腸球菌屬紙片擴(kuò)散法藥物敏感試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、腸球菌屬紙片擴(kuò)散法藥物敏感試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1目的規(guī)范腸球菌屬紙片擴(kuò)散法藥物敏感試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，確保藥敏結(jié)果的準(zhǔn) 確。2適用范圍 本操作規(guī)程適用于腸球菌屬的細(xì)菌。3選藥原則3.1現(xiàn)行版本的CLSI M02和M100對腸球菌屬細(xì)菌紙片擴(kuò)散法藥物敏感試驗(yàn)的要求。3.2 本單位處方手冊中的抗菌藥物名冊。3.3 本單位上一年度腸球菌屬細(xì)菌耐藥監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)。4質(zhì)控紙片藥敏試驗(yàn)應(yīng)使用金黃色葡萄球菌 ATCC25923進(jìn)行質(zhì)量控制，質(zhì)控菌株 可接受的抑菌圈范圍參見現(xiàn)行版本的 CLSI M100-A19。5材料和儀器M-H培養(yǎng)基，無菌生理鹽水，藥敏紙片，無菌棉簽，35 E孵育箱，測量尺、 標(biāo)準(zhǔn)比濁管或比濁儀。6操

2、作步驟參見藥物敏感性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 。7判斷標(biāo)準(zhǔn)見表 5-51.表 5-51 腸球菌屬細(xì)菌紙片擴(kuò)散試驗(yàn)判斷標(biāo)準(zhǔn)藥備注敏判斷標(biāo)準(zhǔn)（mm紙片敏感(S)中介（1）耐藥（R）氨芐西林（10卩g）> 17< 16參見結(jié)果解釋 9.1、9.2萬古霉素（30卩g）> 171516< 14參見結(jié)果解釋9.3替考拉寧（30卩g）> 141113< 10慶大霉素（120卩g）> 106參見結(jié)果解釋9.4、9.5左氧氟沙星（5卩g）> 171416< 13呋喃妥因（300卩g）> 171516< 14利奈唑胺（30卩g）> 232122<

3、; 20磷霉素（200 yg> 211315< 12氯霉素（30 yg> 181317< 128注意事項(xiàng)8.1 抑菌圈直徑量取的范圍為包括藥敏紙片在內(nèi)的被藥物完全抑制的區(qū)域 （肉眼判斷）。藥敏平板應(yīng)置于無反光的黑色背景下，用反射光源肉眼觀測。但 萬古霉素的抑菌圈應(yīng)該用透視光源量取。 測量區(qū)域應(yīng)為肉眼觀察無明顯可見菌落 生長的區(qū)域， 忽略只有用放大鏡才能觀察到的位于抑菌圈外緣的細(xì)菌菌落。 如在 抑菌圈內(nèi)任何可辨別的菌落生長，則報(bào)告該菌株對萬古霉素耐藥。8.2 對腸球菌屬細(xì)菌而言，頭孢菌素、氨基糖苷類（高濃度除外） 、克林霉 素和復(fù)方新諾明體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果可能敏感， 但臨床

4、治療無效， 因此不應(yīng)報(bào)告為 敏感。9結(jié)果解釋9.1 氨芐西林的藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果可代表細(xì)菌對氨芐西林和阿莫西林的敏 感性。在非產(chǎn)酶的腸球菌中，氨芐西林敏感提示菌株對阿莫西林 - 克拉維酸、氨 芐西林 -舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林 - 他唑巴坦敏感。9.2紙片擴(kuò)散法和稀釋法均無法準(zhǔn)確判斷菌株是否由于產(chǎn)B-內(nèi)酰胺酶而引起對氨芐西林和青霉素的耐藥性， 因此對于從血液和腦脊液分離的菌株需要用頭 抱噻吩進(jìn)行檢測菌株是否產(chǎn)B -內(nèi)酰胺酶，見產(chǎn)色素頭抱菌素試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。9.3 在進(jìn)行腸球菌的萬古霉素藥物敏感試驗(yàn)時(shí)， 藥敏平板孵育要足 24 小時(shí)， 須用透視光源量取抑菌圈直徑，對于萬古霉素中介的腸球菌應(yīng)用

5、MIC 進(jìn)行檢測， 有關(guān)耐萬古霉素腸球菌的檢測參見萬古霉素腸球菌篩選試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 。9.4 氨芐西林、青霉素或萬古霉素與一種氨基糖苷類抗菌藥需要先進(jìn)行菌株對高濃度氨基糖苷類的藥物敏感試驗(yàn)（慶大霉素和鏈霉素），其他氨基糖苷類抗 菌藥的效果并不比這兩種更好，因此無需檢測。9.5敏感提示可以與細(xì)胞壁活性的抗菌藥（如氨芐西林、青霉素和萬古霉素 等）抗菌藥聯(lián)合使用，79mm為不確定，應(yīng)進(jìn)行瓊脂稀釋法或肉湯稀釋法進(jìn)行 確認(rèn)，耐藥表明不能與細(xì)胞壁活性抗菌聯(lián)合使用。An timicrobial參Testi ng;Ni netee nthIn formatio nalSusceptibilitySuppleme nt.CLSIdocume ntM100-S19.Way ne,PA:Cli ni cal a nd Laboratory Sta ndards In