論痰結(jié)核桿菌培養(yǎng)的關(guān)鍵點(diǎn)

1、論痰結(jié)核桿菌培養(yǎng)的關(guān)鍵點(diǎn)(江蘇省丹陽市疾病預(yù)防控制中心 江蘇 丹陽212300)【摘要】研究數(shù)據(jù)表明結(jié)核桿菌培養(yǎng)的陽性率高于直接涂片，且對(duì)結(jié)核桿 菌藥物敏感性試驗(yàn)用于指導(dǎo)臨床用藥起著重要作用，因此要加強(qiáng)結(jié)核桿菌培養(yǎng)質(zhì) 量控制，提高結(jié)核桿菌培養(yǎng)的陽性率?！娟P(guān)鍵詞】痰結(jié)核桿菌；培養(yǎng)；關(guān)鍵點(diǎn)【中圖分類號(hào)】r37【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】a【文章編號(hào)】2095-1752 (2016) 34-0348-02結(jié)核病是嚴(yán)重危害人類健康的慢性傳染病.全球己有20億人感染結(jié)核菌， 1993年who宣布“全球結(jié)核病處于緊急狀態(tài)”，把結(jié)核病列為重點(diǎn)控制的傳染 病1。痰結(jié)核桿菌檢查包括直接涂片和培養(yǎng)。我們認(rèn)為要做好結(jié)核桿菌培養(yǎng)，

2、 以下幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)顯得尤為重要。1人員的管理實(shí)驗(yàn)室專業(yè)技術(shù)人員過硬的檢驗(yàn)水平是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的重要條件; 檢驗(yàn)人員必須有扎實(shí)的與其工作任務(wù)相適應(yīng)的理論知識(shí)、豐富的實(shí)踐工作能力和 分析判斷能力，要有高度的工作責(zé)任心和嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的工作態(tài)度，人員要保持穩(wěn)定, 經(jīng)過結(jié)核病參比實(shí)驗(yàn)室培訓(xùn)，考核合格持證上崗。2.檢測(cè)方法檢測(cè)方法是檢測(cè)工作進(jìn)行的重要依據(jù)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格按照分枝桿菌分離培 養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序及質(zhì)量保證手冊(cè)進(jìn)行羅氏培養(yǎng)基的制備或購(gòu)買、儲(chǔ)存，痰標(biāo) 木的收集、儲(chǔ)存和運(yùn)輸，痰標(biāo)木結(jié)核菌分離培養(yǎng)，結(jié)核菌株的鑒定、保存和運(yùn)輸， 以及廢棄物處理等。3.痰標(biāo)木質(zhì)量痰標(biāo)本的正確留取與送檢是保證痰標(biāo)本質(zhì)量的前提，

3、而痰標(biāo)本質(zhì)量肓接影響 檢驗(yàn)結(jié)果。臨床上常由于患者對(duì)正確留取痰標(biāo)本主觀意識(shí)不強(qiáng)、不能正確掌握留 痰方法、部分患者痰標(biāo)本獲得困難、醫(yī)護(hù)人員宣教督導(dǎo)不夠、痰標(biāo)本未做初步篩 選等諸多因素，導(dǎo)致痰標(biāo)本不能及吋、正確留取，影響了培養(yǎng)的陽性率。針對(duì)這 些影響因素，在留取痰液的前、中、后必須采取相應(yīng)的措施，提高送檢痰標(biāo)本的 質(zhì)量。4 痰標(biāo)本的前處理痰標(biāo)本前處理（s的是殺滅或抑制雜菌生長(zhǎng)）0前主要采用堿處理法。取痰液 12ml,根據(jù)痰標(biāo)本的性質(zhì)加12倍的4%naoh,渦旋震蕩30秒，室溫靜置 15分鐘，使痰液充分液化。整個(gè)前處理時(shí)間從加4%naoh到接種完成不得超 過20min,這一步驟非常重要，直接影響培養(yǎng)的

4、陽性率，4%naoh加入量過多, 標(biāo)本被稀釋，破壞了結(jié)核桿菌；太少，消化不完全，不能殺死雜菌，容易造成污 染，均能導(dǎo)致培養(yǎng)的陽性率降低，一定要根據(jù)痰標(biāo)本的粘稠程度適當(dāng)增減堿液的 加入量，標(biāo)本數(shù)量較多時(shí)，應(yīng)分批處理。提高培養(yǎng)陽性率，就要控制污染率，污 染率必須控制在2%以下，污染率高，提示培養(yǎng)基滅菌不佳、被污染或標(biāo)本前處 理不當(dāng)，無菌接種操作不當(dāng)，應(yīng)采取相應(yīng)措施，查找和分析原因。5 .接種量接種量控制在0.10.15ml,并口均勻鋪在培養(yǎng)基的表面，量少影響陽性率， 量多培養(yǎng)基緩沖不過來也影響結(jié)核桿菌生長(zhǎng)。6.培養(yǎng)基評(píng)估商業(yè)提供的培養(yǎng)基需要評(píng)估，實(shí)驗(yàn)室不得使用不符合要求的培養(yǎng)基。合 格的羅氏培養(yǎng)基

5、的外觀為斜面顏色新鮮、表面光滑無氣泡、質(zhì)地均勻無變形、具 有一定韌性和酸堿緩沖能力，所用培養(yǎng)基必須是合格并在有效期內(nèi)使用，每批培 養(yǎng)基的購(gòu)買使用都要有相應(yīng)的記錄并ii用已知標(biāo)準(zhǔn)菌株h37rv進(jìn)行質(zhì)控，對(duì)其 的性能進(jìn)行評(píng)估，自配的培養(yǎng)基使用前還需做無菌實(shí)驗(yàn)合格后方可使用。7 .設(shè)施和設(shè)備實(shí)驗(yàn)室布局要合理，辦公區(qū)和實(shí)驗(yàn)區(qū)要嚴(yán)格分開，并有明顯的標(biāo)志，制定切 實(shí)可行的生物安全制度并嚴(yán)格執(zhí)行，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理，防止交叉污染。儀器 設(shè)備的正常運(yùn)行是保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠的重要因素，培養(yǎng)箱和冰箱等恒溫設(shè) 備每天進(jìn)行溫度監(jiān)控，溫度必須控制在允許的范圍內(nèi)，定期清潔消毒和化霜(冰 箱)，培養(yǎng)箱每年一次溫場(chǎng)檢定，

6、生物安全柜在安裝和使用中需定期檢定，及吋 掌握環(huán)境設(shè)施和儀器的工作狀態(tài)，當(dāng)不能滿足檢測(cè)要求時(shí)，應(yīng)立即停止工作，采 取有效措施整改，直至滿足要求。8.室間質(zhì)量控制通過室間質(zhì)控可以有一個(gè)縱向比較，了解實(shí)驗(yàn)室在本地區(qū)的技術(shù)地位并找出 不足和差距有利于實(shí)驗(yàn)室水平的提高。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)積極參加室間質(zhì)控活動(dòng)，制訂實(shí) 驗(yàn)室質(zhì)量控制計(jì)劃并組織實(shí)施，參加各級(jí)結(jié)核病參比實(shí)驗(yàn)室組織的質(zhì)量評(píng)估活動(dòng)。結(jié)核桿菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室只有對(duì)影響檢測(cè)質(zhì)量的所有相關(guān)因素尤其是以上八個(gè) 關(guān)鍵點(diǎn)進(jìn)行有效控制，并且在工作中獲得持續(xù)改進(jìn)，才能保證痰培養(yǎng)結(jié)果的準(zhǔn)確、 可靠?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1張勇棋等臨床標(biāo)本結(jié)核菌涂片檢查的質(zhì)量控制j現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2005, 20(6)： 82.趙雁林，等分枝桿菌分離培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序及質(zhì)量保證手冊(cè)m北京： 人民衛(wèi)生出版社第一版，2013： 16-47.3張佩英提高痰培養(yǎng)標(biāo)本質(zhì)量