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文檔簡介

1、邵明邵明生命科學學院發(fā)育生物學研究所斑馬魚發(fā)育時期的計算公式:斑馬魚發(fā)育時期的計算公式:HT = h / (0.055T- 0.57) HT = h / (0.055T- 0.57) HTHT = = 在溫度在溫度T T條件下所發(fā)育的小時數(shù);條件下所發(fā)育的小時數(shù); h h = = 在在28.5 28.5 的標準條件下的標準條件下所發(fā)育到的小時數(shù)。所發(fā)育到的小時數(shù)。斑馬魚的早期發(fā)育(從受精到原腸作用結束)斑馬魚的早期發(fā)育(從受精到原腸作用結束)世代周期短(約1.53個月),發(fā)育迅速胚胎透明,易于觀察斑馬魚飼養(yǎng)管理較為簡單,產卵量大是目前唯一可以進行大規(guī)模遺傳突變篩選的脊椎動物,已成為目前最好的脊

2、椎動物發(fā)育遺傳學研究體系之一解剖學手段 Developmental anatomy試驗手段 Experimenta approach遺傳手段 Developmental Genetics 1. 1. 某一部位的細胞將來發(fā)育成什么組織某一部位的細胞將來發(fā)育成什么組織2. 2. 胚胎某部分的細胞在形態(tài)發(fā)生過程中的行為胚胎某部分的細胞在形態(tài)發(fā)生過程中的行為細胞標記細胞標記熒光標記By photoconversionCaged dyesKaedeKaedeUVCaged dyeDMNB caged fluoresceinDMNB caged fluorescein試驗手段試驗手段:通過:通過擾亂擾亂和

3、和破壞破壞來觀察胚胎的反應,目的來觀察胚胎的反應,目的是研究胚胎發(fā)育某個過程的機理是研究胚胎發(fā)育某個過程的機理顯微注射顯微移植術缺損實驗重組實驗Developmental Genetics非同位素的標記:地高辛(Digoxigenin)標記探針的原位雜交loss of function正向:誘變,轉基因引起的插入突變反向:基因敲除技術,基因敲低技術-gain of function基因瞬時高表達持續(xù)過量表達錯誤表達斑馬魚的正向遺傳學篩選(ENU,virus,transposon)Ekker et. al. 2011Recent work on the DNA-binding propertie

4、s of transcription activator-like effector (TALE) proteins has shown that their specificity also relies on only a few key residues with a predictable code that can be used to design new DNA-binding proteins. Non-homologous end joining (NHEJ) 我們實驗室參加了全國斑馬魚一號染色體敲除聯(lián)盟,一號染色體約1500個基因,我們負責60個。Morpholino:Morpholino: 一種一種RNARNA的類似物的類似物Morpholino Morpholino 介導的特異的介導的特異的 knockdownknockdownGSK3S9A constitutively active

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