浙科版生物技術(shù)實(shí)踐單元測(cè)試

1、生物技術(shù)實(shí)踐（時(shí)間40分鐘，滿分100分）一、選擇題（每小題4分,1 .三個(gè)培養(yǎng)皿中分別加入共40分）10 mL不冋的培養(yǎng)基，然后接種相冋的大腸桿菌樣液。培養(yǎng)36小時(shí)后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，結(jié)果如下表所示。下列選項(xiàng)錯(cuò)誤的是（）培養(yǎng)皿培養(yǎng)基成分菌落數(shù)I瓊脂、葡萄糖35n瓊脂、葡萄糖、生長(zhǎng)因子250出瓊脂、生長(zhǎng)因子0A. 該實(shí)驗(yàn)采用的是固體培養(yǎng)基B. 該實(shí)驗(yàn)可以采用稀釋涂布平板法接種C. I和川對(duì)照，說(shuō)明大腸桿菌的生長(zhǎng)不需要生長(zhǎng)因子D. H和川對(duì)照，說(shuō)明大腸桿菌的生長(zhǎng)需要糖類2 下列有關(guān)消毒、滅菌的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A用酒精擦拭雙手的方法對(duì)操作者進(jìn)行消毒B. 對(duì)不同的生物材料，應(yīng)當(dāng)采用不同的滅菌方法C. 接

2、種前用火焰灼燒接種環(huán)D. 消毒即殺死培養(yǎng)基內(nèi)的一切微生物3劃線分離法和涂布分離法是純化微生物的兩種常用方法，下列描述正確的是（）A. 都要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B. 劃線分離法是將不同稀釋度的菌液通過(guò)接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作C. 涂布分離法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)D. 涂布分離法可用于微生物的純化和計(jì)數(shù)，而劃線分離法只能用于微生物的分離不能計(jì)數(shù)4通過(guò)選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌的生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入10%勺酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。利用上述方法能從混雜

3、的微生物群體中分別分離出（）大腸桿菌霉菌放線菌固氮細(xì)菌A. B.C.D.只有5.下列有關(guān)果膠、果膠酶的說(shuō)法不.正確的是（）A. 果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等B. 果膠酶是一類催化劑，其本質(zhì)是RNAC. 植物、霉菌、酵母菌和細(xì)菌均能產(chǎn)生果膠酶D. 果膠不僅會(huì)影響出汁率，還會(huì)使果汁渾濁6某校學(xué)生嘗試用瓊脂作載體，用包埋法固定a-淀粉酶來(lái)探究固定化酶的催化效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表（假設(shè)加入試管中的固定化淀粉酶量與普通a-淀粉酶量相同）。實(shí)驗(yàn)表明1號(hào)試管中淀粉未被水解，你認(rèn)為最可能的原因是（）1號(hào)試管2號(hào)試管固定化淀粉酶V普通a -淀粉酶V淀粉溶液VV60 C保溫5分鐘，取出冷卻至室

4、溫，滴加碘液現(xiàn)象變藍(lán)不變藍(lán)A. 實(shí)驗(yàn)中的溫度過(guò)高，導(dǎo)致固定化淀粉酶失去活性B. 淀粉是大分子物質(zhì)，難以通過(guò)瓊脂與淀粉酶接觸C. 水浴保溫時(shí)間過(guò)短，固定化淀粉酶未將淀粉水解D. 實(shí)驗(yàn)程序出現(xiàn)錯(cuò)誤，試管中應(yīng)先加入碘液后保溫7.下列關(guān)于果酒和果醋制作的敘述，不 .正確的是（）A. 生產(chǎn)果酒和果醋所用微生物的異化類型不同B. 參與發(fā)酵的微生物都含有細(xì)胞核C. 制果酒時(shí)瓶口需密封，而制果醋時(shí)需要通入氧氣D. 發(fā)酵過(guò)程中培養(yǎng)液 pH都會(huì)下降&關(guān)于用塑料瓶制作果酒和果醋的敘述，正確的是（）A. 為了提高果酒的產(chǎn)出量，果汁應(yīng)盡量裝滿發(fā)酵瓶B. 醋酸發(fā)酵階段應(yīng)封閉充氣口，防止雜菌污染C. 制果酒和果醋的過(guò)程中每

5、天需適時(shí)擰松或打開瓶蓋D. 果酒制成后，可將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中制果醋9. 下列說(shuō)法正確的是（）A. 泡菜制作的過(guò)程中所利用的微生物主要是乳酸菌B. 泡菜發(fā)酵過(guò)程中，會(huì)產(chǎn)生多種酸，其中主要是亞硝酸，還有少量的乳酸C. 對(duì)亞硝酸鹽的含量測(cè)定可以用天平稱量法D. 亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸的反應(yīng)產(chǎn)物能與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)成橘黃色化合物10. 在菊花的組織培養(yǎng)操作完成了34 d后，觀察同一溫度中的外植體，發(fā)現(xiàn)有的瓶?jī)?nèi)外植體正常生長(zhǎng)，有的瓶?jī)?nèi)外植體死亡，你認(rèn)為外植體死亡的原因不可能是（）A. 培養(yǎng)條件，比如 pH、溫度等不適宜B. 接種時(shí)外植體未消毒C. 接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體D.

6、將外植體倒插入培養(yǎng)基中二、非選擇題 (共 60 分)11. (10分)(2014 浙江六校聯(lián)考)從自然界獲得純種的釀酒酵母，基本程序是：配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)觀察記錄純化培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列有關(guān)的問(wèn)題：(1) 酵母菌的培養(yǎng)最好使用下列哪種培養(yǎng)基？ ()A. 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B.麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基C.無(wú)土栽培培 養(yǎng)基D. MS培養(yǎng)基(2) 采用劃線分離法接種時(shí)，開始接種時(shí)要灼燒接種環(huán)，目的是 。要把接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基同時(shí)放入恒溫箱培養(yǎng)， 設(shè)置“未接種的培養(yǎng)基”的目的是(3) 將得到的純種釀酒酵母接種到葡萄汁中發(fā)酵，如何獲得酒精含量更高的果酒？(4) 把從酵母細(xì)胞中提取的淀粉酶固定在尼龍布

7、上制成固定化酶，與傳統(tǒng)酶應(yīng)用技術(shù)相比，此技術(shù)最顯著的優(yōu)點(diǎn)是 。(5) 某實(shí)驗(yàn)小組欲按上述方法從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，應(yīng)將菌液涂布接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，30 C條件下培養(yǎng)。為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈狀態(tài)放置； 篩選時(shí)應(yīng)將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍， 如果菌落周圍的現(xiàn)象是出現(xiàn)透明圈， 則說(shuō)明此種菌能夠 。從平板中挑取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌株，采用 法接種于新的培養(yǎng)基平板，可對(duì)菌株進(jìn)行進(jìn)一步的純化。12. (10分)(2014 金華十校聯(lián)考)微生物與人類的生活、健康有著密切的聯(lián)系。請(qǐng)回 答下列有關(guān)問(wèn)題：(1) 在果醋、泡菜和果酒的制作過(guò)程中，均利用相應(yīng)微生物的代謝特點(diǎn)進(jìn)

8、行條件控制，其中需要提供氧氣的是 的制作。泡菜腌制原理是 和等主要微生物利用菜中的 和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵，產(chǎn)生有機(jī)酸和醇類物質(zhì)。(2) 根據(jù)微 生物的 特點(diǎn)， 可以 利用相應(yīng)的 培養(yǎng)基 進(jìn)行分 離或培養(yǎng)， 例如 用的培養(yǎng)基分離能產(chǎn)生脲酶的微生物，用 的培養(yǎng)基培養(yǎng)蘋果青霉， 可提高果膠酶的產(chǎn)量。(3) 在微生物培養(yǎng)或分離過(guò)程中，下列操作不恰當(dāng)?shù)氖?A. 在超凈臺(tái)中進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)該關(guān)閉紫外燈B. 擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)必須保證氧氣的供應(yīng)C. 控制液體培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度D. 空白的培養(yǎng)基平板需進(jìn)行無(wú)菌實(shí)驗(yàn)(4) 利用固體培養(yǎng)基可以進(jìn)行微生物培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)，兩者的培養(yǎng)基明顯不同的是A. 需要添加瓊脂B.需

9、要添加有機(jī)物C.需要添加激素D.需要滅菌處理13. (10分)(2014 浙北五校聯(lián)考)下面是有關(guān)微生物的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答：(1) 培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)必須進(jìn)行無(wú)菌操作。實(shí)驗(yàn)前所需的各種器材如三角燒瓶、培養(yǎng)皿等需要經(jīng)過(guò)法滅菌。(2) 配置培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí)，根據(jù)“細(xì)菌喜葷，霉菌喜素”的規(guī)律，通常在培養(yǎng)基中加入作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還需要考慮溫度、滲透壓和 等條件。(3) 大腸桿菌培養(yǎng)和分離的實(shí)驗(yàn)中，在LB液體培養(yǎng)基中進(jìn)行，培養(yǎng)液經(jīng) 后，在 LB固體培養(yǎng)基上進(jìn)行 并將培養(yǎng)皿 放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，可以獲得右圖效果。通常對(duì)獲得的純菌種可以依據(jù) 的形狀、大小等特征進(jìn)行初步的鑒(4) 微生物與人類的生活關(guān)

10、系越來(lái)越密切，在制作果酒、果醋、泡菜的過(guò)程中，分別用到的主要微生物分別是 。A. 酵母菌、乳酸菌、乳酸菌B. 酵母菌、醋桿菌、乳酸菌C. 乳酸菌、醋桿菌、酵母菌D. 酵母菌、乳酸菌、醋桿菌14. (10分)農(nóng)村中泡菜的制作方法：將新鮮的蔬菜經(jīng)過(guò)整理、清潔后，放入徹底清洗 并用白酒擦拭過(guò)的菜壇中(泡菜壇一般是兩頭小中間大的陶器，壇口有壇沿，凡裂縫的菜壇 不能使用)，然后向壇中加入鹽水，香料及一些“陳泡菜水”，密封后置于陰涼處，最適環(huán) 境溫度為2832 C。有時(shí)制作的泡菜會(huì)“咸而不酸”或“酸而不咸”，前者是用鹽過(guò)多， 后者是用鹽過(guò)少。在實(shí)驗(yàn)室或工廠生產(chǎn)泡菜，還要跟蹤檢測(cè)泡菜腌制過(guò)程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽

11、 含量。(1) 用白酒擦拭泡菜壇的目的是 。(2) 菜壇為什么要密封？若菜壇有裂縫，可能會(huì)出現(xiàn)什么結(jié)果？(3) 若制作的泡菜“咸而不酸”最可能的原因是什么？加入一些“陳泡菜水”的作用是 (5) 制作泡菜的過(guò)程中，有機(jī)物的干重如何變化？菜壇內(nèi)有機(jī)物的種類如何變化？915. (10分)(2014 富陽(yáng)中學(xué)第二次周考)某學(xué)習(xí)小組利用課余時(shí)間制作葡萄酒。為了獲得純凈酵母菌，需要對(duì)購(gòu)買的菌源進(jìn)行分離和純化。步驟如下：養(yǎng)基制備細(xì)菌懸液涂布分離法分離細(xì)菌培養(yǎng)細(xì)菌請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1) 驗(yàn)證培養(yǎng)基制作是否合格的方法是 (2) 關(guān)于用涂布法給平面培養(yǎng)基接種。下列敘述錯(cuò)誤的是()A. 接種的目的是使細(xì)菌相互分離B

12、. 接種需過(guò)濾出去雜菌后進(jìn)行C. 接種工具需灼燒后使用D. 接種需在酒精燈火焰旁進(jìn)行(3) 培養(yǎng)后，如果觀察到菌落重疊，則在涂布接種之前需進(jìn)行 。4小組成員為提高葡萄酒的品質(zhì)，在果汁中加入了人工培養(yǎng)的純凈酵母菌。在制酒的過(guò)程中，先讓酵母菌在有氧條件下 ，然后在無(wú)氧條件下進(jìn)行 。(5) 在實(shí)際生產(chǎn)中，廠家開始嘗試選用海藻酸鈉作 包埋各種酶制劑，這種技術(shù)叫做。16. (10分)(2014 富陽(yáng)中學(xué)第三次周考)利用果酒制作果醋的裝置如右圖。請(qǐng)回答：(1) 果酒可用果漿或果汁為原料制作，制作果酒所用微生物是 。將葡萄漿放入發(fā)酵瓶中，裝量不要超過(guò) 。A. 2/3B. 3/5C. 3/4D. 4/5(2)

13、 乙瓶為發(fā)酵瓶，加料順序?yàn)椋菏紫劝?裝入乙瓶中。然后，將適量 的培養(yǎng)物或醋曲懸液加在適量酒一水混合物中混勻，并調(diào)pH至后倒入乙瓶。(3) 乙瓶底部的導(dǎo)管 2用于，導(dǎo)管3在瓶中的一端應(yīng) 。(4) 下列關(guān)于果醋制作的敘述中，錯(cuò)誤的是 A. 控制導(dǎo)管1內(nèi)液體的流速以利于充分發(fā)酵B. 檢測(cè)流出液的pH以監(jiān)控發(fā)酵C. 甲瓶和丙瓶的瓶口均需密封D.雜菌污染會(huì)影響果醋的品質(zhì)答案1選 C 微生物的培養(yǎng)基成分中加入了瓊脂，說(shuō)明該實(shí)驗(yàn)采用的是固體培養(yǎng)基；該實(shí) 驗(yàn)可以采用稀釋涂布平板法接種；I和川對(duì)照，有葡萄糖、生長(zhǎng)因子兩個(gè)變量，不能說(shuō)明大 腸桿菌的生長(zhǎng)不需要生長(zhǎng)因子；n和川對(duì)照，能夠說(shuō)明大腸桿菌的生長(zhǎng)需要糖類。2

14、選 D 滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子， 而消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物，不包括芽孢和孢子； 對(duì)操作者應(yīng)用較溫和的方法進(jìn)行消毒； 對(duì)不同的生物材料， 應(yīng)當(dāng)采用不同的滅菌方 法。3選 D 劃線分離法不需要進(jìn)行梯度稀釋；涂布分離法是將不同稀釋度的菌液滴加到 固體培養(yǎng)基的表面， 然后用涂布器將菌液均勻涂布在培養(yǎng)基表面； 涂布分離法可用于微生物 的純化和計(jì)數(shù)，劃線分離法只能用于微生物的分離不能計(jì)數(shù)。4選 A 缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)，而固氮細(xì)菌能生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基 中加青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌等原核生物細(xì)胞壁的合成，

15、而霉菌屬于真核生物， 故能生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入 10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)，對(duì)放線菌的生長(zhǎng)無(wú)影響。5選 B 果膠酶不是特指一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛 酸酶、 果膠分解酶和果膠酯酶等； 果膠酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)； 果膠是由半乳糖醛酸聚合而 成的一種高分子化合物，不溶于水，在果汁加工中，不僅影響出汁率，還會(huì)使果汁混濁。6選 B 由于固定化酶是用包埋法固定的，而淀粉是大分子物質(zhì)，它不能通過(guò)瓊脂與 酶接觸，導(dǎo)致淀粉不能被水解而遇碘液呈現(xiàn)藍(lán)色。7選 B 制作果酒和果醋所用的微生物分別是酵母菌和醋酸菌，其中酵母菌是兼性厭 氧型生物， 而醋酸菌是好氧型生物； 酵母菌是真核生

16、物， 含有細(xì)胞核， 而醋酸菌是原核生物， 沒(méi)有細(xì)胞核； 果酒發(fā)酵的后期需密封， 酒精是在無(wú)氧條件下產(chǎn)生的； 果酒發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生 二氧化碳，果醋發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生醋酸，培養(yǎng)液的pH 均會(huì)下降。8選 D 果汁不能裝滿發(fā)酵瓶，因?yàn)榘l(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生氣體，裝滿后可能導(dǎo)致瓶子破 裂；醋桿菌為好氧菌，所以發(fā)酵階段不能封閉充氣口；制果酒的過(guò)程中需適時(shí)擰松瓶蓋，釋 放產(chǎn)生的氣體；醋桿菌與酵母菌相比，其適宜溫度高。9選 A 泡菜發(fā)酵時(shí)，在乳酸菌等的作用下主要產(chǎn)生乳酸；測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理 是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1- 萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成紫紅色產(chǎn)物，將顯色反應(yīng)后的樣

17、品測(cè)定0D值，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到含量，計(jì)算 出泡菜中亞硝酸鹽的含量，此方法叫做光電比色法。10選 A 同一批組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，如溫度、pH 等應(yīng)該相同，且存在瓶?jī)?nèi)正常生長(zhǎng)的外植體，所以不可能是A 項(xiàng)所述原因；接種時(shí)外植體未消毒可能引起雜菌污染，造成實(shí)驗(yàn)失?。?接種工具灼燒后未待冷卻可能將外植體殺滅； 植物有形態(tài)學(xué)上端和下端之分， 倒插后莖段無(wú)法從培養(yǎng)基中吸收生長(zhǎng)素，營(yíng)養(yǎng)也供應(yīng)不上，不利于成活。11.解析：(1) “細(xì)菌喜葷，霉菌喜素”，A培養(yǎng)基適用于細(xì)菌培養(yǎng)，B培養(yǎng)基適用于真菌培養(yǎng)，C培養(yǎng)基適用于植物體培養(yǎng)，D培養(yǎng)基適用于植物組織培養(yǎng)。(2)開始接種時(shí)要對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌， 接種后的培養(yǎng)

18、基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基同時(shí)放入恒溫箱培養(yǎng)，以檢驗(yàn)培養(yǎng)基在接種中是否被污染。 (3) 葡萄汁中添加蔗糖發(fā)酵能促進(jìn)酵母菌快速生長(zhǎng)，加快發(fā)酵產(chǎn)生酒 精更多。 (4) 使用固定化酶的優(yōu)點(diǎn)是酶制劑更加穩(wěn)定、可以重復(fù)使用、產(chǎn)品易純化等。(5)以淀粉為唯一碳源的固體培養(yǎng)基通常只生長(zhǎng)能利用淀粉的微生物。培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)有冷凝水從蓋上滴落到培養(yǎng)基上， 培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)可以防止菌體隨水滴擴(kuò)散， 使分離菌種失敗。 培養(yǎng)基中含淀粉遇碘液會(huì)顯藍(lán)色， 若菌體能分解利用淀粉， 其菌落周圍會(huì)出現(xiàn)透明圈。 通過(guò) 劃線接種方法可以進(jìn)一步分離純化菌種。答案： (1)B(2) 滅菌 檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否被污染(3) 往葡萄汁中加入適量的

19、蔗糖(4) 可以重復(fù)使用 ( 產(chǎn)品易純化 )(5) 淀粉 倒置 分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解 ( 平板)劃線12 .解析：在果醋、泡菜和果酒的發(fā)酵制作中，果醋發(fā)酵屬需氧發(fā)酵，需要向發(fā)酵裝置 中通入空氣。 泡菜腌制原理是假絲酵母和乳酸菌等主要微生物利用菜中的糖和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 進(jìn)行發(fā)酵， 產(chǎn)生有機(jī)酸和醇類物質(zhì)。 分離能產(chǎn)生脲酶的微生物應(yīng)用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng) 基。培養(yǎng)蘋果青霉獲得大量果膠酶時(shí)應(yīng)用含果膠豐富的培養(yǎng)基。 擴(kuò)大培養(yǎng)一般用液體培養(yǎng)基， 是否要通入空氣要根據(jù)微生物的需求而定， 不能一概而論。 植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中必須加 入植物激素作為生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)才能完成， 有機(jī)物的需求較少但不能缺少， 而一般微生物培養(yǎng) 時(shí)不需要激素添加，有機(jī)物較多。答案： (1) 果醋 假絲酵母 乳酸菌 糖(2) 僅以尿素為氮源 富含果膠(3) B (4)C13.解析：無(wú)菌操作包括多種滅菌方法， 對(duì)實(shí)驗(yàn)用的器皿如培養(yǎng)皿等采用高壓蒸汽滅菌。 異養(yǎng)細(xì)菌需要的有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物應(yīng)取自動(dòng)物性營(yíng)養(yǎng)， 如蛋白胨、 酵母提取物等。 培養(yǎng)基配制除考 慮營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、溫度、滲透壓等之外還要特別注意pH值適宜。通常液體培養(yǎng)基用于菌種擴(kuò)大培養(yǎng)或生產(chǎn)， 固體培養(yǎng)基用于研究鑒定和菌種分離， 菌種分離常用劃線分離和涂布分離， 其 中涂布分離前常常需要稀釋樣品。 接種后的培養(yǎng)皿應(yīng)倒