藥學(xué)分子生物學(xué)練習(xí)題

1、 2008 級分子生物學(xué)練習(xí)題一、 名詞解釋1、分子生物學(xué)分子生物學(xué)是在分子水平上研究生命現(xiàn)象的科學(xué)，是現(xiàn)代生命科學(xué)的“共同語言”；2、干細(xì)胞 未分化尚未成熟的細(xì)胞，具有再生各種組織器官或人體的潛在功能；3、人類基因組計劃是80 年代在全球范圍內(nèi)廣泛開展的一項研究計劃，目標(biāo)是全面而透徹的認(rèn)識人類基因組的正常結(jié)構(gòu)，功能及基因的異常結(jié)構(gòu)與人類疾??；4、核酸的變性 某些理化因素會破壞氫鍵和堿基堆積力，使核酸分子的高級結(jié)構(gòu)改變，從而引起核酸理化性質(zhì)及生物學(xué)功能的改變；5、增色反應(yīng)由于核酸變性（或降解）而引起紫外吸收增加的現(xiàn)象；6、DNA 的熔點 引起 DNA 變性的溫度即增色效應(yīng)達(dá)到 50%的溫度；7

2、、核酸的復(fù)性分子雜交互補(bǔ)的單鏈DNA 和 RNA 或 DNA 和 DNA 或 RNA 和 RNA，根據(jù)堿基互補(bǔ)原則，借助氫鍵相連而成的雙鏈雜交分子的過程；8、原位雜交在組織或細(xì)胞水平，使用標(biāo)記探針與細(xì)胞DNA 或 RNA 雜交的方法；9、Southern 法將樣品中混合 DNA 片段經(jīng)凝膠電泳分離，被分離的 DNA 片段從凝膠轉(zhuǎn)移到吸附薄膜上并固定，隨后用標(biāo)記的探針進(jìn)行雜交，以檢測目標(biāo) DNA 片段；10、反義核酸根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原理，利用人工合成或生命有機(jī)體合成的特定互補(bǔ)的DNA 或 RNA 片段與目的核酸結(jié)合后，通過空間位阻效應(yīng)或誘導(dǎo)RNA 活性降解作用，在復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、剪接、mRNA 轉(zhuǎn)運

3、ase及翻譯水平上，抑制或封閉目的基因的表達(dá)；11、反 義 DNA(cDNA)是人工合成的與待封閉基因某一區(qū)段互補(bǔ)的正?；蚧瘜W(xué)修飾的DNA 片段，用來抑制或封閉這一基因的表達(dá)；12、核酶具有催化活性的 RNA；13、染色體原核：遺傳物質(zhì)組成單一環(huán)形雙鏈DNA 分子；真核：由單一的線型雙鏈 DNA 分子及結(jié)構(gòu)蛋白組成的遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)單位；14、常染色質(zhì)間期核中染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度低，處于伸展?fàn)顟B(tài)，染料著色淺的染色質(zhì)。富含單拷貝 DNA 序列；15、異染色質(zhì)間期核中染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度低，處于伸展?fàn)顟B(tài)，染料著色淺的染色質(zhì)。富含單拷貝 DNA 序列；16、核小體間期核中染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度低，處

4、于伸展?fàn)顟B(tài)，染料著色淺的染色質(zhì)。富含單拷貝 DNA 序列；17、基因是指 DNA 分子中能編碼一條多肽鏈，并具有一定長度的片段；18、副密碼子tRNA 上決定其攜帶何種氨基酸的區(qū)域；19、順反子通過互補(bǔ)實驗確定的遺傳功能單位；20、順式排列兩個突變點分別位于兩條染色上；21、反式排列兩個突變點位于同一條染色體上；22、基因組細(xì)胞中一套單體遺傳物質(zhì)的總和；23、不連續(xù)基因DNA 分子上的編碼序列是不連續(xù)的，被不編碼的序列所隔開的基因；24、內(nèi)含子DNA 中不編碼 mRNA 某一部分序列的區(qū)域；25、外顯子DNA 中編碼 mRNA 某一部分序列的區(qū)域；26、基因家族真核細(xì)胞的基因中有許多來源相同、

5、結(jié)構(gòu)相似、功能相關(guān)的基因，這樣的一組基因構(gòu)成基因家族；27、假基因不能轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后生成無功能蛋白質(zhì)的基因；28、堿基互補(bǔ)配對原則在形成雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程中，由于各種堿基的大小與結(jié)構(gòu)不同，使得堿基之間的互補(bǔ)配對只能在 AT 和 GC 之間進(jìn)行；29、反向重復(fù)序列(回文結(jié)構(gòu))雙鏈 DNA 分子中某一段序列，方向相反、序列相同，也就是每一條鏈從53方向的核苷酸序列都相同；30、遺傳圖譜以具有遺傳多態(tài)性的遺傳標(biāo)記為“路標(biāo)”，以遺傳學(xué)距離為圖距的基因圖組；31、轉(zhuǎn)座子原核生物和真核生物基因組中存在著可以從一個部位轉(zhuǎn)移到另一個部位的DNA 序列；32、轉(zhuǎn)座轉(zhuǎn)座因子改變其在 DNA 分子上位置的過程；遺傳信息

6、從 DNADNA 的轉(zhuǎn)移過程；33、返座遺傳信息從 DNARNADNA 的轉(zhuǎn)移過程；34、返座子由返座作用轉(zhuǎn)移的遺傳信息就叫返座子； 35、重疊基因指兩個或兩個以上的結(jié)構(gòu)基因共同一段DNA 順序的現(xiàn)；36、模糊基因經(jīng)過編輯后才能形成功能蛋白質(zhì)的基因（常指mRNA）；37、細(xì)胞器基因存在于細(xì)胞器中的基因；具有獨特序列的單鏈環(huán)狀DNA 分子；38、質(zhì)粒多數(shù)細(xì)菌和某些真核生物細(xì)胞染色體外的雙鏈環(huán)狀DNA 分子；39、質(zhì)粒的不相容性在沒有選擇壓力條件下利用同一復(fù)制系統(tǒng)的不同質(zhì)粒，不能穩(wěn)定和平共處；40、遺傳重組減數(shù)分裂時，通過同源染色體交換和非同源染色體的獨立分配，使子代細(xì)胞的遺傳信息產(chǎn)生了重新組合的

7、現(xiàn)象；41、Holliday 模型霍利迪(R. Holliday) 于 1964 年提出的解釋同源重組的分子模型；42、分支遷移重組位點沿雙鏈向 DNA 分子的任一方向遷移，遷移過程中原來的堿基對被揭開再重新形成新的堿基對的過程；43、位點特異性重組指不依賴于 DNA 序列的同源性，而依賴于能與某些酶相結(jié)合的特異DNA 序列的重組；44、轉(zhuǎn)基因動物通過基因轉(zhuǎn)移技術(shù)獲得的整合有外源基因的動物個體；45、基因敲除將細(xì)胞基因組中某基因去除或使基因失去活性的方法；46、基因治療使用基因工程技術(shù)將外源基因?qū)牖颊叩牟∽兗?xì)胞，外源基因通過糾正機(jī)體基因缺陷或調(diào)節(jié)基因表達(dá)功能而使靶細(xì)胞重新獲得正常功能的過程；

8、47、基因打靶是指通過 DNA 定點同源重組，改變基因組中的某一特定基因，從而在生物活體內(nèi)研究此基因的功能；48、半保留復(fù)制DNA 的復(fù)制時將兩條親本鏈分開，每一條作為合成新鏈的模板，按堿基互補(bǔ)配對規(guī)則合成新鏈，形成兩個子代 DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)；49、復(fù)制子DNA 中發(fā)生一次復(fù)制的單位；50、單向復(fù)制從復(fù)制起點開始，單方向復(fù)制；51、雙向復(fù)制從復(fù)制起點開始，以雙向等速復(fù)制方向進(jìn)行復(fù)制，即從原點開始在兩個方向上各有一個復(fù)制叉在延伸，直至臨近的復(fù)制叉匯合的復(fù)制方式；52、半不連續(xù)復(fù)制雙鏈 DNA 合成時 53端是連續(xù)合成，而 35端則是不連續(xù)合成；53、VDJ 重組H 鏈可變區(qū)的 D 基因的任一段

9、與 J 基因拼成 DJ 基因后再與 V 基因任一段相結(jié)合形成新基因的過程；54、岡崎片段DNA 復(fù)制前期出現(xiàn)的一系列 DNA 片段；55、端粒真核細(xì)胞染色體末端的特殊結(jié)構(gòu)；真核細(xì)胞內(nèi)線性染色體末端的一種特殊結(jié)構(gòu)，由 DNA 簡單重復(fù)序列以及同這些序列專一性結(jié)合的蛋白質(zhì)構(gòu)成；56、滾環(huán)復(fù)制環(huán)狀 DNA 分子的一種快速復(fù)制的方式。復(fù)制過程中環(huán)狀 DNA 分子滾動復(fù)制出前導(dǎo)鏈，線性鏈被核酸內(nèi)切酶切割成單元長度，線狀 DNA 分子靠黏性末端連接成環(huán)形，以此為“”鏈合成互補(bǔ)“”鏈，形成環(huán)狀雙鏈 DNA 分子；57、逆轉(zhuǎn)錄以 RNA 為模板，依靠逆轉(zhuǎn)錄酶的作用，合成 DNA 雙鏈的轉(zhuǎn)錄過程；58、同義突變

10、突變沒有引起編碼氨基酸變化；59、錯義突變堿基序列的改變引起表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)氨基酸序列的改變；60、無義突變某個堿基的改變使編碼某種氨基酸的密碼子變?yōu)榻K止密碼子；61、移框突變在為蛋白質(zhì)編碼的序列中如果缺失或插入核苷酸，則發(fā)生讀框移動，使其后譯讀的氨基酸序列全部混亂，這種現(xiàn)象稱框移突變；62、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)用引物和 DNA 聚合酶進(jìn)行體外擴(kuò)增特定的 DNA 區(qū)域的一種技術(shù)；63、轉(zhuǎn)錄以 DNA 的堿基序列為模板,在 RNA 聚合酶催化下合成互補(bǔ)的單鏈 RNA 分子的過程；64、轉(zhuǎn)錄單位RNA 鏈的生物合成起始于 DNA 模板的一個特定位點，并在另一個位點處終止，這一特定區(qū)域稱為轉(zhuǎn)錄單位；

11、65、啟動子是指 RNA 聚合酶識別、結(jié)合并起始轉(zhuǎn)錄的一段具有高度保守性的DNA 序列；66、終止子轉(zhuǎn)錄過程中能夠終止 RNA 聚合酶轉(zhuǎn)錄的 DNA 序列，這種終止轉(zhuǎn)錄信號的序列；67、增強(qiáng)子能使和它連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA 序列；68、轉(zhuǎn)錄因子直接結(jié)合或間接作用于基因啟動子、形成具有RNA 聚合酶活性的動態(tài)轉(zhuǎn)錄復(fù)合體的蛋白質(zhì)因子；69、轉(zhuǎn)換不同嘌呤或嘧啶之間的轉(zhuǎn)換；70、顛換嘌呤變成嘧啶或嘧啶變成嘌呤；71、轉(zhuǎn)錄后加工由 RNA 聚合酶合成的原初轉(zhuǎn)錄物，往往需要經(jīng)過一系列的包括 5端與 3端的切除，特殊結(jié)構(gòu)的形成，堿基修飾和糖苷鍵的改變以及剪接等過程，才能轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓?RNA 分子

12、，這個過程稱為 轉(zhuǎn)錄后加工；72、RNA 的剪接一個基因的外顯子和內(nèi)含子都轉(zhuǎn)錄到一條原初轉(zhuǎn)錄物RNA 分子中，然后把內(nèi)含子切除而把外顯子連接起來，才能產(chǎn)生成熟的 RNA 分子，這個過程就叫做 RNA 剪接；73、中部核心結(jié)構(gòu)4 個 1012 堿基的保守序列，并構(gòu)成相應(yīng)的二級結(jié)構(gòu)；74、內(nèi)部引導(dǎo)序列內(nèi)含子中能與兩個剪接點加界序列配對的一段序列；75、染色體的倒位是由于同一條染色體上發(fā)生了兩次斷裂，產(chǎn)生的斷片顛倒180 度后重新連接造成的；76、翻譯在多種因子輔助下，核糖體結(jié)合 mRNA 模板，通過 tRNA 識別該 mRNA 的三聯(lián)體密碼子和轉(zhuǎn)移相應(yīng)氨基酸，進(jìn)而按照模板 mRNA 信息依次連續(xù)合

13、成蛋白質(zhì)肽鏈的過程；77、中心法則是指遺傳信息從 DNA 傳遞給 RNA，再從 RNA 傳遞給蛋白質(zhì)，即完成遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程。也可以從 DNA 傳遞給 DNA，即完成 DNA 的復(fù)制過程；78、結(jié)構(gòu)域分子量大的蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)?？梢员环指畛梢粋€或一個以上的球狀或纖維狀的區(qū)域，折疊的較為緊密，各行其功能，稱為結(jié)構(gòu)域；79、遺傳密碼能編碼蛋白質(zhì)氨基酸序列的基因中的核苷酸體系；80、密碼子的簡并性多個氨基酸具有一個以上的密碼子；81、密碼子的擺動性密碼子中的第三個堿基總是處在一個不穩(wěn)定的位置上，它與反密碼子的第一個堿基配對強(qiáng)度不如前兩個堿基，其結(jié)果使 tRNA 可以與一個以上的密碼子堿基配對

14、；82、密碼子的偏愛性多數(shù)氨基酸有一個以上的密碼子，但這些密碼子的使用頻率各不相同；83、分子伴侶能夠防止肽鏈錯誤折疊，能夠促進(jìn)肽鏈正確折疊的蛋白質(zhì)分子；84、蛋白質(zhì)靶向細(xì)胞的生命活動需要源源不斷的合成新的蛋白質(zhì)并精確地運輸?shù)剿鼈兗葱惺构δ艿牟课?，這個過程稱為蛋白質(zhì)的靶向；85、基因表達(dá)指基因通過轉(zhuǎn)錄和翻譯而產(chǎn)生其蛋白質(zhì)產(chǎn)物或轉(zhuǎn)錄后直接產(chǎn)生其RNA 產(chǎn)物的過程；86、誘導(dǎo)酶只有在培養(yǎng)基中存在它們的底物的時候形成的酶；87、組成酶無論培養(yǎng)基中有無它們的底物均能合成的酶；88、順式作用元件某些 DNA 序列不需要通過合成蛋白質(zhì)或 RNA，而直接對基因表達(dá)產(chǎn)生調(diào)控作用，這些具有調(diào)節(jié)功能的特定 DNA

15、 序列只能調(diào)控位于同一 DNA 分子或同一染色體上的有關(guān)基因的表達(dá)，如果該 DNA 序列發(fā)生突變不會改變其他染色體上的等位基因的表達(dá)，則這樣的調(diào)控序列稱為順式作用元件；89、反式作用因子一個基因產(chǎn)物，如蛋白質(zhì)或 RNA 如果對另一個基因的表達(dá)具有調(diào)控作用，則被稱為反式作用因子；90、D-環(huán)復(fù)制雙螺旋的兩條鏈并不同時進(jìn)行復(fù)制，輕鏈先開始復(fù)制，稍后重鏈再開始復(fù)制，當(dāng)復(fù)制沿輕鏈開始時，重鏈上產(chǎn)生了 D 環(huán)，隨環(huán)形輕鏈復(fù)制的進(jìn)行， D 環(huán)增大，重鏈后亦開始復(fù)制，最后兩條鏈完成復(fù)制形成兩條新的 DNA 又螺旋；91、操縱子是原核生物基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的主要形式，它是原核生物細(xì)胞 DNA 上的一段區(qū)域，由若干功

16、能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因和控制這些基因表達(dá)的原件組成的一個完整的連續(xù)的功能單位；92、誘導(dǎo)只有當(dāng)誘導(dǎo)物存在時，操縱子結(jié)構(gòu)基因才開始轉(zhuǎn)錄、翻譯出大量的酶，這一作用過程稱為誘導(dǎo)；93、誘導(dǎo)物產(chǎn)生誘導(dǎo)作用的小分子稱為誘導(dǎo)物；94、阻遏可阻遏操縱子是一種調(diào)節(jié)合成代謝的操縱子，當(dāng)存在足量的代謝合成物時，就可以關(guān)閉操縱子結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄，阻遏合成代謝所需要一系列酶的產(chǎn)生，這一作用稱為阻遏；95、阻遏物產(chǎn)生阻遏作用的小分子物質(zhì)；96、前導(dǎo)區(qū)位于操縱子基因和第一個結(jié)構(gòu)基因之間保證轉(zhuǎn)錄所必須的調(diào)控序列；97、衰減子在前道區(qū)內(nèi)能使轉(zhuǎn)錄終止的DNA 序列；98、衰減作用在前導(dǎo)區(qū)能具有終止或減弱轉(zhuǎn)錄的調(diào)控機(jī)制；99、時序調(diào)控基

17、因表達(dá)按一定的時間順序進(jìn)行調(diào)控的機(jī)制；100、順式剪接內(nèi)含子剪接一般都是發(fā)生在同一基因內(nèi)，切除內(nèi)含子，相鄰的外顯子彼此相連，這種剪接稱為順式剪接；101、反式剪接不同基因的外顯子剪接；102、正調(diào)控當(dāng)阻遏蛋白從操縱基因上脫離后，激活蛋白與啟動子結(jié)合以及和RNA 聚合酶的相互作用則幫助結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄起始，這就是正調(diào)控；103、負(fù)調(diào)控指阻遏蛋白與操縱基因的結(jié)合，阻礙了RNA 聚合酶對操縱子結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄； 二、 問答1、生物學(xué)的研究方向向哪兩個方面發(fā)展?人類基因組計劃最初是由誰提出的?它的首席執(zhí)行科學(xué)家是誰?答：宏觀：個體種群群落生態(tài)系統(tǒng)；微觀：個體系統(tǒng)器官組織細(xì)胞亞細(xì)胞分子；生物學(xué)現(xiàn)在的研究

18、方向主要是分子生物學(xué)和仿生學(xué)。人類基因組計劃最初是1985 年美國科學(xué)家提出來的，它的首席執(zhí)行科學(xué)家是 Watson；2、分子生物學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)研究的關(guān)系是什么?答： 醫(yī)藥科學(xué)事業(yè)的發(fā)展和生物學(xué)的發(fā)展是相互依賴與相互豐富的。分子生物在醫(yī)學(xué)和藥學(xué)各個領(lǐng)域中的滲透使醫(yī)藥科學(xué)進(jìn)入分子水平。分子生物學(xué)的發(fā)展和人類基因組的研究成果破解基因功能將解決大量醫(yī)藥科學(xué)的重大前沿課題，包括基因結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系，疾病發(fā)生機(jī)制，生育控制，腫瘤防治，臟器移植，新藥開發(fā)等。只有從分子水平深入研究，才能揭開生命的奧秘，為醫(yī)學(xué)理論，臨床實踐，新藥研究等開拓燦爛的前景；3、核酸的種類有哪兩種?DNA 的雙螺旋結(jié)構(gòu)是怎樣的?答：核

19、酸有 DNA 和 RNA 兩種類型；DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)的特點：兩條反相平行的多核苷酸鏈圍繞同一中心軸互繞；：堿基位于結(jié)構(gòu)的內(nèi)側(cè)，而親水的糖磷酸主鏈位于螺旋外側(cè)，通過磷酸二酯鍵相連，形成核酸的骨架；：堿基平面與軸垂直，糖環(huán)平面則與軸平行:；：兩條鏈皆為右手螺旋；：雙螺旋的直徑為 2nm，堿基堆積距離為 0.34nm，兩核酸之間的夾角是36 度，每對螺旋由 10 對堿基組成；：堿基按 AT、GC 配對互補(bǔ)，彼此以氫鍵相連系；：維持DNA 結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的力量主要是堿基堆積力；：雙螺旋結(jié)構(gòu)表面有兩條螺形凹溝，一大一??；4、決定 DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)的因素有哪些?答：主要是堿基堆積力，其次還有氫鍵、范德華力、

20、離子鍵；有利因素：氫鍵、堿基堆積力；不利因素：靜電斥力、堿基分子內(nèi)能；5、化學(xué)法(Maxam-Gilbert)和末端終止法(Sanger)進(jìn)行 DNA 測序的原理分別是什么?答：化學(xué)法(Maxam-Gilbert)：用多核苷酸激酶對待測 DNA 片段進(jìn)行 P 標(biāo)記，使其帶放射性；32：將樣品分成 4 份，分別加入硫酸二甲酯、甲酸、肼、NaCl 和肼，反應(yīng)后產(chǎn)生一套片段；：反應(yīng)后將其在同一塊凝膠板上電泳，電泳完畢后進(jìn)行放射性自顯影，從電泳圖譜上可直接讀出序列；硫酸二甲酯G;甲酸肼G、A;C、T；NaCl 和肼 C；末端終止法（Sanger）：將待測的DNA 加熱變性成單鏈，作為合成模板，并加入與

21、其5端互補(bǔ)的短鏈作為引物（引物的 5端用 P 標(biāo)記）；32：將樣品分成4 份，每一份中加入4 中脫氧核苷三磷酸（dNTP）以及一種雙脫氧核苷三磷酸（4 份中分別加入 ddATP、ddGTP、ddCTP 和 ddTTP），并加入 DNA聚合酶催化合成一系列不同長度的片段，每個片段在加入的那種雙脫氧核苷三磷酸除終止：合成的產(chǎn)物在同一塊凝膠板上進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳；6、原核生物和真核生物 RNA 的種類分別是什么?答：RNA 大體可以分為三類：mRNA、rRNA、tRNA；7、影響 DNA 的 T 值的因素是什么?影響 DNA 復(fù)性的因素是什么?核酸分子示交的種類有哪四種?m答：影響 DNA 的

22、T 值的因素有：DNA 的均一性；：GC 含量；：介質(zhì)中的離子強(qiáng)度（反比）；：堿m基的排列順序；影響 DNA 復(fù)性的因素有：DNA 的濃度；：陽離子濃度；：溫度；：DNA 序列的復(fù)雜性；：DNA片段的大?。怀Ｓ玫暮怂岱肿与s交技術(shù)有：原位雜交、斑點雜交、Southern 雜交、Northern 雜交；8、原核生物和真核生物的細(xì)胞周期分別包括哪些時期?答：原核生物的細(xì)胞周期包括：遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期。 真核生物的細(xì)胞周期包括：分裂間期（合成期）：G1 期、S 期、G2 期；分裂期：前期：染色質(zhì)變成染色體，核仁、核膜消失，紡錘體形成，染色體散亂排列；中期：著絲點都排列在赤道板上;后期:著絲

23、點分裂，染色體數(shù)目加倍，染色體向兩級移動；末期：染色體變回染色質(zhì)，核仁、核膜出現(xiàn)；和 G0：暫時離開細(xì)胞周期，停止細(xì)胞分裂，去執(zhí)行一定生物學(xué)功能的細(xì)胞所處的時期；9、反義核酸的種類有哪五種?答：反義 DNA、反義 RNA、肽核酸、核酶、脫氧核酶；10、染色質(zhì)分為哪兩種類型?構(gòu)成染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位是什么?根據(jù) DNA 復(fù)性動力學(xué)將 DNA 序列分為哪四種類型?答：染色質(zhì)分為常染色質(zhì)和異染色質(zhì)兩種；構(gòu)成染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位是核小體；根據(jù)復(fù)性動力學(xué)將DNA 序列分為單拷貝序列（非重復(fù)序列）、輕度重復(fù)序列、中度重復(fù)序列、 高度重復(fù)序列；11、一個 DNA 分子上必需的三種特異核苷酸序列是什么?答：

24、多個復(fù)制起始點 ； 一個著絲粒 ；兩個端粒；12、轉(zhuǎn)座子分為哪四種類型?它們的特點分別是什么?答：原核轉(zhuǎn)座子的類型有：IS兩端有 ITR，只編碼轉(zhuǎn)座酶；：類轉(zhuǎn)座子結(jié)構(gòu)同 IS，但不能獨立存在，僅作為復(fù)合轉(zhuǎn)座子的兩端原件；：復(fù)合轉(zhuǎn)座子兩端由 IS 或類 IS 構(gòu)成，可編碼抗性物質(zhì)；：TnA 轉(zhuǎn)座子家族兩端為 ITR，可編碼轉(zhuǎn)座酶、解離酶和抗性物質(zhì)；真核轉(zhuǎn)座子的類型有：轉(zhuǎn)座子-AC-Ds-植物中的激活解離因子；P 因子果蠅中父本因子，在 M雌 X P 雄中導(dǎo)致雜種不育；：逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子逆轉(zhuǎn)錄病毒、病毒超家族及非非病毒超家族；轉(zhuǎn)座子的共同特點有：兩端有末端反相重復(fù)序列；：轉(zhuǎn)座后靶位點重復(fù)是正向重復(fù)；：

25、編碼與轉(zhuǎn)座有關(guān)的蛋白；：可以在基因中移動；13、轉(zhuǎn)座子的機(jī)制有哪三種類型?復(fù)制轉(zhuǎn)位的轉(zhuǎn)座模型(I)是什么?答：轉(zhuǎn)座子的機(jī)制有：反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座；：切離轉(zhuǎn)位；：復(fù)制轉(zhuǎn)位；14、轉(zhuǎn)座子的特征和遺傳學(xué)效應(yīng)是什么?答：轉(zhuǎn)座子的遺傳學(xué)效應(yīng)：轉(zhuǎn)座引起插入突變；：插入位置上出現(xiàn)新的基因；：插入完成后，原位點保持原有轉(zhuǎn)座子；：轉(zhuǎn)座完成后，引起插入位點旁基因突變；：轉(zhuǎn)座子的切離（準(zhǔn)確切離與非準(zhǔn)確切離）；15、質(zhì)粒有哪幾種類型？質(zhì)粒復(fù)制方式有哪兩種?如何進(jìn)行質(zhì)粒復(fù)制控制？質(zhì)粒如何進(jìn)行轉(zhuǎn)移?答：1）質(zhì)粒的類型： F 質(zhì)粒 R 質(zhì)粒 col 質(zhì)粒 質(zhì)粒噬菌體 穿梭質(zhì)粒2）質(zhì)粒復(fù)制方式： 嚴(yán)緊型質(zhì)粒的復(fù)制 松弛型質(zhì)粒復(fù)制3）

26、質(zhì)粒復(fù)制控制：半保留復(fù)制4）質(zhì)粒如何進(jìn)行轉(zhuǎn)移：首先是供體細(xì)胞與受體細(xì)胞有效結(jié)合，形成供體和受體對；DNA 轉(zhuǎn)移的準(zhǔn)備，質(zhì)粒所編碼的一種蛋白質(zhì)與超螺旋 DNA 單鏈的缺口處的 5端結(jié)合，轉(zhuǎn)移過程開始，這個缺口處稱為轉(zhuǎn)移起始區(qū)；DNA 的轉(zhuǎn)移，DNA 是以線狀分子的形式進(jìn)行轉(zhuǎn)移，完成轉(zhuǎn)移后再形成環(huán)狀DNA；形成有復(fù)制功能的質(zhì)粒；16、遺傳重組分為哪四種類型？它們的特點分別是什么?答：是否需同源序列是否否否是否否否否是是異常重組未知17、什么是 Holliday 模型?用模型 Mesecson-Radding 說明同源重組的過程?答：1、Holliday 模型：受體雙鏈 DNA 斷裂：同源重組由能切

27、開兩條雙鏈DNA 的其中一條受體雙鏈 DNA 的核酸內(nèi)切酶啟動。這個切口在核 外切酶的作用下被擴(kuò)大成間隙。單鏈入侵形成 D 環(huán)：擴(kuò)大成間隙產(chǎn)生 3單鏈端，這個 3游離端攻擊另一條供體雙鏈 DNA 的單鏈同源區(qū)域，這稱單鏈入侵。異源雙鏈 DNA 形成時產(chǎn)生一個 D 環(huán)，即供體雙鏈中的一條鏈被置換，D 環(huán)隨著 DNA 修復(fù)合成而延伸，以 3端引物產(chǎn)生雙鏈 DNA。最終，D 環(huán)大到足以對應(yīng)于受體染色單體上的整個缺口長度。當(dāng)突出的單鏈接觸到缺口的遠(yuǎn)端，互補(bǔ)的鏈序列復(fù)性，于是缺口的兩端都有異源雙鏈 DNA，而缺口本身則被單鏈 D 環(huán)補(bǔ)上。缺口區(qū)域修復(fù)：缺口區(qū)域雙鏈的完整性可以被以左邊的3端作為引物的修復(fù)

28、合成系統(tǒng)所修復(fù)。分支遷移：分支遷移把這種結(jié)構(gòu)變?yōu)橐粋€有著兩個重組位點的分子。2、Mesecson-Radding 模型：同源聯(lián)會的兩個 DNA 分子，其中僅有一個 DNA 分子單鏈出現(xiàn)切口；：切口處的 5端逐步解鏈，而 3端在 DNA 聚合酶的作用下向前延伸，進(jìn)一步置換出5端解離的單鏈；：被置換的單鏈侵入到與其聯(lián)會的另一條 DNA 分子之中，與該 DNA 的互補(bǔ)鏈形成堿基配對，原有的互補(bǔ)鏈被置換出來，形成泡狀的單鏈，隨后被切除；：參與重組的同源染色體之間開始僅有一條單鏈聯(lián)接，通過鏈的扭曲與旋轉(zhuǎn)，形成兩條單鏈交叉的Holliday 結(jié)構(gòu)；：Holliday 結(jié)構(gòu)發(fā)生分支遷移，擴(kuò)展到異源雙鏈區(qū)；：

29、Holliday 結(jié)構(gòu)中間體進(jìn)行切割，形成兩個獨立的 DNA 分子；18、RecB、C、D 蛋白、RecA 蛋白、RuvA、B、C 的功能分別是什么？答：RecBCD 蛋白功能： 核酸酶活性； 解旋酶活性； ATP 酶活性RecA 蛋白功能： 具有 NTP 酶活性； 能結(jié)合單鏈 DNA 或雙鏈 DNARuvA 的功能： 與單鏈 DNA 分子親和力高，能識別Holliday 連接點的結(jié)構(gòu)，在交換點處與所有4 條鏈結(jié)合，形成兩四聚體，將 DNA 像三明治一樣夾住，同時促進(jìn) RuvB 的結(jié)合。RuvB 功能：與雙鏈 DNA 分子親和力高，依賴與 DNA 分子的 ATP酶活性同時具有解旋酶活性。Ruv

30、C 的功能： RuvC 是一種核酸內(nèi)切酶，以二聚體形式特異地結(jié)合Holliday 中間體，在重組中誘發(fā)中間體拆分，一常見的四核甘酸序列 5-（A/T）TT（G/C）-3 提供了剪接位點19、在基因敲除技術(shù)中，如何進(jìn)行正篩選和負(fù)篩選？答：（1）獲得目的基因的同源片段，將此DNA 片段克隆島一般的質(zhì)粒載體中。（2）從重組質(zhì)粒中切除目的基因的大部分同源DNA 序列，只留部分序列在線性制粒載體的兩端。（3）將新霉素抗性基因克隆到帶有目的基因同源序列的線性質(zhì)粒中。（4）在目的基因同源序列的外側(cè)線性化重組質(zhì)粒載體，引入皰疹病毒熊苷激酶。（5）將此質(zhì)粒載體導(dǎo)入細(xì)胞后在含有新霉素、9-鳥苷酸的培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選

31、：未整合成的細(xì)菌在新霉素培養(yǎng)基中不能生存，在含9-鳥苷酸的培養(yǎng)基中能生存；同源重組的細(xì)菌在含新霉素的培養(yǎng)基中能生存，在含9-鳥苷酸的培養(yǎng)基中能生存；非同源重組的細(xì)菌在含新霉素的培養(yǎng)基中能生存，在含9-鳥苷酸的培養(yǎng)基中不能生存。20、原核生物的 DNA 聚合酶分為哪三種類型？ 它們的功能分別是什么？答：原核生物的 DNA 聚合酶分為：DNA 聚合酶（pol ）切除 RNA 引物和在損傷修復(fù)中起作用；：DNA 聚合酶（pol ）與 I 相似，在損傷修復(fù)中起作用；：DNA 聚合酶 (pol ) 兩個活性中心單獨存在時活性低，故加入亞基，聚合酶使復(fù)制合成的進(jìn)度更快；21、真核生物的 DNA 聚合酶分為

32、哪幾種類型？DNA 聚合酶 、 的功能分別是什么？ 答：真核生物 DNA 聚合酶：DNA 聚合酶功能DNA 復(fù)制：合成先導(dǎo)鏈線粒體 DNA 的復(fù)制未知：結(jié)構(gòu)相似于聚合酶DNA 聚合酶22、以大腸桿菌為例，說明原核生物 DNA 的復(fù)制過程？答：DNA 復(fù)制原點的保守序列和相關(guān)的調(diào)控序列結(jié)合，形成起始復(fù)合物（ATP）發(fā)生局部解鏈，形成開放性的復(fù)合物（DnaC 介導(dǎo)下，DnaB 與之結(jié)合進(jìn)一步解鏈，SSB 與單鏈結(jié)合）預(yù)引發(fā)物（使引發(fā)酶與模板單鏈結(jié)合）合成RNA 引物;DNA 聚合酶 III：從 RNA 引物 3端延伸右端復(fù)制叉的先導(dǎo)鏈，置換出后隨連的模板，當(dāng)后隨連模板上出現(xiàn)RNA 引物信號時，RN

33、A 引物隨之合成，向相反方向延伸后隨連DNA，形成左向復(fù)制叉，當(dāng)左向復(fù)制叉的后隨連模板出現(xiàn) RNA 引物信號時 RNA 隨之合成，后隨連也和合成，先導(dǎo)鏈連續(xù)合成，后隨連合成岡崎片段，DNA 聚合酶 I 切除 RNA 引物，并同時補(bǔ)平缺口，DNA 連接酶連接切口，形成兩個 DNA 分子。23、以 SV 說明真核生物 DNA 的復(fù)制過程？40答：SV 病毒（侵入）病毒細(xì)胞（病毒編碼T 抗原）與病毒 DNA 復(fù)制原點結(jié)合，T 抗原又解旋酶活性使得 DNA40局部解鏈，宿主細(xì)胞產(chǎn)生的復(fù)制蛋白因子 A 與單鏈結(jié)合，使 DNA 保持單鏈狀態(tài)，引發(fā)酶與 DNA 聚合酶 d 的復(fù)合物與單鏈的 DNA 結(jié)合，由

34、引發(fā)酶來合成一段RNA 引物（RPC）聚合酶沿引物末端延伸合成一段DNA 短鏈，PCNA 與RPC 結(jié)合，將引發(fā)酶與 DNA 聚合酶置換下來，DNA 聚合酶和 PCNA/RPC 復(fù)合物結(jié)合，增強(qiáng) DNA 聚合酶的行進(jìn)能力，連續(xù)合成前導(dǎo)鏈，置換出的后隨連，模板出現(xiàn)RNA 引物信號，引發(fā)酶與 DNA 聚合酶復(fù)合物與 RPC 不斷地與后隨連模板結(jié)合，合成一段有一段的不連續(xù)的后隨連，DNA 聚合酶與 DNA 連接酶的作用下 RNA 引物被切割降解、補(bǔ)平、連接岡崎片段，隨著復(fù)制叉向前延伸，拓?fù)洚悩?gòu)酶不斷地解除前端的超螺旋最終將兩個 DNA 分子分開。24、什么是染色體的末端復(fù)制問題？如何避免染色體復(fù)制的

35、末端引縮現(xiàn)象？答：染色體復(fù)制的末端問題：線性 DNA 在進(jìn)行復(fù)制的時候 DNA 聚合酶不具有從頭合成的能力，也不具有從 3端到 5端合成的能力，需用 RNA 作為引物，當(dāng) 5端的引物被切除后，出現(xiàn)切口無法填補(bǔ)，出現(xiàn)末端變短；避免方法：染色體末端的端粒酶可以解決末端隱藏問題，染色體末端在端粒酶的催化下形成端粒結(jié)構(gòu)，其功能是完成染色體末端復(fù)制，防止染色體 DNA 降解、末端融合、缺失和非正常重組而影響細(xì)胞分裂，維持染色體的穩(wěn)定完整。25、避免 DNA 復(fù)制末端引縮現(xiàn)象的機(jī)制有哪幾種？它們的內(nèi)容分別是什么？答：26、根據(jù)對遺傳信息的改變將基因突變分為哪四種類型？答：根據(jù)對遺傳信息的改變將基因突變分：

36、同義突變指突變沒有引起編碼氨基酸變化、錯義突變指堿基序列的改變引起表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)氨基酸序列的改變、無義突變指某個堿基的改變使編碼某種氨基酸的密碼子變?yōu)榻K止密碼子、移碼突變；27、誘發(fā)突變的化學(xué)誘變劑有哪四種類型？答：誘發(fā)突變的化學(xué)誘變劑有：堿基類似物、氨基嘌呤、堿基修飾劑、DNA 插入劑；（1）堿基類似物：是一類化學(xué)機(jī)構(gòu)與 DNA 中正常堿基十 分相似的化合物。（2）氨基嘌呤：也是堿基類似物。（3）堿基修飾劑：通過直接修飾堿基的化學(xué)結(jié)構(gòu)，造成堿基變化而導(dǎo)致誘變，如亞硝酸鹽、羥胺、烷化劑等。（4）DNA 插入劑：又稱插入突變劑，包括原黃素、丫啶橙和ICR 的復(fù)合物。28、如何利用 PCR 技術(shù)進(jìn)

37、行定向誘變？答：用一對寡聚核苷酸為引物，引導(dǎo) DNA 聚合酶在兩個引物所識別的序列之間，它的互補(bǔ)鏈上進(jìn)行DNA 合成，經(jīng)模板變性，引物復(fù)性和引物延伸在多步反應(yīng)的多次循環(huán)，使兩引物間的DNA 片段呈指數(shù)增加。29、轉(zhuǎn)錄的基本特征是什么？答：轉(zhuǎn)錄是以四種喝湯核苷三磷酸（NTP）為原料；：轉(zhuǎn)錄是由 DNA 指導(dǎo)下的 RNA 聚合酶催化完成；：在一個轉(zhuǎn)錄區(qū)內(nèi)，只有一條 DNA 單鏈作為模板；：高度的忠實性；：高度的進(jìn)行性； ：調(diào)控區(qū)；轉(zhuǎn)錄的基本特征是：轉(zhuǎn)錄是以四種核糖核苷三磷酸為原料；：轉(zhuǎn)錄是由 DNA 指導(dǎo)下的聚合酶催化完成的,RNA 聚合酶能自己啟動一條新的核苷酸鏈的合成，并在末端逐次延長核苷酸鏈

38、，起始位的核苷酸一般為嘌呤核苷三磷酸，而且一直保持；：轉(zhuǎn)錄時，在一個轉(zhuǎn)錄區(qū)內(nèi)，只有一條 DNA 單鏈作為模板，這條單鏈稱為模板鏈，也叫反義鏈；而與這條模板鏈相對的另一條互補(bǔ) DNA 單鏈稱為編碼鏈，也叫正義鏈；：高度的忠實性：轉(zhuǎn)錄的忠實性是指一個特定的基因轉(zhuǎn)錄具有固定的起點和固定的終點，而且被轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的堿基序列，嚴(yán)格遵守堿基互補(bǔ)原則；：高度的進(jìn)行性：正常的轉(zhuǎn)錄一旦進(jìn)行舊不會中途停止；：調(diào)控區(qū)：調(diào)控轉(zhuǎn)錄的區(qū)域不在轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的序列中，而是在轉(zhuǎn)錄開始位點的上游；30、原核生物 RNA 聚合酶的組成是什么?各亞基的作用分別是什么？答：是由多個亞基組成的；組成是：核心酶+ 因子核心酶用以轉(zhuǎn)錄延長。 因子用

39、以識別啟動子（百度原文：原核生物的RNA 聚合酶由多個亞基組成:2稱為核心酶,轉(zhuǎn)錄延長只需核心酶即可。2 稱為全酶,轉(zhuǎn)錄起始前需要 亞基辨認(rèn)起始點,所以全酶是轉(zhuǎn)錄起始必需的 。）31、真核生物 RNA 的聚合酶有哪三種類型？它們的功能分別是什么？答：真核生物 RNA 的聚合酶的類型分為 RNA 聚合酶、RNA 聚合酶 2、RNA 聚合酶；它們的相應(yīng)功能：RNA 聚合酶存在于核仁中，轉(zhuǎn)錄 rRNA 順序；RNA 聚合酶存在于核質(zhì)中，轉(zhuǎn)錄大多數(shù)基因，需要 “TATA”框；RNA 聚合酶存在于核質(zhì)中，轉(zhuǎn)錄很少幾種基因如32、鑒定 RNA 聚合酶在 DNA 上的結(jié)合位點的方法有哪三種？答：DNase

40、法、足跡法、硫酸二甲酯法；tRNA 基因如 5SrRNA 基因；33、原核生物啟動子的結(jié)構(gòu)可包括哪三部分？終止子有哪兩種類型？ 因子的功能是什么？答：原核生物啟動子的結(jié)構(gòu)可包括：CAP、-10 序列、-35 序列；終止子：不依賴于 因子的終止子；：依賴于 因子的終止子； 因子的功能：作為一種蛋白輔助因子幫助實現(xiàn)轉(zhuǎn)錄的終止；原核生物啟動子的結(jié)構(gòu)：CAP-cAMP 結(jié)合位點、RNA 聚合酶介入位點；終止子類型：一類是不依賴蛋白輔助因子而能實現(xiàn)終止作用；另一類是依賴蛋白輔助因子才能實現(xiàn)終止作用；因子的功能是作為一種蛋白輔助因子幫助實現(xiàn)轉(zhuǎn)錄的終止；34、真核生物 RNA 聚合酶的啟動子可由哪幾部分組成

41、？增強(qiáng)子的性質(zhì)有哪些？見P161、162答：真核生物 RNA 聚合酶的啟動子可由起始子、TATA框、CAAT框、增強(qiáng)子四部分組成；增強(qiáng)子的性質(zhì)：增強(qiáng)效應(yīng)十分明顯；：增強(qiáng)效應(yīng)和其位置和取向無關(guān)；：大多為重復(fù)序列；：其增強(qiáng)效應(yīng)有嚴(yán)密的組織性和細(xì)胞特異性；：沒有基因?qū)Ｒ恍?；：許多增強(qiáng)子還受外部信號的調(diào)控；由四部分組成 ：起始子 、 TATA框 、 CAAT 框 、 增強(qiáng)子：增強(qiáng)子的性質(zhì)：（1）增強(qiáng)效應(yīng)十分明顯；（2）增強(qiáng)效應(yīng)與其位置和取向無關(guān)；(3) 大多為重復(fù)序列；（4）其增強(qiáng)效應(yīng)有嚴(yán)密的組織性和細(xì)胞特異性；（5）沒有基因?qū)Ｒ恍?；（6）許多增強(qiáng)子還受外部信號的調(diào)控； 35、試述原核生物的轉(zhuǎn)錄過程

42、。見 P165答：在原核生物中，當(dāng)亞基與核心酶形成全酶后，全酶與非特異性 DNA 的結(jié)合能力顯著下降，相應(yīng)的全酶與特異性 DNA 的結(jié)合能力顯著增強(qiáng)，當(dāng)亞基發(fā)現(xiàn)起始位點時，全酶就與-35 序列結(jié)合形成封閉的啟動子復(fù)合物，再與-10 序列牢固結(jié)合，使-10 序列與起始位點發(fā)生局部解鏈，形成開放式的啟動子復(fù)合物，在此復(fù)合物中 RNA 聚合酶的起始位點和延長位點被相應(yīng)的核苷三磷酸充滿，在亞基的催化下形成RNA 的第一個磷酸二酯鍵，由 DNA 模板、RNA 聚合酶、新生的 RNA 鏈構(gòu)成三元復(fù)合物，RNA 聚合酶向前移動一個核苷酸的距離，在形成低二個磷酸二酯鍵，當(dāng)三元復(fù)合物中有6-9 個核苷酸合成后，

43、就形成穩(wěn)定的三元復(fù)合物，因子從全酶上解離下來，使三元復(fù)合物中核心酶與 DNA 的親和力下降到非特異性結(jié)合水平，這樣的三元復(fù)合物極易在 DNA 鏈上滑動，使核心酶繼續(xù)合成 RNA 而不脫落，當(dāng) RNA 鏈到達(dá)終止信號時，停止轉(zhuǎn)錄，RNA 聚合酶從模板上掉下來實現(xiàn)轉(zhuǎn)錄終止；當(dāng)因子與核心酶形成全酶后，全酶與非特異性序列的結(jié)合力顯著下降，全酶開始尋找啟動子。當(dāng)因子發(fā)現(xiàn)起始位點時，全酶就與序列結(jié)合，形成一個閉鏈的啟動子復(fù)合物。由于聚合酶全酶的分子量很大，其一端可以到達(dá)序列，由于某種機(jī)制，整個分子向序列轉(zhuǎn)移并與之牢固結(jié)合。然后序列及起始位點處發(fā)生局部解鏈，這時全酶和啟動子形成的復(fù)合物稱為開鏈?zhǔn)綇?fù)合物。閉鏈

44、式啟動子復(fù)合物和開鏈?zhǔn)綇?fù)合物均為二元復(fù)合物，在開鏈?zhǔn)蕉獜?fù)合物中，聚合酶上的起始點和延長位點被相應(yīng)的核苷酸前體充滿，在亞基的催化下形成的第一個磷酸二酯鍵，這時，由聚合酶、DNA 模板和新生的 RNA 鏈所組成的復(fù)合物稱為三元復(fù)合物。三元復(fù)合物形成并有 69 個核苷酸被合成，形成穩(wěn)定的酶-DNA-RNA 三元復(fù)合物，因子從全酶上解離下來，致使三元復(fù)合物中核心酶與 DNA的親和力下降到非特異性結(jié)合水平以下，這時三元復(fù)合物既容易在 DNA 鏈上移動，又因新生 RNA 鏈參與而形成三角關(guān)系，使核心酶繼續(xù)合成而不致中途脫落，直到轉(zhuǎn)錄到終止序列而停止轉(zhuǎn)錄；36、真核生物合成的轉(zhuǎn)錄因子分哪三種類型？答：基本

45、因子、上游因子、誘導(dǎo)因子；37、RNA 生物合成的抑制劑有哪三種類型？見P167答：嘌呤和密度類似物，形成核苷酸類似物而抑制RNA 的合成；：通過與 DNA 結(jié)合而改變模板功能；：與 RNA 聚合酶結(jié)合而影響其活力；38、原核生物和真核生物轉(zhuǎn)錄后加工的主要內(nèi)容分別是什么？見P181答：原核生物轉(zhuǎn)錄后加工一般情況下不加工；5端加帽3端加尾剪接內(nèi)含子特定部位核苷酸修飾;1、由多順反子前體剪切成單一的 tRNA 前體； 1、切除 5 3多余的核苷酸序列；2、切除 53端的多余序列；3、在 3端加 CCA-OH；4、特定部位的核苷酸修飾；4、特定部位的核苷酸修飾；rRNA1、由多順反子前體剪切成單一的

46、順反子前體； 1、切除 5 3多余的核苷酸序列;2、切除 5 3多余的核苷酸序列；3、特定部位的核苷酸修飾；2、剪接去除內(nèi)含子;3、特定部位的核苷酸修飾;39、試述 rRNA、tRNA 和 mRNA 轉(zhuǎn)錄后加工的過程。見 P181答：40、IF 、IF 、IF ，EF-T 、EF-T 、EF-G，RF 、RF 、RF 的功能分別是什么？見 45 題1答：23us123原核生物的起始因子功能IF1IF2在 30S 亞基存在時有很強(qiáng)的 GTP 活性aseIF3原核生物的延伸因子EF-Tu能幫助 Aacyl-tRNA 進(jìn)入核蛋白體 A 位點 EF-G催化肽基-tRNA 從 A 位移動到 P 位原核生

47、物的終止釋放因子RF3對 RF1 和 RF2 的活性有促進(jìn)作用41、起始密碼子和終止密碼子分別是什么？答：起始密碼子: 蛋白質(zhì)翻譯過程中被核糖體識別并與起始 tRNA(原核生物為甲酰甲硫氨酸 tRNA，真核生物是甲硫氨酸 tRNA)結(jié)合而作為肽鏈起始合成的信使核糖核酸(mRNA)三聯(lián)體堿基序列。大部分情況下為AUG，原核生物中有時為 GUG 等。終止密碼子：蛋白質(zhì)翻譯過程中終止肽鏈合成的信使核糖核酸 (mRNA)的三聯(lián)體堿基序列。一般情況下為UAA、UAG 和 UGA，它們不編碼氨基酸42、蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)有哪三種？見生物化學(xué)答：-螺旋、-折疊、-轉(zhuǎn)角；43、密碼子有哪些性質(zhì)？它的起始密碼和終

48、止密碼分別是什么？見P185、183、187答：密碼子的性質(zhì)：遺傳密碼的簡并性和擺動性；：遺傳密碼的通用性；：遺傳密碼的偏愛性；：線粒體密碼的特殊性；起始密碼：終止密碼：通用終止密碼：UAA、UAG、UGA；線粒體遺傳密碼終止密碼：AGA、AGG、UAA、UAG；44、原核生物和真核生物 mRNA 的特點分別是什么？核糖體的主要功能是什么？見P188、189答：原核生物 mRNA 的特點：轉(zhuǎn)錄和翻譯同時進(jìn)行；：S-D 序列與 16SrRNA 結(jié)合，翻譯起始點；：多順反子編碼多蛋白；真核生物 mRNA 的特點：有帽子結(jié)構(gòu)而無S-D 序列；：有PolyA 尾巴；：轉(zhuǎn)錄和翻譯具有時空性；：單順反子;

49、核糖體的主要功能：執(zhí)行蛋白質(zhì)的合成；原核生物的 mRNA 的特點：沒有前體;3端一般沒有 polyA；原核細(xì)胞的 mRNA 分子可以有一個或多個 ORF（開放閱讀框），可以編碼一個或幾個肽鏈。真核生物的 mRNA 特點：以一個相對分子量較大的前體 RNA 出現(xiàn)在核內(nèi)，只有成熟的、相對分子質(zhì)量明顯減小并經(jīng)修飾的 mRNA 才能參與蛋白質(zhì)的合成；絕大多數(shù)真核細(xì)胞的 mRNA 的 3端有 polyA，5端有帽子；真核細(xì)胞的 mRNA 只有一個開放閱讀框，一個真核細(xì)胞的mRNA 只能編碼一條肽鏈。核糖體的主要功能：執(zhí)行蛋白質(zhì)的合成。 （P11-13）45、原核生物的起始因子、延伸因子、終止釋放因子分別

50、有哪些？它們的功能分別是怎樣的？見P195、179、201答：功能IF1IF2在 30S 亞基存在時有很強(qiáng)的 GTP 活性IF3EF-TuEF-TsEF-G原核生物的終止釋放因子RF1RF2RF3對 RF1 和 RF2 的活性有促進(jìn)作用46、試述原核生物的蛋白質(zhì)合成過程？見 P194、195、196、197、201、202 答：肽鏈合成的起始：多肽鏈合成開始時， Met 和 tRNAi 在特定的氨基酰 -tRNA 合成酶催化下，生成fMet-tRNAi ；起始因子 IF2 與一分子 GTP 以及一分子 fMet-tRNAi 生成三元復(fù)合物；這種復(fù)合物再與 mRNA 以及MetMet30S 亞基

51、結(jié)合，生成 30S 起始復(fù)合物；mRNA 借助 S-D 序列與 16S rRNA 的 3-ACCUCCUUA 保守序列互補(bǔ)，使起始密碼子處于能對準(zhǔn)大亞基 P 位點的位置；只有在 mRNA 的起始密碼子正確定位后，大亞基才與 30S 起始復(fù)合物結(jié)合；GTP 水解釋放的能量改變了 30S 亞基和 50S 亞基的構(gòu)象，使兩亞基結(jié)合成 70S 的核蛋白體起始復(fù)合物（當(dāng) 50 亞基被裝配時，所有起始因子被釋放此時需要GTP 的水解來提供能量）；在此復(fù)合物中，fMet-tRNAi 已經(jīng)結(jié)合到 P 位點，MetA 位點也準(zhǔn)備接納能與第二個密碼子配對的氨酰基-tRNA（P 位點提供了特殊的分子環(huán)境，只有起始的

52、氨基酰-tRNA可以進(jìn)入，而參與延伸的氨基酰-tRNA 不能進(jìn)入）；肽鏈的延伸：當(dāng) 70S 起始復(fù)合物形成后，由于 GTP 的水解和 IF-2的釋放同時也觸發(fā)了延伸的開始；GTP 水解和 IF-2 的釋放導(dǎo)致 fMet-tRNAi 產(chǎn)生構(gòu)象變化，是核蛋白體的肽基轉(zhuǎn)移Met酶活性位點能與 fMet-tRNAi 的 3端以及與之連接的甲硫氨酸發(fā)生相互作用，肽鏈的延伸也隨之開始了；在 GTPMet和延伸因子 EF-T 的催化下，mRNA 上第二個密碼子對應(yīng)的氨基酰-tRNA 結(jié)合到核蛋白體小亞基的 A 位；此時，在肽?；D(zhuǎn)移酶的催化下，哎 P 位上的氨基酰的 C-末端與 A 位上氨基酰-tRNA 的

53、氨基之間形成肽鍵；在其后的轉(zhuǎn)位過程中，由于 tRNA 的離開而空出 P 位，新生的肽?；?tRNA 即從 A 位移至 P 位，核蛋白體沿著 mRNA 移動一個密碼子的距離，剛好使其進(jìn)入A 位，如此反復(fù)循環(huán)，肽鏈不斷延伸；肽鏈合成的終止：肽鏈合成過程中，當(dāng)mRNA 上的終止密碼進(jìn)入核蛋白體 A 位時，釋放因子就與A 位點的終止密碼子結(jié)合，這種結(jié)合改變了肽?；D(zhuǎn)移酶活性，使肽?；D(zhuǎn)移到水分子上；P 位點上空載的 tRNA 以及新生成的肽鏈即從核蛋白體上釋放下來，隨后，核蛋白體再與 mRNA分離，核蛋白體自身也水解成大小兩個亞基（核蛋白體的解離需要消耗一分子 GTP）；核蛋白體循環(huán)多核蛋白體：Met

54、+tRNA 氨基酰 tRNA 合成酶 （tRNA 、GTP、起始因子IF2）三元復(fù)合物 IF1、IF2、mRNA、30S 亞基 30S起始復(fù)合物，釋放 IF3IF1、IF2 水解 GTP 改變 30S 亞基構(gòu)象、使 mRNA 的起始密碼子對準(zhǔn)大亞基的位 50S 大亞基與 30S 小亞基結(jié)合形成 70S 核糖體，釋放 IF1、IF2 RNA 結(jié)合到 P 位、A 位點準(zhǔn)備接受與第二個密碼子配對的氨基酰tRNA核糖體的肽基轉(zhuǎn)移酶活性位點與 tRNA 的 3端及 Met 相互作用，肽鍵延伸隨之開始在 EF-Tu、EF-Ts 的作用下形成氨基酰-tRNA，進(jìn)入 A 位點 肽基轉(zhuǎn)移酶 形成一個肽鍵EF-G 使肽基 tRNA 從 A 位到 P 位，A 位再接受下一個氨基酰-tRNA，再形成肽鍵進(jìn)行循環(huán)當(dāng) mRNA 的終止密碼子進(jìn)入 A 位時，釋放因子就與終止密碼結(jié)合，改變肽基轉(zhuǎn)移酶的活性將肽基轉(zhuǎn)移到水分子上P 位空載的 tRNA 及新生的肽鍵從核糖體中釋放出來 （筆記）47、hsp70 和 hsp60 的功能分別是什么？見 P210答：hsp70 結(jié)合尚未離開