UV-2600型紫外分光光度計(jì)操作指導(dǎo)書

1、UV-2600型紫外分光光度計(jì)操作指導(dǎo)書1概況1.1儀器概況：UV-2600型紫外分光光度計(jì)是由日本島津(Shimadzu)生產(chǎn)制造，與功能強(qiáng) 大的操作軟件UVProbe結(jié)合，操作簡單方便，且符合SH/T0181方法的測量精度要 求。1 2主要技術(shù)參數(shù)波長范圍185nm900nm（使用積分球附件ISR- 2600Plus時220nm1400nm）分辨率0. lnm波長準(zhǔn)確性0. 3nm譜帶范圍0. 1、0. 2 0. 5、1、2、5nm測光方式雙光束方式朵散光0. 005%以下檢測器光電倍增管R-928測光范圍-55Abs比色池lcm光源50W鹵素?zé)?、宛燈單色器切尼?特納單色器主電壓AC10

2、0V240V主頻率50/60HZ1 3使用條件操作溫度：1535C操作濕度：30%805%2儀器結(jié)構(gòu)儀器由UV-2600型紫外分光光度計(jì)和計(jì)算機(jī)組成。3操作步驟3.1開機(jī)在使用前先確認(rèn)儀器和計(jì)算機(jī)的工作電源，檢查儀器樣品室應(yīng)無遮擋光路的 物品。確認(rèn)后先開啟計(jì)算機(jī)，然后開啟儀器電源。待分光光度計(jì)外側(cè)的指示燈顯示 綠色時，啟動電腦桌面上的UVPR0BE程序。首先從下拉式菜單的儀器項(xiàng)上追加需要的儀器，操作完畢如下圖所示，然 后點(diǎn)擊上圖的連接鍵，這樣儀器與計(jì)算機(jī)連接（當(dāng)然，中間的通訊電纜的連接、通訊口的指定等都是必須的，此處不再贅述）并開始下示的初始化面。X-24O1 - bv. (07LSI初殆化C

3、ROM松測RAM檢測建光器電動機(jī)初始化獲縫電動機(jī)初始化燈電動機(jī)初始化廣掃推電動機(jī)初妬化廠瀏試通過失股癡=T-：-i -i- r：HAIn $g g we grwm g mra_1BH1 2J I曰 捌皿心U刻!11?區(qū)麗 里1曲 別I 1A17_也作欣 * iSTil WI最大位蘭搜第光頂點(diǎn)（接素 廣WI燈能空検瀏D2艮大位置搜看D2燈能:ft 檢測 廠光原點(diǎn)2搜索 廣待渤X-24O1 - bv. (07srrM I u I r I H t I M 9 nWKAI1(14)初始化大約需要5分鐘左右， 進(jìn)行一系列的檢查和初置， 如一切順利通過就 可以開始測定。3.2測定首先選擇測定的方式，在主菜

4、單上能發(fā)現(xiàn)右圖所示的各鍵，自左至右分別為：1報(bào)告生成器：用于制作各種格式的報(bào)告。2動力學(xué)測定方式：一般測定吸收值隨時間的變化，通常用于酶反應(yīng)隨時間 的變化。3光度測定（定量）方式：可進(jìn)行多波長、單波長、峰高或峰面積定量。校 準(zhǔn)曲線可使用多點(diǎn)、單點(diǎn)、K因子等方法。由于具有自定義方程的功能，DA/蛋口 質(zhì)測定等以前需要特殊選購的軟件才能進(jìn)行的丄作，使用UVPROBE可自編程序進(jìn)行 測定。4光譜測定方式：可進(jìn)行紫外可見區(qū)的光譜測定。3. 3光譜測定方式3. 3. 1參數(shù)的設(shè)定點(diǎn)擊菜單欄上的M鍵，即可岀現(xiàn)如下圖所示的選擇測定條件的畫面:在此對話框中可選擇波長測定的范圍、掃描的速度、釆樣間隔等條件。點(diǎn)擊

5、圖中試樣準(zhǔn)備標(biāo)簽，可輸入重量、體積、稀釋因子、光程長等信 息。點(diǎn)擊圖中儀器參數(shù)標(biāo)簽，可選擇測定種類（吸收值、透射率、能量、反 射率）以及通帶（狹逢）等條件。ffitilu板點(diǎn)擊主菜單上的反 q 闔鍵，可分別開關(guān)圖象面板（圖中的左鍵）、數(shù)據(jù)處理面板（中）以及方法面板（右 鍵）。 3. 3.2光譜測定首先點(diǎn)擊上圖的進(jìn)行基線校正，然后點(diǎn)擊波長設(shè)置到500nm,再點(diǎn)擊自動調(diào)零。為何要如此 做？原因非常簡單，山于一般的分光光度計(jì)的能量在500nm左右最強(qiáng)，在此自動調(diào) 零可得到最正確的基線。通常上述操作在開機(jī)后進(jìn)行一次就足夠了。此后，設(shè)置樣 品點(diǎn)擊鍵即可開始測定。3.4光度測定方式3.4. 1參數(shù)的設(shè)定點(diǎn)

6、擊菜單欄中的鍵，出現(xiàn)下圖：測定的方式測定的方式此處顯示的波長類型是“點(diǎn)”表示測定高度，如果選擇的是范圉，則需輸入 起始和結(jié)束波長，并可選擇最大、最小、峰、谷或面積等作為定量的依據(jù)。無論如何選擇，波長都是必須的，并要加入以后才有效。在某單欄上有右列各鍵，點(diǎn)擊以后分別出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)表（最無）、樣品爰（左2）、工作曲線圖（右2）和樣品圖（最右）。工作曲線標(biāo)準(zhǔn)表選擇測定波長的選擇和登錄波長樣品圖樣品表3.4.2定量測定首先如前所述，選擇了點(diǎn)及波長，然后在方法中選擇校準(zhǔn)，在此決定用工作 曲線法定量，并選擇多點(diǎn)、單點(diǎn)或K因子法等。進(jìn)行定量測定也需要基線校正和自動調(diào)零，方法如前面所述。此后，樣品室內(nèi)逐個放入標(biāo)準(zhǔn)，

7、點(diǎn)擊上圖下方的讀數(shù)鍵即可。注意，無論是 測定標(biāo)準(zhǔn)或未知樣品，必須輸入名稱才有效。標(biāo)準(zhǔn)測定完畢，工作曲線自動顯示。 接下去就可測定未知樣品的濃度了。有時不測定濃度，只測定某些波長的讀數(shù)，則 在校準(zhǔn)方法中選擇“原始數(shù)據(jù)”，在登錄時選擇若干需要的波長，即可測定各波長 的讀數(shù)。使用SH/T0181方法標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行光譜測定時，點(diǎn)擊設(shè)置波長到287. 5nm,再放 入兩只均裝有光譜純異辛烷的比色皿，點(diǎn)擊自動調(diào)零，最后，將外面一只比色皿 中裝入需要測定的樣品，點(diǎn)擊鍵讀數(shù)，即可測得在該波長處的樣品的吸光度值。下圖的劃圈部分:在丄作曲線圖象上點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵，選擇屬性，可從該圖象上得到許多有用的信息, 見下圖：* I

8、HMM I tte.51 KultUJU 0 IX：f尬凸于I 9九I只需在這些顯示的項(xiàng)LI中做標(biāo)記，相應(yīng)的信息即出現(xiàn)在工作曲線圖象的左下方。見X33101* I：4：:2 “ ar，所謂K因子法實(shí)際上可稱為已知工作曲線法（而且不局限于直線），即工作 曲線回歸方程的系數(shù)和次數(shù)已知，故而只要輸入這些系數(shù)以及工作曲線的次數(shù)。這 一方法對工作曲線較為穩(wěn)定的日常分析非常有效。設(shè)置方法見下圖：3. 5動力學(xué)分析在菜單欄中點(diǎn)擊方法鍵,得到如下圖象：此處的計(jì)時方式選擇的是“自動”，時間總量中需手動設(shè)置測定的時間。由 于是自動計(jì)時方式，所以采樣步長（圖中為時間周期）和讀數(shù)次數(shù)將根據(jù)時間總量 自動設(shè)置。此外可設(shè)

9、置波長以及活度訃算的開始和結(jié)束時間。設(shè)置大短的活度范圍 會出現(xiàn)錯誤信息。相反，如果計(jì)時方式選擇的是手動的話，則可輸入時間周期和讀 取次數(shù)，而時間總量（測定時間）會根據(jù)輸入的時間周期和讀取次數(shù)自動計(jì)算得 到?；疃确队糜糜诿阜磻?yīng)隨時間的變化，如果單純進(jìn)行時間掃描的話，則可不考慮 活度范圉。測定的波長欄內(nèi)可選擇單波長或雙波長（波長1-波長2或波長1/波長2）兩 種方法。選擇后輸入相應(yīng)的波長。主菜單中有如右I麼區(qū)應(yīng)風(fēng)各鍵，自主到右分別是時間掃描圖象、數(shù)據(jù)處理面板、測定參數(shù)面板和酶活度圖 象。點(diǎn)擊各鍵屏幕岀現(xiàn)相應(yīng)的板塊。下圖中表示已經(jīng)測定得到數(shù)據(jù)的顯示情況。4定期維護(hù)檢查表檢查維護(hù)項(xiàng)目每天1年2年3年檢

10、查樣品室O檢查外觀O確認(rèn)光源點(diǎn)燈時間O更換W1（鹵素）燈O更換D2（M）燈O性能確認(rèn)OOO5常見故障及排除5.1初始化室的異常狀況（以下編號見前文初始化窗口中內(nèi)容）編號檢查位置處理措施9關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品的電源開關(guān)后再次打開（ON）,進(jìn)新儀器初始化。、（12）樣品室池架上是否有遮擋光線的物品？暫時關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品的電源開關(guān)。取出遮擋光線的物品后再次打開（0N）電源。觀察光源室，W1是否漏光？如果沒有漏光將W1熄滅。暫時關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品的電源開關(guān)后再次打開（ON）。如果光源不亮，請更換W1燈。光源的使用時間是否超過使用壽命？在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”，顯 示“配置

11、”窗口后單擊“點(diǎn)燈時間”選項(xiàng)卡。如果各光源燈的點(diǎn)燈時間超過“燈壽命”，請更換光 源。(11). (13)樣品室池架上是否有遮擋光線的物品？暫時關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品電源開關(guān)。取出遮擋光線的物品后再次打開（ON）電源，對儀器 進(jìn)行初始化。樣品室蓋是否敞開？暫時關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品電源開關(guān)。關(guān)閉樣品室蓋后再次打開（ON）電源開關(guān)，對儀器進(jìn) 行初始化。光源的使用時間是否超過使用壽命？在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”，顯 示“配置”窗口后單擊“點(diǎn)燈時間”選項(xiàng)卡。如果各光源燈的點(diǎn)燈時間超過“燈壽命”，請更換光 源。5.2故障癥狀與處理方法故障（癥狀） 主要原因處理方法打開電源開關(guān)后不通電。

12、AC電源線插頭是否插好？正確連接AC電源線插頭。AC電源線是否被壓，或 電源線彎 曲？如果AC電源線損壞，更換相同型號的電源線。供電電源是 否符合儀器 的電源規(guī) 格？使用與儀器的電源規(guī)格相符的電源。保險(xiǎn)絲是否燒斷？需要確認(rèn)和更好保險(xiǎn)絲時請與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián) 系。無法與UVProbe通訊。是否確保正 確連接USB纜線？請確切鏈接到PC和儀器上。是否正確設(shè)在PC顯示器右下方確認(rèn)本產(chǎn)品COM端口號后，電極置PC的COM端口？UVProbe“儀器”菜單的“配置”，設(shè)置連接端口。是否正確安 裝USB驅(qū)動 程序？按照UVProbe軟件的安裝窗口安裝USB驅(qū)動程序。測光值異常。光源是否熄滅？在UVPr

13、obe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”，顯示 “配置”窗口然后單擊“維護(hù)”選項(xiàng)卡?！肮庠礌顩r” 的“Wl”、“D2”復(fù)選框未被激活時，A處理： 光源熄燈時， 激活“Wl”、“D2”的復(fù)選框。 在UVProbe中單擊“斷開”， 關(guān)閉（OFF）與UVProbe的通訊； 關(guān)閉（OFF）儀器電源。稍后再打開電源；單 擊“連接”，進(jìn)行儀器初始化。如果光源燈未亮，顯示錯誤時，再進(jìn)行“B處理”。光 源燈點(diǎn)亮，隨后又熄滅時進(jìn)行“C處理”。B處理：光源未亮。請更換新燈。C處理：儀器檢出異常時強(qiáng)行將燈熄滅；檢測風(fēng)扇是否 停止或基板上的溫度感應(yīng)器是否過熱； 關(guān)閉電源開關(guān)后 與所在區(qū)域內(nèi)的島津分公司聯(lián)系。波長等測定

14、參數(shù)設(shè)置是 否正確？請重新檢查輸入的參數(shù)。測光值異常。狹縫寬度是 否合適？改變狹縫寬度，重新進(jìn)行測定。光源的使用 時間收費(fèi)超 過使用壽 命？如果光源的使用時間超過使用壽命，請更換光源。測定的樣品請檢查所取樣品是否正確。是否正確？使用的吸收 池是否合 適？請使用符合測定U的的吸收池。 使用玻璃池時無法測定 紫外區(qū)，請使用石英池。儀器附近是 否使用手 機(jī)？手機(jī)種類的信號強(qiáng)度可能光度值有影響。樣品室安裝 的特殊附件 和連接器的 連接是否正 確？請檢查特殊附件是否正確安裝到樣品室， 或連接器是否 正確連接？在儀器前方 是否聽到發(fā) 動機(jī)的異常 聲響？扇形發(fā)動機(jī)可能運(yùn)行異常。請與所在區(qū)域的島津分公司 聯(lián)系

15、。異常警報(bào)發(fā)出蜂鳴聲,LED顯示紅色。排氣風(fēng)扇的排氣口是否堵塞？關(guān)閉電源開關(guān)。檢查排氣風(fēng)扇出口處10cm以內(nèi)是否存 在阻礙物，如果有請清除。111于可能出現(xiàn)溫度異常，請 稍后再重新打開電源開關(guān)。如果仍未解決，請與所在區(qū) 域的島津分公司聯(lián)系。排氣風(fēng)扇是 否停止？確認(rèn)空氣從左后方的排氣口排出。如果風(fēng)扇停止運(yùn)行，關(guān)閉電源開關(guān)后與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。光源是否熄滅？如果光源的使用時間超過使用壽命，請更換光源。兩側(cè)光源都未亮。排氣風(fēng)扇是 否停止？確認(rèn)空氣從左后方的排氣口排出。如果風(fēng)扇停止運(yùn)行，關(guān)閉電源開關(guān)后與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。LVProbe啟動慢。儀器記錄文 件的容量是 否增加？III于加載存儲的儀器記錄需要時間，軟件的啟動可能會