一種白及種子的繁殖方法

1、一種白及種子的繁殖方法專利名稱一種白及種子的繁殖方法技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明涉及一種白及種子的繁殖方法。背景技術(shù)白及為蘭科植物白及 (Bletilla sfriata(Thunb.)Reiehb.f.) 的干燥塊莖 ,大多野生于山野川谷的向陽(yáng)山坡、疏林中、草叢中，喜歡陰涼的濕度較大的環(huán)境，土壤肥沃疏松而又排水良好的夾沙土。所以，要求生存環(huán)境獨(dú)特的白及的資源是有限的，目前，野生資源的產(chǎn)地僅剩下云、貴、川、湘等極其有限的少數(shù)地域的偏遠(yuǎn)山野。白及為多年生草本，植株矮小(未經(jīng)人工選育的野生種質(zhì)資源)，紫花白及高 30 厘米左右，四川蛾眉白花大白及高33 厘米以上。白及葉 3-6 片，長(zhǎng)披針形，中部稍寬，先端尖。

2、白及3 月萌發(fā)，花期 4-5 月，果期 8-10 月。 12 月倒苗。白及雖然結(jié)果，但是，卻不能依靠種子繁衍。成熟的白及種子呈橄欖型，黃色粉沫狀，非常細(xì)小，種皮為單層細(xì)胞組成，側(cè)壁加厚，細(xì)胞器及原生質(zhì)均已消失， 是一層半透明的死細(xì)胞， 胚橢圓型，未分化，為原胚階段，胚柄退化，無(wú)胚乳。在自然狀態(tài)下，極少萌發(fā)成苗。目前，白及目前主要依靠塊莖繁殖，是典型的 1+1=2 繁殖方式。長(zhǎng)期無(wú)性繁殖，不僅繁殖速度慢，而且與耗種量大，還與用藥爭(zhēng)奪原料，長(zhǎng)期無(wú)性繁殖，易引起種性退化，很難適應(yīng)規(guī)模化種植的需要。而且土地連年耕作，白及鱗莖積累了大量病毒， 嚴(yán)重影響了其產(chǎn)量和品種。 為此，有學(xué)者試圖通過(guò)組織培養(yǎng)的方式

3、，以解決白及繁殖效率低及病毒感染等問(wèn)題，并且已經(jīng)取得了可喜成績(jī)。然而，總結(jié)白及組培快繁生產(chǎn)技術(shù)， 存在以下問(wèn)題 :白及鱗莖、 莖段含有大量?jī)?nèi)生真菌及病毒，組培污染率高，成功率低；利用白及莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)和種子組培雖然成功率高，但從脫分化、增殖、分化、煉苗直到移栽周期長(zhǎng)， 至少 5 個(gè)月左右 (蘭科植物生長(zhǎng)普遍緩慢 ) ，而且期間要更換好幾次培養(yǎng)基，工作量大，成本及技術(shù)含量高，一般企業(yè)和個(gè)體戶藥農(nóng)根本做不到；為此，仍然沒(méi)有根本性解決白及存在的問(wèn)題，至今白及價(jià)格一直呈現(xiàn)上漲趨勢(shì)或許是最好也是最直接的印證。為此，仍然有必要尋求更好、更經(jīng)濟(jì)便捷的繁殖和種植技術(shù)方法，擴(kuò)大生產(chǎn)以滿足市場(chǎng)需求。目前，白及人工繁育

4、的研究工作進(jìn)展十分緩慢，這是白及野生改家種研究的一個(gè)關(guān)鍵課題。這種生長(zhǎng)環(huán)節(jié)的奧秘性超越了絕大多數(shù)生產(chǎn)者的認(rèn)識(shí)水平，由此可知，目前白及家種只能以假鱗莖為種苗，并且只有當(dāng)年生，具有老桿和嫩芽的假鱗莖才能發(fā)展成新植株。白及發(fā)展家種，必須要面臨種子秧苗稀缺的困境。再者這種傳統(tǒng)的分株繁殖方式，不可避免地產(chǎn)量低下，抗病蟲害能力差，一代一代退化。由于種苗緊缺，大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化種植就目前來(lái)說(shuō)還遙不可及。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對(duì)白及繁殖效率低、大多依靠無(wú)性繁殖的問(wèn)題，提供了利用種子繁殖快速高效培育優(yōu)質(zhì)種苗的方法。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種白及種子的繁殖方法，所述方法包括 :(I) 將采集的白及種子(每年 8 9 月采集

5、 )播種至適宜的土壤介質(zhì)中，并澆淋適量1/2MS 無(wú)糖培養(yǎng)液；白及種子細(xì)小無(wú)胚乳，所以需播種與泥炭土、營(yíng)養(yǎng)土等有機(jī)質(zhì)豐富的土壤中；白及種子在播種之前，通常需要經(jīng)消毒處理，可直接對(duì)蒴果進(jìn)行消毒，也可將蒴果中的種子取出后進(jìn)行消毒；(2)種子播種后，控制白天生長(zhǎng)溫度為 15 25°C，空氣相對(duì)濕度保持在70%以上，上方用塑料薄膜覆蓋，并設(shè)置遮陽(yáng)網(wǎng)適當(dāng)遮陰；(3)種子播種一周后除去遮陽(yáng)網(wǎng)， 定時(shí)噴霧營(yíng)養(yǎng)液并適時(shí)澆水保持濕潤(rùn)(每周一次， 每次 200 1500mL/m2); 所述營(yíng)養(yǎng)液組成如下 :6_芐氨基嘌呤 O 2.0mg/L, 1- 萘乙酸 O 1.0mg/L ，溶劑為 1/2MS 無(wú)糖

6、培養(yǎng)液或MS 無(wú)糖培養(yǎng)液； (4)種子播種一個(gè)月后施適量磷肥(如過(guò)磷酸鈣，用量為 5 15g/m2) ，并按常規(guī)方法進(jìn)行科學(xué)管理，適時(shí)澆水除草施肥 (如花寶 I 號(hào)，用量為0.2 0.8g/m2) ，直至地下長(zhǎng)出球莖后進(jìn)行移栽。優(yōu)選的，所述白及種子先在添加O2.0mg/L6_ 芐氨基嘌呤 (為 O 則不添加，優(yōu)選 1.0mg/L) 的 1/2MS 培養(yǎng)液或 MS 培養(yǎng)液中培養(yǎng) I 2 個(gè)月，得到萌發(fā)后的白及種子再播種至土壤介質(zhì)中。步驟 (I) 所述土壤介質(zhì)為泥炭土。步驟(I) 所述土壤介質(zhì)為營(yíng)養(yǎng)土、蛭石、珍珠巖質(zhì)量比20:1 5:1 5的混合物。步驟 (3)所述營(yíng)養(yǎng)液組成如下 :6_芐氨基嘌呤

7、 1.0 2.0mg/L, 1- 萘乙酸 0.51.0mg/L, 溶劑為 1/2MS 無(wú)糖培養(yǎng)液或 MS 無(wú)糖培養(yǎng)液；在本發(fā)明中， MS 培養(yǎng)液及 MS 無(wú)糖培養(yǎng)液配方舉例如下 :大量元素母液 : 4 0316.5g ；MgS04.7H203.7g ；KH2PO41.7g ； KN0319g, 加水溶解，定容至 500ml ；鈣鹽母液 :CaCl23.32g ，加水溶解，定容至500ml ；微量元素母液:0.0415g ;Na2Mo04.2 200.0125g ; 3 030.31g ;CuSO4.5 200.00125g ；MnS04.H2O0.845g； CoCl2.6H200.00125

8、g；ZnSO4.7H200.43g ，加水溶解，定容至500ml ；鐵鹽母液=EDTA 二鈉3.725g，加100ml 水加熱溶解，F(xiàn)eSO4.7H202.785g，加 100ml 水溶解后兩者混勻，加水配成500ml ；維生素母液 :鹽酸吡哆醇 (VB6) 0.025g ; 鹽酸硫胺素(VBl) ( 025g ;煙酸 ( 025g,甘氨酸 0.lg，加水溶解，定容至 500ml ；配 ILMS 培養(yǎng)液 :取大量元素母液50ml, 韓鹽母液50ml, 微量元素母液 IOml, 維生素母液 IOml, 鐵鹽母液 5ml, 加肌醇 0.1g,鹿糖或白砂糖 20 30g,蒸懼水定容至 1L 。配 I

9、LMS 無(wú)糖培養(yǎng)液 :取大量元素母液 50ml, | 丐鹽母液 50ml, 微量元素母液 IOml, 維生素母液 10ml ，鐵鹽母液 5ml ，加肌醇 0.1 g 配 ILMS 培養(yǎng)液 :取大量元素母液 50ml ，鈣鹽母液 50ml, 微量元素母液 IOml, 維生素母液 IOml, 鐵鹽母液 5ml, 加肌醇 0.1g,鹿糖或白砂糖20 30go1/2MS 培養(yǎng)液指溶液中所含的大量元素和鈣鹽為 MS 培養(yǎng)液的一半，其他不變。1/2MS 無(wú)糖培養(yǎng)液指溶液中所含的大量元素和鈣鹽為MS 無(wú)糖培養(yǎng)液的一半，其他不變。白及雖然結(jié)果，但是，卻不能依靠種子繁衍。成熟的白及種子呈橄欖型，黃色粉沫狀，非常

10、細(xì)小，種皮為單層細(xì)胞組成，側(cè)壁加厚，細(xì)胞器及原生質(zhì)均已消失，是一層半透明的死細(xì)胞，胚橢圓型，未分化，為原胚階段，胚柄退化，無(wú)胚乳。在自然狀態(tài)下，極少萌發(fā)成苗。目前，白及目前主要依靠塊莖繁殖，是典型的1+1=2 繁殖方式。白及人工繁育的研究工作進(jìn)展十分緩慢，這是白及野生改家種研究的一個(gè)關(guān)鍵課題。這種生長(zhǎng)環(huán)節(jié)的奧秘性超越了絕大多數(shù)生產(chǎn)者的認(rèn)識(shí)水平，由此可知，目前白及家種只能以假鱗莖為種苗，并且只有當(dāng)年生，具有老桿和嫩芽的假鱗莖才能發(fā)展成新植株。白及發(fā)展家種，必須要面臨種子秧苗稀缺的困境。再者這種傳統(tǒng)的分株繁殖方式，不可避免地產(chǎn)量低下，抗病蟲害能力差，一代一代退化。由于種苗緊缺，大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化種植就目

11、前來(lái)說(shuō)還遙不可及。利用本發(fā)明，可在一年時(shí)間內(nèi)得到大量的白及優(yōu)質(zhì)種苗。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在:采用本發(fā)明方法，可在短時(shí)間內(nèi)大量繁育白及的種苗，有效滿足種植業(yè)對(duì)種苗的需求。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此:實(shí)施例 1:I) 于 8月底采集成熟未開(kāi)裂的白及蒴果；2)將蒴果切開(kāi)，取出其中的種子，在水中浸泡兩天，播種到泥炭土中，澆透水，上方用地膜覆蓋后再蓋一層遮陽(yáng)網(wǎng)，種子播種的環(huán)境為人工單棟大棚，大棚頂部遮陽(yáng)網(wǎng)覆蓋，大棚中每日定時(shí)噴水，保持濕度在 70% 以上；3)種子播種一周后去除表面覆蓋的遮陽(yáng)網(wǎng)，每周噴霧一次1/2MS 無(wú)糖培養(yǎng)液 (每次約

12、800mL/m2), 并適時(shí)燒水 ,忌干燥缺水。 4)種子播種一個(gè)月后去除表面覆蓋的薄膜，并澆10g/L的過(guò)磷酸鈣 ( 約 IOOOmL/m2) ，以促進(jìn)幼苗的生根。5)在此之后進(jìn)行科學(xué)的管理， 主要是適時(shí)澆水除草，噴施頁(yè)面肥， (花寶 I 號(hào)，1000 倍稀釋，每?jī)芍苡谇o葉部噴灑I 次，約 500ml/m2) ，一年后可得地下具球莖的白及幼苗。實(shí)施例2:具體方法同實(shí)施例 1，與實(shí)施例 1 不同的是，步驟 2)中的白及蒴果先用75%酒精和0.1%升汞消毒后切開(kāi)蒴果，得白及無(wú)菌種子，播種到 1/2MS 培養(yǎng)液中培養(yǎng)一個(gè)半月， 用紗布過(guò)濾， 得萌發(fā)后的白及種子，然后播種到泥炭土中。 步驟 3)中所

13、用營(yíng)養(yǎng)液為 1/2MS 無(wú)糖培養(yǎng)液 +1.0mg/Ll- 萘乙酸和 +2.0mg/L6- 芐氨基嘌呤；按照上述方法，一年后可得地下具球莖的白及幼苗。實(shí)施例3:具體方法同實(shí)施例 2，與實(shí)施例2 不同的是，白及種子萌發(fā)時(shí)播種的營(yíng)養(yǎng)液為 MS 培養(yǎng)液 +1.0mg/L6- 節(jié)氨基嘌呤。 按照上述方法，一年后可得地下具球莖的白及幼苗。實(shí)施例4:具體方法同實(shí)施例2，與實(shí)施例2 不同的是，步驟2)中種子萌發(fā)后播種到營(yíng)養(yǎng)土:蛭石 :珍珠巖為20:1:1。按照上述方法，一年后可得地下具球莖的白及幼苗。最后，還需注意的是，以上實(shí)施例子僅是本發(fā)明的若干個(gè)具體實(shí)施例子，本發(fā)明不限于上述的實(shí)施例，還有許多變形，本領(lǐng)域

14、相關(guān)的人員能從本發(fā)明內(nèi)容中直接導(dǎo)出或者聯(lián)想出的所有變形，均認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。權(quán)利要求1.一種白及種子的繁殖方法，所述方法包括 : (1) 將采集的白及種子播種至適宜的土壤介質(zhì)中，并澆淋適量1/2MS 無(wú)糖培養(yǎng)液；(2)種子播種后，控制白天生長(zhǎng)溫度為15 25° C，空氣相對(duì)濕度保持在70%以上，上方用塑料薄膜覆蓋，并設(shè)置遮陽(yáng)網(wǎng)進(jìn)行遮陰；(3)種子播種一周后除去遮陽(yáng)網(wǎng)，定時(shí)噴霧營(yíng)養(yǎng)液并適時(shí)澆水保持濕潤(rùn)；所述營(yíng)養(yǎng)液組成如下:6_芐氨基嘌呤 O 2.0mg/L ， l- 萘乙酸 O 1.0mg/L ，溶劑為 1/2MS 或 MS無(wú)糖培養(yǎng)液；(4) 種子播種一個(gè)月后施適量磷肥，并適時(shí)澆

15、水除草施肥，直至地下長(zhǎng)出球莖后進(jìn)行移栽。2.如權(quán)利要求1 所述的方法，其特征在于所述白及種子先在添加 O 2.0mg/L6- 芐氨基嘌呤的1/2MS 或 MS 培養(yǎng)液中培養(yǎng)I2 個(gè)月，得到萌發(fā)后的白及種子再播種至土壤介質(zhì)中。3.如權(quán)利要求1 所述的方法，其特征在于步驟(I) 所述土壤介質(zhì)為泥炭土。4.如權(quán)利要求1 所述的方法，其特征在于步驟(I) 所述土壤介質(zhì)為營(yíng)養(yǎng)土、蛭石、珍珠巖質(zhì)量比20:1 5:1 5的混合物。5.如權(quán)利要求1 所述的方法，其特征在于步驟(3) 所述營(yíng)養(yǎng)液組成如下 :6_芐氨基嘌呤1.0 2.0mg/L, 1- 萘乙酸 0.5 1.0mg/L,溶劑為 1/2MS 或 MS 無(wú)糖培養(yǎng)液。全文摘要本發(fā)明提供了一種白及種子的繁殖方法，所述方法包括(1)將采集的白及種子播種至適宜的土壤介質(zhì)中，并澆淋適量1/2MS 無(wú)糖培養(yǎng)液； (2)種子播種后，控制白天生長(zhǎng)溫度為15 25，空氣相對(duì)濕度保持在70%以上，上方用塑料薄膜覆蓋，并設(shè)置遮陽(yáng)網(wǎng)進(jìn)行遮陰；(3) 種子播種一周后除去