LC-15C高效液相色譜儀操作及維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程

1、Lc-15C高效液相色譜儀操作及維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程目的：建立LC-15C型高效液相色譜儀操作及維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程,嚴(yán)格按規(guī)程操作,及 時對高效液相色譜儀進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)。范圍:適用于LC-15C型高效液相色譜儀的操作及維護(hù)保養(yǎng)。職責(zé):QC檢驗員負(fù)責(zé)實施本規(guī)程,QC負(fù)責(zé)人監(jiān)督執(zhí)行。內(nèi)容：1. 工作原理高效液相色譜是用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，經(jīng)進(jìn)樣閥注入供試品，由流動 相帶入柱內(nèi)，在柱內(nèi)各成分被分離后，依次進(jìn)入檢測器，色譜信號由積分儀記錄， 得到的信號-時間曲線。2. 系統(tǒng)適用性按各品種項下要求對儀器進(jìn)行適用性試驗，包括以下要求：色譜柱的理論板

2、數(shù)（N）:理論板數(shù)應(yīng)高于各品種項下規(guī)定的最小理論板數(shù)， 若理論板數(shù)低于各品種項下規(guī)定的最小理論板數(shù)，應(yīng)改變色譜柱的某些條件（如 柱長、載體性能、色譜柱充填的優(yōu)劣等）使理論板數(shù)達(dá)到要求。分離度和拖尾因子：除另有規(guī)定外,分離度應(yīng)大于1.5T應(yīng)在0.951.05之 間。3. 儀器組成本系統(tǒng)由LC-15ATvp溶劑輸送泵、手動進(jìn)樣閥7725i、SPD-15Avp紫外檢測器、Lcsolution工作站、電腦和柱溫箱等組成。4. 準(zhǔn)備4.1根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的色譜柱（箭頭依次朝上）。4.2檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。4.3準(zhǔn)備所需的流動相，用合適的0.45卩m濾膜過濾，用

3、吸氣減壓裝置脫氣。4.4按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程配制樣品和對照溶液，用合適的0.45 m濾膜過濾。5. 開機(jī)接通電源，依次開啟泵，檢測器（在進(jìn)樣前 30min打開）、Lcsolution工作 站。5.1 LC-15C泵操作5.1.1逆時針轉(zhuǎn)動泵的排液閥180°,打開排液閥；5.1.2按泵的purge鍵，pump指示燈亮，泵大約以 9.9ml/min（可設(shè)定）的 流速沖洗，5min （可設(shè)定）后自動停止；5.1.3將排液閥順時針旋轉(zhuǎn)到底，關(guān)閉排液閥。如管路中仍有氣泡，則重復(fù) 以上操作直至氣泡排盡。5.2 SPD-15A檢測器參數(shù)設(shè)定5.2.1檢測器顯示屏顯示入（NM abs （AV） range

4、 （AUFS） 1amp2540.0000.001D“入（NM”項為波長，“abs （AV） ”項為吸光度，“range （AUFS） ”項 表示量程，“ 1amp項表示氘燈。5.2.2泵顯示屏顯示如下：FLOW/PRESS PRESSURE P.MAX P.MIN0.000 0 0 0“FLOW/PRESS項為流速，“PRESSURE項表示壓力，“P.MAX項為最大 壓力，“ P.MIN ”項表示最小保護(hù)壓力，。5.2.3按pump啟動泵，待壓力穩(wěn)定后，可開始分析測定工作。5.2.4觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動應(yīng)不超過1MPa如超過則可初 步判斷為柱前管路仍有氣泡，按 5.1.1操作。

5、5.2.5 觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移 <0.01mV/min,噪聲為<0.001mV 時，可認(rèn)為系統(tǒng)已達(dá)到平衡狀態(tài)，可以進(jìn)樣。5.3啟動【LC實時分析】5.3.1打開電腦主機(jī)電源，確保分析儀器的所有單元（泵、柱溫箱和檢測器） 都已連至系統(tǒng)控制器。5.3.2打開每一個單元的電源，并確保所有單元都沒有顯示任何錯誤信息。雙擊Lcsolution15C 色譜在線色譜工作站，啟動 Lcsolution 色譜在線色譜工作 站單擊儀器的分析，顯示【LC實時分析】窗口。5.3.3檢查分析儀器，單擊助手欄中的（系統(tǒng)檢查）圖標(biāo)，設(shè)置要檢查的項、【LC設(shè)置輸出格式，設(shè)置每一項并單擊運行，請確保沒

6、有任何儀器故障，并在 實時分析】窗口的狀態(tài)欄顯示區(qū)域中顯示為就緒5.4建立新方法文件541點擊LC實時分析左上角助手欄文件項，選擇文件項里的新建方法文 件，在【儀器參數(shù)視圖】中設(shè)置在分析中要使用的儀器參數(shù)，【儀器參數(shù)視圖】 分為正常和高級.單擊正常顯示一個標(biāo)簽,可以在其中輸入分析條件,比如 測量時間，泵流速,檢測器波長，洗脫模式等，確保為每一個檢測器設(shè)置LC停止 時間和結(jié)束時間并應(yīng)用到所有采集時間.5.4.2泵的洗脫分為等濃度和二元高壓梯度洗脫，如方法使用到二元高壓梯 度洗脫，則點擊LC時間程序在LC時間程序里設(shè)定對應(yīng)的梯度和時間.5.4.3在【儀器參數(shù)視圖】中設(shè)置好所有儀器參數(shù)后，單擊下載將

7、設(shè)置傳 輸?shù)絻x器,并且儀器將按照新的參數(shù)開始運行；點擊LC實時分析左上角助手欄文 件項，選擇文件項的另存方法，將方法保存在易于找到的文件夾中。5.5執(zhí)行單次分析5.5.1進(jìn)入【LC實時分析】窗口后，確保顯示就緒，且色譜圖視圖中的 基線穩(wěn)定后，單擊LC實時分析窗口助手欄上的單次運行圖標(biāo)，出現(xiàn)【單次運 行】屏幕，設(shè)置指定用于分析的方法文件，輸入創(chuàng)建數(shù)據(jù)文件的名稱，輸入完畢 后點擊確定。然后將進(jìn)樣閥手柄置“LOAD處，進(jìn)樣，將進(jìn)樣閥手柄轉(zhuǎn)到“INJECT' 位置，工作站自動采集數(shù)據(jù)，狀態(tài)欄顯示正在運行。5.6數(shù)據(jù)分析5.6.1雙擊Lcsolution在線色譜工作站，啟動再解析，在助手欄中選擇

8、LC數(shù)據(jù)分析,在助手欄中選擇相對應(yīng)的文件序號進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析。6. 關(guān)機(jī)選關(guān)閉泵然后選主窗口右上角關(guān)閉框退出色譜工作站。 用鼠標(biāo)單擊開始選關(guān) 閉系統(tǒng)，選擇關(guān)閉計算機(jī)，單擊是。關(guān)閉檢測器電源，用純甲醇充分清洗泵和色 譜柱，待壓力降到正常水平關(guān)閉泵電源。7. 維護(hù)保養(yǎng)7.1紫外檢測器應(yīng)在進(jìn)樣前30min打開，樣品分析完畢立即關(guān)閉。7.2檢測時方法用到高度梯度洗脫時，要先單次運行一次。待基線平穩(wěn)后方 可進(jìn)樣，流動相用到緩沖鹽時，要先用10%勺甲醇水沖洗1h，才可換上緩沖鹽。7.3樣品分析完畢，系統(tǒng)需用0.45 yn濾膜過濾的純甲醇沖洗1-1.5h，并用注射器吸取純甲醇沖洗進(jìn)樣器，流動相中含有鹽，要用

9、10%?醇水過渡沖洗1h,再用純甲醇沖洗系統(tǒng)。7.4若發(fā)現(xiàn)空載系統(tǒng)壓力升高，可先下列步驟進(jìn)行排除：741將保護(hù)柱拆下，觀察柱壓是否正常，如果保護(hù)柱過濾芯片堵塞則予以 更換。7.4.2如更換保護(hù)柱過濾芯后仍不正常，再將色譜柱拆下，觀察不連接色譜 柱時壓力。如仍然壓力很高，說明柱子沒有問題。7.4.3然后依次從色譜柱往進(jìn)流動相的方向查找問題，拆掉單向閥上面的螺 絲，觀察壓力變化，如果仍然有壓力，則說明單向閥可能有問題。將單向閥拆下， 觀察壓力變化，如壓力正常，則將單向閥用甲醇超聲清洗 30mi n,然后安裝再觀 察壓力變化。7.4.4如問題仍然存在，可以考慮用 5%稀硝酸水和純異丙醇清洗系統(tǒng)或者 更換單向閥，中間一定要用超純水過渡，再用純甲醇清洗，接上色譜柱用甲醇再 次清洗系統(tǒng)。注：（5%稀硝酸水溶液超聲時不要超過 5mi n,因硝酸有腐蝕金屬作 用