關(guān)于血清的一些問題

1、實驗室里常會遇到的關(guān)于血清的問題1.保存血清最好的方法?我們建議血清應(yīng)保存在-5至-2O。然而，若存放于4時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2.培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎?一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。3.如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?我們建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于28冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、

2、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20以下儲存血清，并避免反復(fù)凍融。解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。 請勿將血清置于37太久。若在37放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。4.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的

3、質(zhì)量。若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g,1-2分鐘稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞您的過濾膜。 大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37就會再溶解。所以，使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37，沉淀會自然消失。5.如何避免沉淀？按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：(1)解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。(2) 血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。(3) 勿直接由-20直接至37解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。(4) 勿將血清置

4、于37太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。(6) 若必須做血清的熱滅活，請遵守56，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。6.為什么要熱滅活血清?加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細胞，昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。 7.有必要做熱滅活嗎?實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。

5、經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或完全沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此我們建議您，若非必須，您可以不需要做熱處理這一步。如此一來，不但節(jié)省您寶貴的時間，更確保血清的質(zhì)量! 8.細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理？一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài)，黑點是否

6、游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：(1)細胞生長過老，破碎的細胞殘骸;(2)血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果;(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細胞生長;(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點;(5)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。9.細胞培養(yǎng)中如何防止黑點？(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。(2) 培養(yǎng)基無需37水浴。(3) 培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0- 7

7、.2。(4) 嚴格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。(5) 掌握細胞傳代的最佳時機，細胞切勿生長過老。10.為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀?胎牛血清 沒有預(yù)老化，儲存在28時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在20儲存胎牛血清，避免反復(fù)凍融。 11.如何避免沉淀物的產(chǎn)生?我們建議您在使用血清的時候，注意下列的操作: 解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-20至4至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20至37)，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要

8、，可以無須做此步驟。 若必須做血清的熱滅活，請遵守56，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。12.牛血清對細胞及病毒滴度的影響 血清是一種成分復(fù)雜的混合物，不同批次血清對細胞生長的促進作用不同。大規(guī)模細胞培養(yǎng)中由血清引起的細胞生長狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響表現(xiàn)在以下幾個方面： 1、細胞生長速度緩慢，長滿單層時間長；從同一細胞瓶中分出兩瓶細胞，用同一種培養(yǎng)液，分別加入10的對照血清和待檢血清，在相同條件下培養(yǎng)72小時，會出現(xiàn)對照血清長滿單層，而待檢血清大約只有6070，這種血清就不適合用來大規(guī)模培養(yǎng)細胞。 2、細胞傳代后形態(tài)不正常，細胞狀態(tài)發(fā)生變

9、化 ；由于血清的質(zhì)量問題，使原本狀態(tài)正常的細胞經(jīng)傳代后形態(tài)會變差；比如：細胞瓶里會出現(xiàn)一些蠕動的小黑點（并非污染），或者細胞表面形成一層油狀覆蓋物；細胞的輪廓變得模糊，細胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充，從而影響細胞向四周擴展生長。 3、細胞傳幾代后就出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象，不能連續(xù)傳代 ；質(zhì)量較差的血清缺乏某種細胞的貼壁因子，會使細胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的能力。細胞會從正常的貼壁狀態(tài)，邊緣開始萎縮，上翹。觀察到的現(xiàn)象就是細胞表面不光滑，晃動細胞瓶會看到細胞表面有絮狀物隨培養(yǎng)液波動。隨著傳代次數(shù)增加，細胞萎縮的情況越來越嚴重，直到最終完全脫壁而死亡。 4、細胞長的很好，致密的單層，狀態(tài)也很正常，但

10、是接毒后細胞基本不發(fā)生病變，做滴度檢測幾乎測不出抗原滴度。這種情況也許是因為血清中含有與接種的病毒有同源的特異性抗體。比如血清中經(jīng)常會存在乙腦抗體，牛腹瀉病毒抗體等，如果存在這些抗體，就會把接進去的病毒給中和掉。如果抗體滴度很高，病毒會被抗體完全中和，就沒有病毒顆粒在細胞中增殖，所以會檢測不到病毒滴度。這種情況給疫苗企業(yè)造成的損失是相當大的，不產(chǎn)毒等于前面所做的那么多工作全部白費，浪費人力、物力，尤其是時間上的浪費，從培養(yǎng)細胞開始到接病毒，到收液至少需要一兩個月，一旦出現(xiàn)不產(chǎn)毒的情況，那么這一兩月時間就白白浪費掉了，這也是牛血清給疫苗企業(yè)造成的風(fēng)險之一。 5、細胞生長的狀態(tài)一般，產(chǎn)毒少，毒價低

11、。這種情況比較常見，細胞是病毒的載體，由于血清質(zhì)量不好，導(dǎo)致細胞生長狀態(tài)不好，病毒就無法進行正常的復(fù)制。并非所有病毒都不能復(fù)制，所以就造成疫苗的效價不夠，可能造成不合格產(chǎn)品。13.牛血清給生物制品帶來的問題 對于使用傳統(tǒng)培養(yǎng)基培養(yǎng)的大多數(shù)細胞來說，添加牛血清是必不可少的。但是牛血清的使用也給細胞培養(yǎng)和生物制品的生產(chǎn)帶來很多問題，并成為生物制品生產(chǎn)水平達到最優(yōu)化和實現(xiàn)經(jīng)濟性目標的一大障礙。 1、批間差異 血清是一種成分復(fù)雜而且不確定的混合物，不同來源的血清成分存在很大的差異，因此支持細胞生長的效果也有較大差別。而每批血清的批量是有限的，所以換血清批號時要預(yù)先做大量的篩選實驗，以確定對細胞生長影響

12、最小的血清。不但增加工作量,而且如果因為一時篩選不出合適的血清還會導(dǎo)致生產(chǎn)停滯。 2、動物來源成分 因為來源于動物,所以有可能攜帶傳染源,包括病毒和有毒物質(zhì),任何一種傳染源都有可能對正在生長的細胞系或者制品帶來風(fēng)險；不同來源的血清存在某些特異性病毒抗體（比如：乙腦抗體、牛腹瀉性病毒抗體等），直接影響接毒后病毒的復(fù)制，可能導(dǎo)致不產(chǎn)毒或毒價偏低，從而給疫苗生產(chǎn)造成巨大損失。 3、提高生產(chǎn)成本 目前市場銷售的血清平均價格約0.25元/ml，按10添加量計算，1L培養(yǎng)液中血清所占的成本是25元，培養(yǎng)基及其他添加物的成本約為6元，每升培養(yǎng)液的成本中血清約占80，由此可見血清在疫苗生產(chǎn)中占據(jù)了大量的生產(chǎn)成

13、本。 4、行業(yè)競爭導(dǎo)致質(zhì)量難以提高 由于國內(nèi)牛血清生產(chǎn)廠家增多，而用戶的數(shù)量有限。為了獲得客戶資源，很多血清廠家都在進行低價銷售，行業(yè)內(nèi)形成一種惡性的價格競爭。低價格帶來的結(jié)果就是低質(zhì)量的血清。目前很多血清廠家都處于維持生存的狀態(tài)，因此難以投入大量資金和人力來提高血清的質(zhì)量。 5、血清蛋白引起的疫苗純化問題 由于血清含有大量的不同分子量的未知蛋白和多肽類物質(zhì)，勢必會增加提取，分離，純化的步驟，增加了下游純化處理的難度，因此在疫苗純化階段給純化工作帶來很大的困難；疫苗產(chǎn)品中牛血清白蛋白殘留量要求不高于50ng/劑，為達到純化的目的，純化工藝不得不添加新的儀器設(shè)備；在除去牛血清白蛋白殘留的同時，也

14、會損失大量的有效目的產(chǎn)物，從而降低了疫苗的產(chǎn)率；牛血清中的某些蛋白與目的產(chǎn)物的分子量接近，在純化過程中不能完全被去除，由于血清殘留而導(dǎo)致的生物制品不合格，或者因為雜蛋白含量大造成嚴重不良反應(yīng)的情況時有出現(xiàn).因此也會嚴重影響疫苗產(chǎn)品的質(zhì)量。6、改變培養(yǎng)液的pH值 牛血清的pH理論值為7.08.0，培養(yǎng)基在加入規(guī)定量的碳酸氫鈉后（即達到細胞生長所需要的滲透壓），再加入10的牛血清，一般會使培養(yǎng)液的pH值發(fā)生改變。因此在使用過程中應(yīng)注意pH的變化，如有必要可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl調(diào)pH到所需值。 7、由于血清的營養(yǎng)成分豐富，非常適合細菌、真菌和支原體等生長。國產(chǎn)血清大部分采用

15、手工分裝，因此容易把微生物帶入而使得血清被污染。使用前如果沒有及時發(fā)現(xiàn)，將會把污染物帶入正在培養(yǎng)的細胞中，而使得細胞不能正常生長。 8、血清在貯存解凍過程中會產(chǎn)生沉淀，這是由于血清中含有大量脂蛋白、纖維蛋白及多肽類物質(zhì)，在-15冷凍保存解凍后就會自然形成沉淀，隨著保存時間的延長，沉淀量會增加。因此在融化血清時一般應(yīng)先在4放置使之解凍，然后放在室溫使血清完全融化，以避免沉淀的增加。添加血清時應(yīng)避免把沉淀加入培養(yǎng)液，否則由于沉淀的存在會使得所培養(yǎng)的細胞產(chǎn)生大量黑點，或者細胞表面將會覆蓋一層油狀物質(zhì)，影響細胞的正常生長。為減少血清的損失，可以把有沉淀的血清收集起來進行離心處理，將上清液加入培養(yǎng)液使用

16、（一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾）。- 6 -如何判斷胎牛血清質(zhì)量一、外觀拿到血清，最先接觸的是血清外觀，對于缺少細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說，外觀的判斷尤為重要1、顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響，這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴謹規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶血。國產(chǎn)血清的采血點很分散，大多是由屠戶采血后馬上離心收集，所以很少會有溶血，表現(xiàn)出明亮的蠟黃色，當然，國產(chǎn)血清也很少有標準意義上的胎牛血清。進口胎牛血清或多或少總有點溶血，因為真正的胎

17、牛血清凝血功能差，紅細胞容易破裂。總的來說，國產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進口的血清，質(zhì)量最好的呈現(xiàn)出談黃、微紅色，如Gibco 16000，差點的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當然，熱滅活血清或保存不當?shù)难?，由于血紅蛋白的破壞氧化，會呈現(xiàn)出暗紅，甚至咖啡色。2、沉淀很多血清客戶，會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀，從而懷疑血清的質(zhì)量問題，這是沒有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對血清質(zhì)量沒有任何影響，沉淀的產(chǎn)生原因很多，和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國產(chǎn)的血清：大多來自北方，由于價格低廉，保存環(huán)境都不好，從采血、冷凍、運輸?shù)缴a(chǎn)會經(jīng)過多次凍融，每次凍融過程，就會析出部分纖維蛋白沉淀，這樣，血清成品過濾后看起

18、來反而更加的“干凈”，很少有沉淀產(chǎn)生。進口的胎牛血清：過濾分裝前很少會反復(fù)凍融，生產(chǎn)后的成品也是清澈的，但隨著時間的推移，血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀。當然，進口的新生牛血清，一般牛齡都在2周左右，血清中的各種蛋白含量明顯偏高，生產(chǎn)后血清可能會渾濁，甚至有大量沉淀。當然，購買回來的血清都是冰凍狀態(tài)，使用時需要融化，融化過程最好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進行，否則沉淀相對較多，雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量，但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。3、澄清度進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡，而國產(chǎn)血清，因為絕大多數(shù)是新生牛血清，相對而言更加粘稠，顏色略深，這對于初步接觸血清的人

19、很難判斷，但把兩者進行對比，可容易分辨。二、主要技術(shù)指標目前國內(nèi)血清的質(zhì)量標準是2005版的中華人民共和國藥典，主要指標有以下幾點：1、內(nèi)毒素國產(chǎn)血清標準為不高于5EU/ml。內(nèi)毒素是細菌破碎后細胞壁的成分，因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前，國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求，很多進口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高，如Gibco 26140，只要求不高于50EU/ml，高出我國標準10倍，即使是16000，也要10EU/ml，血清質(zhì)量也未見影響?？梢姡瑑?nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量，除非含量極高，預(yù)示著已經(jīng)污染。2、總蛋白含量胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml，數(shù)值偏

20、高，說明采血的牛齡偏大，不是胎牛，數(shù)值偏低，表明血清可能摻水了。3、血紅蛋白標準為不高于20mg/dl，顏色越紅，數(shù)值越高，反之，數(shù)值越低。4、pH國產(chǎn)血清，大多高于7.5，進口胎牛血清，大多低于7.5，具體原因未知，可能和牛齡有關(guān)，這也能用來初步鑒別血清的來源。5、微生物包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高，細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制，支原體經(jīng)過0.1um過濾，大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的，主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入，又無法過濾，很難徹底清除，但對血清質(zhì)量影響不大。病原性病毒，特別是BVDV，在國產(chǎn)血清中幾乎

21、90%以上都存在，這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一，而進口胎牛血清中基本都控制的很好。6、免疫球蛋白國產(chǎn)血清的只是定性檢測，結(jié)果也很不準確，進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出采血的時的牛齡情況，國產(chǎn)血清，基本都是新生牛的，血清中容易產(chǎn)生IgM，IgG的含量也偏高，進口胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也較低。7、其它不管是國產(chǎn)還是進口血清，都是不測抗生素的（無四環(huán)素胎牛血清除外）。國外，抗生素的使用很嚴格，用量也很少，每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內(nèi)，抗生素的濫用已成了普遍現(xiàn)象，國產(chǎn)血清中殘留很高，對細胞培養(yǎng)極為

22、不利，這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。三、血源市場上的血清血源主要分為中國、北美、南美和澳洲。1、國產(chǎn)血清質(zhì)量差，這是公認的，主要原因并不是生產(chǎn)廠家的責(zé)任，而是天然環(huán)境差和抗生素的大量使用。國內(nèi)環(huán)境污染嚴重，同時飼養(yǎng)過程中抗生素極其濫用，有毒有害物質(zhì)會大量殘留在血清中，最終不利于細胞的生長。2、南美血清，來源很多，如Bioind的巴拿馬、Gibco的烏拉圭、巴西等，這些血清由于采血的不可控性，質(zhì)量參差不齊，當然，相對于國內(nèi)血清來說好的多。另外，國內(nèi)銷售的南美血清大多顏色鮮紅，如Bioind、Gibco、Hyclone等品牌，但阿根廷的血清例外，這可能和各國的采血、生產(chǎn)工藝有關(guān)。3、北美血清，主要

23、來自美國和加拿大，如Hyclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。這類血清，等級越高的顏色越淡，表現(xiàn)為淡黃中帶一點微紅，SH30070和SH30396對比就很明顯，特級胎牛血清基本就能進行干細胞培養(yǎng)。北美血清還有一個顯著特點就是每瓶血清都能溯源，這對一些大型的疫苗廠、藥廠尤為重要。4、澳洲血清，來源主要是新西蘭和澳大利亞，這是在北美血清禁運之后進入中國市場的，一般不具有溯源功能，由于生產(chǎn)、運輸?shù)仍颍瑑r格相對來說比較貴。拿Gibco的10099和16000相比較，后者質(zhì)量等級更高，顏色更淡，性價比更高。四、牛血清在細胞培養(yǎng)

24、基中的主要功能： 牛血清是細胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。 1、提供能促使細胞指數(shù)生長的激素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或含量微小的營養(yǎng)物，以及某些低分子營養(yǎng)物質(zhì)； 2、提供結(jié)合蛋白，識別維生素、脂類、金屬離子，并與有毒金屬和熱源物質(zhì)結(jié)合，起解毒作用； 3、是細胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源； 4、起酸堿度緩沖液作用； 5、提供蛋白酶抑制劑，細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受損傷。五、牛血清的質(zhì)量要求 （一）WHO公布的用動物細胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程中的要求 1. 牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家，并應(yīng)具備適當?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)

25、。 2.有些國家還要求牛血清來自沒有用過反芻動物蛋白飼料喂養(yǎng)的牛群。 3.要能證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。 4.血清要通過濾膜過濾除菌，保證無菌。 5.無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無大腸桿菌噬菌體污染。 6.要求血清對細胞有良好的支持繁殖作用。（二）我國在對牛血清的質(zhì)量標準最早在2000年版中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標準中提出。包括物理性狀、總蛋白，血紅蛋白、細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內(nèi)毒素，支持細胞增殖檢查。2005版藥典頒布之后，小牛血清質(zhì)量標準被納入中國藥典2005年版 第三部 生物制品分冊。 （三）美國對牛血清的質(zhì)量要求： Gibco 和Hyclone等美國主要血清供應(yīng)商的牛血清都已進入到我國市場，他們對血清質(zhì)量標準有嚴格要求，從血清來源到產(chǎn)品質(zhì)量都有明確規(guī)定。 1、血清來源 ：可從世界各地收集胎牛血清，但必須符合其質(zhì)量標準和美國農(nóng)業(yè)部進口要求。 2、血清的收集：必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標準，低溫采集，一次分離，分離后立即混合凍存。 3、血清的制備：超低IgG胎牛血清、透析血清、-射線輻照； 4、除菌過濾：0.22m和0.1m濾膜過濾； 5、成品分裝：根據(jù)需要分裝成不同規(guī)格。六、牛血清質(zhì)量檢定指標 1、化學(xué)