植物生理綜合實(shí)驗(yàn)答案解析

1、綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)1礦質(zhì)元素對植物的作用（紅色的問題見后附照片）1、本次實(shí)驗(yàn)名稱？分為哪兩部分？誘導(dǎo)產(chǎn)生NR，增強(qiáng)其活性2、NR有何特性？何謂誘導(dǎo)酶？NR為誘導(dǎo)酶，不供應(yīng)硝酸根之前，不會產(chǎn)生。誘導(dǎo)酶3、針對上述特性實(shí)驗(yàn)中采取何措施？“真空滲入法”在步驟中何處體現(xiàn)？措施：提前一天用硝酸鹽葉面噴施，增強(qiáng)活性體現(xiàn)：反應(yīng)時，將三角瓶放在真空干燥器中，用真空泵抽氣放氣，直至葉片 沉入瓶底4、實(shí)驗(yàn)中N0 3-所起作用？誘導(dǎo)產(chǎn)生NR，增強(qiáng)其活性5、何謂磺胺比色法？亞硝態(tài)氮在酸性溶液中與對氨基苯磺酸形成重氮鹽，再與a-萘胺定量生成紅色偶氮化合物，在520nm有最大吸收峰.6、NR活力以什么表示？步驟中何處有關(guān)鍵作用

2、？用產(chǎn)生的亞硝態(tài)氮的量表示。關(guān)鍵作用就是 21頁的注意事項(xiàng)。7、標(biāo)準(zhǔn)曲線操作順序如何？兩人如何配合？制備標(biāo)準(zhǔn)溶液、制備顯色液、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。要默契地配和，一人在做實(shí)驗(yàn) 的同時，另一人要負(fù)責(zé)記錄。8、為何標(biāo)準(zhǔn)溶液用NaNO 2溶液不用NaNO 3 ?標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度是多少？因?yàn)橄跛徇€原酶活性可由產(chǎn)生亞硝態(tài)氮的量表示，而不是用NO3-表示，所以用NaNO2表示。標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度是1微克每毫升。9、標(biāo)準(zhǔn)溶液和誰在什么條件下顯色多久？比色波長是多少？在硝酸還原酶活性的測定實(shí)驗(yàn)中，三角瓶 30度下置于黑暗處（恒溫箱、水浴 鍋等）保溫30min，在520nm波長下比色；硝態(tài)氮含量測定實(shí)驗(yàn)中，常溫下放 置20min

3、，再加入8%NaoH 溶液9.5ml，搖勻冷卻至室溫，在 410nm 波長下 比色10、如何獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線或回歸方程？通過使用標(biāo)準(zhǔn)溶液得到的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，確立好橫豎坐標(biāo)運(yùn)用電腦軟件制作。11、取樣應(yīng)注意什么？第一、儀器不能混用，嚴(yán)格按照組別及標(biāo)簽按要求使用；第二、材料（葉片） 要用濕紗布擦拭干凈，用蒸餾水沖洗，濾紙（或干紗布）吸干。12、植物材料如何凈化？采回來的材料（葉片）要用濕紗布擦拭干凈，用蒸餾水沖洗，濾紙（或干紗 布）吸干。13、葉圓片如何獲得，需要多少個葉圓片？14、如何確保葉片等重？為何要等重？每份重量是多少？15、兩個三角瓶中為何一個加入 H2O，另一個加KNO 3 ？16、三角瓶中為

4、何放入PH7.5緩沖液？17、為何要用真空泵抽氣？使用中應(yīng)注意什么？真空泵抽氣影響NO2-的浸出量。 防止液態(tài)水進(jìn)入泵腔18、抽氣時有何現(xiàn)象發(fā)生？抽氣到何時（何種程度）為止？（1）因?yàn)榉磸?fù)抽氣放氣，溶液可滲入葉組織取代葉片空氣， 葉片便沉于溶液底部，酶促反應(yīng)可以相對完全的進(jìn)行（2）抽氣到葉片沉淀19、抽氣后三角瓶置于何處？什么條件？多長時間？顯色反應(yīng)在黑暗處（恒溫箱、水浴鍋等）進(jìn)行 30分鐘20、三角瓶取出后顯色反應(yīng)在何容器中進(jìn)行？為何先加磺胺，后加苯胺？21、上述溶液顯色反應(yīng)時間多長？波長？空白？30min，520nm，空白組一樣22、若三角瓶取出后顯色反應(yīng)不立刻進(jìn)行，對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有無影響？更

5、高還是更低？有影響，更高還是更低我也不知道，我個人覺得更低23、請演算（板書）NR活性計(jì)算公式硝酸還原酶活性（ugg-1 h-1）=（ N02-含量-N02-含量）X1O/W xt24、NR活性計(jì)算公式中t為多少？公式中X 10是何用意？0.5h ;因取反應(yīng)液的十分之一做后面實(shí)驗(yàn)，恩大概就這意思吧25、如何獲得NO2-、NO2-含量？26、NO 3-測定中，與其反應(yīng)的物質(zhì)為什么？試劑中酸的作用？27、該反應(yīng)產(chǎn)物有無顏色？如何才能顯色？應(yīng)加入何物？28、該曲線操作為何與前述不同？區(qū)別在哪？比色波長為多少？29、實(shí)驗(yàn)材料如何處理？稱重多少？處理：將材料用濕紗布擦拭干凈，用蒸餾水沖洗，濾紙吸干。稱取

6、：酶活性測定稱取0.3-0.5，硝態(tài)氮含量測定準(zhǔn)確稱取2g30、用何試劑在何處多少攝氏度下提?。抗芸谌绾翁幚?？酶活性測定：0.1mol/L,ph7.5 磷酸緩沖液在30度水浴硝態(tài)氮含量測定：無機(jī)離子在沸水浴中處理，管口用玻璃泡封口31、提取結(jié)束為何要冷卻？定容至多少？如何確保不損失？因?yàn)橐谑覝叵逻M(jìn)行實(shí)驗(yàn)，定容至 25ml容量瓶，反復(fù)沖洗幾次確保不損失332、取樣品液多少？與何試劑(多少)反應(yīng)？取樣品液0.1ml,與5%水楊酸一硫酸溶液0.4ml反應(yīng)，再與9.5ml8%氫氧化鈉反應(yīng)33、多長時間后加入多少8%NaOH 溶液？取樣加入水楊酸_硫酸后，靜止20分鐘加入34、該測定空白為什么？波長為

7、多少？進(jìn)行對比，410波長35、請演算NO3-N含量計(jì)算公式。氮含量=C*V/W36、上述計(jì)算公式其中C，V，W分別代表什么？硝態(tài)氮含量(mg g-1FW) = (C XV)/WC為標(biāo)準(zhǔn)方程計(jì)算得NO3- N濃度(ug ml)V為提取樣品液總量(ml);W為樣品鮮重(g)。37、以上公式中C如何獲得？C為標(biāo)準(zhǔn)方程計(jì)算得NO3- N濃度(ug ml)綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)2植物利用光能的生理基礎(chǔ)1、葉綠素在紅光區(qū)和藍(lán)光區(qū)都有吸收峰，能否用藍(lán)光區(qū)的吸收峰波長進(jìn)行 葉綠素的定量分析？為什么？不能，因?yàn)槿~綠素a和葉綠素b在百分之96乙醇中最大洗手峰的波長不同， 用分光光度計(jì)測定各種葉綠體色素的含量時，對分光光度

8、計(jì)的波長精確度要求較 高，如果波長與原吸收峰波長相差1nm，則葉綠素a的測定誤差為百分之二， 葉綠素b為百分之十九，因此，在使用前必須嚴(yán)格種植不同葉綠素的最大吸收 峰波長。02、 選擇80 %丙酮提取葉綠體色素時，葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素的 吸收峰值分別是多少納米？663nm,645nm,470nm3、選擇96 %乙醇提取葉綠體色素時，葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素的 吸收峰值分別是多少納米？665nm,649nm,470nm4、選擇不同試劑提取葉綠體色素時，葉綠體色素計(jì)算公式有無不同？請板 書用96 %乙醇提取時的三個公式。答案在26頁實(shí)驗(yàn)結(jié)果處5、提取干材料中葉綠體色素一定要用 96

9、 %乙醇（80 %丙酮），而新鮮材料 可以用無水乙醇（無水丙酮）提取，為什么？混合液浸提法提取葉綠體色素6、葉綠體色素提取有那幾種方法，實(shí)驗(yàn)教學(xué)中宜選用其中哪一種？為什么？水浴提取法提取葉綠體色素。應(yīng)選用水浴提取法提取葉綠體色素，因?yàn)檠心?法研磨過程中丙酮的揮發(fā)，研磨后轉(zhuǎn)移勻漿時容易出現(xiàn)誤差，而混合液浸提法需 要時間充足或樣品太多7、葉綠體色素提取及測定為什么要在弱光下進(jìn)行？該提取液含有哪幾種色 素？01短。葉綠素和類胡蘿卜素8、葉綠體色素定量分析應(yīng)稱取多少植物樣品，由什么因素決定？0.20.5g由葉綠體色素提取方法決定，研磨法提取葉綠體色素樣品為0.2-0.5g，混合液浸提法提取葉綠體色素樣

10、品為0.1-0.2g，水浴提取法提取葉綠體色素樣品為0.2-0.5g9、植物樣品放入試管后需加入96 %乙醇多少毫升，在何溫度下水浴多長時 間？15ml然后放入7080攝氏度的水浴鍋中浸提，直至葉片成黃白色10、定容前植物樣品應(yīng)達(dá)到何種程度？定容至多少毫升？研磨至組織變白。定容至25毫升11、提取時加入96 %乙醇的量能否改變？提取時間及浸提次數(shù)作何調(diào)整？12、葉綠體色素定量分析為何不需制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，比色時空白對照為何 物？答：1?2、如果提取液為80%丙酮，采用80%丙酮為空白。如果用96%的乙醇提 取，則用96% 的乙醇為空白13、用于葉綠體色素分離與定量分析所用的提取液相比較，誰的濃度更

11、高？葉綠體色素分離所用的提取液濃度更高（葉綠色素提取液須用丙酮溶液適當(dāng)稀釋后才可作理化性質(zhì)觀察）14、本實(shí)驗(yàn)中短時間內(nèi)如何制備分離所需色素溶液？用23g新鮮葉片，以80%丙酮（或95%乙醇）研磨提取過濾于三角瓶 中備用15、如何將葉綠體色素溶液涂抹至長濾紙條，用何工具？涂在哪一側(cè)？用毛細(xì)管吸取濃的葉綠體色素提取液涂抹在濾紙條一側(cè)長邊16、分離過程中涂抹葉綠體色素的次數(shù)為多少次？每次均要確保什么？2030次，要確保涂抹均勻且要風(fēng)干后涂，色素要多涂抹幾次，風(fēng)干會再 涂抹第二次，細(xì)、勻、直、滾。涂抹的色素要適量，量多易發(fā)生拖尾，量少色素 帶看不清。17、長濾紙條風(fēng)干后如何與圓形濾紙結(jié)合？應(yīng)注意什么？

12、長濾紙條風(fēng)干后卷成紙捻插入圓形濾紙的小孔中，使之與圓形濾紙齊平。應(yīng) 注意紙捻不能突出，圓形濾紙?jiān)谥行拇虻男A孔，其周圍必須整齊，否則分離的 色素不是一個同心圓18、上述物件應(yīng)放入何處，其中盛有何種液體，它由哪幾種有機(jī)物按照何 種比例配制？:丙酮:插有紙捻的圓形濾紙平放在康維皿上，其中盛有推動劑，按石油醚苯=10:2:1比例配制19、隨著時間推移，圓形濾紙上會出現(xiàn)什么變化？何時應(yīng)將圓形濾紙取出自 然風(fēng)干？會出現(xiàn)被分離的各種色素同心圓環(huán)；當(dāng)推動劑擴(kuò)散至康維皿邊沿時20、何謂分配系數(shù)，上述分離過程中流動相、固定相分別指什么？分配系數(shù)：在平衡狀態(tài)下組分在固定相與流動相中的濃度之比；固定相：與長濾紙條結(jié)

13、合的96%乙醇；流動相：各葉綠體色素21、請板書chia與KOH反應(yīng)方程式。葉綠素a+KOH =甲醇+皂化葉綠素22、請敘述上述皂化反應(yīng)過程，簡單介紹操作過程。反應(yīng)過程P23倒數(shù)第二段前兩句（葉綠素是一種雙羧酸（葉綠酸）與甲醇 和葉綠醇形成的復(fù)雜酯。在堿的作用下，發(fā)生皂化反應(yīng)，生成醇（甲醇與葉綠醇） 和葉綠素的鹽（皂化葉綠素）操作過程p275.皂化反應(yīng)23、 上述反應(yīng)發(fā)生后為何要先加入 3毫升苯再加入1毫升水？它們各自起 何作用？苯是有機(jī)溶劑，溶解類胡蘿卜素和葉黃素，水溶解反應(yīng)生成的鹽（皂化葉綠 素）24、反應(yīng)結(jié)束后上、下兩層分別為何溶液，各自含有哪些物質(zhì)？上層是笨溶液，溶有黃色的胡蘿卜素和葉

14、黃素；下層是稀的乙醇溶液，溶 有皂化葉綠素a和皂化葉綠素b25、何謂葉綠素?zé)晒猬F(xiàn)象？如何觀察葉綠素?zé)晒猬F(xiàn)象？葉綠素?zé)晒猬F(xiàn)象產(chǎn)生的原因是什么?葉綠素吸收光量子轉(zhuǎn)變成激發(fā)態(tài)的葉綠素分子， 很不穩(wěn)定，當(dāng)其回到基態(tài)時可發(fā)出熒光的現(xiàn)象。將濃的葉綠體色素提取液放在試管內(nèi)，在直射光下觀察色素溶液在透射光下及反射光下的顏色。原因：（1）對著光源觀察葉綠素提取液時，看到的是葉綠素的吸收光譜。由于葉 綠素提取液吸收的綠光部分最少，故用肉眼觀察到的為綠色透射光。（2）背光源觀察葉綠素提取液時，看到的是葉綠素分子受激發(fā)后所產(chǎn)生的發(fā)射光譜。當(dāng)葉綠素分子吸收光子后，就由最穩(wěn)定的、能量最低的基態(tài)提高到一個不穩(wěn)定的、 高能

15、量的激發(fā)態(tài)。由于激發(fā)態(tài)不穩(wěn)定，因此發(fā)射光波 （此光波即為熒光），消失能量， 迅速由激發(fā)態(tài)回到基態(tài)。26、為什么葉綠體色素提取液能觀察到熒光現(xiàn)象而植株上的葉片看不到熒光？熒光現(xiàn)象：是指葉綠素在透射光下為綠色， 而在反射光下為紅色的現(xiàn)象，這 紅光就是葉綠素受光激發(fā)后發(fā)射的熒光。葉綠素溶液的熒光可達(dá)吸收光的10%左右。而鮮葉的熒光程度較低，指占其吸收光的 0.11%左右。27、為什么葉綠素容易發(fā)生取代反應(yīng)？在弱酸作用下，葉綠素分子中的鎂被氫離子取代生成褐色的去鎂葉綠素，后者遇乙酸銅則形成藍(lán)綠色的銅代葉綠素。28、取代反應(yīng)中加入30 %醋酸后，由何種離子取代葉綠素中何物？加入醋酸后，氫離子取代鎂離子，

16、形成去鎂葉綠素。29、取代反應(yīng)中進(jìn)一步加入醋酸銅粉末后，是何種離子取代之前那種離子？去鎂葉綠素易與銅離子結(jié)合，形成銅代葉綠素30、反應(yīng)中加入醋酸銅粉末后需作何處理，加入醋酸銅粉末的量需不需要控制？微熱，木習(xí)習(xí)坑曰：你說需要不需要呢 它既然問了，必須控制啊，多了多浪費(fèi)綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)3礦質(zhì)元素對植物的作用1、脯氨酸在何條件下與何種物質(zhì)生成穩(wěn)定的紅色縮合物？脯氨酸在酸性條件下與印三酮反應(yīng)生成穩(wěn)定的紅色縮合物。00002、 上述紅色縮合物為何要用甲苯萃?。勘壬ㄩL是多少nm ?因?yàn)樵跍y定液中含有某些也能與印三酮發(fā)生反應(yīng)的成分，這些成分的反應(yīng)產(chǎn)物也同樣可以吸收520nm光，如果不用甲苯萃取，會導(dǎo)致 0D值

17、偏高，用甲苯 萃取，這些成分的反應(yīng)產(chǎn)物不溶于甲苯， 所以可以降低實(shí)驗(yàn)誤差。并且甲苯對生 成穩(wěn)定的紅色縮合物可以充分溶解3、脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為多少？用前稀釋多少倍，濃度為多少？100ug每毫升，用前稀釋10倍，為10ug每毫升。4、 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作中各管加入冰乙酸、酸性茚三酮分別為多少ml ？分別為2ml和3ml5、上述顯色液應(yīng)在多少C水浴多長時間？如何處理后用甲苯萃取?100攝氏度40min，冷卻6、脯氨酸提取葉片重量如何確定？處理與對照需等重么？天平稱取，不需要7、用何種試劑提取植物材料中脯氨酸？多少C水浴多長時間？3%的磺酸水楊酸溶液，100攝氏度10min8、脯氨酸提取液有無顏色？如何令

18、其顯色？無，加茚三酮9、該顯色劑如何配制，如何保證其充分顯色？稱取1.25g茚三酮溶于30mL冰乙酸和20mL 6M 磷酸溶液中，攪拌加熱（低于70 C）溶解，冷卻后置棕色瓶中沸水浴加熱40min10、脯氨酸含量計(jì)算公式V和A分別為多少ml ？V 為 5ml A 為 2ml11、可溶性糖在何條件下生成糠醛或羥甲基糠醛化合物？沸水浴12、 上述產(chǎn)物與何種物質(zhì)作用形成藍(lán)綠色絡(luò)合物（糠醛衍生物）？在何波長比 色？蒽酮試劑625nm13、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液為何濃度？標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程稀釋至何系列濃度？200微克每毫升；0100微克每毫升14、 上述稀釋后系列濃度葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液各取多少ml，與多少ml、何種物質(zhì)反

19、 應(yīng)顯色？一毫升；加5ml蒽酮試劑15、顯色過程需要在多少C水浴多長時間?沸水；10mi n16、為什么要將顯色時間控制在一定范圍以內(nèi)？由于蒽酮與可溶性糖反應(yīng)的呈色強(qiáng)度隨時間變化，故必須在反應(yīng)后立即在同 一時間內(nèi)比色17、可溶性糖提取液定容后為何要過濾？否則對反應(yīng)有何不良影響？以防有殘?jiān)?不能準(zhǔn)確測出可溶性糖的含量 因?yàn)榧?xì)胞壁中的纖維素、半纖維 素等與蒽酮試劑發(fā)生反應(yīng)。增加了測定誤差。18、過濾后提取液1ml與5ml蒽酮試劑反應(yīng)過程應(yīng)注意哪些問題？由于蒽酮與可溶性糖反應(yīng)的呈色強(qiáng)度隨時間變化，故必須在反應(yīng)后立即在同 一時間內(nèi)比色。燒杯保持干燥，充分?jǐn)嚢杈徛尤?5ml濃硫酸 濃硫酸遇水會產(chǎn) 生大

20、量的熱19、蒽酮試劑如何配制、如何保存？100mg經(jīng)過純化的蒽酮溶于100ml硫酸溶液（76ml相對密度1.84的濃 硫酸加24ml水）貯藏在棕色瓶中20、可溶性糖含量計(jì)算結(jié)果為何單位？ug 每 ml21、應(yīng)用蒽酮法測得的可溶性糖包括哪些？戊糖與已糖，所有寡糖類和多糖類，其中包括淀粉、纖維素等22、何謂電導(dǎo)率？為何逆境脅迫能使溶液電導(dǎo)率值增大？電導(dǎo)率是以數(shù)字表示的溶液傳導(dǎo)電流的能力。植物組織受到逆境傷害時，由于膜的功能受損或結(jié)構(gòu)破壞透性增大，細(xì)胞內(nèi)各種水溶性物質(zhì)不同程度的外滲,將植物組織浸入無離子水中，水的電導(dǎo)率將因電解質(zhì)的外滲而加大，傷害愈重,外滲愈多，電導(dǎo)率的增加也愈大（P55實(shí)驗(yàn)基本原理）23、電導(dǎo)率