標(biāo)準(zhǔn)分析物一種已知的，并被認(rèn)證過含量和純度，用作分析中參照物的分析物。1.40物質(zhì)特定的或有確定化學(xué)組成的物質(zhì)及其代謝物。1.41測試部分指從進(jìn)行檢測或觀察的測試樣品分出的物質(zhì)的量。1.42測試樣品指由一種實(shí)驗(yàn)室樣品

10、制備，并由此獲取測試部分的一種樣品。1.43真實(shí)度精品文檔你我共享AAAAAA從大量的測試結(jié)果獲得的平均值與可接受的參照值之間的符合程度。真實(shí)度通常以偏差表示。1.44單位指ISO 31（20）和歐盟指令71/354/EC中所述的那些單位。1.45確認(rèn)通過檢查和提供有效的證據(jù)，以確定一個(gè)特定計(jì)劃應(yīng)用的具體要求得到實(shí) 行。1.46實(shí)驗(yàn)室內(nèi)重復(fù)性在同一個(gè)試驗(yàn)室，在適當(dāng)長的時(shí)間間隔內(nèi)和在規(guī)定（預(yù)先確定）的條件下（涉及 到如方法、測試材料、操作人員、環(huán)境）獲得的精密度。2.分析方法性能標(biāo)準(zhǔn)和其他要求2.1總體要求2.1.1樣品處理樣品應(yīng)該以有最大機(jī)會(huì)檢測出物質(zhì)的方式獲得、處理和加工。樣品處理過程 應(yīng)防

11、止偶然污染或丟失分析物的可能性。2.1.2方法性能2.121回收率在樣品分析過程中，如果采用了一個(gè)固定的回收率校正因子，則應(yīng)對(duì)每一批 樣品測定回收率。如果回收率在限度以內(nèi)，才能采用固定的回收率校正因子。否 則，應(yīng)采用從該批樣品獲得的特定回收率因子，除非采用標(biāo)準(zhǔn)添加程序（見3.5）或用內(nèi)標(biāo)法來定量測定樣品中分析物，才可應(yīng)用樣品中分析物的特定回收率因 子。2.1.2.2特異性在試驗(yàn)條件下一個(gè)方法應(yīng)能區(qū)分分析物和其他物質(zhì)之間的差別。必須提供這種區(qū)別估計(jì)可能達(dá)到的程度。當(dāng)采用所述的測定技術(shù)時(shí)需要克服任何可預(yù)見的來 自物質(zhì)（如同族物、同類物、要檢測的殘留物）代謝產(chǎn)物的干擾。特別重要的是要 調(diào)查來自基質(zhì)組

12、分的干擾。2.2篩選方法只有那些以記錄的可追溯方式證明其有效，并且在測定的水平假符合串v5%（ 3-誤差）的分析技術(shù)才可用于指令 96/23/EC規(guī)定的篩選目的。在出現(xiàn)可疑 結(jié)果時(shí)，應(yīng)用確認(rèn)方法進(jìn)行確認(rèn)。2.3有機(jī)殘留物和污染物的確認(rèn)方法有機(jī)殘留物或污染物的確認(rèn)方法應(yīng)提供關(guān)于分析物化學(xué)結(jié)構(gòu)的信息。因此僅根據(jù)色譜分析而不采用光譜檢測的方法不適于單獨(dú)作為確認(rèn)方法。但是，如果一精品文檔你我共享AAAAAA個(gè)技術(shù)缺乏足夠的特異性，應(yīng)該通過包括合適的凈化，色譜分離和光譜檢測等分 析技術(shù)來達(dá)到所需的特異性。以下方法或方法聯(lián)合被認(rèn)為是適于鑒定所指定的物質(zhì)組的有機(jī)殘留物或污 染物。表1有機(jī)殘留物或污染物的確認(rèn)

13、方法（液相色譜部分）測疋技術(shù)96/23/EC附錄1物質(zhì)限度只要符合或在線或離線色譜分離只帶有質(zhì)譜檢測的液譜A和B組要采用全掃描技術(shù)或采用至少3（B組）或4（ A組）個(gè)鑒別點(diǎn)作為不記 錄全部質(zhì)譜的技術(shù)帶紅外光譜檢測的液譜A和B組必須滿足紅外光譜吸收的特殊要求帶二級(jí)管矩陣檢測全程掃 描的液譜B組必須滿足紫外光譜吸收的特殊要求帶熒光檢測的液譜B組只適用于自然發(fā)射熒光的分子和經(jīng) 過轉(zhuǎn)化或衍生后發(fā)射熒光的分子帶紫外/可見光檢測（單一只要采用至少兩個(gè)不同的色譜系統(tǒng)波長）的液譜B組或第二個(gè)獨(dú)立的檢測方法2.3.1共同的性能標(biāo)準(zhǔn)和要求確認(rèn)方法應(yīng)提供關(guān)于分析物化學(xué)結(jié)構(gòu)的信息。 當(dāng)有一個(gè)以上化合物給出相同 反應(yīng)時(shí)

14、，那么該方法不應(yīng)區(qū)別不開這些化合物。僅根據(jù)色譜分析而不采用光譜檢 測的方法不適于單獨(dú)作為確認(rèn)方法。如果在方法中使用內(nèi)標(biāo)物，內(nèi)標(biāo)物應(yīng)在提取過程開始時(shí)就加入到測試部分。 根據(jù)可能性，內(nèi)標(biāo)物應(yīng)采用穩(wěn)定性同位素標(biāo)記的分析物一特別適用于質(zhì)譜檢測，或結(jié)構(gòu)與分析物類似的化合物。當(dāng)沒有適宜的內(nèi)標(biāo)物可用時(shí)，分析物的鑒別應(yīng)采用混合色譜來確認(rèn)。此時(shí)， 只需獲得一個(gè)峰，增高的峰的高度（或面積）應(yīng)等于加入的分析物的量。對(duì)于 LC， 半峰高處的峰寬應(yīng)在原始峰寬的 90%110%范圍內(nèi)，保留時(shí)間應(yīng)在5%范圍內(nèi) 變化。參照物或含有等于或接近允許限度或判定限度（超標(biāo)控制對(duì)照樣品）的已知 量的分析物添加材料，以及陰性控制材料和試

15、劑空白最好應(yīng)當(dāng)在整個(gè)過程中與每 一批分析的樣品一塊進(jìn)行操作。注入提取物到分析儀器的順序如下：試劑空白， 陰性控制材料，需要確認(rèn)的樣品，陰性控制材料，最后是超標(biāo)控制對(duì)照樣品。任 何與這種順序不同的變化應(yīng)被證明是適宜的。232對(duì)定量分析方法的額外性能標(biāo)準(zhǔn)和其他要求2.321定量方法的真實(shí)度在重復(fù)分析己鑒定的參照材料時(shí)，試驗(yàn)測定的回收率折算己知值的平均質(zhì)量 范圍的指導(dǎo)范圍如表2。表2定量方法的最低真實(shí)度真值含量（mg/kg）偏差范圍（%）v 0.001-50 +20精品文檔你我共享AAAAAA0.001 0.01-30 +100.010 10-20 +10101000v 1

16、010000v 5在沒有認(rèn)證過的基準(zhǔn)物質(zhì)可使用時(shí)，通過向空白基質(zhì)中加入已知量的分析物 得到的回收率來評(píng)價(jià)測定的真實(shí)度是可以接受的。 用平均回收率折算的數(shù)據(jù)只有 落在表2所示的范圍內(nèi)才可接受。2.3.2.2定量方法的精密度對(duì)于測試物中的禁用物質(zhì)，精密度實(shí)驗(yàn)應(yīng)在方法測定低限、兩倍方法測定低 限和十倍方法測定低限三個(gè)水平進(jìn)行；對(duì)于已制定 MRL的，精密度實(shí)驗(yàn)應(yīng)在方 法測定低限、MRL、選一合適點(diǎn)三個(gè)水平進(jìn)行；對(duì)于未制定 MRL的，精密度實(shí) 驗(yàn)應(yīng)在方法測定低限、常見限量指標(biāo)、選一合適點(diǎn)三個(gè)水平進(jìn)行。重復(fù)測定次數(shù)至少為6。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的變異系數(shù)參考范圍見表 3。 表3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變異系數(shù)被測組分含量實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變

17、異系數(shù)（CV，%）0.1 g/kg431 /kg3010 g/kg21100 g/kg151 mg/kg1110 mg/kg7.5100 mg/kg5.31000 mg/kg3.81 %2.710 %2.0100 %1.3注：對(duì)于低于lOOyfkg的質(zhì)量范圍，用Horwitz公式計(jì)算會(huì)得出不可接受的高值。 因此， 歐盟對(duì)低于100卩g/kg的質(zhì)量范圍時(shí)僅其 CVs應(yīng)盡可能地低。液相色譜工作崗位依據(jù) GB/T 27404-2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測執(zhí)行此要求。對(duì)于在重復(fù)性條件下進(jìn)行的分析，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)CV應(yīng)特別地位于上述數(shù)值的1/22/3之間。對(duì)于在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)重現(xiàn)性條件下進(jìn)行的分析，實(shí)驗(yàn)

18、室內(nèi)的CV不應(yīng)大于重現(xiàn)性CV。對(duì)于有規(guī)定的允許限度的物質(zhì)，方法應(yīng)達(dá)到實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的重現(xiàn)性不大于在0.5倍允許限度的濃度時(shí)相應(yīng)得到的重現(xiàn)性 CV。2.3.3質(zhì)譜檢測性能標(biāo)準(zhǔn)和其他要求質(zhì)譜分析作為確證方法適合的原則是僅用于在線或離線色譜分離之后。2.3.3.1色譜分離精品文檔你我共享AAAAAA對(duì)LC-MS操作，色譜分離應(yīng)該選用合適的液相色譜柱。在任何情況下，檢 測條件下分析物最小可接受的保留時(shí)間是色譜柱死體積相應(yīng)保留時(shí)間的二倍。測試部分分析物的保留時(shí)間（相對(duì)保留時(shí)間）應(yīng)在特定保留時(shí)間平臺(tái)內(nèi)與校正的標(biāo) 準(zhǔn)保留時(shí)間一致。保留時(shí)間平臺(tái)應(yīng)與色譜儀分辨率相當(dāng)。 分析物色譜保留時(shí)間和 內(nèi)標(biāo)物保留時(shí)間的比率，即分

19、析物的相對(duì)保留時(shí)間應(yīng)與校準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間LC在土 2.5%的允許誤差一致。233.2質(zhì)譜檢測質(zhì)譜檢測應(yīng)當(dāng)使用質(zhì)譜技術(shù)，如全質(zhì)譜記錄（全掃描）或選擇離子監(jiān)控（SIM）， MS-MSn技術(shù)如選擇多反應(yīng)監(jiān)控（MRM）或其他合適的MS、MS-MSn技術(shù)與合適 的離子化模式聯(lián)合使用。在高分辨率質(zhì)譜（HRMS）中，全質(zhì)譜范圍10%峰谷上分 辨率應(yīng)典型地超過10000。全掃描：當(dāng)質(zhì)譜檢測是通過執(zhí)行全掃描光譜記錄時(shí)，所有出現(xiàn)的測量診斷離子（分子離子、分子離子的特征加和物、特征碎片離子和同位素離子）的相對(duì)豐度 超過校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品參照光譜豐度的10%是必須的。選擇離子監(jiān)控（SIM）:當(dāng)質(zhì)譜檢測是通過執(zhí)行碎片譜時(shí)，分子

20、離子可能是更 適宜的測量診斷離子之一（分子離子、分子離子的特征加和離子、特征碎片離子、 同位素離子）。選擇的診斷離子不應(yīng)該是起源于分子的相同部分。每一診斷離子 的信噪比（S/N）應(yīng)大于3。全掃描和選擇離子監(jiān)控：檢測離子的相對(duì)豐度，用最強(qiáng)的離子或透過率的百 分?jǐn)?shù)表示。應(yīng)該與校準(zhǔn)物質(zhì)、校準(zhǔn)物質(zhì)溶液或吸取的樣品溶液在可比較的濃度下 和相同的條件下測定。離子強(qiáng)度應(yīng)符合以下限度：表4質(zhì)譜技術(shù)中相對(duì)離于強(qiáng)度的最大允許限度范圍相對(duì)強(qiáng)度（基線峰的）液相色譜多級(jí)質(zhì)譜LC-MS，LC-MSn 50% 20% 50% 10% 20 % 1%基線峰的離子，如果分子離子在參照光譜中相對(duì)強(qiáng)度 1%，則分子離子峰 必須包括

21、在內(nèi)。至少4個(gè)離子位于相對(duì)離子強(qiáng)度的最大允許范圍內(nèi)（見表5）。計(jì)算機(jī)幫助的圖庫查詢可以使用（如果有的情況下）。在這種情況下，測試 精品文檔你我共享AAAAAA樣品的質(zhì)譜數(shù)據(jù)和校準(zhǔn)溶液的質(zhì)譜數(shù)據(jù)的比較必須超過關(guān)鍵匹配因子。 該因子將 在對(duì)每一分析物光譜的確證過程和基本標(biāo)準(zhǔn)描述完成時(shí)被測定。 光譜中由樣品基 質(zhì)和檢測器性能引起的變異性應(yīng)該得到檢查。選擇離子監(jiān)控（SIM）:當(dāng)質(zhì)譜碎片被非全掃描技術(shù)所測量時(shí)，一系列的識(shí)別點(diǎn) 將用于解釋數(shù)據(jù)。96/23/EC指令附錄I的A組的物質(zhì)的確認(rèn)需要最少4個(gè)識(shí)別 點(diǎn)，96/23/EC指令附錄I的B組的物質(zhì)的確認(rèn)需要最少3個(gè)識(shí)別點(diǎn)。表5為每 一種最基本的質(zhì)譜技術(shù)能夠

22、獲得的識(shí)別點(diǎn)數(shù)量。然而，為了使需要確認(rèn)的識(shí)別點(diǎn) 具有資格，識(shí)別點(diǎn)的總和可以按以下計(jì)算：（a）最小至少一個(gè)離子對(duì)被測定：（b）所有相對(duì)測定的離子對(duì)滿足上述描述的標(biāo)準(zhǔn)；（c）最多三個(gè)獨(dú)立技術(shù)能聯(lián)合使用達(dá)到最小識(shí)別點(diǎn)數(shù)。精品文檔你我共享AAAAAA表5質(zhì)譜碎片分類范圍和所獲得的識(shí)別點(diǎn)之間的關(guān)系質(zhì)譜技術(shù)獲得每一離子的鑒別點(diǎn)數(shù)低分辨率質(zhì)譜(LR)1.0低分辨率質(zhì)譜-多級(jí)質(zhì)譜母離子1.0低分辨率質(zhì)譜-多級(jí)質(zhì)譜轉(zhuǎn)換產(chǎn)物1.5高分辨率質(zhì)譜(HRMS)2.0咼分辨多級(jí)質(zhì)譜母離子2.0高分辨-多級(jí)質(zhì)譜轉(zhuǎn)換產(chǎn)物2.5注解：(1)每一種離子只能計(jì)算一次：(2) 使用不同的化學(xué)物質(zhì)產(chǎn)生的衍生物可以用于增加不同分析物的識(shí)

23、別點(diǎn)數(shù)；(3) 對(duì)96/23/EC指令下附錄I的A組的物質(zhì)，如果在分析過程中以下技術(shù)之一被使用，且該技術(shù)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)己完成，則可以貢獻(xiàn)最多一個(gè)識(shí)別點(diǎn)。HPLC與全掃面二極管點(diǎn)陣(DAD)連用：HPLC與熒光檢測器連用；HPLC與免疫血清學(xué)連用；(4)轉(zhuǎn)換產(chǎn)物包括子離子和次級(jí)子離子產(chǎn)物。表6質(zhì)譜技術(shù)和連用技術(shù)獲得識(shí)別點(diǎn)數(shù)的例子(n = 一個(gè)整數(shù))技術(shù)離子數(shù)鑒別點(diǎn)數(shù)LC-MSNNLC-MS-MS1個(gè)母離子十 2個(gè)子離子4LC-MS-MS2個(gè)母離子，每個(gè)有1個(gè)子離子5LC-MS-MS-MS1個(gè)母離子，1個(gè)子離子，5.52個(gè)次級(jí)子離子HRMSN2N2.3.4使用其他檢測技術(shù)的液相測定分析物的性能標(biāo)準(zhǔn)和其

24、他要求。2.3.4.1色譜分離如果可以獲得用于這一目的的一種物質(zhì)，內(nèi)標(biāo)物質(zhì)應(yīng)該盡可能的使用。如果相關(guān)物的保留時(shí)間與分析物的保留時(shí)間接近，則是更合適的。相同實(shí)驗(yàn)條件下， 分析物在相應(yīng)校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品典型的保留時(shí)間下被洗脫。分析物最小可接受的保留時(shí)間是2倍的色譜柱死體積相應(yīng)的保留時(shí)間。 分析物和內(nèi)標(biāo)物保留時(shí)間的比值，即 分析物的相對(duì)保留時(shí)間，應(yīng)該與校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品的比值在合適的范圍內(nèi)相同，允許 吃.5%誤差。2.342全掃描UV/VIS檢測液相方法的性能標(biāo)準(zhǔn)必須達(dá)到。分析物光譜最大吸收波長應(yīng)該與在檢測系統(tǒng)分辨率測定誤差范圍內(nèi)的校準(zhǔn) 標(biāo)準(zhǔn)品的最大吸收波長相同。對(duì)二極管點(diǎn)陣檢測器，允許誤差值為nm。對(duì)于 精品文檔

25、你我共享AAAAAA220nm以上的分析物，具有相對(duì)吸收系數(shù) 1%的兩個(gè)光譜部分，其光譜應(yīng)該與 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品光譜沒有顯而易見的區(qū)別。 首先存在相同的最大吸收，其次兩個(gè)光譜 中在與校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品吸收系數(shù) 1%部分沒有觀察到區(qū)別，即為符合標(biāo)準(zhǔn)。如果使 用計(jì)算機(jī)幫助的圖庫搜尋和匹配，測試樣品的光譜數(shù)據(jù)與校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品光譜數(shù)據(jù)比 較必須超過標(biāo)準(zhǔn)匹配因子。該因子在分析物己完成以上描述標(biāo)準(zhǔn)為基礎(chǔ)的光譜確 證過程期間被測定。樣品基質(zhì)和檢測器性能引起的變異應(yīng)該被檢查。2.343熒光檢測的性能標(biāo)準(zhǔn)液相方法的性能標(biāo)準(zhǔn)必須達(dá)到。該方法將應(yīng)用于顯示自身熒光的分子和在轉(zhuǎn)化或衍生后顯示熒光的分子。結(jié)合色譜條件的激發(fā)和吸收波長的選擇

26、應(yīng)該以在空白樣品中發(fā)生干擾組分減少到 最小的方式完成。色譜條件下最近的峰的極大處應(yīng)該與指定分析物的峰分離，至少為完整的分析物峰的最大高度10%的一個(gè)全峰峰寬。2.344使用帶UV/VIS檢測（單波長）的LC測定分析物帶UV/VIS檢測（單波長）的LC方法本身作為確證方法使用是不適當(dāng)?shù)摹?色譜條件下最近的峰的極大處應(yīng)該與指定的分析物的峰分離，至少為完整的分析物的峰的最大高度10%的一個(gè)全峰寬度。3.確證確證將證明分析方法應(yīng)遵照標(biāo)準(zhǔn)中可適用的相關(guān)的性能特征。不同的檢查目的要求不同的方法種類。下表確定了方法類型檢驗(yàn)的性能特征。表7分析方法通過已確定了的性能特征的分類方法檢測容量CC3決定限度CCa真

27、實(shí)度/ 回收率出宀、選擇性/ 精密度川特異性實(shí)用性/耐用性/穩(wěn)定性定性 S+- +方法 C+- +宀曰.C定量S+- +方法 C+ +注：5=篩選法；C =確認(rèn)方法；十=必需測定的3. 1確證程序本章為分析方法的確證程序提供了例證和/或參考資料。其他證明分析方法符合需要使用性能標(biāo)準(zhǔn)的性能標(biāo)準(zhǔn)的方法，只要他們達(dá)到同樣的水平和同質(zhì)的信 息。確證也能通過進(jìn)行如食品法典，國際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）或國際理論和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)（IUPAC）確定的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)試驗(yàn)來完成，或根據(jù)替代方法如單個(gè)實(shí)驗(yàn)室試 驗(yàn)或內(nèi)部確證。本部分集中關(guān)注使用模型方法的單個(gè)實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（內(nèi)部確證）。這個(gè)方法由以下部分組成：精品文檔你我共享AA

28、AAAA(a) 套獨(dú)立于所用確證模型的共同性能特征;(b) 在表8中所描述的更具體的模型決定程序表8獨(dú)立模式和相關(guān)模式的性能參數(shù)(確證)獨(dú)立模式性能參數(shù)相關(guān)模式性能參數(shù)共同性能參數(shù)(3.1.1)傳統(tǒng)確證方法(3.1.2)內(nèi)部確證方法(3.1.3)特異性回收率回收率真實(shí)性重復(fù)性重復(fù)性耐用性：微小變化室內(nèi)重現(xiàn)性室內(nèi)重現(xiàn)性穩(wěn)定性重現(xiàn)性重現(xiàn)性定量限(CC a)定量限(CC a)檢測限(CC 3)檢測限(CC 3)標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線耐用性：主要變化耐用性3.1.1獨(dú)立模型性能標(biāo)準(zhǔn)無論選擇那種確證方法，下面的性能特性必須確定。為減少工作負(fù)荷量，可 以采用仔細(xì)設(shè)計(jì)并具有統(tǒng)計(jì)意義的方法將測定不同參數(shù)的試驗(yàn)合并進(jìn)

29、行。3.1.1.1特異性對(duì)于分析方法，分析物和接近的相關(guān)物質(zhì)(同分異構(gòu)體、代謝物、降解物、 內(nèi)源性物質(zhì)、基質(zhì)組成成分等)之間的鑒別能力是重要的。必須有兩種方法檢查 干擾情況。因此，應(yīng)選出潛在的干擾物質(zhì)，并且有關(guān)的空白樣品應(yīng)經(jīng)分析，以檢 測可能存在的干擾和估計(jì)干擾的影響：選擇一系列化學(xué)相關(guān)的化合物(代謝物、衍生物等)或其他可能在樣品中 存在影響的、可能遇到的物質(zhì)； 分析適當(dāng)數(shù)量的有代表性的空白樣品(n 20)檢查在期望目標(biāo)分析物被 洗脫的影響區(qū)域內(nèi)的任何干擾(信號(hào)、峰、離子蹤跡);此外，有代表性的空白樣品應(yīng)添加相關(guān)濃度的可能干擾分析物的鑒別和 /或定量的有關(guān)物質(zhì)；分析以后，檢查是否：(a) 存在

30、的干擾可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的鑒定；(b) 目標(biāo)分析物的鑒定被一個(gè)或多個(gè)干擾所阻礙：或(c) 定量分析顯著地受到影響。3.1.1.2真實(shí)性在本節(jié)，定量的真實(shí)性(準(zhǔn)確度的一個(gè)組分)被描述。真實(shí)性只能通過用認(rèn)證的 精品文檔你我共享AAAAAA基準(zhǔn)物質(zhì)（CRM）來確認(rèn)?；鶞?zhǔn)物質(zhì)只要可得到就應(yīng)使用。該程序在ISO 57254（5） 中被詳細(xì)描述。舉例如下：按照方法測試指南分析六份基準(zhǔn)物質(zhì)的重復(fù)樣品；測定存在于每份重復(fù)樣品中分析物的濃度；計(jì)算這些濃度值的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和變異系數(shù) （）;通過將測定的濃度平均值除以核準(zhǔn)值（測定濃度）再乘以100計(jì)算真實(shí) 性，結(jié)果用百分?jǐn)?shù)表示。真實(shí)性（戶檢測的平均回收校正濃度 X10

31、0/核準(zhǔn)值如果得不到基準(zhǔn)物質(zhì)，用4.121項(xiàng)下的描述測定回收率代替準(zhǔn)確性。3.1.1.3實(shí)用性/耐用性（較小的變化）這樣的研究通過實(shí)驗(yàn)室故意引入較小的合理的變化和觀察它們的后果進(jìn)行。預(yù)調(diào)查研究必須通過選擇可能影響測定結(jié)果的樣品的預(yù)處理、凈化和分析因素進(jìn)行。這樣的因素可能包括分析員、試劑的來源和年限、溶劑、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品提取 物、加熱速度、溫度、pH值和許多其他可能在實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)的因素。這些因素應(yīng) 用在不同實(shí)驗(yàn)室之間通常遇到的偏差比較得出的數(shù)量級(jí)進(jìn)行校正；鑒別能影響結(jié)果的可能因素；輕微地改變每一因素；用Youden的方法實(shí)施耐用性試驗(yàn)。（在這點(diǎn)上其他的方法也可使用。但 是Youden方法使要求的時(shí)間

32、和努力最小。Youd方法是一種部分因素的設(shè)計(jì)。不 同因素間的相互作用不能被檢測出；一旦發(fā)現(xiàn)有因素對(duì)測定結(jié)果產(chǎn)生重大影響，要實(shí)施進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)以確定 這一因素可接受的限度；-對(duì)結(jié)果有重大影響的因素應(yīng)在方法草案中清楚地表示出來?；镜母拍畈皇且淮窝芯恳粋€(gè)改變而是一次引入兩三個(gè)變化。例如，讓A、B、C、D、E、F、G表示七個(gè)不同的能影響結(jié)果因素的名義上的值，如果它們 名義上的值輕微變化，用相應(yīng)的小寫字母 a b、c、d、e、f和g表示它們的替 換值。這樣結(jié)果有27或128種不同的可能的組合。在這些組合中，可以選擇一個(gè)有八種組合的大小寫字母平衡分配的子集（表9）。必須進(jìn)行八次測定，每次采用選擇的因素的一

33、種組合 （AG）。測定的結(jié)果在 表9中顯示為S乙精品文檔你我共享AAAAAA表9耐用性研究試驗(yàn)設(shè)計(jì)（較小的變化）因素值測定數(shù)字的組合F12345678A/aAAAAaaaaB/bBBBbBBbbC/cCCCcCcCcD/dDDddddDDE/eEeEeeEeEF/fFffFFffFG/gGggGgGGg觀察的結(jié)果RSTUVWXYZ3.1.1.4穩(wěn)定性已經(jīng)觀察到樣品中分析物或基質(zhì)組成成分在保存或分析過程中不十分穩(wěn)定 可能引起分析結(jié)果中出現(xiàn)嚴(yán)重偏差。此外，應(yīng)檢查校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品在溶液中的穩(wěn)定性。 通常分析物在不同的貯存條件下的穩(wěn)定性被很好地描述。保存條件的監(jiān)測將構(gòu)成常規(guī)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系統(tǒng)的一部分。當(dāng)這些不知

34、道時(shí)，下面舉例說明如何測定穩(wěn)定性。溶液中分析物的穩(wěn)定性：制備新鮮分析物儲(chǔ)備液，并按試驗(yàn)指南稀釋以獲得足夠份數(shù)（例如40）的指定濃度的溶液（未建立允許限量的物質(zhì)，為最小要求性能限度，其他物質(zhì)圍 繞允許的限度）。準(zhǔn)備兩種分析物溶液，一種作為添加的溶液，一種作為最終的 分析溶液，以及其他感興趣的溶液（例如衍生的標(biāo)準(zhǔn)品）。依據(jù)試驗(yàn)指南測定分析物在新鮮制備的溶液中的含量。分裝適宜的體積至合適的容器中，貼標(biāo)簽并根據(jù)計(jì)劃保存：表10分析物在溶液中穩(wěn)定性測定計(jì)劃保存條件20C十4C十20C暗處10等份試樣10等份試樣10等份試樣亮處一一10等份試樣保存時(shí)間可以選擇為1、2、3、4星期或根據(jù)需要選擇更長時(shí)間，必

35、要 時(shí)直到在鑒別和或定量試驗(yàn)中觀察到第一次降解現(xiàn)象。要記錄最長保存時(shí)間和最 佳保存條件每一等份分試樣中分析物濃度的計(jì)算應(yīng)以新鮮制備的分析物溶液的濃度為100%進(jìn)行。精品文檔你我共享AAAAAA剩余的分析物（ ）= CiXOO/C新鮮式中：Ci =某一時(shí)間點(diǎn)的濃度；C新鮮=新鮮溶液的濃度。基質(zhì)中分析物的穩(wěn)定性：只要可能，應(yīng)選用實(shí)際的樣品。得不到實(shí)際的樣品時(shí)，應(yīng)用添加分析物 的基質(zhì)。當(dāng)可以得到實(shí)際的材料時(shí)，材料的濃度應(yīng)在新鮮配制時(shí)測定。材料進(jìn)一 步等份分樣品可以在1、2、4和20周后取并測定濃度。組織應(yīng)至少儲(chǔ)存在一20C 以下或根據(jù)要求采用更低的溫度。如果得不到實(shí)際的材料，取一些空白材料并混合均勻

36、。將材料分為5等 份樣品，每份樣品中添加分析物，分析物最好制備于少量水溶液中， 立即分析一 份樣品。儲(chǔ)存剩余的樣品于至少在 一20C以下或根據(jù)要求采用更低的溫度， 并于 1、2、4和20周后分析。3.1.1.5校準(zhǔn)曲線當(dāng)校準(zhǔn)曲線用于定量時(shí)：至少有五個(gè)水平（包括零）用于繪制曲線；要描述曲線的工作范圍；要描述曲線的數(shù)學(xué)公式和數(shù)據(jù)對(duì)曲線的吻合情況；要描述曲線可接受的參數(shù)范圍。當(dāng)必須進(jìn)行基于一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的一系列校準(zhǔn)時(shí)， 要指出校準(zhǔn)曲線參數(shù)可接受的范 圍，該范圍可以在不同的系列變化。對(duì)于篩選方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于 0.98,對(duì)于確證方法，相 關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.99。測試溶液中被測組分濃度必

37、須在校準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)。 3.1.2傳統(tǒng)的確證程序依據(jù)傳統(tǒng)的方法計(jì)算參數(shù)要求有幾個(gè)單獨(dú)的試驗(yàn)工作。每一工作特性由每一主要變化決定（見上述的實(shí)用性/耐用性項(xiàng)下）。對(duì)于多組分分析方法，只要先前可 能的有關(guān)干擾能被排除，幾個(gè)分析物可以被同時(shí)分析。幾個(gè)工作特性可以被一個(gè) 相似的方法確定。所以，為減少工作量，建議可能的情況下組合試驗(yàn)（例如，重現(xiàn)性和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的特異性檢測的重現(xiàn)性，確定決定限的空白樣品分析和特異性檢 測的試驗(yàn)）。3.1.2.1回收率如果沒有認(rèn)證過的基準(zhǔn)物質(zhì)，回收率必須通過空白添加試驗(yàn)確定，舉例如下： 選擇18等份空白樣品，分別以1、1.5、2倍最小要求性能限量或0.5、1、 1.5倍允許限

38、量添加到6等份樣品；分析樣品并且計(jì)算每份樣品的濃度；用下列方程式，計(jì)算每份樣品的回收率；精品文檔你我共享AAAAAA計(jì)算平均回收率和每一添加水平 6個(gè)結(jié)果的CV;回收率（） = 100 乂測定含量/添加濃度水平。這個(gè)測定回收率的常規(guī)方法是在 3.5中描述的標(biāo)準(zhǔn)附加方法的變種，用于：樣品被認(rèn)為是用空白樣品而非要分析的樣品；-試驗(yàn)樣品有相同的質(zhì)量和試驗(yàn)部分提取物有相同的體積；加入到第二（添加）試驗(yàn)部分的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量記為 XADD（XADD = p VA）; XI是空白的測定值、X2是第二（添加）試驗(yàn)部分測定值；然后,回收率（ ）= 100（X2XI）/XADD。當(dāng)沒有得到任何上述條件（或假定）

39、，那就意味著測定回收率的程序不得不完全執(zhí) 行3.5中描述的標(biāo)準(zhǔn)附加方法。3.1.2.2重復(fù)性制備一系列同一基質(zhì)的樣品，添加分析物使?jié)舛葹?、1.5、2倍最小要求性 能限量或0.5、1、1.5倍允許限量；每一水平的分析應(yīng)至少重復(fù)6次；-分析樣品；計(jì)算每份樣品的測定濃度，求出平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和添加樣品的變異系數(shù) （ ）；至少在兩個(gè)其他條件下重復(fù)這些步驟：計(jì)算所有的平均濃度和添加樣品的 CVs。3.1.2.3.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的重現(xiàn)性-制備一系列指定試驗(yàn)物質(zhì)（同一的或不同的基質(zhì)）的樣品，添加分析物使?jié)舛葹?、1.5、2倍最小要求性能限量或0.5、1、1.5倍允許限量：每一水平的分析應(yīng)至少重復(fù)6次； 由不同的

40、操作者在不同的環(huán)境中至少兩次重復(fù)這些步驟，如不同批次的試劑、溶劑等，不同的室溫，不同的儀器等，如果可能的話；-分析樣品：計(jì)算每份樣品的測定濃度：求出平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和添加樣品的變異系數(shù) （ ）。3.1.2.4重現(xiàn)性當(dāng)重現(xiàn)性需要驗(yàn)證時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)依據(jù)ISO 5725 2（5）參與合作研究。3.1.2.5 確定限（CC a）確定限要依據(jù) 分析方法的工作標(biāo)準(zhǔn)和其他要求”第2部分）中關(guān)于鑒別或 鑒別加定量定義的要求確定。精品文檔你我共享AAAAAA如果該物質(zhì)的允許限度還沒有建立，則按照下列方法確定cca：要么按照011843（17）采用校準(zhǔn)曲線方法（這里指的是凈狀態(tài)變量的臨 界值）。在這種情況下，應(yīng)使

41、用空白物質(zhì)，按照等距離梯度添加物質(zhì)，使之等于 和高于反應(yīng)所需的最低量。分析樣品。鑒定后，根據(jù)添加的物質(zhì)濃度繪圖。丫軸 上的相應(yīng)濃度加實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部重現(xiàn)性的標(biāo)準(zhǔn)差的2.33倍，即等于決定限度。這種方法僅適用于定量檢測（a 1%）:或通過分析每種矩陣至少20個(gè)空白物質(zhì)，以便能夠計(jì)算預(yù)期存在分析物 的時(shí)間窗口中信號(hào)與噪音比?？梢詫⑿盘?hào)嗓音比的3倍作為決定限度。這種方法適用于定性和定量檢測。如果該物質(zhì)的允許限度已經(jīng)建立，則按照下列方法確定CCa :要么按照011843（17）采用校準(zhǔn)曲線方法（這里指的是凈狀態(tài)變量的臨 界值）。在這種情況下，應(yīng)使用空白物質(zhì)，按照等距離梯度添加物質(zhì)，使之位于 允許限度周圍。分

42、析樣品。鑒定后，根據(jù)添加的物質(zhì)濃度繪圖。處于允許限度時(shí) 的相應(yīng)濃度加實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部重現(xiàn)性的標(biāo)準(zhǔn)差的1.64倍，即等于決定限度（a 5%）;或通過分析每種矩陣至少 20個(gè)添加了允許限度的分析物的空白物質(zhì)。處于允許限度時(shí)的濃度加相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)差的1.64倍，即等于決定限度（a 5%）。也可見第5款和3.2。3.1.2.6檢測容量（CCB）應(yīng)根據(jù)所定義的（見第2部分）篩選、鑒別或鑒別加定量的要求確定檢測容 量。如果該物質(zhì)的允許限度還沒有建立，則按照下列方法確定cc 3按照011843（17）采用校準(zhǔn)曲線方法（這里指的是凈狀態(tài)變量的最低可 檢測值）。在這種情況下，應(yīng)使用有代表性的空白物質(zhì)，按照等距離梯度添加物質(zhì)

43、，使 等于和低于反應(yīng)所需的最低量。分析樣品。鑒定后，根據(jù)添加的物質(zhì)濃度繪圖。 決定限度時(shí)的相應(yīng)濃度加決定限度時(shí)的平均檢測含量的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部重現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn) 差的1.64倍，即等于檢測容量（a5%）；分析每種矩陣至少20個(gè)添加有決定限度水平的分析物的空白物質(zhì)。分 析樣品，對(duì)分析物進(jìn)行鑒別。決定限度值加檢測含量的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部重現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差 的1.64倍，即等于檢測容量（a5%）；在不能獲得定量結(jié)果時(shí)，可以通過對(duì)添加量大于或等于決定限度的空白 物質(zhì)進(jìn)行研究來確定檢測容量。在這種情況下，僅僅保留w 5錯(cuò)誤的順應(yīng)的結(jié)果， 濃度水平等于該方法的檢測容量。因此，為了保證該檢測具有可靠的基礎(chǔ)， 應(yīng)至少對(duì)一個(gè)濃度水平進(jìn)行至

44、少20個(gè)次檢測。如果該物質(zhì)的允許限度已經(jīng)建立，則按照下列方法確定CC3：精品文檔你我共享AAAAAA要么按照ISO 11843(17)采用校準(zhǔn)曲線方法(這里指的是凈狀態(tài)變量的最 低可檢測值)。在這種情況下，應(yīng)使用有代表性的空白物質(zhì)，按照等距離梯度添 加物質(zhì)，使之位于允許限度周圍。分析樣品并鑒定分析物。計(jì)算決定限度時(shí)的平 均檢測含量的標(biāo)準(zhǔn)差。決定限度時(shí)的相應(yīng)濃度加實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部重現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差的1.64倍，即等于檢測容量(# 5%);或 通過分析每種矩陣至少 20個(gè)添加了決定限度的分析物的空白物質(zhì)。處 于決定限度時(shí)的值加相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)差的1.64倍，即等于決定限度(#5%)。 也可見3.2。3.1.2.7耐用程度(大的變化)應(yīng)在不同實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)分析方法進(jìn)行檢驗(yàn)，例如包括：不同種類、不同矩陣或不同抽樣環(huán)境。引入的變化應(yīng)該是大的變化。能夠采用諸如Youde n方法(15)(16 )對(duì)這些變化的重要性進(jìn)行評(píng)估。對(duì)于已經(jīng)證明對(duì)測定結(jié)果具有重大影響 的所有大的變化，應(yīng)對(duì)其每個(gè)操作特性進(jìn)行確定