阿維菌素選擇性抑制劑的研究

1、河北化工醫(yī)藥職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)生論文 第 1 頁(yè) 共 14 頁(yè) 1 緒論 1.1 阿維菌素 1.1.1 阿維菌素的概述 阿維菌素(Avermeetins，AVM)，是 1976 年美國(guó) Merek 公司的研究者從一株來(lái)源于日本的阿維菌 素鏈霉菌的發(fā)酵液中發(fā)現(xiàn)的一簇結(jié)構(gòu)相似的化合物。經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定該化合物為 16 元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生 素，是 C5，C22-C23和 C25三個(gè)位上結(jié)構(gòu)不同的 8 種同系物，具體結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖 1 和表 1 所示1。 表 1 阿維菌素的各個(gè)組分的不同基團(tuán) 從圖 1 和表 1 中可知:在 C5位上是甲氧基則稱為 A 組分，如果是輕基則稱為 B 組分;在 C22與 C23 之間以雙

2、鍵連接則稱為 A1，或 B1，以單鍵連接并在 C23位含有一個(gè)輕基則稱為 A2或 B2;在 C25上連接 的是叔丁基時(shí)則分為 Ala，A2a，Bla和 B2a。，是異丙基時(shí)則分為 Alb，A2b，B1b和 B2b。在通常情況下， 圖 1 阿維菌素的分子結(jié)構(gòu) 阿維菌素選擇性抑制劑的研究 第 2 頁(yè) 共 14 頁(yè) 菌株的發(fā)酵產(chǎn)物中 A1a，A2a，Bla和 B2a組分之和的比例在 80%以上，而 A1b，A2b，B1b和 B2b組分之和 的比例在 20%以下。該簇化合物被統(tǒng)稱為阿維菌素，或稱阿弗菌素或埃維菌素。 1.1.2 阿維菌素的有關(guān)理化性質(zhì) 性狀:白色或黃色粉末;無(wú)味。 溶解性:在乙酸乙醋、

3、丙酮、氯仿中易溶;在甲醇、乙醇中略溶;在正己烷、石油醚中微溶;在水 中幾乎不溶。 熔點(diǎn):157-162 紫外吸收:在 243-247nm 和 236-240nm 的波長(zhǎng)處有最大吸收。 化學(xué)穩(wěn)定性:阿維菌素對(duì)酸和堿都較敏感，其化學(xué)穩(wěn)定性情況如圖 2 所示。 阿維菌素 B1組分因光照或暴露在空氣中均容易被降解。 1.2.3 阿維菌素生產(chǎn)中解決雜菌污染的重要性 阿維菌素發(fā)酵要求純種培養(yǎng)，不僅斜面、種子、培養(yǎng)基以及發(fā)酵罐、管道等須經(jīng)嚴(yán)格消毒除去 各種雜菌，而且通入的空氣也需經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理；并需保持機(jī)械攪拌系統(tǒng)、發(fā)酵廢氣排放系統(tǒng)、補(bǔ)料 和取樣系統(tǒng)的無(wú)菌操作。只有這樣，才能確保生產(chǎn)不受雜菌污染，從而保證生產(chǎn)

4、菌的旺盛生長(zhǎng)。發(fā) 酵染菌能給生產(chǎn)帶來(lái)嚴(yán)重危害，輕者影響產(chǎn)量或產(chǎn)品質(zhì)量，重者導(dǎo)致倒罐，甚至停產(chǎn)，解決雜菌污 染是阿維菌素發(fā)酵工廠的一項(xiàng)重要工作內(nèi)容。 1.2 抑菌劑 抑菌劑就是能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的物質(zhì)。抑菌劑可能無(wú)法殺死細(xì)菌，但它可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，阻 止細(xì)菌滋生過(guò)多、危害健康。所有的精油，或多或少都有抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的能力。有些精油只抑制某 些特殊病菌的生長(zhǎng)，而有些精油，抑制病菌的種類很多。同時(shí)，重要非常少量的精油，就可以產(chǎn)生 圖 2 阿維菌素的化學(xué)穩(wěn)定性 河北化工醫(yī)藥職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)生論文 第 3 頁(yè) 共 14 頁(yè) 很好的抑菌效果，如丁香、薰衣草、迷迭香、鼠尾草和百里香等精油，抑菌的效果都很好。 1

5、.2.1 抑菌劑種類 新型殺菌消毒劑森可洛 日本坷柯阿公司于 1998 年開(kāi)發(fā)了一種粉狀的含氯殺菌消毒劑，稱森可洛。每 10L 自來(lái)水溶入 3g 森可洛，該殺菌液可在 5 秒內(nèi)將 0-157 殺滅。水中殘氯量約 80mg/kg，水的 pH=5 左右，氧化還原 電位(ORP)在+500mV 以上2。是一種具有強(qiáng)殺菌能力的弱酸性電解質(zhì)水。除 0-157 之外，亦能殺滅 沙門氏菌等食物中毒菌。可用于固體原料及半成品等。與一般所用的次氯酸鈉相比，含氯濃度低而 殺菌效果強(qiáng)，殺菌后無(wú)殘留性，對(duì)環(huán)境無(wú)副作用。 乳鐵蛋白膚 乳鐵蛋白(Lactofe 幣 n;LF)是存在于母乳、

6、牛乳等中的一種多功能因子，可由干酪乳清或脫脂 乳經(jīng)分離提純而得。具有抗菌、提高免疫能力、抑制腫瘤、調(diào)節(jié)無(wú)機(jī)鹽吸收等作用。乳鐵蛋白經(jīng)胃 蛋白酶等酸性蛋白酶酶解后，可獲得乳鐵蛋白膚(Lactofe 州 ncin;LFein)，其抑菌能力(包括 O-157)比 乳鐵蛋白高 400 倍，分子量約 3100，是由 25 或 26 個(gè)氨基酸殘基所組成的堿性多膚。乳鐵蛋白膚對(duì) O-157 的最低抑制濃度為 8-10ug/mL，用 10ug/mL 濃度的乳鐵蛋白膚水溶液對(duì)平板計(jì)數(shù)為 106/mL 的 O-157 處理，經(jīng) 3 小時(shí)后全部消滅。從透過(guò)型電子顯微境觀察，經(jīng)乳鐵蛋白膚處理過(guò)的細(xì)胞形態(tài)無(wú) 論是細(xì)胞膜或

7、細(xì)胞質(zhì)均有被消化的作用。因此，其用于各種乳及乳制品之類，可預(yù)防致命 O-157 作 祟。 最近(2000 年 6 月)日本又暴發(fā)出兒童飲用日本雪印乳業(yè)公司所生產(chǎn)的脫脂乳后，因受到金黃色 葡萄球菌所產(chǎn)生的 A 型腸毒素的危害而導(dǎo)致大量食物中毒，中毒人數(shù)已達(dá) 1.4 萬(wàn)人。使日本全國(guó) 8500 家食品超市停售該公司乳制品，公司被迫于 7 月宣布所屬 21 家工廠停業(yè)整頓。可見(jiàn)其危害之 廣。乳鐵蛋白膚對(duì)金黃色葡萄球菌也有很好的抑菌作用，其最低有效濃度為 3ug/mL(或 mg/L)。 乙醇制劑 乙醇具有強(qiáng)烈的殺菌作用是早己知道的事實(shí)，日本自八十年開(kāi)始即已廣泛在魚(yú)糜和肉糜類制品 的真空

8、斬拌過(guò)程中使用，此外作為食品加工機(jī)械和設(shè)備表面消毒的需用量也不少。日本自 1996 年 0-157 等食物中毒事件暴發(fā)后，作為對(duì)策之一，食品用乙醇消毒制劑耗用量大幅度上升，1996 年比 1995 年猛增 24.5%，1997 年增長(zhǎng) 7.2%。 增加乙醇用量可提高抑菌效果，但會(huì)有乙醇臭。按日本消防法，若濃度大于 60%，對(duì)保存場(chǎng)所 和保存量等均有很大制約，因此一般所用的乙醇濃度均不超過(guò) 60%。但低濃度有揮發(fā)度低，與食品 阿維菌素選擇性抑制劑的研究 第 4 頁(yè) 共 14 頁(yè) 的接觸時(shí)間長(zhǎng)、食品表面干燥緩慢、易使設(shè)備生銹等缺點(diǎn)。因此作為商品的乙醇消毒殺菌劑，也常 與其他抑菌劑配合使用以減少用量

9、。如菜肴(半成品菜和熟菜)用的一般與中碳鏈脂肪酸甘油醋或聚 賴氨酸合 ASAP 抑菌劑 近年來(lái)，隨著消費(fèi)者對(duì)婦科消毒產(chǎn)品品質(zhì)要求的不斷提高，各級(jí)衛(wèi)生行政部門逐漸加強(qiáng)對(duì)婦科 洗液的抽檢監(jiān)督。然而，抽檢結(jié)果往往不盡人意。各種不合格產(chǎn)品的曝光報(bào)道，屢見(jiàn)報(bào)端。行業(yè)的 聲譽(yù)也屢受影響，對(duì)當(dāng)事企業(yè)而言，更是左右命運(yùn)、關(guān)乎前途。 ASAP 屬全球首創(chuàng)天然有機(jī)抗菌除臭劑，以大豆萃取液為主成份3。它正廣泛應(yīng)用于婦科洗液、 衛(wèi)生巾、濕巾、漱口水、凈水、生食蔬菜消毒液、洗手液、環(huán)境消毒等各領(lǐng)域。藉由其安全、高效、 性價(jià)比高等特點(diǎn)，正廣受關(guān)注，逐步取代醋酸洗必泰等傳統(tǒng)抗菌劑，在國(guó)際同類產(chǎn)品中屬于領(lǐng)先水

10、 平。 新型抑菌劑 Tallofin(太樂(lè)芬) 工業(yè)循環(huán)水系統(tǒng)在水質(zhì)處理過(guò)程中有機(jī)物與無(wú)機(jī)物的濃度逐漸升高,絕大部分有機(jī)物是可生物降 解的,是微生物的營(yíng)養(yǎng)源。適宜的生存環(huán)境和充足的營(yíng)養(yǎng)物使得微生物在循環(huán)水系統(tǒng)大量繁殖,形成 生物粘泥。生物粘泥會(huì)給系統(tǒng)運(yùn)行造成許多障礙。傳統(tǒng)上用于工業(yè)循環(huán)水系統(tǒng)中的殺菌劑,其作用機(jī) 理是通過(guò)直接破壞微生物生命過(guò)程和細(xì)胞核物質(zhì)來(lái)控制微生物的繁殖。這些殺菌劑在殺死細(xì)菌的同 時(shí)對(duì)人體及環(huán)境也容易造成極大的危害。而 Tallofin(太樂(lè)芬)通過(guò)與微生物之間的分散、包覆、剝 離多重物理作用達(dá)到控制細(xì)菌的目的,并且對(duì)人體及環(huán)境不會(huì)造成危害4。因此,我們?cè)诘谌?/p>

11、循環(huán)水 場(chǎng)進(jìn)行了現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用試驗(yàn),通過(guò)對(duì)水質(zhì)指標(biāo)的跟蹤分析,確定該藥劑的使用效果及最佳投加方法。 ECL-1501 高效抑菌劑 高效抑菌劑是一種含有廣譜殺菌劑的液態(tài)產(chǎn)品，適用于食品廠、啤酒廠巴氏線、巴氏殺菌及中 水的微生物控制5。當(dāng)用于整個(gè)水處理程序時(shí)，ECL-1051 高效抑菌劑既可用作系統(tǒng)運(yùn)作過(guò)程中的動(dòng) 態(tài)殺菌和抑菌處理，又可用作系統(tǒng)關(guān)閉過(guò)程中的靜態(tài)殺菌和抑菌處理。安全，在使用效抑制各種 1 容器中的微生物，可防止粘狀污垢的形成。使用簡(jiǎn)便，可作為動(dòng)態(tài)殺菌。它也適合靜態(tài)殺菌。 2 產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn) 相容性好，與其他清洗劑等相容。降低殺菌劑清洗難度，節(jié)約大量人工。高效長(zhǎng) 3 4 5 效，能

12、有降低水耗。減少殺菌劑換水頻次，濃度下對(duì)各種材料的容器，工具等無(wú)腐蝕性。 6 1.3 抑菌劑現(xiàn)狀 河北化工醫(yī)藥職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)生論文 第 5 頁(yè) 共 14 頁(yè) 1.3.1 防腐抑菌劑現(xiàn)狀 隨著近代盒飯、半成品菜和熟菜的大量增加，傳統(tǒng)的干制、鹽漬、糖漬類產(chǎn)品大幅下降，而低 糖、低鹽、高水分柔軟食品的大量開(kāi)發(fā)，使防腐保鮮向較短時(shí)間(如 3-7 日而不是半年左右)方向發(fā) 展，要求用量低，不影響原有風(fēng)味，使用方便，不要求滅菌，只要求抑制微生物的活性靜菌，使之 不能繁殖而導(dǎo)致變質(zhì)。這種趨勢(shì)在日本尤為明顯，日本在超市、大賣場(chǎng)中冷藏出售的半成品菜、熟 菜(非速凍蔬菜)、濕熟面條、拌涼皮等即食制品，1988

13、年為 24，563 億日元，至 1995 年上升至 39，559 億日元。如包括大型的小賣店等在內(nèi)，1995 年估計(jì)達(dá)到 45，544 億日元。已在食品加工業(yè) 中占有重要地位。 在日本，凡進(jìn)人超市、大賣場(chǎng)等大型商場(chǎng)的食品(包括半成品菜、熟菜等)，其雜菌數(shù)不得過(guò) 106個(gè)/100g6。因此，防腐保鮮劑的使用已成為不可或缺的保證。為此，在日本屬于天然防腐劑的 聚賴氨酸(主要用于方便米飯、熟面條等高淀粉制品)、魚(yú)精蛋白(主要用于奶油類制品如奶油糕點(diǎn))、 溶菌酶(以肉食制品為主)的用量大幅增長(zhǎng)，發(fā)展很快。由于苯甲酸鈉、山梨酸鉀等傳統(tǒng)的化學(xué)合成 防腐劑，在標(biāo)簽法中需加以標(biāo)示，而消費(fèi)者則更傾向于接受天然和

14、安全性高的各種天然制劑，故各 種 pH 調(diào)節(jié)劑(利用偏酸性以抑菌)、甘氨酸制劑和中碳鏈脂肪酸甘油醋等也得以日益增長(zhǎng)，以取代傳 統(tǒng)的防腐劑和抗氧化劑。為提高效果、降低用量、確保安全起見(jiàn)，大多不單獨(dú)使用，而是由生產(chǎn)添 加劑的工廠進(jìn)行適當(dāng)復(fù)配(很多配合使用有增效效果)后銷售，在日本將它們分成主劑和輔劑兩大類。 1.3.2 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物轉(zhuǎn)基因研究中抑菌劑的應(yīng)用現(xiàn)狀 自 1983 年第個(gè)轉(zhuǎn)基因植物問(wèn)世以來(lái)，植物轉(zhuǎn)基因研究發(fā)展迅速，轉(zhuǎn)基因作物已成為普及應(yīng)用 速度最快的農(nóng)作物改良手段。迄今為止，全世界已獲得轉(zhuǎn)基因植物近 200 種，其中大部分為農(nóng)桿菌 轉(zhuǎn)化成功的的植物。在農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化中，植物外植體與農(nóng)

15、桿菌共培養(yǎng)后需要使用抑菌劑脫菌，以 抑制農(nóng)桿菌的進(jìn)一步生長(zhǎng)，目前較常使用的抑菌劑是頭抱菌素類和青霉素類抗生素7。但不同植物 或同一種植物不同品種間甚至基因型間對(duì)抗生素的敏感性或毒害忍受程度也存在著較大差異。有些 植物材料對(duì)頭抱菌素類和青霉素類極其敏感，既使低微濃度即會(huì)對(duì)外植體產(chǎn)生毒害作用，因此大環(huán) 內(nèi)醋類抗生素的作用也是不容忽視的。總之，在進(jìn)行農(nóng)桿菌介導(dǎo)植物轉(zhuǎn)基因之前，對(duì)受體材料進(jìn)行 抗生素敏感性測(cè)定是十分必要的。研究確定適用抗生素種類及其濃度，以保證抑菌劑既能有效地清 除農(nóng)桿菌或抑制農(nóng)桿菌的生長(zhǎng)，又能使轉(zhuǎn)化細(xì)胞不受或少受影響，從而獲得較高的轉(zhuǎn)化效率。隨著 抗生素研究與應(yīng)用的不斷發(fā)展，新型抗生

16、素不斷問(wèn)世，相信研究者們能發(fā)現(xiàn)更適用于農(nóng)桿菌介導(dǎo)的 植物轉(zhuǎn)基因研究的抑菌劑類型。 阿維菌素選擇性抑制劑的研究 第 6 頁(yè) 共 14 頁(yè) 2 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)方法 2.1 研究目的 由于操做過(guò)程中染菌現(xiàn)象不可避免，因此我們加入抑制劑，該抑制劑要求對(duì)生產(chǎn)菌株無(wú)抑制作 用，但抑制雜菌的生長(zhǎng)和繁殖。阿維菌素發(fā)酵過(guò)程中的雜菌主要為細(xì)菌，其分為革蘭氏陰性菌和革 蘭氏陽(yáng)性菌，而生產(chǎn)阿維菌素的菌株為放線菌。因此實(shí)驗(yàn)中我們選取其特征菌株大腸桿菌、金黃色 葡萄球菌與放線菌形為實(shí)驗(yàn)菌種，并做平行實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行比較、觀察，從而得出結(jié)論。以在生產(chǎn)發(fā)酵 過(guò)程中得到應(yīng)用 ，抑制雜菌。 2.2 實(shí)驗(yàn)材料 2.2.1 菌種 大腸桿菌

17、；金黃色葡萄球菌；放線菌 2.2.2 培養(yǎng)基 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基： 牛肉膏：5g/L；蛋白胨：10g/L；氯化鈉：5g/L；瓊脂：2%；蒸餾水；pH7.0-7.2 高氏一號(hào)培養(yǎng)基： 可溶性淀粉：20g/L；KNO3：1g/L；K2HPO4：0.5g/LMgSO47H2O：0.5g/L, NaCl：0.5g/L;FeSO47H2O:0.01g/L 瓊脂:2%；蒸餾水;pH7.27.4 2.2.3 抑菌劑 A3;A8 2.2.4 實(shí)驗(yàn)器材： 三角瓶，量筒(1000ml，100ml)，燒杯(1L)，移液槍（包含槍頭） ，EP 管，無(wú)菌水，蒸餾水，棕 色瓶，試管（3 支 10ml 蒸餾水，6 支 9.

18、9ml 蒸餾水） ，容量瓶(50ml)，玻璃棒，棉塞，報(bào)紙，鑷子， 河北化工醫(yī)藥職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)生論文 第 7 頁(yè) 共 14 頁(yè) 超凈臺(tái)，酒精燈，接種針，涂布器，培養(yǎng)皿，錐形瓶（一個(gè)瓶裝 200ml 培養(yǎng)基） 2.3 實(shí)驗(yàn)方法 2.3.1 培養(yǎng)基配制 依據(jù)培養(yǎng)及配方配制即可。 2.3.2 滅菌 把包好的儀器、培養(yǎng)基等放入滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行滅菌。 溫度：121 時(shí)間：20min 2.3.3 抑制劑的配制（此操作在無(wú)菌臺(tái)上進(jìn)行） A9 濃溶液的配制 A9：取 A8 藥品 0.5g,放在小燒杯中用無(wú)菌水溶解，攪拌待完全溶解后，用 50ml 的小容量瓶定 容到 50ml。配制好以后放在棕色小瓶中待用。用移液

19、槍取 0.2ml 上述試劑,在用無(wú)菌水定容到 50ml。配置后濃度為 40ppm。 A8 濃溶液的配制 濃度 6.4mg/ml 配制方法取 A8 藥品 0.32g,放在小燒杯中用無(wú)菌水溶解，攪拌待完全溶解后，用 50ml 的小容量瓶定容到 50ml。配制好以后放在棕色小瓶中待用。配置后濃度為 64ppm。 2.3.4 倒平板 在已經(jīng)經(jīng)過(guò) 15min 滅菌的超凈臺(tái)上，把熱的培養(yǎng)基按要求在酒精火焰的保護(hù)下倒入滅好菌的平 皿中，至凝固。 2.3.5 菌懸液制備 將接種針在酒精火焰上灼燒，稍涼片刻。用針在單菌落上取一環(huán)金黃色葡萄球菌，接種到裝有 10ml 無(wú)菌水的試管中，震蕩、搖勻。用移液槍取 0.1

20、ml 菌懸液置裝有 9.9ml 無(wú)菌水的試管中，震蕩、 搖勻，得到濃度為 10-2的菌懸液。繼續(xù)用移液槍從濃度為 10-2的菌懸液中取 0.1ml 菌懸液置裝有 9.9ml 無(wú)菌水的試管中，震蕩、搖勻，得到濃度為 10-4的菌懸液。 同樣的方法得到濃度為 10-4的大腸桿菌和濃度為 100的放線菌的菌懸液。 阿維菌素選擇性抑制劑的研究 第 8 頁(yè) 共 14 頁(yè) 2.3.6 抑菌劑的添加 用移液槍取 0.1ml 濃度為 10-4的金黃色葡萄球菌的菌液放入 EP 管中，加入 0.1ml 抑制劑，得到 抑制劑濃度為 20ppm 的菌液;用移液槍取 0.3ml 濃度為 10-4的金黃色葡萄球菌的菌液放

21、入 EP 管中， 加入 0.1ml 抑制劑，得到抑制劑濃度為 10ppm 的菌液;用移液槍取 0.7ml 濃度為 10-4的金黃色葡萄球 菌的菌液放入 EP 管中，加入 0.1ml 抑制劑，得到抑制劑濃度為,5ppm 的菌液。蓋好 EP 管蓋，等待 十分鐘。 同理對(duì)濃度為 10-4的大腸桿菌添加抑制劑；濃度為 100的放線菌添加抑制劑。 2.3.7 涂布 用移液槍取 0.1ml 濃度為 10-4的金黃色葡萄球菌的菌液滴入裝有牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的平皿中 進(jìn)行涂布。用移液槍取 0.1ml 已經(jīng)加入抑制劑十分鐘的菌液進(jìn)行涂布，并依次標(biāo)號(hào)菌種名稱、時(shí)間、 制作人、所加抑制劑濃度。 同理將大腸桿菌的原液

22、和加入抑制劑的菌液涂布到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的平皿中；將放線菌的 原液和加入抑制劑的菌液涂布到高氏 1 號(hào)培養(yǎng)基的平皿中。 2.3.8 菌種的培養(yǎng) 將涂布好的金黃色葡萄球菌、大腸桿菌放入溫度為 37的培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 1-2 天，放線菌放入溫 度為 28的培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 2-4 天。 2.3.9 觀察記錄 對(duì)培養(yǎng)好的平板中的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。 河北化工醫(yī)藥職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)生論文 第 9 頁(yè) 共 14 頁(yè) 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析 3.1 試驗(yàn)結(jié)果 3.1.1 A8 抑制劑的實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表 2 A8 抑制劑的實(shí)驗(yàn)記錄 金黃色葡萄球菌大腸桿菌放線菌 -2-4 加-2加-4 -2-4 加-2加-4 -2-4 加-2加-

23、4 11.221561254523574487111783602806834 11.23925724123122198967108892016 11.251118732221801359949 600 以上 500 左右 12089 11.286543231516012389569989119 3.1.2 A9 抑制劑的實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表 3 A9 抑制劑的實(shí)驗(yàn)記錄 金黃色葡萄球菌大腸桿菌放線菌 20105 不 20105 不 20105 不 12.282718915077121129140891215 12.53665717910115014023333384145 12.745676468110

24、12113216276848598 12.924352536130142165189101103109115 12.13516178111217373450580899290102 12.1527293864129195240260107217221235 阿維菌素選擇性抑制劑的研究 第 10 頁(yè) 共 14 頁(yè) 3.2 實(shí)驗(yàn)分析 3.2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)論 由以上數(shù)據(jù)分析，A8 對(duì)大腸桿菌及金黃色葡萄球菌的抑制效果不錯(cuò)，但是其對(duì)放線菌的抑制效 果也很明顯，而我們所需要的是在阿維菌素生產(chǎn)中，即在放線菌發(fā)酵的過(guò)程中使用的抑菌劑，所以 A8 可以排除。A9 的效果不是很明顯，在濃度為 20ppm 時(shí)，其對(duì)

25、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌可以抑制 一半，但是同濃度下對(duì)放線菌亦有些微抑制的效果，故不建議應(yīng)用 A9。 3.2.2 實(shí)驗(yàn)小結(jié) 此次實(shí)驗(yàn)讓我學(xué)到了很多東西，對(duì)于阿維菌素的生產(chǎn)情況有了更深層次的了解，也了解到其染 菌現(xiàn)象的嚴(yán)重性，也明白了解決其染菌現(xiàn)象的迫切性。所以在我認(rèn)真的對(duì)待每一次實(shí)驗(yàn)，認(rèn)真分析 實(shí)驗(yàn)結(jié)果，希望早日選擇出合適的抑菌劑，A9 雖說(shuō)對(duì)放線菌的抑制效果不明顯，但是其對(duì)大腸桿菌 及金黃色葡萄球菌的抑制效果也不是非常好，我建議選擇效果更好的抑菌劑，在前幾次試驗(yàn)中，我 們發(fā)現(xiàn)菌落個(gè)數(shù)很多，并且非常小而密，不易數(shù)清楚，且效果不明顯，所以我們調(diào)節(jié)了取菌的量及 菌液的濃度，最終調(diào)節(jié)出適合的濃度。

26、河北化工醫(yī)藥職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)生論文 第 11 頁(yè) 共 14 頁(yè) 4 結(jié)論 導(dǎo)致阿維菌素發(fā)酵染菌的原因很多，主要有種子帶菌、空氣帶菌、滅菌不透、操作不當(dāng)?shù)确矫妗?染菌對(duì)于阿維菌素發(fā)酵生產(chǎn)十分不利，輕則影響產(chǎn)量和質(zhì)量，重則倒罐，甚至停產(chǎn)，造成巨大損失。 因此，防止染菌對(duì)于阿維菌素發(fā)酵具有重大意義。 本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果 A8 都對(duì)工業(yè)生產(chǎn)的意義不大，A9 的效果雖有但是并不明顯，但我們可以從這方 面考慮并進(jìn)行改良。隨著發(fā)酵工業(yè)的不斷深入發(fā)展，預(yù)期、防止發(fā)酵染菌將會(huì)擴(kuò)大至更廣的范疇， 可望把阿維菌素發(fā)酵染菌造成的損失降到最小。 阿維菌素選擇性抑制劑的研究 第 12 頁(yè) 共 14 頁(yè) 參考文獻(xiàn) 1彭柏林.阿維

27、菌素菌種生產(chǎn)工藝的研究(碩士論文)D.沈陽(yáng):沈陽(yáng)藥科大學(xué)微生物藥學(xué)系, 2001. 2凌關(guān)庭.防腐抑菌劑的進(jìn)展J.糧食與油脂，2000 3ASAP12345.抑菌劑.http:/ 4吳雪潔,孟云平.新型抑菌劑 Tallofin（太樂(lè)芬）在循環(huán)水系統(tǒng)的應(yīng)用J.工業(yè)水處理, 2010.12 5呂長(zhǎng)征.高效抑菌劑.http:/ do?id=3656807.2011.12.22 6凌關(guān)庭.防腐抑菌劑的進(jìn)展J.糧食與油脂，2000 7代容春.農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物轉(zhuǎn)基因研究中抑菌劑的應(yīng)用現(xiàn)狀M.福建:福建師范大學(xué)生命科學(xué) 學(xué)院.2009.05 8吳劍波.微生物制藥M.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2002:142-143. 河北化工醫(yī)藥職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)生論文 第 13 頁(yè) 共 14 頁(yè) 致謝 本文是在孫祎敏老師對(duì)我大力幫助下完成的。她淵博的知識(shí)、開(kāi)闊的視野和敏銳的思維給了我 深深的啟迪同時(shí)為我提供了大量的實(shí)驗(yàn)材料。在此次畢業(yè)設(shè)計(jì)過(guò)程中我也