半數(shù)致死量的測(cè)定

1、半數(shù)致死量的測(cè)定半數(shù)致死量的測(cè)定預(yù)防獸醫(yī)學(xué) 弓建芳1309064006半數(shù)致死量LD50是藥物、毒物及病原微生物等毒力水平的一個(gè)標(biāo)志。它表示使全部實(shí)驗(yàn)對(duì)象有一半死亡所需的藥物劑量或濃度。測(cè)定LD50的方法很多，如目測(cè)機(jī)率單位法、寇氏法、直線回歸法、累計(jì)法及序貫法等。一、一、寇氏法寇氏法（Karbers method）寇氏法在實(shí)際工作中較常用，計(jì)算簡(jiǎn)便，結(jié)果較準(zhǔn)確。【條件】 1.劑量必須按等比級(jí)數(shù)（劑量對(duì)數(shù)按等級(jí)數(shù)）分組。 2.各組動(dòng)物數(shù)應(yīng)相等。 3.“反應(yīng)”應(yīng)大致呈正態(tài)分布。最小劑量組的死亡率（Pn）應(yīng)為0%，最大劑量組的死亡率（Pm）應(yīng)為 100%；如果Pn80%用校正公式計(jì)算；如Pn20%

2、或Pm80% 用此法計(jì)算結(jié)果不太準(zhǔn)確。校正公式：lg LD50XKd)43(PnPmP計(jì)算步驟計(jì)算步驟1、計(jì)算lgLD50公式為 lgLD50= （Xi+Xi+1）（Pi+1Pi） i組號(hào)；（Xi+Xi+1）相鄰兩組對(duì)數(shù)劑量之和（Pi+1Pi）相鄰的兩組死亡率之差21簡(jiǎn)化公式簡(jiǎn)化公式若相鄰對(duì)數(shù)劑量是等差級(jí)數(shù)即藥物劑量是等比級(jí)數(shù)則公式為lgLD50=Xk d/2（Pi+Pi+1）Xk :最大對(duì)數(shù)劑量d：相鄰兩組對(duì)數(shù)劑量之差，即相鄰劑量比值的對(duì)數(shù)也可以直接按照前面的校正公式計(jì)算計(jì)算步驟計(jì)算步驟 2、求lgLD50的反對(duì)數(shù)LD503、求lgLD50的標(biāo)準(zhǔn)誤SlgLD50 SlgLD50=d4、求lg

3、LD50的95%的置信區(qū)間 Ig-1（lgLD50 1.96SlgLD50）niPiPi)1(例題例題 為了研究銨碘消毒劑對(duì)建鯉毒力的影響，隨機(jī)撈取210尾規(guī)格基本一致的鯉魚，放入缸內(nèi)，每缸30尾，1組對(duì)照，6組處理。以等對(duì)數(shù)間距設(shè)置6個(gè)劑量水平（單位ml/m3），量取藥液并加入缸內(nèi)，攪拌均勻，96小時(shí)后得如下表中結(jié)果。試求銨碘對(duì)建鯉的半數(shù)致死量。不同劑量銨碘對(duì)建鯉的致死資料不同劑量銨碘對(duì)建鯉的致死資料 組別組別劑量劑量動(dòng)物數(shù)動(dòng)物數(shù)死亡數(shù)死亡數(shù)死亡率死亡率140.0003000.000247.1563030.100355.59230150.500465.53830200.667577.2623

4、0270.900691.08530301.000解題步驟解題步驟1、計(jì)算lgLD50lgLD50=Xk d/2（Pi+Pi+1） =lg91.085 lg =1.76882、LD50=Ig-1（lgLD50）=58.7223、 SlgLD50=0.0714 =0.01054、LD5095%的置信區(qū)間 Ig-1（lgLD50 1.96SlgLD50）=Ig-1（1.7688 1.96x0.0105)3001.309 . 01 . 0301021000.40156.47(0+0.1+.+0.9+1)計(jì)算結(jié)果計(jì)算結(jié)果銨碘消毒劑對(duì)建鯉的半數(shù)致死量在95%的置信區(qū)間為：56.079ml/m361.572

5、ml/m3。即銨碘消毒劑使一半建鯉死亡的平均劑量最小為56.079ml/m3最大為61.572ml/m3，做出這一推斷的置信度為95%。計(jì)算結(jié)果計(jì)算結(jié)果LD5099%的置信區(qū)間 Ig-1（lgLD50 2.58SlgLD50）=Ig-1（1.7688 2.58x0.0105）銨碘消毒劑對(duì)建鯉的半數(shù)致死量在99%的置信區(qū)間為：55.171ml/m362.501ml/m3。即銨碘消毒劑使一半建鯉死亡的平均劑量最小為55.171ml/m3最大為62.501ml/m3，做出這一推斷的置信度為99%。公式推導(dǎo)公式推導(dǎo)o 由圖可知：矩形AFEDAFADlg LD501lg LD50=XK-d/2(Pi+P

6、i+1)=XK-d/2 (P1+P2+P2+P3.+Pi+1)=XK-d/2 【2P（P1+Pi+1）】=XK-d（P0.5） 二、序貫法二、序貫法最節(jié)省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的方法，又稱“上下法”，適于反應(yīng)快速的藥物實(shí)驗(yàn)，但不能估計(jì)誤差，無法進(jìn)行LD50的顯著性檢驗(yàn)。方法：1、根據(jù)經(jīng)驗(yàn)選擇一個(gè)近50%反應(yīng)率的等比級(jí)數(shù)劑量組，通常用4-6個(gè)劑量組；2、給動(dòng)物注射，當(dāng)前一只動(dòng)物出現(xiàn)陰性反應(yīng)時(shí)，就選用較高一級(jí)的劑量給予下一只動(dòng)物；當(dāng)出現(xiàn)陽性反應(yīng)時(shí)，就給下一只動(dòng)物較低一級(jí)的劑量，直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束；3、計(jì)算各劑量動(dòng)物總數(shù)n與劑量對(duì)數(shù)x的乘積之和（nx ）；4、計(jì)算lgLD50=（nx）/n ；5、取反對(duì)數(shù)得到LD50

7、。 特別注意特別注意o 后一動(dòng)物劑量上升或下降由由前一動(dòng)物的死亡或存活決定，從第一只改變算起到最后一只止，最后的終止號(hào)也作為一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果。o 若最后一只動(dòng)物死亡，下降一格畫“x”，以存活計(jì)數(shù)；若最后用一只動(dòng)物存活，上升一格畫“x”，以死亡計(jì)數(shù)。例題例題為測(cè)定某試劑的安全性，用序貫法測(cè)定此試劑小白鼠腹腔注射的LD50（mg/kg）,選用1月齡小白鼠22只，給藥的對(duì)數(shù)劑量應(yīng)從估計(jì)最可能接近LD50的劑量開始，本例從1.85開始，死亡記為“+”號(hào)，存活記為“-”號(hào)。測(cè)定結(jié)果測(cè)定結(jié)果某試劑的某試劑的LD50值測(cè)定結(jié)果對(duì)數(shù)劑量對(duì)數(shù)劑量1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 111213141516171819202122231.95+1.90+-+1.85+-+-+1.80-+-+-+1.75-x整理與計(jì)算整理與計(jì)算 對(duì)數(shù)劑量對(duì)數(shù)劑量x死亡死亡存活存活合計(jì)合計(jì)n1.951011.902131.856281.803581.75