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1、蛋白質(zhì)工程的崛起知識(shí)點(diǎn)一蛋白質(zhì)工程的概念: 蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ), 通過(guò)基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求。也就是說(shuō), 蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上,延伸出來(lái)的第二代基因工程,是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。說(shuō)明:對(duì)本概念的理解應(yīng)從以下幾個(gè)方面理解:1. 蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ):蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系2. 蛋白質(zhì)工程的改造對(duì)象: 改造蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu), 本質(zhì)上是改造控制該蛋白質(zhì)合成的基因的結(jié)構(gòu)。 3. 蛋白質(zhì)工程的產(chǎn)物:產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)。知識(shí)點(diǎn)二 蛋白質(zhì)工程的原理:蛋白質(zhì)工程的目標(biāo)是根
2、據(jù)人們對(duì)蛋白質(zhì)功能的特定需求,對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)。 其基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)。其流程圖如下:知識(shí)點(diǎn)三蛋白質(zhì)工程的實(shí)例:. 干擾素是動(dòng)物體內(nèi)的一種蛋白質(zhì),可治療病毒的感染和癌癥,但在體外保存相當(dāng)困難,通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造蛋白質(zhì)后可在70條件下, 保存半年。 . 玉米體內(nèi)賴(lài)氨酸的含量比較低,關(guān)鍵是玉米體內(nèi)天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶濃度達(dá)到一定量時(shí), 就會(huì)抑制這兩種酶的活性, 從而影響賴(lài)氨酸含量的提高, 經(jīng)過(guò)蛋白質(zhì)工程改造這兩種酶后,分別使賴(lài)氨酸的含量提高了5倍和 2倍。說(shuō)明:對(duì)該部分知識(shí)的學(xué)習(xí)不能局限
3、于這兩個(gè)例子,更重要的是從中學(xué)習(xí)蛋白質(zhì)工程的原理和蛋白質(zhì)工程的基本途徑。知識(shí)點(diǎn)四蛋白質(zhì)工程的進(jìn)展和前景:蛋白質(zhì)工程的進(jìn)展向人們展示出誘人的前景,如:通過(guò)對(duì)胰島素的改造,使其成為一種速效性藥品,再如:將蛋白質(zhì)工程應(yīng)用與微電子方面,制成電子元件,具有體積小、耗電少、效率高等優(yōu)點(diǎn)。但是由于蛋白質(zhì)發(fā)揮功能必須依賴(lài)于它的高級(jí)結(jié)構(gòu)(空間結(jié)構(gòu)),這是相當(dāng)復(fù)雜的,所以,目前成功的例子還不多,還需要人們的努力??傊?,蛋白質(zhì)工程的前景是光明的,道路是曲折的。說(shuō)明:學(xué)習(xí)該部分知識(shí)時(shí)要聯(lián)系蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),特別要理解蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)對(duì)其功能的影響,如:高溫使蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性;同時(shí)要根據(jù)所學(xué)知識(shí),發(fā)
4、揮用心愛(ài)心專(zhuān)心1自己的想象能力, 解決如何在蛋白質(zhì)工程操作中不使蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)改變,而了解能行使正常功能的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)?教材拓展拓展點(diǎn)一蛋白質(zhì)工程與基因工程的主要區(qū)別:蛋白質(zhì)工程主要是根據(jù)蛋白質(zhì)精細(xì)結(jié)構(gòu)和生物活性的作用機(jī)制之間的關(guān)系, 利用基因工程手段, 按人類(lèi)需要定向改造天然的蛋白質(zhì)分子,甚至創(chuàng)造新的自然界根本就不存在的、具有優(yōu)良特性的蛋白質(zhì)分子。蛋白質(zhì)工程與基因工程密不可分,基因工程是通過(guò)基因操作把外援基因轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)纳矬w內(nèi),并在其中進(jìn)行表達(dá),它的產(chǎn)品還是該基因編碼的天然存在的蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)工程則更進(jìn)一步, 根據(jù)分子設(shè)計(jì)方案,通過(guò)對(duì)天然蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行改造來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)其編碼的蛋白質(zhì)的改造,它
5、的產(chǎn)品已不再是天然的蛋白質(zhì),而是經(jīng)過(guò)改造的具有人類(lèi)所需優(yōu)點(diǎn)的蛋白質(zhì)。天然蛋白質(zhì)是通過(guò)漫長(zhǎng)進(jìn)化過(guò)程,由自然選擇而來(lái)的, 而蛋白質(zhì)工程對(duì)天然蛋白質(zhì)的改造好比在實(shí)驗(yàn)室里加快了進(jìn)化過(guò)程,能更快、更有效地為人類(lèi)需要服務(wù)。拓展點(diǎn)二蛋白質(zhì)工程的內(nèi)容: 蛋白質(zhì)工程的內(nèi)容主要有兩方面:一是根據(jù)需要設(shè)計(jì)具有特定氨基酸序列和空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì);二是確定蛋白質(zhì)的化學(xué)組成及空間結(jié)構(gòu)與生物功能之間的關(guān)系。 在此基礎(chǔ)上, 實(shí)現(xiàn)從氨基酸序列預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)和生理功能,設(shè)計(jì)合成具有特定生理功能的全新蛋白質(zhì), 而氨基酸排序由基因決定, 所以還需要改造控制蛋白質(zhì)合成的相應(yīng)基因中脫氧核苷酸序列或人工合成所需要的自然界原本不存在的基
6、因片段,用于蛋白質(zhì)工程??偨Y(jié): 學(xué)法指導(dǎo):學(xué)習(xí)蛋白質(zhì)工程時(shí),要結(jié)合基因控制蛋白質(zhì)的合成過(guò)程、基因工程以及蛋白質(zhì)的生理功能等知識(shí), 只有在這些知識(shí)的基礎(chǔ)上,才能學(xué)好蛋白質(zhì)工程;同時(shí), 要關(guān)注當(dāng)前關(guān)于蛋白質(zhì)工程的發(fā)展,以加深對(duì)蛋白質(zhì)工程的理解?!就卣归喿x】1. 動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器1987 年美國(guó)科學(xué)家戈登(Gordon)等人首次在小鼠的奶中生產(chǎn)出一種醫(yī)用蛋白tPA(組織型纖溶酶原激活物),展示了用動(dòng)物乳腺生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品的可能性。利用動(dòng)物乳腺生產(chǎn)高價(jià)值產(chǎn)品的方式稱(chēng)為動(dòng)物乳腺反應(yīng)器。為什么要用動(dòng)物乳腺作為反應(yīng)器生產(chǎn)高價(jià)值的蛋白質(zhì)產(chǎn)品呢?這是因?yàn)閯?dòng)物乳房是一種高度分化的專(zhuān)門(mén)化腺體,合成蛋白質(zhì)的能力非常
7、強(qiáng),尤其是一些經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的遺傳改良,專(zhuān)門(mén)產(chǎn)奶的乳用動(dòng)物品種,蛋白質(zhì)合成能力更是驚人。一頭優(yōu)質(zhì)奶牛,一年可產(chǎn)奶10 000 kg。即便是一只奶山羊,一年也可產(chǎn)奶2 000 kg 。用心愛(ài)心專(zhuān)心2動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器歸納起來(lái)有四大優(yōu)點(diǎn):產(chǎn)量高, 且易收獲目標(biāo)產(chǎn)品, 可以隨乳汁分泌而排出動(dòng)物體外; 目標(biāo)產(chǎn)品的質(zhì)量好。動(dòng)物乳腺組織不僅具有按遺傳信息流向合成蛋白質(zhì)的能力,而且具備一整套對(duì)蛋白進(jìn)行修飾和加工的能力,如糖基化、羧化、磷酸化以及分子組裝等,而微生物和植物系統(tǒng)都不具備這種全面的蛋白質(zhì)后加工能力;產(chǎn)品成本低;從奶牛中提取產(chǎn)品,操作比較簡(jiǎn)單。正因?yàn)槔脛?dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)高附加值的產(chǎn)品有上述優(yōu)點(diǎn),目前
8、利用動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)已成為一種風(fēng)險(xiǎn)投資產(chǎn)業(yè),受到科學(xué)家、 商界和醫(yī)藥界的高度重視。目前瞄準(zhǔn)的目標(biāo)醫(yī)藥產(chǎn)品有:血液蛋白質(zhì), 如表 1-2 所示, 這些血液蛋白質(zhì)有巨大的經(jīng)濟(jì)效益, 其中利用奶牛生產(chǎn)的凝血酶已通過(guò)第三期臨床實(shí)驗(yàn),即將投放市場(chǎng)。 第二代醫(yī)用蛋白質(zhì),主要有抗體、降鈣素、人的生長(zhǎng)激素、胰島素等藥物蛋白,乳白蛋白、乳鐵蛋白等營(yíng)養(yǎng)蛋白,疫苗,組織修復(fù)物等。生產(chǎn)“人源化牛奶”,即用成人的乳蛋白基因替代牛的乳蛋白基因,使牛奶變成像人奶的一種基因工程奶。表 1-2 一些醫(yī)用蛋白質(zhì)的需求情況第 8因子第9因子C蛋白凝血酶抗胰蛋白酶血纖蛋白原白蛋白市場(chǎng)需求量 304 g4 kg10 k
9、g21 kg5 t150 kg315 t單價(jià)(美元 /g ) 290 萬(wàn)4 萬(wàn)1 萬(wàn)7 0005001 0003.50總價(jià)值(億美元) 8.821.601.001.502.501.5011.20動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器的做法與轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的操作是相同的,只是為了將目標(biāo)產(chǎn)品在乳汁中形成, 需要使用乳腺組織中特異表達(dá)的啟動(dòng)子,即在目標(biāo)產(chǎn)品蛋白質(zhì)編碼框的前面加上乳腺組織中特異表達(dá)的啟動(dòng)子等,構(gòu)建成表達(dá)載體后通過(guò)注射導(dǎo)入受精卵中,再將其送入母體動(dòng)物內(nèi),發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體,這個(gè)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物就會(huì)在奶中產(chǎn)生所需要的目標(biāo)產(chǎn)品。2. 當(dāng)前生命科學(xué)中的幾個(gè)前沿研究領(lǐng)域基因組學(xué)基因組學(xué)是闡明各種生物基因組DNA中堿基對(duì)的排列順序
10、,破譯相關(guān)的遺傳信息的學(xué)科。目前除人類(lèi)基因組的測(cè)序工作已完成外,水稻基因組、擬南芥基因組、雞基因組等也已完成,這些工作的相繼完成為揭示生命奧秘提供了基本的資料。功能基因組學(xué)基因組測(cè)序工作的完成只是為人類(lèi)從基因水平認(rèn)識(shí)生命本質(zhì),提供了基本的資料。 功能基因組學(xué)就是要揭示每個(gè)基因在生命活動(dòng)中的具體功能,為勾畫(huà)整個(gè)生命藍(lán)圖,充分利用基因資料打下基礎(chǔ)。發(fā)現(xiàn)新的功能基因和新的基因功能的確定,從而獲得知識(shí)產(chǎn)權(quán),已成為當(dāng)前生命領(lǐng)域世界各國(guó)競(jìng)相爭(zhēng)奪的“制高點(diǎn)”。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)結(jié)構(gòu)基因組學(xué)是繼人類(lèi)基因組計(jì)劃之后又一個(gè)大的科學(xué)熱點(diǎn),是在生物用心愛(ài)心專(zhuān)心3的整體水平測(cè)定出全部蛋白質(zhì)分子的三維結(jié)構(gòu),以及蛋白質(zhì)之間、蛋白質(zhì)與核酸之間、蛋白質(zhì)與多糖之間、 蛋白質(zhì)和核酸以及多糖之間的精細(xì)三維結(jié)構(gòu),獲得這些蛋白質(zhì)在整個(gè)生命活動(dòng)中的三維結(jié)構(gòu)全息圖,即單個(gè)蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu),以及蛋白質(zhì)與其他生物大分子結(jié)合后的復(fù)合體的三維結(jié)構(gòu)狀態(tài)與生命活動(dòng)的關(guān)系,從而在生命整體水平上理解生命的原理。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)的研究進(jìn)展,將對(duì)人類(lèi)疾病機(jī)理的闡明、疾病的防治有重要意義。蛋白質(zhì)組學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)是獨(dú)立于基因組學(xué)發(fā)展的一門(mén)新興的前沿學(xué)科。它是研究一個(gè)完整的生物體(或細(xì)胞等)所表達(dá)的所有蛋白質(zhì)的特征,包括蛋白質(zhì)
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