體外診斷試劑的相關(guān)介紹和分析

1、 體外診斷試劑相關(guān)介紹及分析1.體外診斷試劑的簡介1.1體外診斷試劑相關(guān)概念n 生物制品是以微生物、寄生蟲、動物毒素、生物組織等為起始材料，采用生物學(xué)工藝或分離純化技術(shù)制備并以生物學(xué)技術(shù)和分析技術(shù)控制中間產(chǎn)物和成品質(zhì)量制成的生物活化制劑。n 診斷試劑從一般用途來分，可分為體內(nèi)診斷試劑和體外診斷試劑兩大類。除用于體內(nèi)診斷的如舊結(jié)核菌素、布氏菌素、錫克氏毒素等皮內(nèi)用的診斷試劑等外，大部分為體外診斷試劑。n 體外診斷試劑是指對從人體內(nèi)提取的樣本（包括捐獻的血液和組織）在體外進行檢查的試劑、組合試劑、校準物品、對照材料等。體外診斷試劑可單獨或與試驗工具、儀器、器具、設(shè)備或系統(tǒng)組合使用。1.2體外診斷試

2、劑的原理分類n 作用原理：體外診斷試劑是化學(xué)檢測方法中最重要的部分，通過診斷試劑和體內(nèi)物質(zhì)在體外的化學(xué)反應(yīng)來判斷體內(nèi)物質(zhì)的性質(zhì)和數(shù)量，通過和標準品的比較來判斷人體的生理狀態(tài)，主要應(yīng)用在疾病的診斷上。1.2.1臨床生化試劑臨床生化試劑主要有測定酶類、糖類、脂類、蛋白和非蛋白氮類、無機元素類、肝功能、臨床化學(xué)控制血清等幾大類產(chǎn)品，主是用于配合手工、半自動和一般全自動生化分析儀等儀器檢測，有單試劑、液體雙試劑、干粉雙試劑、化學(xué)法試劑、標準品等規(guī)格，同時各廠家都提供適用于檢測室間、室內(nèi)質(zhì)控的質(zhì)控血清系列。1.2.2免疫診斷試劑免疫診斷試劑在診斷試劑盒中品種最多，根據(jù)診斷類別，可分為傳染性疾病、內(nèi)分泌、

3、腫瘤、藥物檢測、血型鑒定等。從結(jié)果判斷的方法學(xué)上又可分為EIA、膠體金、化學(xué)發(fā)光、同位素等不同類型試劑，其中同位素放射免疫的試劑由于對環(huán)境污染比較大，目前在國際市場上已經(jīng)被淘汰，國內(nèi)還有少量使用。1.2.3分子診斷試劑分子診斷試劑主要有臨床已經(jīng)使用的核酸擴增技術(shù)（PCR）產(chǎn)品和當前國內(nèi)外正在大力研究開發(fā)的基因芯片產(chǎn)品。PCR產(chǎn)品靈敏度高、特異性強、診斷窗口期短，可進行定性、定量檢測，曾廣泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、優(yōu)生優(yōu)育、遺傳病基因、腫瘤等的檢測，但由于市場混亂和交叉污染等原因，衛(wèi)生部嚴令禁止了熒光電泳定性類PCR試劑在臨床的應(yīng)用，目前國家食品藥品監(jiān)督管理局已經(jīng)批準了少量已解決了交叉污染

4、的雜交半定量和定量試劑盒?；蛐酒欠肿由飳W(xué)、微電子、計算機等多學(xué)科結(jié)合的結(jié)晶，綜合了多種現(xiàn)代高精尖技術(shù)，被專家譽為診斷行業(yè)的終極產(chǎn)品，但成本高、開發(fā)難度大，目前產(chǎn)品種類很少，只用于科研和藥物篩選等用途。1.3體外診斷試劑的國標分類2007年6月1日,SFDA起實施的體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）進一步明確規(guī)定，除了依據(jù)藥品管理法實施條例以及放射性藥品管理辦法等上位法或特別規(guī)章，對用于血源篩查的體外診斷試劑和放射性核素標記的體外診斷試劑產(chǎn)品作為藥品監(jiān)管外，其他體外診斷試劑產(chǎn)品全部按醫(yī)療器械注冊管理。1.3.1按醫(yī)療器械受理和審評的體外診斷試劑 一、臨床血液學(xué)和體液學(xué)檢驗試劑二、臨床化學(xué)檢驗

5、試劑 三、臨床免疫學(xué)檢驗試劑四、微生物學(xué)檢驗試劑五、組織細胞學(xué)檢驗試劑六、變態(tài)反應(yīng)、自身免疫診斷檢驗試劑（盒）七、遺傳性疾病檢驗試劑八、分子生物學(xué)檢驗試劑九、其它檢驗試劑（盒）1.3.2按藥品受理和審評的體外診斷試劑*1.ABO血型定型試劑（盒）*2.乙型肝炎表面抗原（HBsAg）試劑（盒）*3.丙型肝炎病毒（HCV）抗體試劑（盒）*4.人類免疫缺陷病毒HIV（12型）抗體試劑（盒）人類免疫缺陷病毒抗原/抗體診斷試劑（盒）*5.梅毒螺旋體抗體試劑（盒）6.放免試劑(盒)注：以上帶*號的五個品種，預(yù)期用途為血源篩查時按藥品受理和審評，為臨床診斷時，按第三類醫(yī)療器械進行管理。1.4體外診斷試劑的發(fā)

6、展特點當前診斷試劑總體發(fā)展主要有以下特點：(1)免疫診斷試劑將會逐漸取代臨床生化試劑，成為診斷試劑發(fā)展的主流。(2)診斷技術(shù)正在向兩極發(fā)展。一方面是高度集成、自動化的儀器診斷，另一方面是簡單、快速便于普及的快速診斷。(3)檢驗產(chǎn)品的種類將快速擴大。(4)產(chǎn)品更新應(yīng)用加快，由于遺傳工程、基因重組以及單克隆抗體等現(xiàn)代生物技術(shù)的不斷應(yīng)用和發(fā)展，使這些精確的診斷試劑能迅速由研究階段進入臨床階段，縮短了開發(fā)時間。國際臨床診斷試劑市場年增長速度約為35，目前還處于持續(xù)發(fā)展時期，美國FDA已批準的診斷試劑近700種，名列世界各國之首，但同世界衛(wèi)生組織所屬全球疾病統(tǒng)計分類協(xié)會最近宣布的全球已確知的12000種

7、疾病相比，需求潛力非常大。 國內(nèi)臨床檢驗市場經(jīng)過幾年的快速發(fā)展，雖然一些重要的臨床產(chǎn)品項目已經(jīng)進入成熟期，國內(nèi)市場發(fā)展速度有所減緩，但仍然有1520的增長速度。目前同國際上的幾百種產(chǎn)品相比，國內(nèi)市場還遠沒有得到開發(fā)，像腫瘤診斷和基因芯片試劑都具有巨大的市場潛力。即使從目前需求較大、發(fā)展比較成熟的幾個病種來看，市場仍有很大的發(fā)展?jié)摿?。同時隨著人們生活水平的提高和國家醫(yī)療體制的改革，市場規(guī)模必然會進一步擴大。2.臨床常見疾病的體外診斷試劑2.1心血管診斷試劑2.1.1心血管疾病的概述根據(jù)國際疾病分類原則第九版（ICD-9）規(guī)定，心血管病主要包括高血壓病、冠心病、肺心病、腦血管病、風(fēng)濕熱、慢性風(fēng)濕性

8、心臟病及動脈粥樣硬化、栓塞等等。但不包括先天性心臟病。其中人們最關(guān)心的是死亡率和致殘率最高的冠心病和腦血管病，這兩種病又有共同的致病基礎(chǔ)，即高血壓、高脂血癥、糖尿病、吸煙等等。因此，冠心病與腦血管病的預(yù)防有許多共同之處。心血管病是威脅人類健康的重要疾病，在西方發(fā)達國家患病率和死亡率逐步下降時，我國卻呈越來越高發(fā)的態(tài)勢。近年心血管病患病率上升很快，這種疾病已成為我國人口總死亡原因第一位。在西方發(fā)達國家，由于過去20 年來采取了很多有效預(yù)防措施，心血管病發(fā)病率已不斷下降。但是我國的發(fā)病人數(shù)和死亡人數(shù)卻不斷增加，所以，我國要全力預(yù)防和治療心血管疾病。2.1.2 預(yù)測心血管疾病危險的相關(guān)標志物心血管疾

9、病目前已經(jīng)成為全球致死率第一的疾病，學(xué)者們正致力于早期發(fā)現(xiàn)心血管疾病危險因素的研究。系統(tǒng)了解冠心病和動脈粥樣硬化危險因素，對其進行干預(yù)治療，具有非常重要的意義。綜合近年的研究成果，對心血管疾病的危險有“預(yù)測”作用的血液中的物質(zhì)有以下幾類：（一）血脂因素1.總膽固醇（TC）冠心病患者血清TC 多數(shù)在5.06.5mmol/L。TC 水平越高。冠心病發(fā)病越多越早，血清總膽固醇每降低1%。冠心病的危險性可減少2%。多項臨床試驗表明：降低膽固醇有利于減少冠心病患者的死亡和減少心肌梗死的發(fā)生。2.低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)眾多研究均表明LDL-C 升高是冠心病的主要病因，降低LDL-C 能降低近期發(fā)

10、生心臟病危險40%，還可能降低10 年或更久的遠期危險。因此急性冠脈綜合征或介入治療、搭橋手術(shù)的住院患者，入院時或24 小時內(nèi)應(yīng)測血脂，以便醫(yī)生有針對性的治療。3.高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)HDL-C 每下降0.03mmol/L(1mg/dl)，冠心病事件的相對危險性增加2%3%。當HDL-C<1.0mmol/L(40mg/dl)時稱為低HDL-C，這被認為是一項很強的獨立的冠心病危險因素。相反，HDL-C1.55mmol/L(60mg/dl)則對心臟有保護作用。HDL-C主要受某些生活方式(如吸煙、肥胖、活動少等)的影響，并有一定的家族遺傳性。4.甘油三酯(TG)有研究表明高TG

11、 也是冠心病的獨立危險因素。血清TG 升高常見于代謝綜合征患者。（二）動脈炎癥因素近年來，越來越多的專家將注意力集中在動脈的炎癥反應(yīng)上，甚至有研究者提出“動脈粥樣硬化從根本上來說就是一種炎癥性疾病，這正是今后治療的主要方向。”目前已經(jīng)開始了對一些炎癥生成蛋白的常規(guī)檢查，年齡較大的人將在檢測血脂和血壓的基礎(chǔ)上，開始對變異基因和炎癥相關(guān)蛋白的檢測。也許在不遠的將來，心血管疾病的高危人群將針對基因的異常進行治療。如果以上這些能夠?qū)崿F(xiàn)，冠脈疾病將在20 年后變?yōu)闅v史。1.超敏C 反應(yīng)蛋白（hs-CRP）在正常情況下以微量形式存在，當機體有炎癥、創(chuàng)傷和冠心病事件時則會明顯增加。在多危險因子國際試驗（MR

12、FIT）中觀察到hs-CRP 水平與冠心病猝死有很強的相關(guān)關(guān)系；對早期無癥狀患者，前瞻性的研究顯示，hs-CRP 水平增加與冠脈事件、中風(fēng)及周圍血管病相關(guān)聯(lián)，是一種獨立的危險因素。近年來用新的敏感方法檢測血漿hs-CRP，發(fā)現(xiàn)其輕度升高也可增加不穩(wěn)定性心絞痛患者冠脈事件發(fā)生的危險。2.血漿纖維蛋白原（Fib）Fib 在肝臟合成，是與血液凝固有關(guān)的血漿蛋白。Fib 增加是機體的一種非特異性反應(yīng)，常見于有炎癥時。近年來研究發(fā)現(xiàn)Fib 為冠心病的獨立危險因子之一，在急性冠脈綜合征（ACS）時血漿中的Fib 即增高，且與病情相關(guān)。Fib 是凝血反應(yīng)中的關(guān)鍵因子，其在粥樣硬化斑塊的形成和破裂及血栓形成起

13、重要作用。在急性冠脈綜合征時測定和隨訪Fib 具有重要的價值。3肌酸激酶-同工酶（CK-MB）近年來用單克隆抗體、酶免疫熒光測定CK-MB，在急性心肌損傷出現(xiàn)胸痛后24 小時，敏感性可達90%。是臨床作為心肌損傷的標志物之一，甚至作為生化診斷的金標準。4. 肌鈣蛋白（cTnT 和cTnI）肌鈣蛋白為心肌收縮與舒張所必需，其敏感性與特異性比CK-MB 高，因為該蛋白不存在于身體其它部位。急性心肌梗塞診斷中，心肌肌鈣蛋白（cTn）是目前認為較好的確定標志物。（三）其它因素1. 胰島素抵抗胰島素抵抗是糖尿病的主要病理生理特征，同時也是高血壓、冠心病、肥胖及急性冠脈綜合征發(fā)生的獨立危險因素。治療胰島素

14、抵抗有利于降低冠心病的發(fā)病危險。2. 瘦素瘦素是一個測定人體脂肪量很好的血液標志物。已知身體超重是患心血管疾病的危險因素，血中瘦素水平比體重指數(shù)（BMI）能更好地反映肥胖程度，因為瘦素作用于脂肪代謝，并與胰島素抵抗的其他標志物相關(guān)，而與總肥胖程度無關(guān)。因此瘦素水平升高則發(fā)生冠脈事件的危險升高。2.2中國肝炎系列診斷試劑2.2.1中國肝炎發(fā)病情況根據(jù)近年來全國各地報告，在篩查中孕婦乙肝表面抗原（HBsAg）陽性率約為5-10%，有三分之一孕婦HBeAg 同時為陽性（即大三陽）。大三陽的孕婦，其所生子女中在半年內(nèi)成為乙肝病毒攜帶者的達63-90%。其余三分之二僅HBsAg 陽性孕婦所生子女隨訪10

15、 年，HBsAg 的總感染率為72.2%。而HBsAg 陰性孕婦的子女總感染率較低，但仍達36.8%。顯而易見，由于小兒受母嬰傳播和水平傳播兩個因素影響，使小兒乙肝發(fā)病的形勢嚴峻。發(fā)病率仍以甲型肝炎為多，其次為乙型肝炎，然后是丙型肝炎和戊型肝炎，丁型肝炎在兒童中可能很少。2.2.2“兩對半”等肝炎病毒標志物肝炎分許多型，其病毒種類也不同，檢測它們的標志物對肝炎診斷和治療很有幫助。下面就常見的幾型順序介紹：（一）乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg、HAA), 這項化驗是判斷是否患有乙型肝炎或是否攜帶乙型肝炎病毒的一項參考指標。以下的五項試驗(HBsAg、HbsAb、HbeAg

16、、HbeAb、HBcAb)經(jīng)常組合在一起，被稱為乙肝五項，俗稱為“兩對半”。當出現(xiàn)陽性結(jié)果時，表示肝臟中有乙型肝炎病毒存在和/或復(fù)制。乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb) 這項化驗是判斷患者是否曾被HBV 感染，或注射乙肝疫苗后機體是否產(chǎn)生對HBV 的免疫力的一項參考指標。當出現(xiàn)陽性結(jié)果時，有以下兩種情況：第一，過去曾發(fā)生HBV 自然感染，目前對HBV 有一定的免疫力，常伴有HBcAb陽性。第二，由于接種乙肝疫苗而產(chǎn)生的保護性抗體，此時通常僅HBsAb 單項陽性。乙型肝炎病毒e 抗原(HBeAg) 這項化驗是判斷患者是否正患乙型肝炎及傳染性強弱的一項參考指標。當出現(xiàn)陽性結(jié)果時，表示患者正患乙型肝

17、炎，或者患者體內(nèi)有HBV 活躍復(fù)制，傳染性強。乙型肝炎病毒e 抗體(HBeAb)這項化驗是判斷患者是否曾經(jīng)或目前正患乙型肝炎及傳染性強弱的一項參考指標。當出現(xiàn)陽性結(jié)果時，表示患者有HBV 感染，或者說明患者體內(nèi)HBV 復(fù)制由活躍進入低復(fù)制或非復(fù)制期，傳染性降低(與HBeAg 陽性時相比較)。乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)這項化驗是判斷患者是否曾經(jīng)感染過或現(xiàn)在正在患乙型肝炎的一項參考指標。血清中HBcAb 有兩種組分，lgM 型和IgG 型。當出現(xiàn)HBcAbIgM 陽性結(jié)果時，表明患者為急性原發(fā)性HBV 感染。表示：患者是一個乙型肝炎患者。HBCAblgM 在HAV 原發(fā)性感染的早期，通常在

18、血清中持續(xù)大約312 個月左右，以后即使再暴露于HBV，通常也無HBcAblgM上升的現(xiàn)象。當出現(xiàn)HBcAbIgG 陽性結(jié)果時，表明：患者曾經(jīng)被HBV 感染。HBcAbIgG 不是一種保護性抗體，因而不能中和HBV 的感染性。HBcAbIgG可以長期存在，甚至終生能檢出。（二）丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒(HCV)抗體(HCVAb)這項化驗是判斷患者是否曾經(jīng)感染過或現(xiàn)在正在患丙型肝炎的一項參考指標。針對HCV 基因的不同功能區(qū)有不同的抗體，其中最主要的抗體是HCVAbCore。其中又分為IgM 型和IgG 型。但目前普遍認為只有IgG 型HCVAbCore 是診斷HCV 感染的可靠指標。這種抗體一

19、旦出現(xiàn)，將長期持續(xù)存在。此實驗用于判斷是否患有內(nèi)型肝炎，或是否曾經(jīng)感染過內(nèi)型肝炎病毒。（三）其它肝炎病毒甲型肝炎病毒(HAV)抗原(HAVAg)這項化驗是確診是否患有甲型肝炎的指標。當出現(xiàn)陽性結(jié)果時，表示：患者被HAV 感染；表示患者可能有傳染性；由于HAV 感染后排毒的規(guī)律，在潛伏期末患者糞便已大量排毒，并達到高峰，發(fā)病后開始下降并迅速減低，通常于臨床發(fā)病34 周后，已難以從糞便中檢出HAVAg，因而應(yīng)結(jié)合其他檢測項目進行診斷。甲型肝炎病毒抗體(HAVAb) 這項化驗是判斷是否患有或曾經(jīng)患有甲型肝炎的指標。血清中HAVAb 含有多種組分，其中主要為IgM 型和IgG 型。當出現(xiàn)HAVAbIg

20、M 陽性結(jié)果時，表明患者為HAV 近期感染。丁型肝炎病毒(HDV)抗體(HDVAb) 這項化驗是確診是否患有丁型肝炎的指標。當出現(xiàn)陽性結(jié)果時，表示肝臟中有HDV 存在和/域復(fù)制。HDVAb分為lgM 型和IgG 型。戊型肝炎病毒(HEV)抗體(HEVAb)這項化驗是確診是否患有戊型肝炎的指標。當出現(xiàn)陽性結(jié)果時，表示患者為HEV 感染。HEVAb 分為IgM 型和IgG 型。庚型肝炎病毒(HGV)抗體(HGVAb) 這項化驗是確診是否患有庚型肝炎的指標。當出現(xiàn)陽性結(jié)果時，表示患者為HGV 感染。2.3腫瘤標志物檢測試劑2.3.1中國腫瘤發(fā)病情況分析目前，我國每年新發(fā)生的各種惡性腫瘤大約150 萬

21、人，死亡約130 萬人，大約占死亡總?cè)藬?shù)的18%。按這個死亡水平計算，全國每一分鐘就有25 人死于癌癥，每天將有3600 人被癌癥奪走生命。通過惡性腫瘤死亡率幾十年來動態(tài)變化可以看出，隨著我國經(jīng)濟的發(fā)展、人民生活水平的提高、行為生活方式的改變以及人口老齡化等原因，我國人口的死因譜已發(fā)生了很大變化。惡性腫瘤分類構(gòu)成在城鄉(xiāng)有分布的差異，由于城市在經(jīng)濟、衛(wèi)生、生活條件等方面較農(nóng)村為優(yōu)，因此，在食管癌、胃癌、肝癌、宮頸癌等方面，城市死亡率低于農(nóng)村。以食管癌表現(xiàn)最明顯，農(nóng)村死亡率為城市的2 倍多。但在另一方面，城市受環(huán)境污染和其他方面因素的影響，肺癌、乳腺癌、膀胱癌、腸癌等的死亡率也大大高于農(nóng)村。2.3

22、.2常用腫瘤標志物及主要臨床意義1.SCCA 鱗狀細胞癌相關(guān)抗原 (1.5ng/ml)對宮頸鱗癌、肺和頭頸部鱗癌診斷和療效監(jiān)測，復(fù)發(fā)監(jiān)測有重要意義。2.NSE 神經(jīng)元特異性烯醇化酶 (0-13ug/L)在SCLC、神經(jīng)母細胞瘤、APUD 系統(tǒng)腫瘤均可增高。3.TPA 組織多肽抗原(0-1ug/L)它為角蛋白8、18、19 片段，可反映腫瘤增殖狀態(tài)，用于膀胱癌、乳腺癌、肺癌、結(jié)直腸癌、宮頸癌、卵巢癌和肝膽腫瘤的輔助診斷。4.TPS 組織特異性多肽抗原(80u/L)它為角蛋白18 片段M3 抗原決定簇，是反映腫瘤細胞分裂和增殖活性的特異指標。與反映腫瘤容量的標志物CA153、CA125、CA199

23、、CEA、PSA 等聯(lián)用，既可反映腫瘤增殖活性，亦可反映瘤負荷大小，在乳腺癌、卵巢癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、肝癌和胃腸道腫瘤均可增高。5.Cyfra21-1 (0-6ng/L)它為細胞角蛋白19 片段。Cyfra21-1 對鱗癌敏感性76.5%，腺癌47.8%、小細胞肺癌（SCLC）42.1%。在肺鱗癌：I、II、III、VI 期分別為60%、88.8%、80%和100%。在惡性胸水和間皮瘤，診斷的敏感性和特異性也較高。6.CA72-4 腫瘤相關(guān)糖蛋白 (0-6 u/ml)它是乳腺癌、胃腸道癌和卵巢癌的標志物。在胃癌和卵巢癌敏感性45-50%，特異性幾乎100%。7.CA242 唾液酸化鞘糖

24、脂抗原(0-20u/ml)它對胰腺癌和膽道腫瘤的診斷較CA199 更具特異性。在結(jié)直腸癌、胃癌、卵巢癌、子宮癌、肺癌、頭頸部腫瘤等有較高敏感性和特異性。8.CA199 低聚糖類腫瘤相關(guān)抗原(0-37u/ml)這是胰腺癌敏感標志物，與AFP、CEA 聯(lián)用對胃腸道腫瘤的診斷更有價值。在卵巢癌、淋巴瘤、胃癌、肺癌、食道癌和乳腺癌陽性率約30%。9.CA153 粘蛋白樣大分子抗原 (0-30u/ml)在非轉(zhuǎn)移性乳腺癌有30-40%增高，而轉(zhuǎn)移性乳腺癌有70-80%增高。在肺癌、卵巢癌、胰腺癌、結(jié)直腸癌均可升高。10.CA125 粘蛋白樣糖蛋白復(fù)合物(0-35u/ml)在卵巢癌敏感性46%，特異性99%

25、，主要為漿液性卵巢癌。在胰腺癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、胃腸道惡性腫瘤、子宮癌均增高。11.PSA 前列腺特異性抗原(0-4ng/ml)它是前列腺疾病的最佳標志物，大于10ng/ml 時前列腺癌敏感性為99%。前 列腺肥大、急性前列腺炎亦可增高，F(xiàn)-PSA/PSA 比值有助于鑒別診斷。12.F-PSA 游離型PSA（0-1ng/ml）F-PSA/PSA 比值對前列腺癌與前列腺良性病變有重要鑒別診斷意義，PSA 濃度越高，F(xiàn)-PSA/PSA 比值越小，前列腺癌可能性越大。13.MG7-Ag 胃癌抗原（3.6±0.7u/ml）55%的胃癌 MG7-Ag 升高，5%假陽性。14.CEA 癌胚抗

26、原（0-5ng/ml）在結(jié)直腸癌，CEA 升高與分期相關(guān)，術(shù)前水平與術(shù)后復(fù)發(fā)時間及生存期相關(guān)。在乳腺癌、肺癌、胰腺癌和前列腺癌也可升高。在腦膜瘤患者腦脊液中CEA100%升高。15.AFP 甲胎蛋白（<25ng/ml）它是肝細胞和生殖細胞腫瘤的標志物，與HCG 和TPS 聯(lián)合應(yīng)用，有助于生殖細胞腫瘤和肝癌的鑒別診斷。16.HCG 人絨毛膜促性腺激素（<3ug/L）可用于妊娠診斷；滋養(yǎng)層惡性腫瘤敏感性100%，非精原睪原癌70%，精原細胞瘤10%；絨毛膜上皮癌，HCG 陽性，AFP 陰性；內(nèi)胚竇瘤（卵黃囊腫瘤）則AFP 陽性，HCG 陰性。17.2MG 2 微球蛋白(0-6ng/ml

27、)與漿細胞瘤數(shù)量成正比，并與骨髓瘤分期相關(guān)。還在其它幾種血液腫瘤（慢粒、淋巴瘤）和多種實體腫瘤（如膽管癌、肝癌、胃癌、結(jié)直腸癌、肺癌、食管癌、膀胱癌等）及某些非腫瘤疾病 （腎臟疾病、肝炎、肝硬化、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等）也可增高。18.Her-2/neu 表皮生長因子受體-2又稱CerbB2，在20-30%乳腺癌高表達， Her-2 高表達病人對內(nèi)分泌治療不敏感，易復(fù)發(fā)、易轉(zhuǎn)移。在卵巢癌也有高表達，且提示預(yù)后不良。19.S100 血清100 蛋白在許多惡性黑色素瘤晚期患者明顯升高，且能反映療效和轉(zhuǎn)歸并能早期預(yù)告復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。在神經(jīng)系統(tǒng)損傷和炎癥時，也可增高。20.EB 病毒抗體 IgA/IgG/IgM抗

28、EB 病毒早期抗原的抗體，可以反映EB 病毒的感染和致癌性，故常用于鼻咽癌、Burkitt 淋巴瘤輔助診斷依據(jù)。2.3.3 腫瘤標志物檢測的幾種方法標記免疫分析是一大類超靈敏度、高特異性檢測技術(shù)的總稱，因其具有許多獨特優(yōu)點，已成為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究及醫(yī)學(xué)檢驗的重要技術(shù)手段。它們的基本原理相同，只是依標記物的不同而最終測量到的信號各異。已被廣泛應(yīng)用的檢測方法主要有：放射免疫分析（RIA）、酶免疫分析（EIA）、時間分辨熒光免疫分析（TFIA）和化學(xué)發(fā)光免疫分析（CLIA）。1 放射免疫分析 放射免疫分析自20 世紀60 年代問世以來，在生物醫(yī)學(xué)各個領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。20 世紀90 年代，RIA 技

29、術(shù)研究的主要進展是試管固相法。有學(xué)者將試管固相法稱之為第四代RIA。固相RIA 和免疫放射測量法（IRMA）的靈敏度、特異性、穩(wěn)定性及測量范圍均優(yōu)于液相競爭法；尤其是不需要使用離心機進行分離，簡化了操作步驟，提高了檢測的精密度?；罨嚬躌IA和IRMA 技術(shù)系共價鍵結(jié)合，包被均一，穩(wěn)定性好，實現(xiàn)了分析技術(shù)一步法，易于實現(xiàn)自動化分析。2 酶免疫分析 由于RIA 和IRMA 有著自身固有的、難以克服的缺陷，Engvall 和Vanweemen 各自領(lǐng)導(dǎo)的研究小組分別以酶代替同位素，于1971 年創(chuàng)立了酶免疫分析技術(shù)(EIA)。因其標記物制備簡單，有效期長，對環(huán)境無污染等特點，EIA 技術(shù)得到了迅速

30、的普及和發(fā)展。20 世紀90 年代后期，在EIA 中引進了放大系統(tǒng)，主要是生物素親和素系統(tǒng)的應(yīng)用，使測定的靈敏度趕上或超過了RIA。（1）酶聯(lián)免疫熒光測量法（ELIFA）同時兼具酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）和熒光免疫分析（FIA）兩種方法的優(yōu)點，其靈敏度較傳統(tǒng)的ELISA 明顯提高，最小檢出值達10-15mol/L。（2）增強發(fā)光酶免疫分析法（ELEIA）是20 世紀80年代后期發(fā)展起來的新型免疫分析技術(shù)，其特點是：酶促增強發(fā)光信號，且發(fā)光信號保持穩(wěn)定，該方法的最小檢出值達10-20mol/孔。3 化學(xué)發(fā)光免疫分析 1981 年，Pannagli 將化學(xué)發(fā)光原理與免疫反應(yīng)結(jié)合起來，建立了化學(xué)

31、發(fā)光免疫分析法（CLIA）。這種方法雖然靈敏度可以達到放免的水平，但是影響檢測結(jié)果的因素較多，穩(wěn)定性較差，而且在發(fā)生化學(xué)反應(yīng)之后，樣品的發(fā)光無法再現(xiàn)。為了克服這一方法學(xué)上的缺陷，有的學(xué)者著手研究發(fā)光穩(wěn)定劑，以便使發(fā)光信號的持續(xù)時間延長。最近的研究結(jié)果證明，使用甲基吖啶酯標記抗體更為理想，因不必加催化劑，所以受外界因素的干擾少，且操作簡單，穩(wěn)定性高，標記蛋白后不影響發(fā)光信號的產(chǎn)生。目前，在這一領(lǐng)域全自動測定儀器的研制發(fā)展很快，極大地提高了該方法的分析效率和普及推廣。近年來，免疫電化學(xué)發(fā)光（IECL）技術(shù)正在快速發(fā)展。這一方法具有靈敏、快速、穩(wěn)定、選擇性強、重現(xiàn)性好、易于操作、方法靈活多樣的優(yōu)點。

32、它是集電化學(xué)發(fā)光、生物素抗生物素、免疫分析，并由固相免疫分析發(fā)展起來的磁微球等技術(shù)于一體，是眾多學(xué)科交叉的研究領(lǐng)域。IECL 分析方法多樣，廣泛地應(yīng)用于抗原、半抗原和抗體的免疫檢測，其線性范圍也較寬，符合臨床檢驗的需要。IECL 技術(shù)的發(fā)展趨勢在于合成新的發(fā)光標記物，優(yōu)化標記技術(shù)和免疫分析方法。3.體外診斷試劑的發(fā)展方向3.1 國內(nèi)體外診斷試劑的產(chǎn)業(yè)化現(xiàn)狀目前，國內(nèi)臨床診斷試劑市場規(guī)模已經(jīng)發(fā)展到每年30 億-40 億元人民幣的銷售額，其中傳統(tǒng)的臨床生化和免疫診斷是最大的兩個細分市場，約占到整個體外診斷試劑的60%左右，其它血液、尿液分析、微生物等市場分額相對較小，而分子診斷（PCR 診斷試劑）

33、發(fā)展迅速，市場份額快速提高。目前國內(nèi)主要的診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)有80多家，其中銷售額較大的有科華生物、復(fù)興醫(yī)藥、中生北控、上海容盛、華美生物等。同國外公司相比，國內(nèi)的企業(yè)普遍規(guī)模小、品種少，發(fā)展不均衡。大多數(shù)的生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品往往只是集中在一兩個細分市場，無法提供全系列診斷產(chǎn)品服務(wù)和技術(shù)支持。另外，國外也有許多公司在中國內(nèi)地設(shè)銷售機構(gòu)直接銷售產(chǎn)品，但主要是價格較高的封閉式儀器和試劑為主。3.2診斷試劑的研究和發(fā)展方向我國診斷試劑制藥產(chǎn)業(yè)的研發(fā)方向結(jié)合傳統(tǒng)醫(yī)藥的優(yōu)勢，發(fā)展重點應(yīng)針對腫瘤、心血管系統(tǒng)、艾滋病及免疫缺陷等重大疾病。我國作為一個12 億人口大國，每年人口凈增1700 萬，進入2000 年，60 歲以上的人口達到1