第十四章 新藥藥物動(dòng)力學(xué)研究

1、新藥研究開發(fā)中藥物動(dòng)力學(xué)的作用新藥研究開發(fā)中藥物動(dòng)力學(xué)的作用1、臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究： 通過(guò)動(dòng)物動(dòng)物體內(nèi)和體外的研究方法，揭示藥物在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，獲得藥物的基本藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，闡明藥物的吸收、分布、代謝和排泄的過(guò)程和特點(diǎn)。2、臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究： 旨在闡明藥物在人體人體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。 第一節(jié)第一節(jié) 新藥藥物動(dòng)力學(xué)研究的內(nèi)容新藥藥物動(dòng)力學(xué)研究的內(nèi)容新藥臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究的新藥臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究的基本原則基本原則： （1）試驗(yàn)?zāi)康拿鞔_；（2）試驗(yàn)設(shè)計(jì)合理；（3）分析方法可靠；（4）所得參數(shù)全面，滿足評(píng)價(jià)要求；（5）對(duì)試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)進(jìn)行綜合分析與評(píng)價(jià)；（6）具體問(wèn)題

2、具體分析。新藥臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究的新藥臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究的基本要求基本要求試驗(yàn)藥品試驗(yàn)藥品 質(zhì)量穩(wěn)定且與藥效學(xué)或毒理學(xué)研究所用試驗(yàn)藥品一致。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 一般采用成年和健康動(dòng)物。常用的有犬、小鼠、大鼠、兔和豚鼠等。 選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本原則：首選動(dòng)物應(yīng)與藥效學(xué)或毒理學(xué)研究一致；創(chuàng)新藥應(yīng)選用兩種動(dòng)物或兩種以上的動(dòng)物，其中一種為嚙齒類動(dòng)物，另一種為非嚙齒類動(dòng)物，其他類別藥物，可選用一種動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；口服給藥不宜選用兔等食草類動(dòng)物。 3、給藥途徑和給藥劑量、給藥途徑和給藥劑量 應(yīng)盡可能與臨床用藥一致。藥動(dòng)學(xué)研究至少應(yīng)設(shè)三個(gè)劑量組，高劑量一般接近于最大耐受量，中、小劑量根據(jù)動(dòng)物有效劑量的上下限范

3、圍選取。以考察藥代過(guò)程是否線性和解釋藥效和毒性。 4、取樣時(shí)間點(diǎn)安排、取樣時(shí)間點(diǎn)安排 吸收相：23個(gè)采樣點(diǎn) Cmax附近：至少3個(gè)采樣點(diǎn) 消除相：46個(gè)采樣點(diǎn) 采樣時(shí)間至少應(yīng)持續(xù)到35個(gè)半衰期，或持續(xù)到血藥濃度為 Cmax的1/101/20。5、藥時(shí)曲線數(shù)據(jù)處理、藥時(shí)曲線數(shù)據(jù)處理 要求提供的基本藥動(dòng)學(xué)參數(shù)有： 靜注給藥的t1/2、V、 AUC和Cl等； 血管外給藥的ka、Cmax、tmax、 t1/2 和AUC等。 水溶性藥物：應(yīng)提供血管外給藥的絕對(duì)生物利用度。 緩、控釋制劑：應(yīng)根據(jù)多次給藥穩(wěn)態(tài)時(shí)完整給藥間隔的血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)，提供穩(wěn)態(tài)時(shí)達(dá)峰時(shí)間tmax 、穩(wěn)態(tài)峰濃度等。臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究

4、內(nèi)容臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究?jī)?nèi)容n血藥濃度血藥濃度- -時(shí)間曲線時(shí)間曲線n吸收吸收n分布分布n血漿蛋白結(jié)合率血漿蛋白結(jié)合率n藥物生物轉(zhuǎn)化藥物生物轉(zhuǎn)化n藥物排泄藥物排泄n對(duì)藥物代謝酶活性的影響對(duì)藥物代謝酶活性的影響血藥濃度血藥濃度- -時(shí)間曲線時(shí)間曲線1.劑量的選擇：在有效安全范圍內(nèi)，要選擇三種劑量劑量的選擇：在有效安全范圍內(nèi)，要選擇三種劑量2.2.給藥后取血時(shí)間應(yīng)注意到下列給藥后取血時(shí)間應(yīng)注意到下列三個(gè)相三個(gè)相的時(shí)間點(diǎn)分布。血管外給藥時(shí)的時(shí)間點(diǎn)分布。血管外給藥時(shí)應(yīng)體現(xiàn)吸收相、平衡相和消除相。實(shí)驗(yàn)觀察期不小于應(yīng)體現(xiàn)吸收相、平衡相和消除相。實(shí)驗(yàn)觀察期不小于3 3個(gè)半衰期。個(gè)半衰期。3.3.口服給藥口服

5、給藥, ,一般在給藥前禁食一般在給藥前禁食12h12h。研究口服給藥。研究口服給藥, ,不宜選用兔和反芻不宜選用兔和反芻動(dòng)物如羊等。動(dòng)物如羊等。4.4.盡量從同一動(dòng)物多次采樣以盡量從同一動(dòng)物多次采樣以避免避免采用多只動(dòng)物采用多只動(dòng)物合并樣品合并樣品。n動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)n在體實(shí)驗(yàn)（原位灌流）在體實(shí)驗(yàn)（原位灌流）藥物的吸收藥物的吸收離體實(shí)驗(yàn)離體實(shí)驗(yàn)外翻腸囊外翻腸囊Ussing擴(kuò)散池?cái)U(kuò)散池Caco-2細(xì)胞模型吸收預(yù)測(cè)細(xì)胞模型吸收預(yù)測(cè)藥物的分布藥物的分布n選用大鼠或小鼠做分布試驗(yàn)較為方便。選用大鼠或小鼠做分布試驗(yàn)較為方便。n選擇劑量后、至少測(cè)定藥物在心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖選擇劑量后、至少

6、測(cè)定藥物在心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖腺、腦、脂肪、骨髓肌等組織的分布。特別注意藥物在靶器官腺、腦、脂肪、骨髓肌等組織的分布。特別注意藥物在靶器官/ /靶組靶組織織( (包括藥效學(xué)與毒理學(xué)包括藥效學(xué)與毒理學(xué)) )的分布。的分布。n以血藥濃度以血藥濃度- -時(shí)間曲線作參考時(shí)間曲線作參考, ,選選2-32-3個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別代表分布相、平衡個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別代表分布相、平衡相和消除相的藥物。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的組織相和消除相的藥物。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的組織, ,必須有至少必須有至少5 5只動(dòng)物的數(shù)據(jù)。只動(dòng)物的數(shù)據(jù)。n擬通過(guò)改進(jìn)劑型而增加組織分布的藥物，應(yīng)該提供改進(jìn)劑型與原劑擬通過(guò)改進(jìn)劑型而增加組織分布的藥物，應(yīng)該提供改

7、進(jìn)劑型與原劑型比較的組織分布研究，以支持其立題依據(jù)。型比較的組織分布研究，以支持其立題依據(jù)。藥物與血漿蛋白的結(jié)合藥物與血漿蛋白的結(jié)合n研究藥物與血漿蛋白結(jié)合的方法包括平衡透析法、研究藥物與血漿蛋白結(jié)合的方法包括平衡透析法、超濾法、超速離心法、凝膠過(guò)濾法等超濾法、超速離心法、凝膠過(guò)濾法等注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)n藥物與血漿蛋白結(jié)合程度受很多因素影響藥物與血漿蛋白結(jié)合程度受很多因素影響, ,如血漿如血漿pHpH、血漿濃度、藥、血漿濃度、藥物濃度等。血漿物濃度等。血漿pHpH應(yīng)固定為應(yīng)固定為7.4,7.4,至少選擇至少選擇三個(gè)血藥濃度三個(gè)血藥濃度( (包括有效濃包括有效濃度在內(nèi)度在內(nèi)) )進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

8、。n必須證明藥物與半透膜本身有無(wú)結(jié)合必須證明藥物與半透膜本身有無(wú)結(jié)合, ,并做對(duì)照予以校正。并做對(duì)照予以校正。 n可被血漿轉(zhuǎn)化的藥物可被血漿轉(zhuǎn)化的藥物, ,應(yīng)加入少量酶抑制劑應(yīng)加入少量酶抑制劑, ,以終止其轉(zhuǎn)化。以終止其轉(zhuǎn)化。n建議進(jìn)行比較試驗(yàn)建議進(jìn)行比較試驗(yàn)n對(duì)于蛋白結(jié)合率大于對(duì)于蛋白結(jié)合率大于90%90%以上的藥物，建議開展體外藥物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合試以上的藥物，建議開展體外藥物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合試驗(yàn)。驗(yàn)。藥物的代謝藥物的代謝考察轉(zhuǎn)化類型、代謝途徑、代謝物結(jié)構(gòu)及量、代謝酶等考察轉(zhuǎn)化類型、代謝途徑、代謝物結(jié)構(gòu)及量、代謝酶等對(duì)藥物代謝酶的影響對(duì)藥物代謝酶的影響觀察藥物對(duì)細(xì)胞色素觀察藥物對(duì)細(xì)胞色素P450P450同

9、功酶的誘導(dǎo)或抑制作用；同功酶的誘導(dǎo)或抑制作用；應(yīng)用肝微粒體技術(shù)，了解代謝相互作用或種族差異。應(yīng)用肝微粒體技術(shù)，了解代謝相互作用或種族差異。 藥物的排泄藥物的排泄確定藥物的排泄途經(jīng)、排泄速率和各排泄途經(jīng)確定藥物的排泄途經(jīng)、排泄速率和各排泄途經(jīng)的排泄量。的排泄量。藥物排泄試驗(yàn)一般選用小鼠或大鼠進(jìn)行。藥物排泄試驗(yàn)一般選用小鼠或大鼠進(jìn)行。 新藥臨床藥物動(dòng)力學(xué)的基本內(nèi)容與要求新藥臨床藥物動(dòng)力學(xué)的基本內(nèi)容與要求n臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究的臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究的GCPGCP要求要求n受試藥物的要求受試藥物的要求n受試者的選擇受試者的選擇n劑量的確定劑量的確定n藥時(shí)曲線的數(shù)據(jù)的測(cè)定藥時(shí)曲線的數(shù)據(jù)的測(cè)定n藥時(shí)曲線的數(shù)據(jù)

10、的處理藥時(shí)曲線的數(shù)據(jù)的處理n新藥臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究報(bào)告新藥臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究報(bào)告1.符合符合GCP要求要求 試驗(yàn)的方案設(shè)計(jì)與試驗(yàn)過(guò)程中，均應(yīng)注意對(duì)受試者的保護(hù)。2倫理學(xué)考慮倫理學(xué)考慮 按照GCP原則制訂試驗(yàn)方案并經(jīng)倫理委員會(huì)討論批準(zhǔn)，受試者必須自愿參加試驗(yàn)，并簽訂書面知情同意書。3.受試藥物受試藥物 應(yīng)為經(jīng)國(guó)家藥檢部門檢驗(yàn)合格，符合臨床研究用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的中試放大產(chǎn)品。新藥臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究的基本要求新藥臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究的基本要求4.受試者的選擇受試者的選擇 期臨床藥物動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)選擇健康志愿者。年齡以1845歲為宜。體重符合標(biāo)準(zhǔn)。不吸煙、不嗜酒。5.劑量確定劑量確定 一般選用低、中、高三種

11、劑量。高劑量組劑量必須接近或等于人最大耐受的劑量。 6.藥時(shí)曲線的數(shù)據(jù)測(cè)定藥時(shí)曲線的數(shù)據(jù)測(cè)定 單劑量和多劑量試驗(yàn)時(shí)，均確定12例以上受試者。 多劑量試驗(yàn)時(shí)，根據(jù)給藥次數(shù)不同而確定不同的服藥方法，具體參見教材和輔導(dǎo)材料。取血時(shí)間點(diǎn)可參見臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究的相關(guān)內(nèi)容。7.7.藥時(shí)曲線數(shù)據(jù)處理藥時(shí)曲線數(shù)據(jù)處理 通過(guò)單次給藥測(cè)得的各受試者血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)，需獲得的主要藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)包括：ka、tmax、Cmax、AUC、V、k、t12和Cl等。從尿藥濃度估算藥物經(jīng)腎排泄的速率和總量。通過(guò)多次給藥的穩(wěn)態(tài)血藥濃度-時(shí)間曲線數(shù)據(jù)，求得主要藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)包括：tmax、t1/2、Cl、 、 、 穩(wěn)態(tài)血藥濃

12、度-時(shí)間曲線下面積AUCss及DF等。 ssCmaxCssminssC新藥藥物動(dòng)力學(xué)研究中生物樣本的測(cè)定方法新藥藥物動(dòng)力學(xué)研究中生物樣本的測(cè)定方法生物樣品的特點(diǎn)：* 取樣量少* 藥物濃度低* 干擾物質(zhì)多* 個(gè)體差異大生物樣本的測(cè)定方法：生物樣本的測(cè)定方法：（1）色譜法：氣相色譜法 高效液相色譜法 色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等；（2）免疫學(xué)方法：放射免疫分析法 酶免疫分析法 熒光免疫分析法等（3）微生物學(xué)方法 測(cè)定方法注意點(diǎn)測(cè)定方法注意點(diǎn)n根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件, ,首選首選HPLCHPLC、GCGC等分離方法等分離方法, ,以及紫外、熒光等測(cè)定以及紫外、熒光等測(cè)定方法。方法。n用放射性核素標(biāo)記藥物用

13、放射性核素標(biāo)記藥物, ,在用前要進(jìn)行純度檢查在用前要進(jìn)行純度檢查, ,放化純度要放化純度要95%95%。定位標(biāo)記要指明標(biāo)記位置。定位標(biāo)記要指明標(biāo)記位置。n放射免疫法和酶標(biāo)免疫法具有一定特異性放射免疫法和酶標(biāo)免疫法具有一定特異性, ,靈敏度高靈敏度高, ,但原藥與其代但原藥與其代謝產(chǎn)物或內(nèi)源性物質(zhì)常有交叉反應(yīng)謝產(chǎn)物或內(nèi)源性物質(zhì)常有交叉反應(yīng), ,需提供證據(jù)需提供證據(jù), ,說(shuō)明特異性。說(shuō)明特異性。n生物檢定法常能反映藥效學(xué)本質(zhì)生物檢定法常能反映藥效學(xué)本質(zhì), ,但一般特異性較差但一般特異性較差, ,最好用特異性最好用特異性高的方法予以對(duì)比、證明高的方法予以對(duì)比、證明, ,否則應(yīng)加以說(shuō)明。否則應(yīng)加以說(shuō)明

14、。生物樣本測(cè)定方法的方法學(xué)驗(yàn)證指標(biāo)生物樣本測(cè)定方法的方法學(xué)驗(yàn)證指標(biāo)1、精密度2、準(zhǔn)確度3、特異性4、樣品穩(wěn)定性5、回收率6、標(biāo)準(zhǔn)曲線和定量范圍7、定量下限目前用于生物樣品測(cè)定的部分儀器目前用于生物樣品測(cè)定的部分儀器填充柱超臨界流體色譜儀微量毛細(xì)HPLC系統(tǒng)分析純化LC-MS系統(tǒng)GC-MS系統(tǒng)正電子發(fā)射斷層顯像正電子發(fā)射斷層顯像(Positron Emission Tomography,PET)基本原理：利用回旋加速器加速帶電粒子(如質(zhì)子、氘核)轟擊靶核發(fā)生核反應(yīng),產(chǎn)生正電子放射性核素, 通過(guò)有機(jī)合成或無(wú)機(jī)反應(yīng)制備各種正電子顯像劑。顯像劑進(jìn)入體內(nèi)后定位于靶器官,在衰變過(guò)程中發(fā)射帶正電荷的電子。這

15、種正電子與人體組織中的負(fù)電子相互作用, 產(chǎn)生能量相等、方向相反的兩個(gè)高能光子, 兩個(gè)光子被PET儀相對(duì)的兩個(gè)探頭同時(shí)檢測(cè)到，這被稱為“符合事件”，表明兩個(gè)探頭連線上存在著被正電子核素標(biāo)記的藥物?！胺鲜录钡亩嗌賱t由藥物在局部的密集程度決定。PET能對(duì)體內(nèi)放射性標(biāo)記的藥物的分布進(jìn)行準(zhǔn)確的定位和定量，再經(jīng)過(guò)計(jì)算機(jī)重建，即可獲得三維的分布圖像。18F-FDG（18氟脫氧葡萄糖）顯影氟脫氧葡萄糖）顯影PET的優(yōu)點(diǎn)：的優(yōu)點(diǎn)：1、小動(dòng)物PET顯像的方法和結(jié)果可類推到人體研究，縮短了新化合物進(jìn)入臨床應(yīng)用的時(shí)間。2、可以在同一動(dòng)物身上進(jìn)行無(wú)損傷的反復(fù)實(shí)驗(yàn)，減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用，并且可以對(duì)同一只動(dòng)物在不同時(shí)間點(diǎn)

16、進(jìn)行研究，消除種屬差異。3、PET 顯像可以對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行動(dòng)態(tài)掃描，能獲得動(dòng)態(tài)的數(shù)據(jù)資料。 4、可對(duì)整個(gè)動(dòng)物進(jìn)行有效的測(cè)量和在體外快速的掃描，從而對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程進(jìn)行縱向研究，可以觀察動(dòng)物體內(nèi)疾病的發(fā)展?fàn)顩r以及藥物對(duì)疾病的治療效果，快速得出更加明確的結(jié)論。PET的局限性：的局限性：1、PET設(shè)備較昂貴,試驗(yàn)費(fèi)用高。2、PET用示蹤劑品種有限，而且標(biāo)記過(guò)程操作困難，或某些藥物的示蹤劑難以標(biāo)記。3、有些標(biāo)記化合物在體內(nèi)不穩(wěn)定易分解, PET 圖像難以區(qū)分標(biāo)記藥物與代謝物。計(jì)算機(jī)在藥物動(dòng)力學(xué)研究中的應(yīng)用計(jì)算機(jī)在藥物動(dòng)力學(xué)研究中的應(yīng)用主要軟件介紹主要軟件介紹3P87/97軟件：國(guó)內(nèi)應(yīng)用較廣，可處理各種用

17、藥途徑的線性和非線性藥動(dòng)學(xué)模型，給出有關(guān)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)及各種圖表的詳細(xì)結(jié)果。 DAS軟件：是在NDST-21基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)，在微軟視窗下運(yùn)行的專業(yè)統(tǒng)計(jì)軟件包。DAS可完成臨床前藥學(xué)、藥理以及臨床新藥研究關(guān)系密切的各種統(tǒng)計(jì)計(jì)算， WinNonlin軟件：國(guó)外最常用的藥動(dòng)學(xué)軟件，被認(rèn)為可用于幾乎所有的藥動(dòng)、藥效及非房室模型的分析。NDST軟件：可進(jìn)行與臨床前藥理及臨床新藥研究關(guān)系密切的各種統(tǒng)計(jì)計(jì)算。PKBP-N1軟件： 計(jì)算方法主要有：最優(yōu)化方法中的單純形法、解矛盾方程組的正交化方法與二分法、樣條插值法、優(yōu)選法和逐次直線回歸法等。NONMEN軟件：主要用于群體藥動(dòng)學(xué)的參數(shù)估算及分析，是群體藥動(dòng)學(xué)分析

18、的主流軟件。第二節(jié)第二節(jié) 生物利用度與生物等效性生物利用度與生物等效性一、生物利用度與生物等效性的概念二、生物利用度和生物等效性研究在新藥研究中的作用三、生物等效性評(píng)價(jià)方法四、生物利用度研究方法五、生物等效性統(tǒng)計(jì)分析一、生物利用度與生物等效性的概念一、生物利用度與生物等效性的概念n生物利用度（生物利用度（Bioavailability, BA）是指劑型中的藥物被吸收進(jìn)入體循環(huán)的速度(rate of bioavailability, RBA)與程度（extent of bioavailability, EBA）。n包括包括絕對(duì)生物利用度絕對(duì)生物利用度和和相對(duì)生物利用度相對(duì)生物利用度絕對(duì)生物利用度

19、絕對(duì)生物利用度（absolute bioavailability）是藥物吸收進(jìn)入體循環(huán)的量與給藥劑量的比值，是以靜脈給藥制劑（通常認(rèn)為靜脈給藥制劑生物利用度為100%）為參比制劑獲得的藥物吸收進(jìn)入體循環(huán)的相對(duì)量。相對(duì)生物利用度相對(duì)生物利用度（relative bioavailability）是以其他非靜脈途徑給藥的制劑（如片劑和口服溶液）為參比制劑獲得的藥物吸收進(jìn)入體循環(huán)的相對(duì)量，是同一種藥物不同制劑之間比較吸收程度與速度而得到的生物利用度。n計(jì)算公式：%100TRRTDAUCDAUCF%100TivivTDAUCDAUCF相對(duì)生物利用度 絕對(duì)生物利用度n生物等效性生物等效性（Bioequiv

20、alence, BE）：是指一種藥物的不同制劑在相同試驗(yàn)條件下，給以相同劑量，反映其吸收程度和速度的主要藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 n藥學(xué)等效性藥學(xué)等效性（pharmaceutical equivalence）：如果兩制劑含等量的相同活性成分，具有相同的劑型，符合同樣的或可比較的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，則可以認(rèn)為它們是藥學(xué)等效的。 生物等效性與藥學(xué)等效性的區(qū)別n藥學(xué)等效性沒有反映藥物制劑在體內(nèi)的情況。藥學(xué)等效性沒有反映藥物制劑在體內(nèi)的情況。n生物等效性的研究生物等效性的研究, ,反映了藥物制劑的生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)反映了藥物制劑的生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn), ,對(duì)臨床療效提供直接的證明。對(duì)臨床療效提供直接的證明。二、生物利用度與生

21、物等效性研究在新藥二、生物利用度與生物等效性研究在新藥研究中的作用研究中的作用n新藥研究階段：選擇合適給藥途徑、確定用藥方案；考察處方、工藝對(duì)生物利用度的影響n開發(fā)新劑型或仿制：與原研生物等效n藥品上市后：處方變更保證生物等效要求進(jìn)行生物等效性研究的藥物要求進(jìn)行生物等效性研究的藥物 n新開發(fā)的藥物產(chǎn)品新開發(fā)的藥物產(chǎn)品, ,尤其是口服制劑。尤其是口服制劑。n改變劑型的產(chǎn)品。改變劑型的產(chǎn)品。 n改變處方與工藝的產(chǎn)品改變處方與工藝的產(chǎn)品( (仿制產(chǎn)品仿制產(chǎn)品) )。有必要進(jìn)行生物等效性研究的藥物有必要進(jìn)行生物等效性研究的藥物n預(yù)防與治療嚴(yán)重疾病的藥物預(yù)防與治療嚴(yán)重疾病的藥物n治療指數(shù)窄的藥物：治療指

22、數(shù)是毒性濃度與有效濃度治療指數(shù)窄的藥物：治療指數(shù)是毒性濃度與有效濃度的比值的比值n水溶性低的藥物：水溶解度低于水溶性低的藥物：水溶解度低于5mg/ml5mg/mln溶解速度慢的藥物溶解速度慢的藥物n有胃腸道中生物轉(zhuǎn)化或在胃腸中不穩(wěn)定的藥物有胃腸道中生物轉(zhuǎn)化或在胃腸中不穩(wěn)定的藥物 n有特殊理化性質(zhì)的藥物如多晶型藥物有特殊理化性質(zhì)的藥物如多晶型藥物, ,溶劑化物、粒溶劑化物、粒度影響吸收的藥物度影響吸收的藥物n賦形劑比例高的產(chǎn)品賦形劑比例高的產(chǎn)品三、生物等效性評(píng)價(jià)方法三、生物等效性評(píng)價(jià)方法SFDA推薦的方法從高到低排列為：*藥物動(dòng)力學(xué)研究方法*藥效動(dòng)力學(xué)研究方法*臨床比較試驗(yàn)方法*體外研究方法體內(nèi)

23、方法1、藥物動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)方法、藥物動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)方法 采用峰濃度Cmax、達(dá)峰時(shí)間tmax和血藥濃度-時(shí)間曲線下面積AUC全面評(píng)價(jià)。2、藥效動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)方法、藥效動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)方法 采用明確的可分級(jí)定量的人體藥效學(xué)指標(biāo)通過(guò)效應(yīng)-時(shí)間曲線（Effect-Time curve）與參比制劑比較來(lái)確定生物等效性。 3、臨床隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)評(píng)價(jià)方法、臨床隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)評(píng)價(jià)方法 給予患者兩種（或多種）藥物制劑后，通過(guò)觀察藥物的療效、不良反應(yīng)與毒性之間的差異進(jìn)行評(píng)價(jià)（100例）。4、體外研究、體外研究 鑒于體外結(jié)果并不能完全代替體內(nèi)行為，一般不提倡用體外的方法來(lái)確定生物等效性。根據(jù)BCS分類，可用體外溶出替代一些藥物的生物等

24、效性試驗(yàn)。BCS分類系統(tǒng)I型型高溶解性、高通透性高溶解性、高通透性21 型型低溶解性、高通透性低溶解性、高通透性10 型型高溶解性、低通透性高溶解性、低通透性24 型型低溶解性、低通透性低溶解性、低通透性6 n溶解性：溶解性：37 ，pH 17.5，85%；Caco-2 細(xì)胞滲透Papp 酒石酸美托洛爾 （33 10-6cm/s）q透膜性差： rule of fiven1）含5個(gè)以上氫鍵供體（-OH/-NH）n2)含10個(gè)以上氫鍵受體（N/O）n3）LogP5 正辛醇/水pH7.4n4) Mw 500尤其是1000以上四、生物利用度的研究方法四、生物利用度的研究方法n血藥濃度法n尿藥數(shù)據(jù)法n藥

25、理效應(yīng)法（一）血藥濃度法（一）血藥濃度法 藥物的吸收量應(yīng)等于劑量乘以吸收分?jǐn)?shù)f，即 制劑的生物利用度F為00CdtKVfX%100)()(TRRRTTRTXKVAUCXKVAUCffF（二）尿藥數(shù)據(jù)法（二）尿藥數(shù)據(jù)法 如果藥物大部分（70%）經(jīng)尿排泄，而且藥物在尿中的累積排泄量與藥物吸收總量的比值保持不變，則可用藥物在尿中排泄的數(shù)據(jù)估算生物利用度。標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品）試劑試劑劑量劑量/()(uuXXF （三）藥理效應(yīng)法（三）藥理效應(yīng)法 在某些情況下由于分析方法精密度不夠，重現(xiàn)性差或其它原因，無(wú)法進(jìn)行血藥濃度測(cè)定，可以用急性藥理作用急性藥理作用（如瞳孔放大、心率或血壓）作為藥物生物利用度測(cè)定的指標(biāo)。五

26、、生物利用度五、生物利用度( (生物等效性生物等效性) )的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) n研究單位研究單位n分析方法的指標(biāo)與要求分析方法的指標(biāo)與要求n研究對(duì)象研究對(duì)象n受試制劑與參比制劑受試制劑與參比制劑n試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)設(shè)計(jì)n洗凈期洗凈期n給藥劑量與方法給藥劑量與方法n采樣點(diǎn)的確定采樣點(diǎn)的確定n結(jié)果處理結(jié)果處理1研究單位的基本條件研究單位的基本條件 n要求研究單位應(yīng)有良好的醫(yī)療監(jiān)護(hù)條件，良好的分析測(cè)試條件和良好的數(shù)據(jù)分析處理?xiàng)l件。n參加生物利用度研究的人員，應(yīng)包括臨床藥物動(dòng)力學(xué)研究人員、臨床醫(yī)師、分析檢驗(yàn)技術(shù)人員和護(hù)理人員等。2供試品的基本要求供試品的基本要求 n供試品的臨床前研究工作已經(jīng)完成并通過(guò)嚴(yán)格

27、的臨床前評(píng)審，獲得了國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局的臨床試驗(yàn)批文。n供試品應(yīng)當(dāng)在符合GMP條件的車間制備，制備過(guò)程應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格執(zhí)行GMP的要求，應(yīng)符合國(guó)家藥品監(jiān)督管理局審定的藥品標(biāo)準(zhǔn)要求并有質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告。3參比制劑的選擇參比制劑的選擇 n參比制劑選擇方法： 絕對(duì)生物利用度研究選用在我國(guó)已獲得上市許可的相同藥物靜脈注射劑作為參比制劑。 相對(duì)生物利用度研究時(shí)，選用在我國(guó)已獲得上市許可的相同藥物相同劑型的主導(dǎo)產(chǎn)品作為參比制劑；若為完成特定研究目的，可選用相同藥物的其它藥劑學(xué)性質(zhì)相近的上市劑型作為參比制劑，這類參比制劑亦應(yīng)為上市主導(dǎo)產(chǎn)品。4檢測(cè)方法的選擇與評(píng)價(jià)檢測(cè)方法的選擇與評(píng)價(jià) n生物樣品中藥物的分離測(cè)定應(yīng)選靈

28、敏度高、專屬性強(qiáng)、精密度好、準(zhǔn)確度高的分析方法。n生物樣品分析方法確證完成后方可測(cè)試未知樣品。每個(gè)未知樣品一般測(cè)定一次，必要時(shí)可進(jìn)行復(fù)測(cè)。每批生物樣品測(cè)定時(shí)應(yīng)建立新的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并隨行測(cè)定高、中、低三個(gè)濃度的質(zhì)控樣品。質(zhì)控樣品測(cè)定結(jié)果的偏差一般應(yīng)小于20。 5對(duì)受試對(duì)象的要求對(duì)受試對(duì)象的要求n 臨床生物等效性評(píng)價(jià)中的生物利用度研究，受試對(duì)象是健康人。年齡一般1840歲； 性別以男性為宜；體重應(yīng)具標(biāo)準(zhǔn)體重或接近標(biāo)準(zhǔn)體重，一般要求為標(biāo)準(zhǔn)體重（110）范圍內(nèi)，或體重指數(shù)BMI 在2024范圍內(nèi)；試驗(yàn)前兩周內(nèi)未服用其它藥物，且受試期間忌煙、酒。6.試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)設(shè)計(jì) n盡量避免生物因素與給藥方法影響，成為

29、生物利用度試驗(yàn)應(yīng)注意的重要問(wèn)題。生物利用度試驗(yàn)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，主要目的就是為了消除個(gè)體差異與試驗(yàn)周期對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。n生物利用度的試驗(yàn)設(shè)計(jì)要求采用隨機(jī)交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法。7.洗凈期洗凈期n試驗(yàn)中設(shè)置洗凈期是為了避免前一次所用藥物對(duì)后一次試驗(yàn)產(chǎn)生影響。n洗凈期由受試藥物t1/2 而定。洗凈期一般不小于7個(gè) t1/2， 洗凈期通常為1周或2周，半衰期長(zhǎng)的藥物需要更長(zhǎng)的洗凈期。8.給藥劑量與方法給藥劑量與方法n劑量為臨床常用量，最大不得超過(guò)最大安全劑量。當(dāng)采用非臨床治療劑量時(shí)，應(yīng)提供劑量設(shè)置的依據(jù)。通常，供試品與參比制劑的給藥劑量應(yīng)該一致。n普通制劑的生物利用度試驗(yàn)一般采用單劑量給藥方式。 9.采樣點(diǎn)的

30、確定采樣點(diǎn)的確定n包括吸收相、平衡相及消除相。采樣持續(xù)到受試藥原形或其活性代謝物3倍t1/2后，或持續(xù)采樣至血藥濃度為Cmax的1/10以后。n應(yīng)用尿藥法時(shí)，要求收集受試藥原形或其代謝物7倍t1/2后的全部尿樣。10.試驗(yàn)中的醫(yī)學(xué)監(jiān)護(hù)試驗(yàn)中的醫(yī)學(xué)監(jiān)護(hù) n新藥的生物利用度試驗(yàn)方案需經(jīng)倫理委員會(huì)審批通過(guò)方可進(jìn)行試驗(yàn)。生物利用度試驗(yàn)工作在一期臨床試驗(yàn)的觀察室進(jìn)行。受試者應(yīng)得到醫(yī)護(hù)人員的監(jiān)護(hù)。受試期間發(fā)生的任何不良反應(yīng)，均應(yīng)及時(shí)處理和記錄，并通報(bào)新藥開發(fā)研究單位和藥品監(jiān)督管理部門。11.結(jié)果處理方法結(jié)果處理方法n應(yīng)提供如下資料：q各受試者經(jīng)時(shí)過(guò)程的血藥濃度數(shù)據(jù)、平均值及標(biāo)準(zhǔn)差，并繪制血藥濃度時(shí)間曲線。

31、q生物利用度評(píng)價(jià)所需參數(shù)，如藥時(shí)曲線下面積AUC0t 或 AUC0。q峰值血藥濃度Cmax、達(dá)峰時(shí)間tmax，均為實(shí)測(cè)值。q生物利用度F。q其它藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，如MRT、t1/2等。q盡量能提供用血藥濃度時(shí)間數(shù)據(jù)擬合得到的血藥濃度隨時(shí)間變化的規(guī)律及其相關(guān)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。 生物利用度試驗(yàn)的注意點(diǎn)生物利用度試驗(yàn)的注意點(diǎn)n嚴(yán)格挑選受試者、設(shè)立嚴(yán)格的試驗(yàn)設(shè)計(jì)來(lái)減少或消除生物學(xué)因素與給藥方法對(duì)生物利用度測(cè)定的影響。n采用嚴(yán)格的自身對(duì)照、隨機(jī)分組的試驗(yàn)設(shè)計(jì)。n無(wú)特殊情況，采用空腹給藥；控制飲水量和飲用水水溫以減少水量和水溫對(duì)藥物吸收的影響。n受試者應(yīng)無(wú)煙酒嗜好，試驗(yàn)過(guò)程應(yīng)禁煙、酒、茶和咖啡。避免受試者參加劇烈運(yùn)動(dòng)

32、或靜臥。n對(duì)血藥濃度的分析檢測(cè)方法嚴(yán)格要求。等效性判斷標(biāo)準(zhǔn)n血藥濃度-時(shí)間曲線下面積AUC與藥物吸收總量成正比, 代表藥物吸收的程度。n達(dá)峰時(shí)tmax表示吸收的速度。n峰濃度Cmax是與治療效果及毒性水平有關(guān)參數(shù),也與藥物吸收數(shù)量有關(guān)。六、生物等效性統(tǒng)計(jì)分析六、生物等效性統(tǒng)計(jì)分析n生物等效性的統(tǒng)計(jì)采用將受試藥和參比藥比較, 從其樣本均數(shù), 推斷總體均數(shù)是否等效。n統(tǒng)計(jì)分析多采用方差分析、雙單側(cè)檢驗(yàn)、置信區(qū)間、貝葉斯分析等。n將AUC和Cmax兩參數(shù), 經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后, 以多因素方差分析(ANOVA) 進(jìn)行判斷, 比較制劑間, 周期間和個(gè)體間的差異, 如P0.05 說(shuō)明無(wú)差異性。生物等效性評(píng)價(jià)的檢

33、驗(yàn)方法 以雙向單側(cè)t檢驗(yàn)和計(jì)算(12)%可信區(qū)間(90%可信區(qū)間)進(jìn)行判斷。 雙向單側(cè)t檢驗(yàn), 設(shè)定的無(wú)效假設(shè)是兩藥不等效, 受試藥在參比藥一定范圍之外, 為兩個(gè)單側(cè)t檢驗(yàn)。當(dāng)P7t1/2。3. 采血點(diǎn): 達(dá)Css后, 采取三次谷濃度血樣和末次給藥后的系統(tǒng)采樣。4. 進(jìn)行血藥濃度分析并繪制血藥濃度-時(shí)間曲線。5. 藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)估算: AUC、Cmax、Cmin、tmax、Css、 Css 、t1/2、DF和F值。6. 進(jìn)行生物等效性、峰谷波動(dòng)及Css等的評(píng)估。ssCmaxssCmin多劑量達(dá)穩(wěn)態(tài)試驗(yàn)應(yīng)提供的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)：多劑量達(dá)穩(wěn)態(tài)試驗(yàn)應(yīng)提供的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)： （1）各受試者受試制劑與參比

34、制劑的血藥濃度-時(shí)間曲線。（2）各受試者在血藥濃度達(dá)穩(wěn)態(tài)后末次給藥的血藥濃度-時(shí)間曲線。tmax、AUC0、DF、AUC0、F、MRT、t1/2、 、 等。 4.食物影響試驗(yàn)食物影響試驗(yàn) 食物對(duì)緩、控釋制劑的影響較大。食物影響試驗(yàn)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)是23交叉設(shè)計(jì)。所測(cè)定的指標(biāo)有AUC和Cmax參比制劑為緩、控釋制劑時(shí)：參比制劑為緩、控釋制劑時(shí)：供試品與參比制劑的AUC0t 或AUC0比值的90%可信限在80% 125%置信區(qū)間內(nèi)；供試品與參比制劑的Cmax或比值的90%可信限在70% 143%置信區(qū)間內(nèi)；供試品與參比制劑的AUC 0t或AUC 0 、Cmax或 的雙單側(cè)t檢驗(yàn)均得到P0.05的結(jié)果，t

35、1 與t2 同時(shí)成立；tmax經(jīng)非參數(shù)法檢驗(yàn)無(wú)差異，則認(rèn)為供試品與參比制劑為生物等效制劑ssCmax)(1t)(1t等效性檢驗(yàn)標(biāo)等效性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)參比制劑為普通制劑時(shí)：參比制劑為普通制劑時(shí)：供試品與參比制劑的AUC0比值的90%可信限在80%125%置信區(qū)間內(nèi)，雙向單側(cè)t檢驗(yàn)P0.05，t1 ，t2 則認(rèn)為供試品與參比制劑為吸收程度上的生物等效制劑；Cmax ,DF 和 有顯著降低，tmax有顯著延長(zhǎng)，表明供試品具有緩/控釋特征。ssCmax)(1t)(1t（一）釋放度試驗(yàn)（一）釋放度試驗(yàn)釋放度：釋放度：指一定劑型的藥物在規(guī)定介質(zhì)中釋放的速度和程度。通常緩、控釋制劑的釋放度測(cè)定至少需設(shè)置3個(gè)時(shí)間點(diǎn)。第一點(diǎn)的取樣時(shí)間為0.52小時(shí)，用于考察藥物是否有突釋。第二點(diǎn)為在累計(jì)釋放量約為50左右取樣，用于考察釋藥特性及藥物是否平穩(wěn)釋放。最后取樣在累計(jì)釋放量至少達(dá)80或釋放達(dá)到平臺(tái)期時(shí)進(jìn)行，用于考察藥物釋放是否基本完全。緩釋與控釋制劑的質(zhì)量評(píng)價(jià)緩釋