自選模塊選修生物技術實踐

1、第一講微生物的利用知識點一微生物的培養(yǎng)和分離1培養(yǎng)基的成分和分類(1) 微生物的營養(yǎng)：碳源、氮源、生長因子、水和無機鹽。(2) 培養(yǎng)基的類型：按物理性質(zhì)分：固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基。按目的用途分：鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基。2滅菌操作(1)無菌操作的概念：無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。主要包括：各種器皿必須無菌；培養(yǎng)基也必須要無菌；轉(zhuǎn)移菌種時不能帶入其他雜菌。(2)消毒和滅菌的區(qū)別：條件結(jié)果常用的方法消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥物消毒法滅菌強烈的理化因素殺死

2、物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌3.培養(yǎng)和純化大腸桿菌(1)大腸桿菌：革蘭氏陰性、兼性厭氧的腸道桿菌。(2)大腸桿菌培養(yǎng)：LB液體培養(yǎng)基(通用的細菌培養(yǎng)基)擴大培養(yǎng)；LB固體培養(yǎng)基分離純化，鑒定菌種。(3)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實驗步驟：配制培養(yǎng)基(稱量、溶化、調(diào)pH)滅菌制作平板擴大培養(yǎng)劃線分離菌種保存。(4)分離方法：劃線分離法(方法簡單)和涂布分離法(單菌落更易分開，但操作復雜)。知識點二分離以尿素為氮源的微生物1實驗目的(1)使用專一的培養(yǎng)基(含尿素)分離專一的細菌(有脲酶的細菌)。(2)使用指示劑(酚紅)顏色的變化檢知酶(脲酶)所催化的反應。2實驗原

3、理由于有些細菌能產(chǎn)生脲酶向周圍擴散，將培養(yǎng)基中的尿素分解，產(chǎn)生氨使培養(yǎng)基變堿性，于是酚紅由黃色變成紅色。(NH2)2COH2O2NH3CO23實驗步驟制備平板制備細菌懸液涂布分離法分離細菌倒置培養(yǎng)觀察計數(shù)。4實驗結(jié)果(1)與稀釋度為105相比，培養(yǎng)基中的平均菌落數(shù)在104處理中多。(2)在相同稀釋度的情況下，尿素培養(yǎng)基中的平均菌落數(shù)少于LB培養(yǎng)基中的平均菌落數(shù)，其原因是大多數(shù)微生物不能利用尿素為氮源。(3)在尿素培養(yǎng)基上的菌落周圍會出現(xiàn)紅色的環(huán)帶。 考點一|培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術1培養(yǎng)基營養(yǎng)要素基本營養(yǎng)要素：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽。此外還要滿足不同微生物生長對pH、特

4、殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。營養(yǎng)要素來源功能碳源無機碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無機物構成細胞中的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；既是碳源又是能源有機碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機酸、石油、花生粉餅等氮源無機氮源無機氮：NH3、銨鹽、硝酸鹽、N2等將無機氮合成含氮的代謝產(chǎn)物有機氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物生長因子維生素、氨基酸、堿基酶和核酸的組成成分；參與代謝過程中的酶促反應特別提醒(1)微生物最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是銨鹽、硝酸鹽。(2)對異養(yǎng)微生物來說，含C、H、O、N的有機化合物既是碳源，又是氮源、能源。(3)有些培養(yǎng)基不需

5、要添加特殊營養(yǎng)物質(zhì)，生物自己能合成，如大腸桿菌能合成某些維生素，作為特殊營養(yǎng)物質(zhì)。2微生物的純化培養(yǎng)方法劃線分離法涂布分離法注意事項(1)接種環(huán)的灼燒：第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染培養(yǎng)物每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種來自上次劃線末端劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者(2)灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再進行操作，以免溫度太高殺死菌種(3)劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連(4)劃線用力要大小適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破(1)稀釋操作時：每支試管及其中的水、移液管等均需滅菌；操作時，試管口和移液管應在離火焰12 cm處(2)涂布平板時：涂布器用體積分數(shù)為7

6、0%酒精消毒，取出時，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管管頭不要接觸任何物體典例1右圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序為1、2、3、4、5。下列敘述正確的是()A在五個區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)和培養(yǎng)基進行滅菌B劃線操作時完全打開皿蓋，劃完立即蓋上C接種時不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達到分離單菌落的目的D第1區(qū)和第5區(qū)的劃線最終要連接起來，以便比較前后的菌落數(shù)解析在每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌；進行劃線操作時，左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)

7、，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋；注意接種時不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達到分離單菌落的目的；第1區(qū)和第5區(qū)的劃線不能相連。答案C1消毒和滅菌的辨析項目條件結(jié)果常用方法應用范圍消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分對人體有害的微生物煮沸消毒法日常用品紫外線消毒法接種室、超凈臺化學藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源滅菌強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌法接種工具干熱滅菌法玻璃器皿、金屬工具高壓蒸汽滅菌法培養(yǎng)基及容器的滅菌過濾滅菌不能加熱滅菌的化合物，要用G6玻璃砂漏斗過濾2大腸桿菌的培養(yǎng)和分離應注意的幾個問題(1)在倒平板過程中，不能將培養(yǎng)基濺在皿壁與皿

8、蓋上，防止雜菌污染。(2)本實驗需設置空白培養(yǎng)基在相同條件下一起培養(yǎng)，以確定是否有雜菌污染。(3)培養(yǎng)皿倒置的目的是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基中難以形成單菌落。(4)實驗操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。針對練習1細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次

9、用于殺滅哪些部位的雜菌()A接種環(huán)、手、培養(yǎng)基B高壓鍋、手、接種環(huán)C培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D接種環(huán)、手、高壓鍋解析：選C一般說來滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠喪失生長繁殖的能力，對于培養(yǎng)基、操作器皿和接種環(huán)等都需要滅菌。消毒僅指殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體基本無害，如操作者的手臂需要消毒處理。高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌設備，通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法?；鹧孀茻?，可以迅速徹底地滅菌，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)。2(2014·全國卷)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}

10、：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過_滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_。(3)示意圖A和B中，_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行

11、振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_的利用率。解析：(1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間。0.1 mL稀釋液中平均有38個活菌，可推測每升水樣中的活菌數(shù)38×10×100×1 0003.8×107(個)。(2)接種環(huán)、接種針或其他金屬用具直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落

12、。(3)比較兩圖可以看出，A是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果，B是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)由于振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)考點二|分離以尿素為氮源的微生物1實驗步驟(1)制平板：在酒精燈火焰旁將LB固體培養(yǎng)基和尿素固體培養(yǎng)基(選擇培養(yǎng)基)分別倒在兩個培養(yǎng)皿中，在超凈臺上搖勻，平放至凝固。(2)制備細菌懸液：將1 g土樣依次稀釋出10

13、2、103、104和105土壤稀釋液，備用。(3)用涂布分離法分離細菌：取0.1 mL稀釋104和105土壤稀釋液，分別加到LB培養(yǎng)基和尿素培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，再用刮刀將菌液涂布到整個平面上。(4)培養(yǎng)：將培養(yǎng)皿倒置，在37 恒溫培養(yǎng)2448 h。(5)觀察培養(yǎng)基中的菌落數(shù)。2實驗結(jié)果(1)與稀釋度為105相比，LB培養(yǎng)基中的菌落數(shù)在104處理中多，尿素培養(yǎng)基中的菌落數(shù)在104處理中多；在相同稀釋度的情況下，尿素培養(yǎng)基中的菌落數(shù)少于LB培養(yǎng)基中的菌落數(shù)，其原因是大多數(shù)微生物不能利用尿素為氮源。(2)在尿素培養(yǎng)基上的菌落周圍會出現(xiàn)紅色的環(huán)帶，理由是：細菌向胞外分泌脲酶，使培養(yǎng)基中尿素分解，產(chǎn)生氨，

14、氨為堿性，使培養(yǎng)基中的酚紅變?yōu)榧t色。典例2 (2014·學軍中學月考)尿素是一種高濃度氮肥且長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌的分解作用，才能被植物吸收利用。某同學要分離出土壤中能分解尿素的細菌，并嘗試進行計數(shù)，培養(yǎng)基配方如下：K2HPO4NaClH2O葡萄糖尿素酚紅瓊脂0.12 g0.12 g15 mL0.025 g2.0 g0.25 mg0.5 g(1)分解尿素的細菌在生態(tài)系統(tǒng)中屬于_(成分)，該種細菌在生態(tài)平衡中的作用是_，寫出細菌分解尿素的方程式_。(2)根據(jù)培養(yǎng)基的成分推斷，該同學能否分離出土壤中只分解尿素的細菌_(填“能”或“否”)，推斷理由是_。(3)分

15、離得到分解尿素的細菌后，則應選擇液體培養(yǎng)基進行_。培養(yǎng)一段時間后，要借助顯微鏡并使用_對微生物細胞進行計數(shù)。計數(shù)過程中，下列哪種行為會影響計數(shù)的準確性()A計數(shù)時直接從靜置培養(yǎng)的試管底部取培養(yǎng)液進行計數(shù)B .如果方格內(nèi)微生物細胞數(shù)量多于300 個，培養(yǎng)液先稀釋后再計數(shù)C如果微生物細胞有粘連，要數(shù)出團塊中的每一個細胞D壓在方格線上的細胞只計左線和上線上的細胞數(shù) (4)為了提高尿素肥效，可以將分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”。為了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用_技術。解析土壤中能分解尿素的細菌能利用環(huán)境中的有機物，在生態(tài)系統(tǒng)中屬于分解者，能參與N素循環(huán)。由于培養(yǎng)基中使用了瓊脂，而瓊脂

16、是混合物，含有氮素，所以生長的微生物中不只是以尿素為氮源的微生物。分離所得菌種經(jīng)液體培養(yǎng)基可以擴大培養(yǎng)。使用血球計數(shù)板可以計數(shù)培養(yǎng)液中的菌體數(shù)，計數(shù)時混合均勻后取少量培養(yǎng)液進行計數(shù)，如果方格內(nèi)微生物細胞數(shù)量多于300 個，培養(yǎng)液要先稀釋后再計數(shù)，如果微生物細胞有粘連，要數(shù)出團塊中的每一個細胞，壓在方格線上的細胞只計左線和上線上的細胞數(shù)。答案(1)分解者參與了氮循環(huán)(或維持氮平衡)(NH2)2COH2O2NH3CO2(分子式、符號、條件缺一不可)(2)不能瓊脂是未被純化的混合物，內(nèi)含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物(3)擴大培養(yǎng)血細胞計數(shù)板A(4)固定化酶“分

17、離以尿素為氮源的微生物”實驗時注意的幾個問題(1)用瓊脂糖代替瓊脂配置固體培養(yǎng)基的原因：瓊脂是未被純化的混合物，內(nèi)含一定量的含氮化合物。如果用瓊脂固化培養(yǎng)基，會為細菌提供一定量的非尿素類氮源，這樣會在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)生以非尿素為氮源的細菌，不利于以尿素為氮源的細菌的篩選，故而用經(jīng)純化的瓊脂糖而不用瓊脂做固化劑。(2)有脲酶的細菌菌落周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶的原因：細菌向胞外分泌脲酶，使培養(yǎng)基中的尿素水解，尿素分解后產(chǎn)生氨，氨為堿性，酚紅在酸性環(huán)境里為黃色，在堿性環(huán)境里變?yōu)榧t色。培養(yǎng)基中的酸堿指示劑產(chǎn)生顏色變化(變紅)，標志著存在脲酶水解尿素的作用，從而證明這一菌株可以以尿素為氮源。紅色環(huán)狀區(qū)域的大小

18、代表脲酶活性的強弱和含量的多少。紅色區(qū)域越大，表明菌株利用尿素的能力越強。(3)滅菌：配置尿素固體培養(yǎng)基后加封口膜用高壓蒸汽滅菌法滅菌，冷卻到60 ，加入G6玻璃漏斗過濾的尿素溶液，搖勻，待用。尿素加熱會分解，所以要滅菌后再加入。針對練習3(2012·浙江高考)幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下：請回答：(1)在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有_，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會出現(xiàn)_色環(huán)帶。(2)下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是_滅菌。A高壓蒸汽B紫外燈照射C

19、70%酒精浸泡 D過濾(3)步驟X表示_。在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液_到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得_菌落。(4)在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在_中。若不倒置培養(yǎng)，將導致_。(5)臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標記的_分解為NH3和14CO2。解析：(1)脲酶能特異性地催化尿素水解釋放出NH3和CO2。所以加入尿素作為氮源，加入酚紅指示劑(高pH時呈現(xiàn)紅色)能指示以尿素為氮源的細菌的存在。(2)由于尿素在高溫下會分解，因此對尿素溶液的滅菌要采用玻璃漏斗過濾的方法。(3)本題運用的是涂布分離法，該方法能更容易獲得單菌落，但操作較

20、復雜。(4)在倒平板和培養(yǎng)過程中，會產(chǎn)生水蒸氣，如果正置，那么水蒸氣在皿蓋上凝結(jié)成水珠后會滴在培養(yǎng)基上，會污染細菌，導致不能分離出單菌落。(5)該題中Hp含有脲酶，能把尿素分解成NH3和CO2?；颊咄ㄟ^服用被14C標記的尿素并檢測呼氣中的被14C標記的CO2的含量來判斷人體是否感染Hp。答案：(1)脲酶紅(2)D(3)接種涂布單(4)恒溫培養(yǎng)箱無法形成單菌落(5)尿素課堂對點練題組一微生物的分離與培養(yǎng)操作1(2013·江蘇高考)某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是()A培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌B轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進行劃線C接種后的培養(yǎng)皿須放在光

21、照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次解析：選B培養(yǎng)微生物過程中應先滅菌再倒平板；每一次劃線前都要進行接種環(huán)的灼燒滅菌；接種后的培養(yǎng)皿應在恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，光照會影響溫度等條件；培養(yǎng)過程中觀察間隔的時間一般不超過24 h。題組二微生物的培養(yǎng)和純化2(2014·四川高考)有機農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如下圖甲、乙所示。(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、_四類，該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是_。(2)與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的

22、培養(yǎng)基常需添加生長素和_，這些植物激素一般需要事先單獨配制成_保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時，通常使用的劃線工具是_。劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有_。(4)為探究苯磺隆的降解機制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設是_，該實驗設計是否合理？為什么？_。解析：(1)微生物生長繁殖需要的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、水和無機鹽四類。根據(jù)題意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，該實驗的目的是探索其降解機制，因此，需要分離出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生

23、物，故選擇培養(yǎng)時為了排除其他碳源的干擾，培養(yǎng)基中唯一碳源只能是苯磺隆。(2)與微生物培養(yǎng)基相比，植物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基需要添加生長素和細胞分裂素，用于調(diào)節(jié)植物細胞再分化；這些植物激素一般需要事先單獨配制成母液保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時，通常使用的劃線工具是無菌接種環(huán)。劃線的平板培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域的劃線上不間斷地長滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，而其他劃線上有菌落。造成此現(xiàn)象的原因可能有兩個：一是接種環(huán)灼燒后未冷卻，菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡；二是劃第二劃線區(qū)域第一條線時未從第一區(qū)域末端開始。(4)根據(jù)圖乙所示實驗中的上清液加入蛋白酶溶液推測，實驗目的是探究目的菌株是否能分泌降

24、解苯磺隆的蛋白質(zhì)，實驗設計不合理之處是缺少不加蛋白酶溶液、其他條件同圖乙的空白對照。答案：(1)氮源和無機鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖(2)細胞分裂素母液(3)接種環(huán)接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理，缺少空白對照課下提能練1除了高溫加熱以外，其他滅菌方法還有()A長時間紫外線照射B真空包裝C用保鮮膜密閉 D添加防腐劑解析：選A滅菌是使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。真空包裝、添加防腐劑、用保鮮膜密閉都起到了抑菌作用，紫外線照射使細菌的蛋白質(zhì)變性，核酸受破壞，是滅菌方法。2下列關于微生物分離和培養(yǎng)的敘

25、述，錯誤的是()A微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行消毒B測定土壤樣品中的細菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法C分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度D分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源解析：選A微生物培養(yǎng)前，要對培養(yǎng)基進行滅菌；菌落計數(shù)法可以測定土壤樣品中的細菌數(shù)目；不同微生物在土壤中含量不同，故分離不同微生物需采用不同的稀釋度；在以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基上，只有能分解尿素的細菌可以生長。3(2015·鎮(zhèn)海中學月考)檢驗飲用水的細菌含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施。請回答下列與檢驗飲用水有關的問題：(1)要測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)量，常采用_法，通常將水樣進行一系列的梯度_，

26、然后將上述的水樣用涂布器分別涂布到_的表面進行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時_(填“是”或“否”)需要對照組。原因_。(2)下圖所示的四種菌落分布圖中，不可能由上述方法得到的是_。 (3)大腸桿菌培養(yǎng)的條件需無菌，培養(yǎng)基配制時需加入氯化鈉，以維持_。配制培養(yǎng)基時先_(填“調(diào)節(jié)pH”或“滅菌”)后_(填“調(diào)節(jié)pH”或“滅菌”)。解析：測定飲用水中細菌數(shù)目可以采用涂布分離法，涂布前需先稀釋樣品以獲得合適的計數(shù)平板，稀釋后的水樣涂布于LB固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)時需同時培養(yǎng)一個未接種的空白培養(yǎng)基作為對照，從而判斷培養(yǎng)基是否已被污染。題圖中D是經(jīng)劃線分離后培養(yǎng)所得結(jié)果。LB培養(yǎng)基中加入NaCl

27、除作為無機鹽外，還能維持培養(yǎng)基的滲透壓。培養(yǎng)基配制后先調(diào)pH值后滅菌才能使用，若先滅菌后調(diào)pH值就不能保證調(diào)pH值后的培養(yǎng)基無菌。答案：(1)涂布分離稀釋LB固體培養(yǎng)基是因為需要判斷培養(yǎng)基使用之前是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格)(2)D(3)滲透壓調(diào)節(jié)pH滅菌4(2013·全國卷)臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉栴}：(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用_法或_法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當稀釋，用_法接種于

28、固體培養(yǎng)基表面，在37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長，布滿平板。(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A_；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B_；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明_；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根據(jù)上述實驗結(jié)果，為達到抗菌目的，最好選用抗生素_。解析：(1)微生物的常用接種方法為劃線法和稀釋涂布法。(2)能夠使菌落均

29、勻生長、布滿平板的接種方法為涂布法。(3)含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A敏感；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B不敏感；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明該致病菌對C的敏感性比對A的弱；含D的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落(排除雜菌污染)，說明該致病菌可能對抗生素D產(chǎn)生了抗藥性。答案：(1)劃線稀釋涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌(4)A5自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時一般要將它們分離提純，然后進行數(shù)量的測定。下面是對大腸桿菌進行數(shù)量測定的實驗，請回答有關問題

30、：實驗步驟：(1)制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液。(2)為了得到更加準確的結(jié)果，你選用_法接種樣品。(3)適宜溫度下培養(yǎng)。結(jié)果分析：(1)測定大腸桿菌數(shù)目時，在對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確可信的是_，其理由_。A一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230B兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是220和260，取平均值240C三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、50和520，取平均值260D四個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、300、240和250，取平均值250(2)一同學在稀釋倍數(shù)為105的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為234，那么每毫升樣品中的菌落

31、數(shù)是_(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1 mL)。(3)用這種方法測定的大腸桿菌密度，實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量_，因為_。解析：為了得到更加準確的結(jié)果，應用稀釋涂布平板法接種樣品。選取多個菌落數(shù)相差不大的平板計數(shù)，取其平均值。234÷0.1×1052.34×108。因為菌落可能由兩個或多個細菌連在一起生長而成，所以實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多。答案：實驗步驟：(2)稀釋涂布平板結(jié)果分析：(1)D在設計實驗時，一定要涂布至少三個平板作為重復組，才能增強實驗的說服力與準確性；在分析實驗結(jié)果時，要考慮所設置的重復組的結(jié)果是否相當(2)2.34×108(3)

32、多當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落6(2015·湖州中學周考)高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示。 (1)號培養(yǎng)基從物理狀態(tài)來看，屬于固體培養(yǎng)基，配制時要加入_作為凝固劑，從用途來看屬于選擇培養(yǎng)基，因以_作為唯一碳源。(2)配置固體培養(yǎng)基的基本步驟是()A計算、稱量、倒平板、溶化、滅菌B計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌C計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板D計算、稱量、滅菌、溶化、倒平板(3)溶化時，燒杯中加入瓊脂后要不停地_，防止瓊脂糊底引起燒杯破裂。對培養(yǎng)基滅菌的方法一般為_。(4)過程是_

33、，過程所使用的接種方法是_法。(5)部分嗜熱菌在號培養(yǎng)基上生長時可釋放_分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，挑選相應的菌落，接種到號培養(yǎng)基進一步分離純化后，再對菌種進行_培養(yǎng)。解析：固體培養(yǎng)基通常加入瓊脂作為凝固劑。本實驗的目的是獲得產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，故其選擇培養(yǎng)基中應以淀粉作為唯一碳源。配置固體培養(yǎng)基的基本步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。配置培養(yǎng)基時加熱溶化中，要注意加入瓊脂后要不斷攪拌，防止瓊脂糊底和溢出。對培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌。仔細觀察題圖可知，過程是菌液稀釋，過程是采用涂布法接種的。能產(chǎn)生淀粉酶的部分細菌能分解利用淀粉，其菌落周圍會出現(xiàn)透明圈，取這樣的菌落

34、再分離純化可獲得相應菌種，以后可以擴大培養(yǎng)用于生產(chǎn)。答案：(1)瓊脂淀粉(2)C(3)攪拌高壓蒸氣滅菌(4)稀釋涂布分離(5)淀粉酶擴大第二講酶的應用知識點一果汁中的果膠和果膠酶1果膠及其特性果膠是植物細胞壁的主要成分，由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成。果膠起著粘合細胞的作用，去掉果膠植物組織將變得松散。果膠不溶于乙醇中，這是鑒別果膠的一種簡易的方法。2果膠酶的組成及作用通常所說的果膠酶包括果膠酶和果膠甲酯酶，能使果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯，瓦解植物細胞壁和胞間層。3實驗步驟第一步制勻漿第二步燒杯A燒杯B5 g勻漿5 g勻漿10 mL黑曲霉提取液10 mL水間歇攪拌2030

35、min第三步試管1試管2試管3試管4A燒杯混合物4 mLA燒杯混合物4 mLB燒杯混合物4 mLB燒杯混合物4 mL沸水浴不加熱沸水浴不加熱上清液最澄清澄清較渾濁渾濁第四步加入95%酒精4 mL沉淀物最少沉淀物較少沉淀物最多沉淀物較多4實驗結(jié)論果膠酶能分解果膠，提高果汁的澄清度。知識點二­淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(1)固定化酶的含義：是指將水溶性的酶用物理或化學的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑的方法。(2)固定化的方法：吸附法、共價偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。(3)固定化酶的優(yōu)點：穩(wěn)定性提高；易分離；可反復利用。(4)­淀粉酶的固定化及淀粉

36、水解作用的檢測：淀粉的水解過程：淀粉糊精麥芽糖葡萄糖(遇碘顯藍色) (遇碘顯紅色) (遇碘不顯色)­淀粉酶的固定化(如右圖)。5 mg ­淀粉酶溶于4 mL蒸餾水，加入5 mg石英砂，攪拌30 min。將石英砂裝入含氣門芯并用夾子封住的注射器中。用40 mL蒸餾水用流速1 mL/min來洗滌除去未吸附的游離淀粉酶。使淀粉溶液以0.3_mL/min的流速過柱，在流出5 mL后接收0.5 mL流出液。加入12滴KI­I2溶液，觀察顏色變化。實驗預期結(jié)果： 水解產(chǎn)物糊精遇碘呈紅色。 考點一|果汁中的果膠和果膠酶探究影響果膠酶活性因素實驗的分析(1)實驗原則：單一變量原則

37、、對照性原則。嚴格控制變量，盡量減少無關變量的影響。(2)實驗原理：果膠酶活性受溫度、pH或酶抑制劑的影響，在最適溫度或pH時，活性最高，果肉的出汁率、果汁的澄清度都與果膠酶的活性大小成正比。(3)設計實驗：探究最適溫度時，pH為無關變量，最好是最適pH；探究最適pH時，溫度為無關變量，最好是最適溫度。探究果膠酶的最適用量時，最適用量是在溫度、pH等適宜條件下測出來的，如果無關變量改變，最適用量也會發(fā)生變化。典例1下列有關果膠酶及果膠酶實驗探究的敘述正確的是()A探究果膠酶的最適用量時，pH、溫度不影響實驗結(jié)果B果膠酶包括果膠酶、果膠甲脂酶和葡萄糖異構酶等C探究溫度對果膠酶活性影響時，溫度、蘋

38、果泥、果膠酶用量及反應時間等都是自變量D可以用相同時間內(nèi)過濾得到的果汁體積來確定果膠酶的最適用量解析探究果膠酶的最適用量時，pH、溫度會影響實驗結(jié)果；葡萄糖異構酶不屬于果膠酶；探究溫度對果膠酶活性影響的實驗中，溫度為單一變量，其他因素保持不變；可以用相同時間內(nèi)過濾得到的果汁體積和通過比較果汁的澄清度來確定果膠酶的最適用量。答案D1果膠是細胞間的黏連成分，也是果汁中的成分，加入果膠酶可將細胞離析，增加固形物的分散度。此外，還降低了水果勻漿懸液的黏度，有利于過濾掉不溶物，并使果膠分解成半乳糖醛酸。2品質(zhì)最好的果汁應該是：盡量保留水果中的營養(yǎng)成分。具有水果的原始口味。有更多的固形物。分散程度好，不沉

39、淀，不上浮。有原始的水果色彩。除去所有的機械組織，更易消化。因此，能使最多的水果成分溶解或分散在果汁中的條件就是最佳條件，達到這些條件的方法要溫和，且對人體無害。針對練習1工業(yè)生產(chǎn)果汁時，常常利用果膠酶破除果肉細胞壁以提高水果的出汁率，為研究溫度對果膠酶活性的影響，某同學設計了如下實驗：將果膠酶與蘋果泥分裝于不同試管，在10 水浴中恒溫處理10分鐘(如圖甲所示)。：將步驟處理后的果膠酶和蘋果泥混合，再次在10 水浴中恒溫處理10分鐘(如圖乙所示)。：將步驟處理后的混合物過濾，收集濾液，測量果汁量(如圖中丙所示)。：在不同溫度條件下重復以上實驗步驟，并記錄果汁量，結(jié)果如下表：溫度/1020304

40、050607080果汁量/mL813152515121110根據(jù)上述實驗，請分析回答下列問題：(1)果膠酶能破除細胞壁，是因為果膠酶可以分解細胞壁中的果膠，產(chǎn)物是_。(2)為什么該實驗能夠通過測定濾出的蘋果汁量的大小來判斷果膠酶活性的高低？_。(3)下圖中A、B、C圖依次表示果膠酶濃度一定時，果膠酶的反應速度與反應物濃度、溫度、pH之間的關系，據(jù)圖完成下列問題：圖A中，反應物達到某一濃度時反應速度不再上升的原因是_。圖B中，曲線ab段表明_， 曲線bc段表明_。將裝有果膠酶與反應物的甲、乙兩支試管分別放入12 和90 水浴鍋中，20分鐘后取出轉(zhuǎn)入40 的水浴鍋中保溫，兩支試管內(nèi)的反應是：甲_，

41、乙_。圖C表示果膠酶濃度、反應物濃度、溫度等一定時，果膠酶催化反應的速率隨pH變化的曲線，實驗時可根據(jù)_來判定果膠酶的最適pH。解析：(1)果膠酶催化植物細胞壁中的果膠分解成為半乳糖醛酸。(2)該實驗中衡量結(jié)果的指標有兩項，一是觀察在相同的時間內(nèi)，濾出蘋果汁的量的多少，量多說明果膠酶活性高，將果膠分解得多，使果汁更好地流出；二是觀察果汁的澄清度。(3)酶是生物體內(nèi)具有催化能力的有機物，絕大多數(shù)是蛋白質(zhì)，其催化效率受反應物濃度、溫度、pH的影響。圖A中，當反應物在低濃度范圍內(nèi)增加時，反應速度迅速上升；當反應物達到一定濃度時，隨反應物濃度增加， 反應速度不再增加。這是因為酶雖然有高效性，但催化能力

42、也有一定限度，當所有酶都發(fā)揮了最高效能后，反應物濃度再增加，反應速度也不增加，這時受酶濃度影響。從a點到b點曲線上升，這是因為溫度升高，酶活性升高。曲線bc下降，因為溫度超過最適溫度，酶活性降低。由于甲試管溫度較低，所以酶活性較低，反應速度很慢，當轉(zhuǎn)入40 (酶反應的適宜溫度)的水浴鍋中加熱時，其反應速度迅速增加。乙試管在90 高溫下，酶結(jié)構被破壞，酶變性失活，當轉(zhuǎn)入40 的水浴鍋中保溫時，酶活性也不再恢復，故無催化反應。圖C表示果膠酶濃度、反應物濃度、溫度等一定時，果膠酶催化反應的速率隨pH變化的曲線，實驗時可根據(jù)果汁的量來判定果膠酶的最適pH。答案：(1)半乳糖醛酸(2)果膠酶將果膠分解為

43、小分子物質(zhì)，小分子物質(zhì)可以通過濾紙，因此蘋果汁量的大小反映了果膠酶催化果膠分解的能力(3)受反應物中酶濃度的限制果膠酶的活性隨溫度升高而升高果膠酶的活性隨溫度的繼續(xù)升高而下降反應速度加快無催化反應果汁的量考點二|­淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測直接使用酶、固定化酶的比較比較項目直接使用酶固定化酶酶的種數(shù)一種或幾種一種常用載體高嶺土、皂土、硅膠、凝膠制作方法化學結(jié)合固定化、物理吸附固定化是否需要營養(yǎng)物質(zhì)否否催化反應單一或多種單一反應底物各種物質(zhì)(大分子、小分子)各種物質(zhì)(大分子、小分子)缺點對環(huán)境條件非常敏感，易失活；難回收，成本高，影響產(chǎn)品質(zhì)量不利于催化一系列的酶促反應優(yōu)點催化效

44、率高、耗能低、低污染既能與反應物接觸，又能與產(chǎn)物分離；可以反復利用典例2試分析下圖中，與石英砂載體制備固定化­淀粉酶相似的是()解析A是吸附法；B是化學結(jié)合法；C和D是包埋法，C一般是將酶包埋在細微網(wǎng)格里，D是將酶包埋在凝膠中。石英砂可以吸附酶分子，所以與A相似。答案A1­淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(1)原理：用吸附法將­淀粉酶固定在石英砂上，一定濃度的淀粉溶液經(jīng)過固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示劑溶液測試，流出物呈紅色，表明水解產(chǎn)物糊精生成。(2)淀粉水解作用的檢測：原理：淀粉遇碘顯藍色，糊精遇碘顯紅色，麥芽糖遇碘不顯色，本實驗使用的是枯草桿

45、菌的­淀粉酶，其作用的最適pH為5.57.5，最適溫度為5075 。水解過程如下：2證明洗滌固定化淀粉酶柱的流出液中沒有淀粉酶的方法可在試管中加入1 mL可溶性淀粉溶液，再加入幾滴淀粉酶柱的流出液，混合后用手握住試管增加溫度，幾分鐘后加12滴KI­I2指示劑，如仍顯藍色，即流出液中沒有淀粉酶了。用固定在石英砂上的淀粉酶柱再作用于淀粉溶液，使其自柱中流出，才能表明是淀粉酶的固相酶作用的結(jié)果。針對練習2(2015·富陽3月周考)下列是有關固定化酶及細菌培養(yǎng)與分離的問題。請回答：(1)固定化酶是將水溶性的酶用物理或_的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為 _ 而又有酶活性的制

46、劑?？捎?_ 法將­淀粉酶固定在石英砂上形成固定化酶柱。(2)為獲取土壤中的芽孢桿菌，某同學進行了相關實驗，操作流程如下：上圖中步驟A為_，步驟B為_。要判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，可采用的方法是_。(3)下列消毒滅菌方法中，常用于接種環(huán)滅菌的是_。A70%酒精浸泡B紫外線照射 C灼燒 D高壓蒸汽(4)請分析劃線分離法能得到單菌落的原因：_。答案：(1)化學不溶于水吸附(2)制平板培養(yǎng)將滅菌后的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間后觀察是否出現(xiàn)菌落(3)C(4)劃線過程中接種環(huán)上的菌液逐漸減少，到劃線最后部分細菌間距離加大，經(jīng)培養(yǎng)后能得到單菌落課堂對點練題組一果膠酶的應用1用果膠酶處理蘋果泥時為了使果膠酶

47、能夠充分地催化反應，應采取的措施是()A加大蘋果泥用量 B大幅度提高反應溫度C換成大型號容器 D用玻璃棒進行攪拌解析：選D為了使果膠酶能夠充分地催化反應，應采取的措施是增大酶和反應物的接觸面積，攪拌可以達到此目的。只換大型號容器不一定能加快反應。大幅度提高溫度有可能會出現(xiàn)溫度過高而使酶活性降低的現(xiàn)象。如果反應物已足夠多，那么增加反應物也不能改變反應速率。題組二固定化酶2下列關于固定化酶的說法，錯誤的是()A固定化酶不足之處是不能催化一系列反應B固定化酶可再次利用降低了生產(chǎn)成本C固定后的酶既能與反應物接觸，又能與反應物分離D固定化酶易溶于水解析：選D酶的固定方式有包埋法、化學結(jié)合法和物理吸附法，

48、酶經(jīng)固定化后作為制劑使用有許多優(yōu)點，如既能與反應物接觸，又能與產(chǎn)物分離；不溶于水可以反復利用；穩(wěn)定性提高。固定化酶的缺點是不利于催化一系列的酶促反應。課下提能練1下列關于果膠酶作用的敘述，錯誤的是()A分解水果細胞壁中的果膠，從而瓦解細胞壁B可將果膠分解成半乳糖醛酸，使果汁變清C分解水果細胞壁中的纖維素和果膠D可使果汁榨取變得容易，提高出汁率解析：選C果膠酶可將果膠分解為半乳糖醛酸，從而使果汁榨取的時候比較容易，并使果汁變清。要分解纖維素，需要纖維素酶。2酶的固定化是將酶束縛或限制于一定區(qū)域內(nèi)，使其進行酶促反應后可回收及重復利用的一類技術，下列關于固定化酶技術的敘述不正確的是()A為使葡萄糖液

49、與葡萄糖異構酶充分接觸生產(chǎn)果糖，葡萄糖液應從固定化酶反應柱下端注入B制備固定化酶的方法主要有化學結(jié)合法和物理吸附法C固定化酶固定時可能會對酶造成損傷而影響其活性D用固定化葡萄糖異構酶生產(chǎn)高果糖漿可以大幅度提高產(chǎn)量解析：選A葡萄糖液應從固定化酶反應柱的上端注入，使葡萄糖液流過反應柱，與固定化葡萄糖異構酶接觸，轉(zhuǎn)化成果糖。制備固定化酶的方法主要有化學結(jié)合法和物理吸附法。固定化酶固定時可能會對酶造成損傷而影響其活性。3某校生物興趣小組為探究不同濃度果膠酶對蘋果勻漿出汁率的影響，進行了如下實驗。實驗步驟：制備蘋果勻漿。將蘋果洗凈，切成小塊，用榨汁機打碎成蘋果勻漿。加熱蘋果勻漿到100 ，再冷卻至50

50、左右。配制不同濃度的酶液。取5支10 mL的試管，依次編號為26號。分別加入不同量的質(zhì)量濃度為10 g/L的果膠酶溶液，再分別加入蘋果酸定容至10 mL，獲得質(zhì)量濃度分別為2 g/L、4 g/L、6 g/L、8 g/L、10 g/L的果膠酶溶液，備用。降解蘋果勻漿(如下圖所示)。沉淀。向上述6只燒杯中添加明膠、活性炭等物質(zhì)攪拌處理，充分混勻后靜置，分別過濾。記錄并處理結(jié)果：用量筒測量澄清濾液(即蘋果汁)的體積，記入表格，并計算出汁率。請回答下列問題：(1)果膠酶能提高蘋果的出汁率并使果汁澄清的原理是_。(2)步驟中，將蘋果勻漿加熱到100 的目的是_。(3)步驟中，在26號試管中加入10 g/L果膠酶溶液的量分別是_；步驟中，在1號燒杯中加入1 mL_。(4)根據(jù)預期結(jié)果，請在右圖中繪制出蘋果勻漿出汁率與果膠酶濃度之間大致的關系曲線，并在坐標軸上標出蘋果勻漿最高出汁率所對應的果膠酶最佳濃度。解析：果膠是植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一。在果汁加工中，果膠不僅影響出汁率，還會使果汁渾濁。果膠酶能分解果膠，瓦解植物細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，也使渾濁的果汁變得澄清。在研究酶濃