海水―揮發(fā)性酚的測定―4-氨基安替比林分光光度法

1、FHZDZHS0039海水揮發(fā)性酚的測定4氨基安替比林分光光度法F-HZ-DZ-HS-0039海水一揮發(fā)性酚的測定一4-氨基安替比林分光光度法1范圍本方法適用于海水及工業(yè)排污口水體中低于10mg/L酚含量的測定。酚含量超過此值，可用溴化滴定法。檢出限:1.1卩g/L2原理被蒸餾出的揮發(fā)酚類在PH10.0 ±.2和以鐵氰化鉀為氧化劑的溶液中，與4-氨基 安替比林 反應(yīng)形成有色的安替比林染料/此染料的最大吸收波長在510nm處,顏色在30min內(nèi)穩(wěn)定，用三氯甲烷萃取，可 穩(wěn)定4h并能提高靈敏度，但最大吸收波長移至460nm /本方法不能區(qū)別不同類型的酚，而在每份試樣中各種酚類化合物的百分

2、組成是 不確定的/因此，不能提供含有混合酚的通用標(biāo)準(zhǔn)參考物，本方法選用苯酚作為參比 標(biāo)準(zhǔn)。來自水體的干擾可能有分解酚的細(xì)菌、氧化及還原物質(zhì)和樣品的強(qiáng)堿性條件/ 在分析前除去干擾化合物的處理步驟中可能有一部分揮發(fā)酚類被除去或損失。因 此，對一些高污染海水，為消除干擾和定量回收揮發(fā)酚類，需要較嚴(yán)格的操作技術(shù)。干擾物質(zhì)的消除：氧化劑:水樣中的氧化劑能將酚類氧化而使結(jié)果偏低。采樣后取一滴酸化了的水樣于淀粉-碘化鉀試紙上,若試紙變藍(lán)則說明水中有氧化劑。采樣后應(yīng)立即加入硫酸亞鐵溶液或抗壞血酸 溶液以除去所有的氧化性物質(zhì)。過剩的硫酸亞鐵或抗壞血 酸在蒸餾步驟中被除去。油類和焦油：如水樣中含有石油制品等低沸點(diǎn)

3、污染物 ，可使蒸餾液渾濁，某些酚 類化合物 還可能溶于這些物質(zhì)中。采樣后用分液漏斗分離出浮油 ，在沒有硫酸銅存 在的條件下，先用粒 狀氫氧化鈉將pH調(diào)節(jié)至1212.5使酚成為酚鈉，以避免萃取酚 類化合物。盡快用四氯化碳從水相中提出雜質(zhì)（每升廢水用40mL四氯化碳萃取兩 次。并將pH調(diào)到4.0（見6.1。用三氯甲烷萃取時，須用無酚水作一試劑空白，或先用1g/L氫氧化鈉溶液洗滌三 氯甲烷，以除去可能存在的酚。二氯甲烷可代替三氯甲烷，尤其在用氫氧化鈉提純?nèi)?氯甲烷溶液形成乳 濁液時。硫的化合物酸化時釋放出硫化氫能干擾酚的測定，用磷酸將水樣酸化至pH4.0, 短時間攪拌曝氣即可除去硫化氫及二氧化硫的干

4、擾。然后加入足夠的硫酸銅溶液 , 使樣品呈淡藍(lán)色或不再有硫化銅沉淀產(chǎn)生。然后將 pH調(diào)到4.0。銅（n離子抑制 了生物降解，酸化保證了銅（n離子的存在并消除樣品為強(qiáng)堿性時的化學(xué)變化。3試劑除非另作說明，所用試劑均為分析純，水為不含酚和氯的蒸餾水。3.1無酚水置普通蒸餾水于全玻璃蒸餾器中，加氫氧化鈉至強(qiáng)堿性，滴入高錳酸鉀溶液至深 紫紅色,放入少許無釉瓷片（浮石或玻璃毛細(xì)管亦可，加熱蒸餾。棄去初餾份。收集 無酚水于硬質(zhì)玻璃 瓶中,或于每升蒸餾水中加入0.2g經(jīng)280E活化4h的活性炭粉 末，充分振搖后用0.45卩n濾膜過濾。3.2三氯甲烷（CHCI3或二氯甲烷（CH2CI 2。3.3精制苯酚將苯酚

5、（C6H 50H置于50C70C熱水浴中溶化，小心地移入100mL蒸餾水中, 用包有鋁箔的軟木塞塞緊，其中插有一支250C水銀溫度計(jì),蒸餾瓶的支管與空氣冷 凝管連接，用一干燥的錐形燒瓶接受器。如圖1所示。電爐加熱蒸餾，棄去帶色的初餾出液，收集182C 184C餾份（無色密封避光保 存。3.4 鹽酸（p 1.19 g/mJL3.5磷酸溶液，1+9。3.6硫酸銅溶液100 g/L:稱取10g硫酸銅（CuS04 5H 20溶解于水中并稀釋至100mL l3.7 溴酸鹽-溴化物溶液，C（1/6KBrO3=0.100mol/L:稱取2.7848g無水溴酸鉀（KBrO3溶于水中，加10g溴化鉀（KBr溶解

6、后稀釋至1000mL l3.8緩沖溶液，pH 9.8:稱取20g氯化銨（NH4Cl溶于100mL濃氨水（NH 3 H 2O , p 0.90g/m中。此溶液 pH 為 9.8。3.9 4氮基安替比林溶液，20g/L:稱取2g 4-氨基安替比林C6H 5NN （CH 3 C （CH 3:C （NH 2 C :O溶于水中，并稀釋至100mL ,貯于棕色瓶中，置冰箱內(nèi)。有效期一 周。3.10鐵氰化鉀溶液，80g/L:稱取8g鐵氰化鉀K3 Fe（CN 6溶于水中，并稀釋至 100mL。貯于棕色瓶中。置冰箱內(nèi)?？煞€(wěn)定一周。顏色變深時，應(yīng)重新配制。3.11硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定液，C（Na2S 2O 3=0.

7、0250mol/L稱取6.21g硫代硫酸鈉（Na2S 20 35H2O用剛煮沸冷卻的水溶解,加入 約0.2g碳酸鈉（Na2C0 3，待全部溶解后，移入1000mL容量瓶中 搖勻。移入棕色試 劑瓶中。置于陰涼處。其 準(zhǔn)確濃度用重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定。重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶，C（61K 2Cr 20 7=0.0250mol/L:稱取1.2258g預(yù)先在110C烘2h的光譜 純重鉻酸鉀 （K2Cr 2O 7，用水溶解，移入1000mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。硫代硫 酸鈉溶液的標(biāo)定：取20.00mL重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液C（61K 2Cr 20 7 =0.0250mol/L三份,分別置于三個250mL具塞三角

8、瓶中，加50mL 硫酸溶液C（21H 2S0 4 =3mol/L, 1g碘化鉀（KI ,于暗處放置5min。用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 滴定至淺黃色，加1mL淀粉溶液（10g/L繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛消失（終點(diǎn)顯示三價鉻離子 的綠色。記錄消耗的硫代硫酸鈉溶液的毫升數(shù)。同時用水作試劑空白用硫代硫酸鈉滴定。按公式（1計(jì)算硫代硫酸鈉溶液的濃度：C（Na2S 20 3=VV C 1 x （1式（1中:C（Na2S 20 3硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L;C 重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L;V 1 重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積,mL ;V 滴定消化硫代硫酸鈉溶液的體積（減空白，mL3.12酚標(biāo)準(zhǔn)溶液酚標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液

9、，1.00g/L:稱取I.OOOOg精制苯酚溶于水中，移入1000mL 容量瓶中,用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液1.00mL含1.00mg酚。通常直接稱取精制的苯酚即可配標(biāo)準(zhǔn)溶液，若為非精制苯酚可按下法標(biāo)定：移取10.00mL待標(biāo)定的酚貯備溶液于250mL碘量瓶中，加入50mL水，加10.0mL溴酸鹽-溴化鉀溶液C （6IKBrO 3 =0.100mol/L及5mL鹽酸（p 1.19g/mL立即蓋緊瓶塞，搖勻。避光 放置 5min后用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液C（Na2S 2O 3=0.0250mol/L滴定至呈淡黃色時，加入 1mL淀粉溶液（10g/L繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好消失為止，記下硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液

10、滴定 體積V 2。同時用 水作試劑空白滴定，消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積為 V 1。按公式（2計(jì)算酚標(biāo)淮貯備溶液的濃度：（10100068. 150250. 021 XXX -=V V f p（2式（2 中：p f酚溶液濃度，卩g/mL; V 1試劑空白消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的毫升數(shù), mL ;V2酚貯備溶液消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的毫升數(shù)，mL。酚標(biāo)準(zhǔn)溶液,10.0卩g/r移取 10.0mL （或相當(dāng)于10.0mg酚的體積酚標(biāo)準(zhǔn) 貯備溶液（1.00mg/mL于1000mL容量瓶中,用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液1.00mL 含10.0卩酚,當(dāng)天配制。酚標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，1.00卩g/r移取 10.0m

11、L酚標(biāo)準(zhǔn)溶液（10.0卩g/mLT 100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液1.00mL含1.00卩酚。現(xiàn)用現(xiàn)配。3.13甲基橙指示劑溶液,2g/L3.14淀粉溶液,10g/L:稱取1.0g可溶性淀粉，盛于200mL燒杯中，加少量水調(diào)成糊狀加入100mL沸水?dāng)嚢?，冷后加?.4g氯化鋅（ZnCI2或0.1g水楊酸（C7H 60 3 防腐。4儀器設(shè)備4.1分光光度計(jì)4.2蒸餾裝置:全玻璃，包括500mL玻璃蒸餾器和蛇形冷凝管。如圖1所示圖1苯酚蒸餾裝置示意圖1 10mm或25mm微量蒸餾燒瓶；2空氣冷凝管；3 250C水銀溫度計(jì)；4 電爐;5鐵架后;6軟木塞;7三角燒瓶（收集苯酚5試樣制

12、備5.1海水樣品用玻璃或金屬采樣器采集，水樣現(xiàn)場預(yù)處理方法：加H 3P0 4至pH <4,每升水樣 加入2g硫酸銅（CuSO 4 5H 20 ,貯存于硬質(zhì)玻璃瓶中,在4C保存。 保存時間 24h ,詳見 GB17378.3 1998。5.2試樣量測定水樣用量200mL。6操作步驟6.1水樣前處理量取200mL海水樣（若酚量高可少量取水樣，記下體積V ,加純水至200mL , 置于500mL全玻璃蒸餾器中，用磷酸溶液（1+9調(diào)節(jié)pH到4.0左右以甲基橙作指示 劑（2g/L,使水樣由 桔色變?yōu)槌燃t色。加入5mL硫酸銅溶液（100g/L ,放入少許無釉 瓷片（浮石或玻璃毛細(xì)管，加熱。蒸出150

13、mL左右時，停止蒸餾,在沸騰停止后,向 蒸餾瓶內(nèi)加入約50mL水，繼續(xù)蒸餾,直到收集餾出液（D大于或等于200mL為止。 若樣品已按5.1條所述的方法加磷酸和硫酸銅 保存,則可直接蒸餾（若水樣經(jīng)稀釋則 須補(bǔ)加磷酸及硫酸銅溶液。用磷酸將樣品酸化到pH4.0以防止酚類化合物分解.加 入硫酸銅抑制生物對酚的氧化作用。注1：將水樣蒸餾，餾出液清亮、無色，從而消除渾濁和顏色的干擾，鐵（川能與鐵 氰酸根生成棕色產(chǎn)物而干擾測定，蒸餾將排除這一干擾。注2:測定酚的水樣必須用全玻璃蒸餾器蒸餾，如用橡皮塞，膠皮管等聯(lián)接蒸餾燒 瓶及冷凝管，都能使結(jié) 果偏高和出現(xiàn)假陽性而產(chǎn)生誤差。注3:停止蒸餾時，須防電爐余熱引起的

14、爆沸，以免將瓶塞沖起砸碎或沾污冷凝 管。6.2工作曲線的繪制移取 0、0.50、1.00、2.00、4.00、7.00、10.00、15.00mL 酚標(biāo)準(zhǔn)使用溶液 （1.00卩g/mL分別置于預(yù)先盛有100mL水的250mL分液漏斗中,最后加水至200mL 系列各點(diǎn)含酚濃度分別 為 0、2.50、5.00、10.0、20.0、35.0、50.0、75.0 卩 g/L向各分液漏斗內(nèi)加入I.OOmL緩沖溶液（pH9.8，混勻。再各加入1.0mL4-氨基安 替比林溶 液（20g/L ,混勻。力卩1.0mL鐵氰化鉀溶液，混勻。放置10min。力卩10.0mL 三氯甲烷（CHCI 3 ,振搖2min，靜

15、置分層。有機(jī)層于波長 460nm處,用三氯甲烷作參 比，測定吸光度（A i和標(biāo)準(zhǔn) 空白（A o。以吸光度（A i -A o為縱坐標(biāo)，酚濃度（卩g/為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。注1:pH在8.010.0范圍內(nèi)顯示的顏色都可以，但為了防止芳香胺（苯胺、甲苯 胺、乙酰苯胺 的干擾,以pH9.810.2最合適，因?yàn)榇朔秶鷥?nèi)20mg/L苯胺所產(chǎn)生的顏 色僅相當(dāng)于0.1mg/L酚的顏色。注2:NH 4OH-NH 4Cl體系的緩沖溶液比較穩(wěn)定，由于增大了溶液NH 3的濃度， 可以抑制4-氨基安替比林被 氧化為安替比林紅的反應(yīng)。注3:游離氯能氧化4-氨基安替比林，還能與酚起取代反應(yīng)生成氯酚。注4:主試劑在空氣中易變

16、質(zhì)而使底色加深，此外,4-氨基安替比林的純度越高，靈 敏度越高，如配制的4-氨基安替比林溶液顏色較深時，可用活性炭處理脫色。注5:過硫酸銨（NH 4 2S 20 8可代替鐵氰化鉀K3F e （CN6。注6:各種試劑加入的順序很重要，不能隨意更改。注7:吸收皿在連續(xù)使用過程中，宜用氯仿蕩洗，揮發(fā)至干。6.3水樣測定將餾出液（D轉(zhuǎn)入250mL分液漏斗中，按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制操作步驟（6.2測定試樣 吸光度A w和試樣空白吸光度A b。7結(jié)果計(jì)算由A w -A b .查標(biāo)準(zhǔn)曲線或用線性回歸方程計(jì)算水樣中揮發(fā)酚的濃度（卩g/L若是經(jīng)稀釋后再蒸餾的水樣則按公式（3計(jì)算水樣中揮發(fā)酚的濃度V V Cif = P式33 中：p f海水中揮發(fā)性酚的濃度，卩g/L；C 查標(biāo)準(zhǔn)曲線得揮發(fā)性酚的濃度，卩g/L;V 1 餾出液（D體積,mL ;V