阿昔洛韋乳膏體外透皮吸收實(shí)驗(yàn)

1、不同軟膏基質(zhì)對(duì)阿昔洛韋透皮吸收效果的影響藥學(xué)院09級(jí)06班黃小玉 09206060193戴貝萱 09206060198 周秀瓊 09206060199 呂臺(tái)中 08206060185 譚圣斌 08206060178 顏可立 082060601741、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模罕容^不同軟膏基質(zhì)對(duì)阿昔洛韋透皮性能的影響。2、實(shí)驗(yàn)依據(jù)：阿昔洛韋（acyclovir, acv）為核昔類抗病毒藥，目前廣泛用于皮膚科的各種 皰疹病毒感染。除口服、注射給藥外，皮膚局部用藥仍為低毒、有效的給藥途徑, 尤其作為非處方藥物，其應(yīng)用前景較為廣泛。阿昔洛韋乳膏為皮膚科用藥，本實(shí) 驗(yàn)采用離體乳豬皮膚作為滲透屏障，采用高效液相色譜測(cè)定的

2、方法，設(shè)計(jì)四種不 同基質(zhì)的處方，測(cè)定acv從處方中的釋放與經(jīng)皮滲透性質(zhì)，并與商品acv軟膏 進(jìn)行比較。通過(guò)對(duì)比來(lái)研究阿昔洛韋乳膏的體外透皮吸收效果。3、儀器設(shè)備和實(shí)驗(yàn)材料：3.1儀器knauer高效液相色譜儀；改進(jìn)franz擴(kuò)散池（擴(kuò)散面積4.52 cm2,接受室體 積13 ml）；超級(jí)恒溫水浴裝置及磁力攪拌器。3.2試藥阿昔洛韋（浙江武義制藥廠提供，批號(hào)931202）；月桂氮卓酮（azone福建壽寧 美菲思生物化學(xué)品廠，批號(hào)960606）；乙醇、丙二醇為分析純，軟膏基質(zhì)、薄荷 油為藥用標(biāo)準(zhǔn)。阿昔洛韋軟膏（市售，上海申光制藥廠生產(chǎn)批號(hào)950401）。3.3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用小型乳豬（巴馬香豬，體重68

3、kg）o4、實(shí)驗(yàn)方法與步驟：4.1色譜條件：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑流動(dòng)相：甲醇：水=10： 90檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm柱溫：室溫 進(jìn)樣量20ul4.2溶液的制備4.2.1對(duì)照品溶液的制備:精密稱取阿昔洛韋對(duì)照品適量，置50ml量瓶中，加0.4% 氫氧化鈉溶液5ml使溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml,置looml量 瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，制成每iml中含20µg的溶液，即為對(duì)照品 溶液。4.2.2樣品溶液的制備：取阿昔洛韋乳膏適量，均勻涂布于fnmz擴(kuò)散池的豬皮上, 10h后取接收液適量，孔徑為0. 45p,m的濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液作為樣品溶液。 4

4、.2.3空白基質(zhì)液的制備：取空白基質(zhì)適量，均勻涂布于franz擴(kuò)散池的豬皮上， 10h后取接收液適量，孔徑為045 m的濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液作為空白基質(zhì)液。 4.3專屬性試驗(yàn)分別取上述對(duì)照品溶液、樣品溶液、空白基質(zhì)液20ul進(jìn)樣，記錄色譜圖。 結(jié)果表明在此色譜條件下，空白基質(zhì)及皮膚不干擾測(cè)定。4.4阿昔洛韋標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱取干燥至恒垂的阿昔洛韋對(duì)照品100 mg,用生理鹽水于100 ml量瓶中 配成1 mgmll的儲(chǔ)備液，分別精密吸取儲(chǔ)備液0.2、0.4、0.8、1.0及2.0 ml于 100ml量瓶中，用生理鹽水定容，搖勻，即得質(zhì)量濃度(p)為2.0、4.0、8.0、 10.0及20.0ugml

5、1的標(biāo)準(zhǔn)液。分別進(jìn)樣20ul,以峰面積a為縱坐標(biāo)、濃度c( g /ml)為橫坐標(biāo)，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，r=0.9999,表明阿昔洛韋濃度在2.0-20.0 ng ml1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。4.5精密度和回收率實(shí)驗(yàn)分別吸取高、中、低3個(gè)濃度的阿昔洛韋對(duì)照品液，分別于id內(nèi)重復(fù)進(jìn)樣5 次，連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定5d,日內(nèi)精密度rsd為1.23% ,日間精密度rsd為2.04%。取 3份阿昔洛韋溶液，分別加入等量的阿昔洛韋對(duì)照品貯備液，搖勻后，各進(jìn)樣 20ul,測(cè)定峰面積，連續(xù)5次，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，換算成實(shí)際測(cè)定濃度，計(jì)算回收率，低、中、高3種濃度的回收率分別為(97.5±0.9)%> (9&

6、;8±21)%、 (98.0±1.5)%o 4.6處方的制備4.6.1乳膏基質(zhì)(1)處方：acv3g,硬脂酸18 g,凡丄林32 g,丙三醇15 g,三 乙醇胺1.8 g,月桂氮卓酮5 g,丙二醇5 g,薄荷油0.5 g,蒸憾水加至100.0 go (2) 制備方法：將硬脂酸，凡士林，月桂氮卓酮水浴加熱熔融。另將丙三醇、三乙醇 胺、丙二醇、水加熱至同溫，細(xì)流加入上述熔融物中，攪拌至冷，加acv、薄 荷油攪勻，即得白色乳膏。462 peg基質(zhì) (1)處方：acv3g, peg400 4.5 g, peg4000 12 g,月桂氮卓酮5 g,丙二醇5g,薄荷油05g。(2)制備

7、方法:將peg400、peg4000置于蒸發(fā)皿中, 水浴加熱熔融，加入月桂氮卓酮、丙二醇混合攪拌至冷，加入藥物、薄荷油混合 均勻，即得白色軟膏。4.6.3 i號(hào)凝膠基質(zhì)(1)處方：acv3g,卡巴浦3g,三乙醇胺3g,乙醇20g, 月桂氮卓酮5 g,丙二醇5g,薄荷油0.5 g,蒸憾水加至100.0 go (2)制備方法:將 卡巴浦均勻撒布于適量水中，放置使充分溶脹，加入藥物攪勻。取乙醇、丙二醇、 月桂氮卓酮、薄荷油混合均勻，攪拌下加入。另取三乙醇胺溶于適量水屮，攪拌 下加入，加水至足量，攪拌均勻，即得白色凝膠。4.6.4 ii號(hào)凝膠基質(zhì) 處方：各成份同463,另加輔助促透劑2 g。制備方法同

8、 4.6.3。4.7離體豬皮的制備巴馬香豬處死后立即用電動(dòng)剪毛刀剪去腹部皮膚毛，剝離去毛部位皮膚，去 除皮下組織后用生理鹽水沖洗干凈，置于生理鹽水中浸泡約30rain,取出，用濾 紙吸干，備用。4.8離體皮膚滲透試驗(yàn)采用改進(jìn)fnmz擴(kuò)散池。取制備好的離體豬皮放人fnmz擴(kuò)散池中，皮膚角質(zhì) 層朝上，擴(kuò)散池的有效面積為4.52cm。取乳膏適量均勻涂布于皮膚上，在接受池 中加生理鹽水14ml, 37c恒溫水浴，用磁力攪拌器不斷攪拌，使藥物自然釋放。 分別于涂布后1、2、4、6、8、10、12h各取接受液iml,(取樣后即向接受室內(nèi) 補(bǔ)充im生理鹽水)。用0451m微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液進(jìn)樣測(cè)定。5、

9、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理5.1按下列公式計(jì)算單位面積累積滲透量（q）：qn 二 v。x qn/v + f 5i 1式屮vo為接收液總體積，v為取樣量，q為第n次實(shí)測(cè)單位面積滲透量（q二 樣品峰面積x對(duì)照品濃度x接收液取樣量/（對(duì)照品峰面積x釋放面積），qi為n 次前每次測(cè)得的單位面積滲透量。5.2各時(shí)間點(diǎn)藥物單位面積累計(jì)滲透量見(jiàn)表一。以qt作線性回歸，得回歸方程, 所得直線斜率即透皮速率。表一藥物累積滲透量項(xiàng)目lh 2h 4h 6h 8h 10h2h商品軟膏乳膏基質(zhì)peg基質(zhì)i號(hào)凝膠基質(zhì)ii號(hào)凝膠基質(zhì)5.3根據(jù)文獻(xiàn)1,藥物阿昔洛韋從處方中的釋放速率大小呈以下順序：i號(hào)凝膠 >peg基質(zhì)>11號(hào)

10、凝膠乳膏基質(zhì)商品軟膏。acv的透皮速率分別為：商品軟 w 1.1 ±0.3,乳膏基質(zhì)3.0±05, i 號(hào)凝膠5.6±0.8, peg基質(zhì) 14.4± 1.1, ii 號(hào)凝 膠20.2±2.1 ug -cm.h-k在商品軟膏中，acv的透皮速率最小，acv累積滲 透量也較低，后四種處方基質(zhì)的藥物透皮速率分別為它的2.47、4.98、12.79與17.85 倍。6、本實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新點(diǎn)體外經(jīng)皮滲透研究最好用人的皮膚，但人的皮膚難于得到，本試驗(yàn)所選用的 體外經(jīng)皮滲透屏障是與人體皮膚最接近的乳豬皮膚，有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，在體外和同 的條件下，用豬皮膚預(yù)測(cè)人皮膚的

11、通透性數(shù)據(jù)是相似的。一些化合物體內(nèi)皮膚穿 透證明，剛斷奶的豬背部皮膚與人的前臂皮膚最相近，而小型豬的皮膚與人的皮 膚穿透性特征最接近。故我們選用乳豬模擬人體皮膚。本實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)典的franz試驗(yàn)擴(kuò)散裝置考察噴昔洛韋乳膏體外透皮量，操作 簡(jiǎn)便，重復(fù)性好。由于豬皮含有豐富蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等大量生物大分子，在進(jìn)行 hplc檢測(cè)之前必須對(duì)接收液進(jìn)行過(guò)濾，防止帶人較多雜質(zhì)影響檢測(cè)結(jié)果、污染 色譜柱。本實(shí)驗(yàn)采用檢測(cè)靈敏度較高的hplc測(cè)定透皮接收液中的阿昔洛韋的含量， 結(jié)果準(zhǔn)確可靠，滿足透皮吸收制劑研究的要求，為阿昔洛韋乳膏的體外研究奠定 了基礎(chǔ)。7、參考文獻(xiàn)1馬曉微，何飛燕*,梁文權(quán).五種阿昔洛韋軟膏釋放與透皮性質(zhì)比較j中國(guó)醫(yī)