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1、發(fā)酵罐的結(jié)構(gòu)系統(tǒng)及使用 .txt28 生活是一位睿智的長(zhǎng)者, 生活是一位博學(xué)的老師, 它常常春 風(fēng)化雨,潤(rùn)物無(wú)聲地為我們指點(diǎn)迷津,給我們?nèi)松膯⒌?。不要吝惜自己的?ài),敞開(kāi)自己的胸懷, 多多給予, 你會(huì)發(fā)現(xiàn), 你也已經(jīng)沐浴在了愛(ài)河里。 實(shí)驗(yàn)十五 發(fā)酵罐的結(jié)構(gòu)系統(tǒng)及使用方法 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? 了解發(fā)酵罐(氣升式、攪拌式)的幾大系統(tǒng)組成,即空氣系統(tǒng)、 蒸汽系統(tǒng)、補(bǔ)料系統(tǒng)、進(jìn)出料系統(tǒng)、溫度系統(tǒng)、在線控制系統(tǒng)。 2掌握發(fā)酵罐空消的具體方法及步驟 3掌握發(fā)酵罐進(jìn)料及實(shí)消的具體方法及步驟 4掌握發(fā)酵罐各系統(tǒng)的控制操作方法二、實(shí)驗(yàn)原理:1 蒸汽系統(tǒng): 三路進(jìn)汽空氣管路、補(bǔ)料管路、罐體) 2溫度系統(tǒng):(1) 夾
2、套升溫:蒸汽通入夾套。(2) 夾套降溫:冷水通入夾套,下進(jìn)水,上出水。(3) 發(fā)酵過(guò)程自動(dòng)控溫系統(tǒng): 熱電偶控溫, 馬達(dá)循環(huán), 只能加熱, 發(fā)酵設(shè)定溫度低于室溫時(shí), 由夾套進(jìn)冷水降溫。3空氣系統(tǒng):取氣口T空壓機(jī):往復(fù)式油泵獲得高脈沖的壓縮空氣粗過(guò)濾器:由沙布包裹棉花壓實(shí)成塊狀疊加制得,作用是去除部分細(xì)菌及大部分灰塵(貯氣罐):空壓機(jī)壓縮使氣體溫度升高, 經(jīng)貯氣使氣體保溫殺菌; 壓縮空氣中有油污、 水滴, 且壓力不穩(wěn),有一定的脈沖作用,會(huì)沖翻后面的過(guò)濾介質(zhì),貯氣后可使油滴重力沉降,減小 脈沖。冷卻塔):有降溫并穩(wěn)定作用,同時(shí)經(jīng)旋風(fēng)分離器進(jìn)行氣液分離( 絲網(wǎng)分離器 ) :通過(guò)附著作用,逐步累積沉降
3、而分離 5 微米以上的微粒 其作用介質(zhì)為銅絲網(wǎng)( 加溫器 ) : 對(duì)壓縮空氣升溫,除濕,使?jié)穸冗_(dá)50%-60%總過(guò)濾器:紗布包裹棉花加活性炭顆粒,逐層壓緊而成。分過(guò)濾器:平板式纖維,中間為玻璃纖維或絲棉,下面放水閥應(yīng)適時(shí)打開(kāi)放出油、水,再用 壓縮空氣控干。種子罐或發(fā)酵罐4補(bǔ)料系統(tǒng):補(bǔ)培養(yǎng)基、消泡劑、酸堿等。5在線控制系統(tǒng):熱電偶(溫度探關(guān)) 、溶氧探頭、 pH 探頭(后二者實(shí)消時(shí)才安裝,為不可 再生探頭,有限定使用次數(shù), pH 探頭使用前要先校準(zhǔn)) 、控制柜、數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)。6、進(jìn)出料系統(tǒng):進(jìn)料口 (接種口 )、出料口 (取樣口 )。7蒸汽過(guò)濾器: 在蒸汽進(jìn)入空氣系統(tǒng)時(shí)應(yīng)用, 以免蒸汽中攜帶的雜
4、質(zhì)顆粒堵塞分過(guò)濾器微孔。三、方法與步驟:( 一 ) 原則:1 通蒸汽前先關(guān)閉所有閥門。 2粗過(guò)濾器不空消也不實(shí)消,要定期處理,所以必須關(guān)閉通向粗過(guò)濾器的閥門。 3活蒸汽,滅過(guò)頭,即尾汽不能關(guān)死,要保證有活蒸汽放出,但不能太大,以免分壓。 4罐體排汽口排汽,并保持罐內(nèi)正壓。5空氣過(guò)濾系統(tǒng)只空消,不實(shí)消,以免罐中物料沖入過(guò)濾器內(nèi)。但空消一結(jié)束,即要通入無(wú) 菌空氣吹干管路并保壓,避免染菌。6進(jìn)蒸汽時(shí)順著蒸汽管路開(kāi)閥門, 結(jié)束時(shí)逆著進(jìn)路關(guān)閥門, 先開(kāi)尾閥后開(kāi)主閥, 結(jié)束時(shí)先關(guān) 主閥后關(guān)尾閥。8蒸汽一停,即由無(wú)菌空氣充入保持罐內(nèi)正壓。(二)空消: 先開(kāi)啟蒸汽發(fā)生器,自有蒸汽產(chǎn)生并排掉管路中冷凝水后,按以
5、下步驟進(jìn)行: 1先關(guān)閉所有閥門,檢查處是否關(guān)緊密封,打開(kāi)罐上方排氣口。2 .蒸汽先進(jìn)空氣系統(tǒng), 蒸汽t蒸汽過(guò)濾器t分過(guò)濾器,無(wú)論蒸汽走到哪一路得先放尾閥,放出冷凝水,排掉冷空氣,待有蒸汽沖出后調(diào)小,打開(kāi)主閥。3再進(jìn)罐體:由主路進(jìn)罐,然后通入取料管路,再入補(bǔ)料系統(tǒng)(兩邊)。4 .罐壓升至0.12Mpa(此時(shí)控制系統(tǒng)中溫度讀數(shù)約為120C左右)時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí),保溫保壓,30分鐘。保壓方式:(1)調(diào)節(jié)主汽路進(jìn)汽閥門控制進(jìn)汽量; (2)調(diào)節(jié)排氣口排氣量大小或尾閥放汽量。5 .結(jié)束空消:( 1)逆著蒸汽進(jìn)路關(guān),先關(guān)近罐閥。 (2)同時(shí)準(zhǔn)備好壓縮空氣確保蒸汽一停即 充入無(wú)菌壓縮空氣以維持空氣系統(tǒng)及罐內(nèi)的正壓。
6、近罐空氣閥的尾閥要一直微開(kāi)啟。 注意:空消前應(yīng)檢查夾套中是否殘留了冷水,若有,影響罐體升溫,須自?shī)A套出水口將水放出。(三)進(jìn)料及升溫1 、調(diào)大排氣口排氣量,至罐壓掉零,開(kāi)啟進(jìn)料口,加料。裝上溶氧探頭及pH 探頭。2.夾套升溫:蒸汽由夾套蒸汽管路進(jìn)入夾套進(jìn)行升溫 (有表壓可讀出進(jìn)入夾套的氣壓) ,溫度可由控制面板 上讀出,升至90C,關(guān)閉夾套蒸汽。*升溫目的:冷的物料和罐體中直接沖入蒸汽,極易產(chǎn)生大量冷凝水而使培養(yǎng)基中水分過(guò)大; 另外,對(duì)淀粉質(zhì)的物料,則直接通入蒸汽很容易使物料結(jié)球不溶,表面糊化結(jié)團(tuán),影響滅菌 效果;升溫還可以利于淀粉質(zhì)原料液化。*說(shuō)明:(1) 培養(yǎng)基配制時(shí), 考慮實(shí)消時(shí)會(huì)產(chǎn)生水
7、分, 因此, 若考慮用 7升的裝液量 (10 升罐), 則加液量應(yīng)為 6 升左右,其余物料按 7 升需量稱量。裝料系數(shù)一般為 70%。(2)通蒸汽對(duì)夾 套升溫時(shí),必須排空夾套內(nèi)水 ( 可用蒸汽沖出 ) ,但可微開(kāi)啟出水口閥門適當(dāng)減壓,避免夾套 內(nèi)壓力過(guò)大。( 四 ) 實(shí)消:1關(guān)閉氣路入罐閥,主汽路進(jìn)汽t補(bǔ)料口進(jìn)汽(方法同空消)t罐壓升至0.12Mpa (121C),保壓、保溫30分鐘t實(shí)消結(jié)束。(五)冷卻接種:蒸汽關(guān)閉的同時(shí),即通入壓縮空氣(罐壓表頭掉至0.05MPa時(shí)接入無(wú)菌空氣)t夾套通入自來(lái)水冷卻(下進(jìn)水,上出水閥門,送水排水)t冷卻至約32Ct接種(放大排氣口出氣量,至表頭掉零,開(kāi)啟接
8、種口,火圈接種)t接種后擰緊接種口,將排氣閥調(diào)小,接上玻璃轉(zhuǎn)子 流量計(jì),使流量計(jì)讀數(shù)在8.0左右,同時(shí)保持罐壓 0.06Mpar在控制系統(tǒng)中設(shè)定好發(fā)酵溫度t保溫保壓發(fā)酵24hr(六)數(shù)據(jù)采集、取樣、放罐數(shù)據(jù)采集:系統(tǒng)自動(dòng)采集,每 2分鐘采集一組數(shù)據(jù)并存貯,包括:溫度、溶氧、pH等,系統(tǒng)可自動(dòng)給出有關(guān)曲線。 同時(shí)由值班者每 20分鐘記錄一次, 準(zhǔn)確填表, 獲取數(shù)據(jù)制作過(guò)程曲 線。中間取樣:每取樣前,將取樣口蒸汽滅菌半小時(shí)t棄去始放出的樣液約10毫升,再用無(wú)菌空容器取樣約100毫升t無(wú)菌封存T取樣口再滅菌 30分鐘T樣液冷藏待測(cè)。(具體步驟見(jiàn)電腦 桌面文件 )放罐:調(diào)節(jié)無(wú)菌空氣量放罐,方法同取樣。( 七 ) 罐體清洗 放罐后,加大排氣,使表壓掉零,取出各探頭,加蓋,由進(jìn)料口加入凈水關(guān)好,罐內(nèi)升壓, 放罐,如此重復(fù)兩次。* 取樣操作步驟:(1)須提樣前半小時(shí),開(kāi)啟蒸汽發(fā)生器,送入蒸汽,開(kāi)啟閥門1, 2,蒸汽滅菌。( 2)半小時(shí)后,關(guān)閥門 1,立即開(kāi)啟閥門 3,先放棄部分培養(yǎng)液,再取樣 100ml 左右至滅菌 三角瓶中(標(biāo)注好取樣日期、時(shí)間、取樣人) ,冷藏備測(cè)。( 3)關(guān)閉閥門 3,開(kāi)啟閥門 1,半小時(shí)后關(guān)閉閥門 2,再關(guān)閥門 1。1溶氧儀調(diào)節(jié)方法:待系統(tǒng)溫度穩(wěn)定后,調(diào)零
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