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1、二、實(shí)驗原理二、實(shí)驗原理 抑制劑和底物結(jié)構(gòu)相似，可與底物競爭結(jié)合酶的活性中心，阻礙酶- -底物復(fù)合物形成抑制程度取決于抑制劑與酶的相對親和力，以及抑制劑與底物濃度的相對比例（I/SI/S）第1頁/共9頁HOOCCH=CHCOOHFADFADH2甲烯白MBHMBH2 2 （無色）甲烯藍(lán)MB （藍(lán)色）在在無氧條件無氧條件下以甲烯藍(lán)褪色時間判斷琥珀下以甲烯藍(lán)褪色時間判斷琥珀酸脫氫酶活性高低，觀察競爭性抑制作用酸脫氫酶活性高低，觀察競爭性抑制作用 丙二酸丙二酸HOOCHOOCCHCH2 2COOHCOOH琥珀酸脫氫酶琥珀酸脫氫酶第2頁/共9頁三、實(shí)驗步驟三、實(shí)驗步驟. . 酶促反應(yīng)及競爭性抑制作用 取

2、試管6 6支，按表所列步驟操作。 加液體石蠟以隔絕空氣3737水浴保溫 隨時觀察并記錄各管褪色時間！第3頁/共9頁3. 3. 實(shí)驗記錄和結(jié)果分析 酶提取液中有沒有琥珀酸脫氫酶活性？各管的褪色情況有何區(qū)別？為什么？丙二酸對琥珀酸脫氫酶抑制作用的類型及其特點(diǎn)是什么？本實(shí)驗中5 5號、6 6號試管的作用是什么？第4頁/共9頁四、結(jié)果分析1 1、酶提取液中有沒有琥珀酸脫氫酶活性？2 2、各管的褪色情況有何區(qū)別？為什么？3 3、丙二酸對琥珀酸脫氫酶抑制作用的類型 及其特點(diǎn)是什么？如何證明的？4 4、本實(shí)驗中5 5號、6 6號試管的作用是什么？第5頁/共9頁五、注意事項五、注意事項加試劑時加試劑時看清底物與抑制劑的濃度看清底物與抑制劑的濃度。注意注意隨時觀察記錄隨時觀察記錄各管褪色時間。各管褪色時間。3737水浴保溫過程中，水浴保溫過程中，不能振搖試管不能振搖試管，避免甲烯白重新氧化變藍(lán)。避免甲烯白重新氧化變藍(lán)。實(shí)驗結(jié)束后一定實(shí)驗結(jié)束后一定洗凈試管內(nèi)的液體石蠟洗凈試管內(nèi)的液體石蠟。

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