蒸發(fā)光散射檢測器使用說明書

1、UM-3000蒸發(fā)光散射檢測器使用說明書14目錄1. 簡介11.1 UM-3000 ELSD檢測器介紹11.2 操作原理22. 檢測器的安裝321 必需組件322 拆箱423 檢測器的安裝位置424 電源要求425 氣路連接5251 氣體供應(yīng)輸入連接5252 氣閥的連接5253 氣體出口的連接526 數(shù)據(jù)線連接53日常操作531 安全532 操作注意事項633 開機(jī)運(yùn)行634 關(guān)機(jī)操作74. 日常維護(hù)和清潔741 日常維護(hù)7411 霧化器維護(hù)8412 激光光源的更換842 日常清潔8421 流通渠道清潔9422 霧化器清潔9423 蒸發(fā)室清潔9424 檢測室清潔95. 診斷和故障排除951 檢

2、測器故障952 基線噪聲大1053 系統(tǒng)故障126. 附錄1361 儀器規(guī)格1362 相關(guān)配件1362 揮發(fā)性流動相改性劑131. 簡介1.1 UM-3000 ELSD檢測器介紹UM-3000型蒸發(fā)光散射檢測器（Evaporative Light Scattering Detector）設(shè)計用于高效液相色譜系統(tǒng)，分析任何揮發(fā)性低于流動相的化合物。ELSD的應(yīng)用范圍包括：碳水化合物，藥物，脂類，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化劑，營養(yǎng)滋補(bǔ)品，及組合分子庫等。蒸發(fā)光散射檢測器消除了常見于其他HPLC檢測器的問題。示差檢測受溶劑前沿峰的干擾使得分析復(fù)雜化，并且由于對溫度極其敏感使得

3、基線很不穩(wěn)定，與梯度洗脫不相容。另外，示差檢測器的響應(yīng)不如ELSD 靈敏。而低波長紫外檢測器在急變梯度條件下受基線漂移的困擾，并要求被分析化合物帶有發(fā)色團(tuán)。ELSD 則不受這些限制。不同于這些檢測器，ELSD 能在多溶劑梯度的情況下獲得穩(wěn)定的基線，使得分辨率更好、分離速度更快。另外，因為ELSD 的響應(yīng)不依賴于樣品的光學(xué)特性，所以ELSD 檢測時樣品不要求帶有發(fā)色團(tuán)或熒光基團(tuán)。 UM-3000蒸發(fā)光散射檢測器通過對氣壓和溫度的精確控制，確保在霧化室內(nèi)形成一個較窄的液滴尺寸分布，使液滴蒸發(fā)所需要的溫度大大降低。采用低溫蒸發(fā)模式，維持了顆粒的均勻性，對半揮發(fā)性的物質(zhì)和熱敏化合物同樣具有較好的靈敏度

4、。 UM-3000 ELSD檢測器的主要技術(shù)參數(shù) 光源：650nm激光二極管 檢測元件：光電倍增管 蒸發(fā)區(qū)溫度范圍：室溫130 溫度變化增量：1 溫度控制精度：±1 霧化氣體：氮氣或空氣 氣體消耗量：1.04.0L/min 氣體輸送壓力范圍：25bar 氣體壓力測量精度：0.01bar 模擬輸出：010mV，01V 電源：220V，50Hz 檢測限：1ng葡萄糖 噪音水平：0.1mV（流速1ml/min的有機(jī)溶液或水溶液） 計算機(jī)接口：RS232 檢測角度：120° 顯示：LCD1.2 操作原理蒸發(fā)光散射檢測器的檢測原理是：首先將柱洗脫液霧化形成氣溶膠，然后在加熱的漂移管中

5、將溶劑蒸發(fā)，最后余下的不揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒在光散射檢測池中得到檢測。主要包括以下三個步驟：1 流動相的霧化在霧化過程中將大量的液體流動相轉(zhuǎn)變成細(xì)小的液滴氣溶膠，從而使流動相更容易蒸發(fā)。霧化階段是一個非常重要的步驟，這個步驟的可靠程度和重現(xiàn)性決定了整個檢測器的靈敏度和重現(xiàn)性。氣體流量越低形成的液滴越大，液滴越大則散射的光越多，從而提高了分析靈敏度，但是越大的液滴在漂移管中越難蒸發(fā)。每種方法均存在產(chǎn)生最佳信號噪音比率的最優(yōu)化氣體流量。流動相流速越低要求適當(dāng)霧化的氣體流量也越低。用內(nèi)徑為2.1mm 的微徑柱代替內(nèi)徑為4.6mm 標(biāo)準(zhǔn)型分析柱，能大大降低流動相流速，因而提高分析的靈敏度。2 流動相的蒸發(fā)當(dāng)

6、載氣從霧化室把氣溶膠運(yùn)送到加熱漂移管時，氣溶膠中揮發(fā)性成分在加熱的不銹鋼漂移管中蒸發(fā)。為特定應(yīng)用設(shè)置適當(dāng)?shù)钠乒軠囟?，取決于流動相組成和流速，以及樣品的揮發(fā)性。高有機(jī)含量流動相比高含水量流動相要求蒸發(fā)的漂移管溫度低。低流動相流速比高流動相流速要求蒸發(fā)的漂移管溫度越低。半揮發(fā)性樣品要求采用較低的漂移管溫度，以獲得最佳靈敏度。最佳溫度需要通過觀察各溫度時的信號噪音比率來確定。低蒸發(fā)溫度對于保持顆粒大小的均勻性和熱敏性溶質(zhì)的完整性非常重要。流動相和霧化氣體中的非揮發(fā)性雜質(zhì)會導(dǎo)致噪音。采用高品質(zhì)的氣體，溶劑和揮發(fā)性緩沖液（經(jīng)過過濾的），會很大程度上降低基線噪音。若流動相沒有完全揮發(fā)會導(dǎo)致基線噪音上升。

7、仔細(xì)選擇設(shè)置檢測器的參數(shù)保證流動相完全揮發(fā)。3 對含有待測物的剩余顆粒的光散射霧狀的溶質(zhì)顆粒從漂移管出來后進(jìn)入檢測池，在這里溶質(zhì)穿過光束，被溶質(zhì)顆粒散射的光的量通過光檢測器加以檢測。光檢測器產(chǎn)生的電信號與通過檢測池的顆粒數(shù)量和大小成比例。2. 檢測器的安裝21 必需組件除了UM-3000型ELSD檢測器及其配件，用戶需要以下設(shè)備來配置完整的色譜系統(tǒng)。排氣系統(tǒng)：· 靠近檢測器的地方應(yīng)有通風(fēng)櫥或其它通風(fēng)設(shè)備，將排出的氣體從實驗室中抽除。請使用隨儀器的附件-排氣冷阱。氣源：· 請使用純凈，干燥的氣體，最好是氮氣，壓力可調(diào)節(jié)，99.9%或以上的純度為好。氣源可以是高壓氣體鋼瓶，高壓

8、液化氣罐，或是氮氣發(fā)生器以及空氣發(fā)生器。HPLC 系統(tǒng)組件：· HPLC泵，非梯度或者梯度的，在至少3000 psi壓力和0.1-1.5 ml/min 流速下，應(yīng)能保持低脈沖溶劑輸送。對于微孔柱，低流速輸送能力是必須的。· 自動進(jìn)樣器或手動進(jìn)樣閥。· 分離相關(guān)組份的分析柱，若您不能確定使用何種類型的柱子，您可與通微公司聯(lián)系。· 推薦使用與分離柱匹配的預(yù)柱幫助延長分析柱的使用壽命。· 柱溫箱，在需要時選用。· 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，電腦及工作站，能接收模擬輸出信號，010m V或01V均可。其它：· HPLC 級流動相溶劑·

9、 溶劑瓶，連接管，入口過濾器，打印紙，打印機(jī)等用于泵和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的配件。注意：流動相只可使用揮發(fā)性的緩沖溶液，含有緩沖溶液的流動相必須過濾以防止噪聲。22 拆箱UM-3000型ELSD檢測器和附件用同一箱子運(yùn)輸。小心拆開所有部件，確認(rèn)裝箱單上的所有物品都包括在內(nèi)，并且完好無損。保留所有的紙箱和包裝材料以備日后使用。確保到達(dá)用戶手中時包裝完好，如有任何損壞請立即與通微公司聯(lián)系。23 檢測器的安裝位置 檢測器應(yīng)安裝在一個平穩(wěn)的表面，安裝區(qū)應(yīng)遠(yuǎn)離氣溫變化大的地方。避免把檢測器放在窗口、通風(fēng)口、烘箱等附近。避免陽光直射，遠(yuǎn)離強(qiáng)磁場。放置時為檢測器以及相關(guān)HPLC系統(tǒng)留出足夠的操作空間。警告：檢測器和

10、其后的垂直面至少保持15厘米的距離，以保證不阻礙風(fēng)扇散熱。24 電源要求檢測器電源為220V，50Hz，使用三相電源，以確保安全和正確操作。儀器要正確接地，與系統(tǒng)其他配件，如計算機(jī)、HPLC系統(tǒng)控制器、泵、自動進(jìn)樣器等有共同的接地線，以避免“接地環(huán)”產(chǎn)生的不穩(wěn)定影響（如變化的背景、高噪音等）。如有必要，可把地線接到同一根線上。警告：不要與其他大功率設(shè)備或電力震蕩系統(tǒng)（如離心機(jī)、電冰箱等）連接到同一個電源電路。25 氣路連接251 氣體供應(yīng)輸入連接位于儀器后面板的氣體入口連接器可連接氣體調(diào)整器、一般氣體供應(yīng)器或氣體生成儀器。對大多數(shù)情況，輸入氣壓在25bar之間可獲得最優(yōu)性能。為安全起見，當(dāng)儀器

11、使用有機(jī)溶劑時操作氣體必須使用惰性氣體如氮氣。如果混入氧氣或壓縮空氣可能會引起爆炸。氣體必須時干燥的、干凈的、沒有微粒。建議用戶在氣體供應(yīng)和檢測器之間安裝氣體過濾器。252 氣閥的連接氣體入口處安裝了一個電控氣閥，可自動開關(guān)控制氣體供應(yīng)。當(dāng)未檢測時氣閥是閉合的，在檢測器不使用時防止氣流進(jìn)入檢測器。打開氣閥時，按VALVE鍵開始供應(yīng)氣體。當(dāng)儀器未通過氣體時，不要讓溶劑輸送泵工作，檢測器處于運(yùn)行狀態(tài)時，才能打開泵。253 氣體出口的連接經(jīng)過光學(xué)檢測室后，需要從儀器中排除的氣體（包括載氣、流動相蒸汽和溶解微粒）要經(jīng)過排氣口排出。排氣口位于儀器后面板上，需要通過塑料排管連接其他排氣設(shè)備。排氣管中的氣體

12、可能含有有機(jī)溶劑，為安全起見，要保證塑料排管正確排氣。26 數(shù)據(jù)線連接儀器后面板的BNC提供模擬輸出信號，有010mV，01V兩個輸出信號范圍可選。3日常操作31 安全 請遵守以下條例保證ELSD UM-3000操作安全：1. 實驗室保持良好通風(fēng)以防止溶劑蒸汽積聚。2. 使用通風(fēng)柜或其他通風(fēng)設(shè)備以防止吸入排氣管逸漏的溶劑煙霧。3. 在使用可燃溶劑時避免使用明火和點火。4. 使用惰性氣體，最好是氮氣，用于含有有機(jī)溶劑的流動相的霧化。5. 請勿除去儀器的蓋子，除非在通微工作人員的指導(dǎo)下。6. 在除去蓋子前先切斷電源。注意：內(nèi)部元件可能很燙，避免眼睛直接接觸激光。32 操作注意事項1 當(dāng)漂移管未達(dá)到

13、適當(dāng)?shù)恼舭l(fā)溫度或霧化氣體關(guān)閉時，流動相不應(yīng)開啟。否則流動相可能在漂移管中積聚。2 只有揮發(fā)性的緩沖液允許加入到流動相中。非揮發(fā)性緩沖液的顆粒將會被檢測器作為樣品檢測，引起許多基線噪音。3 在氣體流速設(shè)置為3L/min，且以水作為流動相，流速為1ml/min時，建議設(shè)置蒸發(fā)溫度為40。用戶可根據(jù)氣體流速設(shè)置、流動相組成以及流速來設(shè)置相應(yīng)合適的蒸發(fā)溫度。33 開機(jī)運(yùn)行開啟電源后，儀器自動進(jìn)入菜單模式，在此操作模式下，氣閥通常是關(guān)閉的。按MENU鍵進(jìn)入運(yùn)行條件設(shè)置界面。根據(jù)分析樣品的性質(zhì)設(shè)置蒸發(fā)溫度，Te設(shè)置蒸發(fā)溫度，在室溫130之間。設(shè)置完成后，按ENTER鍵進(jìn)入第二頁設(shè)置F設(shè)置氣體流量。設(shè)置結(jié)束

14、后按ENTER鍵進(jìn)入運(yùn)行界面，打開氣源后按RUN鍵開始蒸發(fā)溫度升溫運(yùn)行，按VALVE鍵開放氣體流量計對儀器供氣。開始運(yùn)行后屏幕顯示S：信號值，T：蒸發(fā)溫度，F(xiàn)：氣體流量，P：氣體壓力。開機(jī)穩(wěn)定后記錄只有氣體打開時的基線1015min，觀察前面板的顯示和色譜圖的信號輸出，基線必須是穩(wěn)定的、低噪音。如果基線不穩(wěn)定和/或漂移，儀器可能還沒有達(dá)到設(shè)定的溫度。在分析柱連接到檢測器前，先用流動相沖洗分析柱。沖洗的時間長短取決于分析柱存儲時間和曾經(jīng)使用的樣品和流動相的類型。在連接到ELSD前確定分析柱沒有硅膠“顆?！被蚱渌廴疚锵疵撓聛?。否則會引起基線噪聲和波動，ELSD UM-3000 會很靈敏地檢測污染

15、物。將HPLC 泵開啟，調(diào)節(jié)到所需的流速。請不要超過推薦的最大溶劑流速。如有需要時，請檢查連接是否有泄漏，并擰緊接頭。觀察顯示面板上的信號輸出，并記錄基線。在泵打開時信號初始升高之后，幾分鐘內(nèi)信號水平應(yīng)回落到接近于只有氣體打開時的信號水平。如果經(jīng)充分平衡時間之后信號仍舊高，流動相可能被污染（柱的顆粒，緩沖液，等等），或者是溫度或者是氣體流量設(shè)置太低，使得流動相沒有達(dá)到最佳蒸發(fā)。采取適當(dāng)措施，讓系統(tǒng)重新平衡幾分鐘。系統(tǒng)整個平衡好后就可以進(jìn)樣了。34 關(guān)機(jī)操作在確認(rèn)色譜柱清洗完后，先關(guān)閉流動相，允許只通氣體，持續(xù)大約10分鐘的時間，以清除剩余的液滴。檢測器關(guān)機(jī)操作：按MENU停止蒸發(fā)飄移管加熱程序

16、；關(guān)閉壓縮機(jī)氣體輸出閥門或氮氣輸出閥門，待壓力完全消失后關(guān)VALVE；最后關(guān)閉檢測器電源。 注意：如果ELSD 在幾天內(nèi)不會使用，請將柱出口后霧化器進(jìn)口斷開。重新連接前請沖洗分析柱。4. 日常維護(hù)和清潔41 日常維護(hù)蒸發(fā)光散射檢測器不需要專門人員去維護(hù)，每次使用完請排出儀器中的腐蝕性溶劑和包含改性劑的溶劑，否則將堵塞霧化器或降低儀器的性能。為保證ELSD的最佳性能，需要適當(dāng)?shù)木S護(hù)霧化系統(tǒng)。411 霧化器維護(hù)下列維護(hù)工作在正常使用期間至少每月完成一次，如果發(fā)現(xiàn)基線噪音變大，請多重復(fù)幾次。· 直接把HPLC泵接到檢測器上，不連色譜柱· 設(shè)置蒸發(fā)溫度為100· 設(shè)置氣體

17、流量為2ml/min· 流速設(shè)置為1ml/min，用丙酮沖洗檢測器30min· 流速設(shè)置為1ml/min，用甲醇沖洗檢測器30min· 流速設(shè)置為1ml/min，用水沖洗檢測器30min所有步驟完成后，此程序可使儀器處于初始操作水平。如果霧化器因為沒有在適當(dāng)?shù)臅r間間隔內(nèi)完成維護(hù)或因為其他原因被堵塞，首先應(yīng)嘗試用此程序去補(bǔ)救，必要時可疏通霧化器。412 激光光源的更換光源部件是特別設(shè)計用來優(yōu)化儀器信噪比的。ELSD UM3000采用的是半導(dǎo)體激光器，更換激光器時使用指定的部件，如果使用其他部件可能在安裝、調(diào)試方面無法進(jìn)行，或者降低、損害儀器的性能。如果激光光源需要更

18、換，請與通微公司聯(lián)系。警告：打開外蓋或燈光通道門（儀器后面）的情況下，千萬不要操作儀器，因為在檢測器有幾個區(qū)域存在高壓電，可能會引起身體的傷害并損壞儀器。注意：光源產(chǎn)生高亮度的輻射，會對人眼和皮膚產(chǎn)生危害，不要讓眼睛暴露在強(qiáng)光束下。42 日常清潔儀器的外部不需要仔細(xì)清潔，但請保持干凈。清潔時用沾有肥皂水或非腐蝕性清潔產(chǎn)品的軟紙或軟毛巾擦拭。用戶不需要做儀器內(nèi)部清潔，如果有需要，請與通微公司聯(lián)系。421 流通渠道清潔只要遵循儀器開關(guān)程序，儀器會按照自身設(shè)計進(jìn)行內(nèi)部流通渠道清潔。422 霧化器清潔必須保持霧化器的清潔，這樣才能使流動相有好的霧化效果。一段時間后，由于內(nèi)部結(jié)晶或顆粒的影響，霧化器可能

19、會被堵塞。參照霧化器維護(hù)項下操作步驟清潔霧化器。如果清洗之后，霧化器仍然堵塞，請與通微公司聯(lián)系。423 蒸發(fā)室清潔這部分不需要用戶來做，如果需要維護(hù)必須由經(jīng)認(rèn)可的技術(shù)工程師完成。424 檢測室清潔這部分不需要用戶來做，如果需要維護(hù)必須由經(jīng)認(rèn)可的技術(shù)工程師完成。5. 診斷和故障排除51 檢測器故障癥狀解決方法打開檢測器后屏幕無顯示1 檢查電源線是否連接，電壓是否正常。2 檢查保險絲是否損壞，如果以損壞請更換同一型號保險絲。沒有氣壓1 確認(rèn)儀器的氣體供應(yīng)連接正確。2 確認(rèn)氣閥打開。3 確認(rèn)供應(yīng)氣壓至少是儀器要求的最小值。無檢測信號輸出1 確認(rèn)信號線連接正常。2 關(guān)閉儀器和工作站再打開。靈敏度過低1

20、 核實氣體供應(yīng)連接正確沒有漏氣。2 確保蒸發(fā)溫度值設(shè)置不要太高。3 確保霧化溫度值設(shè)置不要太高?；€不穩(wěn)1 檢查氣體質(zhì)量。2 檢查溶劑質(zhì)量，是否使用溶劑改性劑。3 檢測器沒有充分平衡，讓檢測器充分平衡。4 漂移管溫度設(shè)置不當(dāng)，重新設(shè)置。5 流動相混合不當(dāng)引起蒸發(fā)不當(dāng)，更正流動相比例。雜峰1 確認(rèn)使用干凈、惰性氣體。2 漂移管溫度和氣體流量設(shè)置不當(dāng)，重新設(shè)置。3 更換新鮮的、高質(zhì)量的流動相4 霧化器可能部分堵塞，清洗霧化器5 漂移管和光室可能污染，請與通微公司聯(lián)系。蒸發(fā)溫度和霧化溫度沒有達(dá)到設(shè)定值1 漂移管和霧化室的溫度傳感器可能需要更換。2 確保儀器設(shè)置了正確的交流電壓。3 加熱保險絲可能需要

21、更換，請與通微公司聯(lián)系。52 基線噪聲大癥狀解決方法A 噪音來自于分析柱：l 分析柱連接著l 流動相開著l 霧化器氣體開著l 激光開著結(jié)果：l 與分析柱斷開后噪音消失1. 分析柱中有硅膠顆?；蚱渌盍狭鞒觥８鼡Q此污染的分析柱B 噪音來自于流動相l(xiāng) 分析柱斷開l 流動相開著l 霧化器氣體開著l 激光開著結(jié)果：l 泵關(guān)閉后噪音消失1. 當(dāng)前的漂移管溫度和氣體流量設(shè)置可能不能為流動相提供足夠的蒸發(fā)。重新設(shè)置霧化溫度和蒸發(fā)溫度。2. 霧化器和/或漂移管可能污染了。參考清洗程序。3. 流動相可能有顆粒污染。過濾流動相或用新鮮流動相替代。4. 流動相中存在過量氣泡。流動相脫氣。5. 泵也可能是噪音的來源。檢查泵的脈沖。確定泵已經(jīng)完全清除氣泡。如需要時在加入脈沖阻尼器。檢查泵的閥和墊圈，必要時更換。C 噪音來自于氣體l 分析柱斷開l 流動相關(guān)閉著l 霧化器氣體開著l 激光開著結(jié)果：l 氣體關(guān)閉后噪音消失1. 氣體供應(yīng)源可能被污染了顆粒。使用質(zhì)量更好/更純的氣體替換氣源。2. 霧化器、漂移管、和/或光池可能需要清潔。參考清洗程序。D 噪音來自于光池l 分析柱斷開l 流動相關(guān)