嗎啡對(duì)垂體后葉素致兔心肌損傷的影響

1、嗎啡對(duì)垂體后葉素致兔心肌損傷的影響 【摘要】 目的 觀察嗎啡預(yù)處理垂體后葉素引起的兔心肌損傷后血壓、心電圖和血清心肌肌鈣蛋白I(cTn-I)的含量變化，并觀察心肌病理切片，探討嗎啡對(duì)受損心肌預(yù)處理的影響。方法 將成年中國(guó)白兔24只隨機(jī)分為三組，對(duì)照假手術(shù)組(A組)，手術(shù)模型完成穩(wěn)定45min后予0.9%生理鹽水0.20.3mL/kg，30s靜脈注射完畢；藥物損傷心肌組(B組)，45min后予垂體后葉素(2.5U/kg)0.20.3mL/kg，30s注射完畢；嗎啡預(yù)處理組(C組)，予嗎啡0.65mg/kg靜脈推注，45min后予垂體后葉素(2.5U/kg)0.20.3mL/kg，30s注射完畢，

2、記錄給藥前后平均動(dòng)脈壓(MAP)、中心靜脈壓(CVP)、HR及T波變化；測(cè)定血清cTn-I含量；觀察給藥48h后白兔心肌組織的變化。結(jié)果 與A組比較，B組MAP、CVP、T波明顯升高(P0.01)，HR明顯下降(P0.01)；與B組相比，C組MAP、CVP、T波明顯下降(P0.01)，T波B、C組明顯高于A組(P0.01)。血清cTn-I水平A、C組低于B組(P0.01)。結(jié)論 嗎啡預(yù)處理對(duì)垂體后葉素所致的兔心肌損傷有保護(hù)作用。 【關(guān)鍵詞】 心肌損傷；嗎啡；肌鈣蛋白I；雙抗夾心免疫吸附法；兔Abstract: Objective To observe the change of blood p

3、ressure,electrocardipgram and Troponin I after morphine pretreatment on acute myoardial infarction induced by pituitrin in rabbits , and to compare them with the change of pathostaining, and to explore the effect of morphine pretreatment on acute myocardial ischemic injury. Methods Twenty-four rabbi

4、ts were divided randomly into three groups: control group(Group A), pituitrin group (Group B) and morphine pretreatment group(Group C). The information included MAP、CVP、HR and T wave were observed and recorded at different time points. It was divided into two observing phrases of 24h,48h and determi

5、ned the contents of blood serum cTn-I and caridiac pathostain of 48h. Results (1) Changes in myocardiac mechanics:myocardiac mechanics had a dynamic change after injection of pituitrin 2.5U/kg weight. parameters between and within groups throughout the experimental period except ischemia group,which

6、 had a significantl reduction in HR and a significant increase in MAP, CVP and T wave. Comared with other groups. Group C compared with Group A , MAP and CVP at each time point there was no significant statistical difference, HR (1min) decreased (P0.05),T wave increased(P0.01). Compared B group with

7、 group A, MAP (1min) significantly increased (P0.01), CVP significantly increased from 15 sec to 5 min (P0.01), HR significantly lowered in 15sec to 10 min (P0.01),T wave significantly increased(P0.01). Compared Group B with C group,HR significantly decreased at the point of from 30sec to 2min (P0.0

8、1), MAP ,CVP and T wave was no significant statistical difference at differnet time points. (2) Blood serum cTn-I showed significant difference among three groups(P0.01).(3)Cardiac pathological change showe significant difference among three groups.Conclusion Morphine pretreatment can prevent lipid

9、peroxidation and protect myocardium.Key words: myoardial infarction；morphine；troponin I；enzyme linked immunosorbent assay；rabbit 急性心肌梗死(AMI)是危害人類健康的世界范圍性問題，其發(fā)病率和死亡率都極高。嗎啡作為中樞鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜藥，具有鎮(zhèn)痛、抑制交感神經(jīng)活性、減輕心臟前后負(fù)荷、降低心肌耗氧量的作用，是治療AMI的常用藥。近年來人們發(fā)現(xiàn)，嗎啡能模擬缺血預(yù)處理(ischemic preconditioning，IPC)減少心肌梗死面積，具有心肌保護(hù)作用。血清肌鈣蛋白I(

10、cTn-I)是目前公認(rèn)的敏感性較高、特異性最強(qiáng)的反映心肌損傷的指標(biāo)，血清cTn-I濃度的升高可以反映心肌損傷的嚴(yán)重程度，中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)于2002年明確提出cTn-I取代CK-MB成為檢測(cè)心肌損傷的金標(biāo)準(zhǔn)。本研究以兔垂體后葉素性心肌損傷為模型，觀察并探討嗎啡對(duì)受損心肌預(yù)處理的影響。1 材料和方法1.1 材料111 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 中國(guó)白兔，雌雄不限，體重(2.000.26)kg，由寧夏醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，健康狀況符合國(guó)家普通實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康標(biāo)準(zhǔn)。112 實(shí)驗(yàn)儀器 MP20心電監(jiān)測(cè)機(jī)(德國(guó)產(chǎn))；HX-300動(dòng)物呼吸機(jī)(XH-300成都泰盟科技有限公司產(chǎn))；輸液泵(PERFUSION COMPACT。

11、BBRAUN)；MME-192超低溫冰箱(SANYO Electrin biomedical CO，Ltd，ULTRT-low temperation freezer model)；KHB Labsyatems Wellsacanks 酶標(biāo)儀和洗板機(jī)。113 實(shí)驗(yàn)試劑和藥物 cTn-I試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)試定量，美國(guó)ADL公司)，購(gòu)自南京銅人生物工程研究所。垂體后葉素(6U/支，上海禾豐制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào) 5401005)；嗎啡(10mg/支，沈陽第一制藥廠生產(chǎn)，批號(hào) 050703)；維庫溴胺注射液(4mg/支，仙居制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào) 010404)12 方法121 動(dòng)物模型的制備

12、用2%的戊巴比托鈉(45mg/kg)腹腔注射麻醉白兔，將其固定于實(shí)驗(yàn)兔專用操作臺(tái)，將心電圖針狀電極插入兔4肢皮下，用心電圖機(jī)描記標(biāo)準(zhǔn)肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖；2%鹽酸利多卡因表面麻醉兔的鼻腔、會(huì)厭、聲門開口處，經(jīng)鼻或經(jīng)口插管(2.5#，1113cm)并固定；術(shù)野備皮消毒鋪單，手術(shù)暴露頸總動(dòng)脈和頸內(nèi)靜脈，用于監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈壓(MAP)、中心靜脈壓(CVP)以及給藥，待手術(shù)操作完成，給予維庫溴胺2mg/kg靜脈推注，0.9%生理鹽水10mL/(kgh)靜脈泵入，用動(dòng)物呼吸機(jī)控制呼吸(810mL/kg，4050次/分)，手術(shù)模型完成穩(wěn)定1520min后開始記時(shí)并進(jìn)入藥物實(shí)驗(yàn)。1.2.2 動(dòng)物分組 對(duì)照假手術(shù)組(

13、A組)，手術(shù)模型完成穩(wěn)定45min后予0.9%生理鹽水0.20.3mL/kg，30s靜脈注射完畢；藥物損傷心肌組(B組)，45min后予垂體后葉素(2.5U/kg)0.20.3mL/kg，30s注射完畢1；嗎啡預(yù)處理組(C組)，予嗎啡0.65mg/kg靜脈推注，45min后予垂體后葉素(2.5U/kg)0.20.3mL/kg，30s注射完畢。1.2.3 實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo) (1)分別檢測(cè)并記錄三組白兔給垂體后葉素即刻、15s，30s，1min、2min、3min、4min、5min、10min和20min的MAP、CVP、HR、T波。(2)分別采取白兔注射垂體后葉素前后24、48h時(shí)的全血3mL，3

14、000r/min離心制備血清，-80冰箱保存，用于血清cTn-I檢測(cè)。(3)病理檢查。48h后即刻麻醉兔，開胸摘取心臟，切取左心室，用10%甲醛固定后石蠟標(biāo)本切片，常規(guī)HE染色，進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。13 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 14.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示。組間比較采用方差分析，均數(shù)間兩兩比較采用q檢驗(yàn)，P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2 結(jié)果21 各組白兔給藥前后血壓、心率及T波變化 (表1、2、3)表1 各組白兔給藥前后血壓的變化(略)表2 各組白兔給藥前后心率的變化(略)表3 各組白兔給藥后T波的變化(略) 與A組比較，B組MAP、CVP、T波明顯升高(P0.01)，

15、HR明顯下降(P0.01)；與B組相比，C組MAP、CVP、T波明顯下降(P0.01)，T波B、C組明顯高于A組(P0.01)。22 各組白兔血清cTn-I的變化 (表4)表4 三組血清白兔cTn-I的變化(略)血清cTn-I水平A、C組低于B組(P0.01)。23 心肌組織病理學(xué)變化(圖13，見封3)3 討論 目前，建立心肌梗死動(dòng)物模型的藥物常用的是異丙腎上腺素和垂體后葉素，通過藥物作用造成冠狀動(dòng)脈痙攣，促使心肌發(fā)生梗死。垂體后葉素是下丘腦神經(jīng)元合成的神經(jīng)激素，垂體后葉素中含有血管升壓素，生理狀態(tài)下主要通過V2受體調(diào)節(jié)終尿量，大劑量時(shí)通過V1受體引起冠狀血管收縮，該模型死亡率相對(duì)較低，模型相

16、對(duì)穩(wěn)定。因此在本實(shí)驗(yàn)研究中用其誘發(fā)心肌缺血。 近年來，國(guó)內(nèi)外的研究人員從不同的角度研究嗎啡取得不少成果。王欣等2研究發(fā)現(xiàn)，嗎啡預(yù)處理可以減輕缺血心肌損傷及產(chǎn)生限制心肌梗死范圍的心肌保護(hù)作用；嗎啡是通過心臟局部的阿片受體介導(dǎo)，激活蛋白激酶C從而產(chǎn)生心肌保護(hù)作用。江曉菁等3研究發(fā)現(xiàn)，嗎啡可以減輕大鼠心肌的缺血/再灌注損傷；嗎啡是通過心肌局部的阿片受體及心肌細(xì)胞的KATP通道介導(dǎo)產(chǎn)生心肌保護(hù)作用。本研究結(jié)果顯示心肌梗死模型組白兔注射垂體后葉素后s即出現(xiàn)降低，并持續(xù)min多；在s即呈上升趨勢(shì)，min達(dá)高峰并保持min；在s即呈上升趨勢(shì)，min達(dá)高峰并保持約1min多，min后，上升，和下降基本保持穩(wěn)定

17、。注射嗎啡進(jìn)行預(yù)處理后，再注射垂體后葉素發(fā)現(xiàn)，嗎啡能明顯拮抗垂體后葉素作用和心臟自身代償作用導(dǎo)致的血流動(dòng)力學(xué)變化以及心臟的損傷。 該實(shí)驗(yàn)表明心肌梗死模型組白兔注射垂體后葉素后即刻II導(dǎo)聯(lián)心電圖T波顯著抬高，30s時(shí)T波達(dá)到最高，30s后心電圖出現(xiàn)T波下降但始終高于A組。嗎啡的預(yù)處理除了對(duì)實(shí)驗(yàn)兔心率和血壓有一定影響外，我們還觀察到嗎啡的預(yù)處理能明顯降低S-T段高度，減少心肌梗死發(fā)生，并能改善T波的變化。另外本實(shí)驗(yàn)研究顯示心肌梗死前三組白兔血清cTn-I基本相同，垂體后葉素導(dǎo)致兔心肌損傷后B組cTn-I的水平高于C組和A組，表明嗎啡預(yù)處理可以減輕心肌損傷程度，減少心肌酶的釋放。cTn-I測(cè)定是診斷

18、心肌梗死最敏感的指標(biāo)，可反映微型梗死。正常情況在心肌細(xì)胞膜完整的狀態(tài)下，cTn-I不能透過細(xì)胞膜進(jìn)入血液循環(huán)，血液中的cTn-I含量很低，當(dāng)一些病變引起心肌細(xì)胞損傷時(shí)則迅速?gòu)浬⑷胙?，外周血?0%以上的cTn-I以cTnI-NTnC復(fù)合物形式存在，游離的較少。有研究表明，發(fā)生急性心肌梗死后，50%的病人血清cTn-I在34h后增高，1024h達(dá)到高峰4，由于肌纖維逐步降解，肌鈣蛋白復(fù)合物不斷釋放，cTn-I能持續(xù)升高1周左右5。cTn-I具有高度的心肌特異性，作為心肌損傷的特異性標(biāo)志物在缺血心肌損傷中得到了廣泛的應(yīng)用，近年來國(guó)內(nèi)外都非常重視cTn-I的檢測(cè)，國(guó)外已經(jīng)將其定位診斷心肌梗死的的金標(biāo)準(zhǔn)。本研究各組白兔在給藥后48h的心肌組織病理切片顯示，B組兔的心肌損傷程度最重，在心內(nèi)膜下存在廣泛的心肌損傷和梗死，炎癥細(xì)胞彌漫性侵潤(rùn)；而嗎啡預(yù)處理組的心肌損傷成灶性，心肌損傷和梗死程度明顯較輕。說明嗎啡對(duì)垂體后葉素引起的心肌損傷有預(yù)處理作用。 綜合本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以說明預(yù)先注射嗎啡對(duì)垂體后葉素導(dǎo)致的兔心肌有保護(hù)作用，提示嗎啡預(yù)處理可減輕缺血性的心肌損