天女木蘭組織培養(yǎng)抗褐化探究

1、天女木蘭組織培養(yǎng)抗褐化探究摘要：從外植體類型、外植體預(yù)處理方法、培養(yǎng)基類型、 抗褐化劑類型及培養(yǎng)條件等方面研究了天女木蘭(m a g n o 1 i a s i e b o 1 d i i k. koch)組織培養(yǎng) 過程中的褐化問題。結(jié)果表明，b5培養(yǎng)基對(duì)防止外植體褐 化效果好，外植體在ms培養(yǎng)基中褐化嚴(yán)重。外植體的取材 部位與天女木蘭的褐化程度密切相關(guān)，側(cè)芽褐化率相對(duì)較 低，其次是頂芽，帶芽的莖段褐化率最髙。在b 5 + 0 . 5 m g / l 6 b a + 0 . 3 m g / l i b a 培養(yǎng)基中添 加適宜濃度的抗氧化劑、吸附劑有利于抑制天女木蘭的褐 化，抗褐化效果是聚乙烯基

2、毗咯烷酮(pvp) 維生素c (vc ) 活性炭(ac)。用1 g / l v c浸泡外植體4 h可有效減輕褐化。培養(yǎng)初期一定的低溫和暗培養(yǎng)可以減輕 天女木蘭的褐化。關(guān)鍵詞：天女木蘭(ma g n o 1 i a s i e b o 1 d i i k. koch)；組織培養(yǎng)；抗褐化中圖分類號(hào)：s 7 9 2 . 9 9 ； q 9 4 3 .1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：a 文章編號(hào)：0439- 8 114 ( 2 0 12) 14-3107-03study on browning controlling of magnolia sieboldii in tissue culturewang huanl,

3、2, du feng guo2,zhang zh ix i angl, q i c u i c u i 2(1. col lege o f biological s c i e n c e and biotechnology, b e i j i n g fores try u n i v e r s ity, b e i j i n g 100083, china； 2jili n province key lab of fores try and ecological e n v i r o n m ent forestry col lege, b e i h u a u n i v e

4、r s ity, jilin 132013, j i 1 i n , china)abstract： factors a f f e c t i n g browning p rob 1 em of magno 1 i a s i e b o 1 d i i k koch i n c 1 u d i n g type o f e x p 1 a n t s , p r e t r e a t m e n t o f e x p 1 a n t s , med i u m, ant ibrowning subs tances a n d c u 1 t u r e conditions were

5、 studied the results showed that b 5 medium could p r e v e n t the e x p 1 a n t s f rom brownin g well while browning was s er i o u s on ms medium. the typeo f e x p 1 a n t playeda n important role i n b r o w n in g the b rowning rate o f 1 a te r a 1 buda s theowes t , followed b ybud； and the

6、 b r o w n if the s t e m w i t h bud i g h e s t soaking exp1 g / l vc for 4 h c o uv i a t e browning e f f e cbrowning could b e r etrained b y adding ant i o x i d n t and absorbent a t a p p r o p i a t e concent rat ionn i n t h medium b 5 + 0. 5 m g / l 6 b a + 0 .m g / l i b a the antibrowni

7、ngfeet ranked a spvp>vc>aclow temperatureand darkt i v a t i o n a t theearly s to f culti vationcould r ei e v e the browning problem key words： magnolia s i e b1 d i i k koch； tissue c u 1 t u r e ； anti browning天女木蘭(m a g n o 1 i a s i e b o 1 d i i k. koch)又名天女花、小花木蘭，為木蘭科木蘭屬 落葉小喬木，是第四紀(jì)冰川時(shí)期

8、幸存的珍稀植物，是國(guó)家重 點(diǎn)保護(hù)的易危植物和吉林省一級(jí)保護(hù)植物1 ,也是中國(guó) 惟一分布于東北地區(qū)的木蘭科植物2。它集觀葉、觀花、 觀果于一身，同時(shí)全株含有芳香油，可以被用于提取高級(jí)香 料并具有很高的藥用價(jià)值。目前，主要通過種子繁殖和抒插繁殖培育苗木，但種子 繁殖存在采種難、生理休眠的問題，抒插繁殖存在生根慢及 生根率低等問題3 6。運(yùn)用組織培養(yǎng)技術(shù)是建立天女 木蘭無性繁殖的重要手段，不僅能有效解決種源欠缺的問 題，而且還能保留母樹的優(yōu)良性狀，快速繁育良種。已有一 些學(xué)者開展了天女木蘭的組織培養(yǎng)研究工作，但存在繁殖系 數(shù)低、褐化及生根難等問題7 9。因此如何克服褐化 成為天女木蘭組織培養(yǎng)快速繁殖

9、成功與否的關(guān)鍵之一，而關(guān) 于天女木蘭組織培養(yǎng)快速繁殖中的褐化問題研究較少?；?此，研究了外植體類型、外植體預(yù)處理方法、培養(yǎng)基類型、 培養(yǎng)條件及抗褐化劑類型等對(duì)天女木蘭組織培養(yǎng)過程中外 植體褐化的影響，以期為天女木蘭組織培養(yǎng)快速繁殖提供參 考，對(duì)挽救和保護(hù)這個(gè)珍稀瀕危樹種也具有重要意義。1材料與方法1. 1材料試驗(yàn)材料為取自吉林市龍?zhí)秴^(qū)江密峰苗圃的8年生的 長(zhǎng)勢(shì)良好的天女木蘭實(shí)生苗，分別在3、4月初剪取天女木 蘭當(dāng)年生健壯的休眠枝條，在室內(nèi)水培71 0 d,待芽 萌動(dòng)膨大時(shí)再接種；在57月剪取天女木蘭新萌發(fā)的幼嫩 枝條做試驗(yàn)。1 . 2方法采用單因素試驗(yàn)，每個(gè)處理接1 0瓶，重復(fù)3次。剪取 帶芽的莖段、頂芽和側(cè)芽，放入洗潔精溶液中浸泡2 0 m i n,再用流水沖洗2 h ,然后在超凈工作臺(tái)上用體積分 數(shù)為7 5 %的乙醇對(duì)其表面消毒3 0 s ,用無菌水沖洗 23次，然后用1 g / l h g c 1 2處理78 m i n,用無菌水沖洗56次。將0. 51. 0 cm的芽 或帶芽的莖段分別接種到相應(yīng)的培養(yǎng)基中。如無特殊說