HPLC法測定刺五加軟膠囊中刺五加苷E的含量

1、HPLC法測定刺五加軟膠囊中刺五加昔E的含量摘要：目的：建立刺五加軟膠囊中刺五加昔E的含量測定方法。 方法： 采用HPLC法測定， 使用Diamonsil C18(250mm x 4.6mm,5卩m)色譜柱,流動相：乙ffl-0.1%磷酸溶液(15:85),流速:1 .Oml/min,檢測波長:210nmo結(jié)果： 刺五加昔E對照 品在10.16?滋g/ml-91.44?滋g/ml范圍內(nèi)有良好線性關(guān)系(=0.9998),平均回收率 為98.06%, RSD=1.3%(n=6)。結(jié)論：該法操作簡便 準確 重現(xiàn) 性好，可作刺五加軟膠囊中刺五加昔E的質(zhì)量控制方法。關(guān)鍵詞:刺五加昔E；刺五加軟膠囊；高效

2、液相色譜法中圖分類號：R961.1文獻標識碼：A刺五加軟膠囊是由刺五加浸膏、精制玉米油等成分混合制成的中藥軟膠囊，具有益氣健脾、補 腎安神的作用。臨床用于體虛乏力，食欲不振，腰膝酸痛，失眠多 夢。本文參考 有關(guān)文獻仆4,建立了高效液相色譜法(HLPC)測定 刺五加軟膠囊中刺五加昔E的含量方法，實驗結(jié)果表明，該法操作簡 便、準確、重現(xiàn)性好，可作刺五加軟膠囊中刺五加昔E的質(zhì) 量控制方 法。1儀器與試藥1.1儀器AgilentHOO型高效液相色譜儀，紫外檢測器;紫外分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；十萬分之一天平（梅特勒）。TU-19011.2試藥刺五加昔E對照品（中國藥品生物制品檢定所提

3、供批號111713-200502供含量測定用）；刺五加軟膠囊（自制批號:20100301K20100302V 20100303規(guī)格為0.3g);乙月青為色譜 純，水 為去離子水，其他試劑為分析純。2方法與結(jié)果2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱：Diamonsil C18 （250mm x4.6mm35卩m）;乙膳-0.1%磷酸溶液（15:85）;流速:1.0ml/min;檢測波長：210nm;柱溫：室溫;進樣量：10?滋丨，理論板數(shù)以刺五加昔E峰計不得低于2000o2.2對照品溶液的制備精密稱取刺五加昔E對照品5.08mg ,置于50ml量瓶中，先用2ml50%甲醇溶解， 再加甲醇溶解并定容

4、至刻度， 搖勻， 配成濃度為101.6?滋g/ml的甲醇溶液。再精密量取該甲醇溶液5ml置10ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，制成含刺五加 昔E50.8?滋g/ml的對照 品溶液。2.3供試品溶液的制備取本品10粒，除去膠皮取內(nèi)容物，精密稱定，取相當于2粒的量，精密稱定。置250ml三角瓶中，力口10ml正已 烷，混合均勻后移入分液漏斗中，依次用20ml、10ml、10ml乙月青提取三次，合并乙月青層于蒸發(fā)皿上蒸發(fā)至干，用1ml甲 醇溶解，取SPE-C18小柱（依次用10ml甲醇和10ml純化水 洗滌，吹 干），上樣，用甲醇洗脫至25ml容量瓶中，控制流速在1ml/min ,定容，即得。2.4線

5、性關(guān)系考察線性關(guān)系的考察取刺五加昔E對照品用甲醇制成101.6?滋g/ml的溶液，精密量取此溶液1ml、3ml、5ml、7ml、9ml,分別 置于10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，在上述色譜條件下測 定，記錄色譜圖，以標準溶液濃度為橫坐標、 峰面積為縱坐標， 繪制標 準曲線， 得回歸方程： 丫=43325X+56524r=09998。結(jié)果表明， 朿9五加昔E在10.16?滋g/ml91.44?滋g/ml范圍內(nèi) 有良好的線性關(guān)系。2.5回收率試驗采用加樣回收法，取同一批已知含量樣品6（批號：20100301）入刺五加昔E對照品溶液10ml（50.8?滋g/ml）,按照2.3項 供試品 制備

6、方法進行測定，計算平均加樣回收率，結(jié)果平均加樣回收率為98.06%, RSD為1 .26%，表明準確度良。2.6精密度試驗取同一對照品溶液， 進樣10?滋I，重復(fù)6次進樣，依份，每份精密稱定相當于1粒內(nèi)容物的樣品，再加法測定，其峰面積的RSD=0.41%(n=6)o結(jié)果表明，儀器的精密 度良 好。2.7穩(wěn)定性試驗取樣品(批號2010301)的供試品溶液，分別于室溫下放置0、2、4、6、8小時后測定，峰面積積分值基本不變,RSD=0.74%(n=5) o結(jié)果表明，在室溫條件下，供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定 性良好。2.8重復(fù)性試驗取同一批號的樣品(批號20100301)6份，按照供試品含量測定 方法進

7、行操作，結(jié)果平均含量為0.652mg ,RSD=0.62%(n=6),表明本含量測定方法的重復(fù)性良好。3討論3.1通過紫外掃描，刺五加昔E在210nm處有最大吸收，故選 擇210nm為檢測波長。3.2由于生產(chǎn)中采用精制玉米油為溶劑，在檢驗過程中對色譜柱污染比較嚴重。針對這種情況，我們先采取正已烷-乙猜萃取的方法去到去除油脂對色譜柱污染 的目的。3.3先后試用了三種流動相系統(tǒng)：甲醇水、甲醇水磷酸 和乙月青水磷酸， 結(jié)果乙膳水磷酸系統(tǒng)分離效果較好。 通過 乙月青0.1%磷酸溶液10 : 90、15 : 85、20 : 80、25 : 75不同 比例的選擇，確定15: 85的比例分離效果最好，保留時間適中。除部分油脂, 再采用相萃取法用SPE-C18對油脂進行吸附，從而達3.4實驗證明，用該法檢測刺五加軟膠囊中刺五加昔E含量，可 操作性強 精密度高、重現(xiàn)性及線性關(guān)系良好，回收率高，與其他峰分離良好，可作為刺五加軟膠囊中刺五加昔E的質(zhì)量 控制方法。參考文獻1國家藥典委員會中華人民共和國藥典2005版(一部)S.北京：中國醫(yī)藥科技出版社52005.12胡廣東，胡新海宋鐵兵刺五加中刺五加昔E的含量測定J.3吳少杰， 邢朝斌等不同產(chǎn)地刺五加中刺五加昔E含量的高 效液相