醫(yī)學檢驗本科班分子生物學檢驗技術試卷

1、醫(yī)學檢驗本班分子生物學檢驗技術試卷選擇題（在備選答案中選擇一個最佳答案,每題 2分,共 20分）:1. 在核酸提取時 , 常需要使用氯化鈉 , 醋酸鈉等鹽溶液 , 真正的目的是（ ）A.中和核酸的負離子，使其易于沉淀 B. 調(diào)節(jié)PH值C. 保持核算的完整性D.提高核酸的濃度E. 無特定目的2. 在一個DNA分子中,如G所占摩爾比為17.2%,則A所占摩爾比為（）A. 82.8% B. 32.8% C. 17.2% D. 65.6% E.無法計算3. 下列那項不是擴增反應所必需的 ?（）A. 引物和模板 B. dNTP C. Mg+ D .DNase E.緩沖液4. 下列那項是分子生物學技術形成

2、的理論基礎 ?（）A. 基因結構與功能的關系B.基因結構變異與疾病的關系C. 病原微生物的基因結構特征D.基因的表達 . 調(diào)控與疾病的關系A. DNAB. RNAA. DNAB. RNAE. 以上皆是5. 分子生物學檢驗技術主要包括那些技術 ?（）A. 核酸分子雜交技術B. DNA測序技術C. PCR 技術D. DNA重組技術E. 以上全是6. 下列哪項檢測需應用分子生物學檢驗技術 ?（）A. 肝功能檢測B.乙肝兩對半檢測C.乙肝病毒DNA（HBV-DNA檢測D. 腫瘤細胞培養(yǎng)E. 病原微生物培養(yǎng)7. 在核酸的分離純化過程中 , 為保證其一級結構的完整性 , 應采取（ ）A. 盡量簡化分離步驟

3、 , 縮短提取時間 B. 適當延長提取時間C.在37攝氏度條件下進行D.加入Mg+,Ca+等二價金屬離子E. 以上全是有一核酸樣品 , 測得 A260/A280=2.0, 請問該樣品屬于哪類核酸樣品 ?（）A. DNAB. RNAC.是DNA但有蛋白質(zhì)污染D.是RNA但有蛋白質(zhì)污染E. DNA 和 RNA8. 在RNA提取和純化過程中，為避免Rnase污染而導致 RNA的降解，應采?。ǎ〢. 在潔凈的實驗室里操作B.帶手套和口罩C.所用器材高壓消毒或 DEPC處理D.冰浴下操作E. 以上皆是9. 隨機引物標記法全程標記DNA時,需選用下列哪種酶？（）A. DNA 多聚酶 I 的 Kelnow

4、片段 B. TaqDNA 聚合酶C. 限制性內(nèi)切酶D. DNA連接酶E. 末端轉移酶判斷題：（你認為下列敘述正確的請在題后括號內(nèi)打V,錯誤的打X,每題2分，共6分）1. 雙脫氧核酸鏈終止法是最常用的DNA測序技術（）3't 5'外切酶活性，無校正功能,2. TapDNA聚合酶的作用是催化 DNA合成，但由于缺乏所以在復制合成新鏈過程中可能會發(fā)生堿基錯配,導致PCR產(chǎn)物的錯誤（3. 采用加熱煮沸法可使 RNase完全失活（） 三：填空題 （ 每空格 2 分, 共 24 分）:一級結構的完整性 ）；1. 在選擇核酸的分離純化方法,應遵循的總原則是：一是保證核酸（ 二是盡可能（ 排除

5、其他分子的污染,保證核酸樣品的純度）。2. 在PCF反應中，Mg+是個至關重要的因素，濃度（過低 ）會降低酶的活性，濃度（過 高 ）又會導致非特異性擴增。3. 用于核酸雜交的普通硝酸纖維素膜最大的優(yōu)點是 （ 本底低 ）,因而最容易檢測雜交信號, 缺點是（ 脆性大 ）易破裂，且隊V 5 0 0 bp的核酸結合力低。4 整個核酸雜交反應主要由（ 預雜交 ）、（ 雜交 ）和（ 洗脫 ）三個步驟組成。5. 轉移到硝酸纖維素膜或尼龍膜上的核酸, 其與濾膜的結合是松散的, 需做進一步的固定, 常用的固定方法是（ 烘烤 ）、（紫外線固定 ）和（ 堿固定 ）。三. 名詞解釋： （ 每題 4 分, 共 20 分

6、）:1. 融點曲線分析技術：是根據(jù)野生型序列和突變序列因不同Tm而產(chǎn)生不同的融點曲線而設計的。2. 探針 : 指所有能與特定的靶分子發(fā)生特異性的相互作用,并可以被檢測的分子3. Tm 值： DNA 熔解溫度,指把 DNA 的雙螺旋結構降解一半時的溫度。4. 轉染：將外源DNA直接導入真核生物細胞的過程稱為轉染。5. 轉化：將重組的DNA分子導入細菌，使其在細菌體內(nèi)擴增及表達的過程稱為轉化。四. 問答題 ：（每題 10 分，共 30 分）1. 簡述限制性內(nèi)切酶的定義、命名原則和分類。答：定義：限制性內(nèi)切酶是能識別和水解雙鏈DNA分子內(nèi)特異序列的核酸水解酶類。命名：通常由 3 個斜體字母表示，第

7、1個大寫字母為來源微生物的屬名第 1個字母，第 2、 第 3 個小寫子母取微生物種名的頭兩個字母。分類：根據(jù)酶分子組成及裂解方式的不同， 將限制性內(nèi)切酶分 3類，I類和川類限制性內(nèi)切 酶在同一酶分子中兼有修飾 （甲基化）作用和依賴于 ATP的限制水解活性，H類限制性內(nèi)切 酶能識別并水解特異性的核苷酸序列是 DNA重組技術中最重要的工具。2. PCR 引物的設計應遵循哪些原則。答：1.用于PCR反應的引物需要兩條， 分別設在被擴增目的的片段的兩端，并分別與模版正負鏈序列互補。2. 引物的長度一般以 18-25 個核苷酸為宜， 引物過長容易產(chǎn)生寡核苷酸的鏈內(nèi)互補， 形成發(fā) 夾狀結構，影響引物和模板

8、之間的互補。3. 兩條引物之間尤其在 3'端的序列不能有互補，以免形成引物二聚體。4. 引物的堿基組成應平衡，避免出現(xiàn)嘌呤、嘧啶堿基堆積。5. PCR擴增中的退火溫度是根據(jù)引物的Tm值而決定的，兩條引物的 Tm值不能差太大。6. 根據(jù)需要，可在合成引物時于其5'端加修飾成分。3. 試述實時熒光PCR水解探針法的實驗原理？答：原理：PCR反應體系中除有兩條引物外還需要一條熒光素標記的探針。探針的5'端和3'端分別標記熒光報告基團R和熒光淬滅基團 Q當探針完整時 R基團與Q基團分別位于探針的兩端，Q基團抑制R基團使其不能發(fā)射熒光。PCR程中，TaqDNA聚合酶沿著模