中藥分析實驗教案

1、中藥分析實驗教案實驗一中藥制劑的理化定性鑒別(4學(xué)時)一、目的要求1、掌握TLC的鑒別方法。2、熟悉中成藥分析的理化定性方法。二、實驗內(nèi)容(一)化學(xué)定性鑒別和紫外分光光度法定性鑒別1、牛黃解毒片：(1 )鑒別方法 取本品1片，研細，進行微量升華，所得的白色升華物，加新制的1%香草醛的硫酸溶液 12滴，液滴邊緣漸顯玫瑰紅色。 取本品6片(包衣者除去包衣)，研細，加乙醇10ml,溫?zé)?0分鐘，濾過，取濾液 5ml,加鎂粉少量與鹽酸0. 5ml,加熱，即顯紅色；另取濾液4ml,加氫氧化 鈉試液，即顯紅色， 再加30%過氧化氫溶液，紅色不消失，加酸成酸性時，則紅色 變?yōu)辄S色。(2)思考題試述法的化學(xué)定

2、性原理。2、復(fù)方丹參片(1)鑒別方法分光光度法：取本品1片，研細，分次加水少量，攪拌，濾過，濾液移置100ml量瓶 中，并加水至刻度，取溶液2ml,加水至25mL在283 土 2nm的波長處有最大吸 收。取本品1片，研細，進行微量升華，所得白色升華物，加新制的1%香草醛的硫酸溶液1 滴，液滴邊緣漸濕玫瑰紅色。（3）思考題試述法的化學(xué)定性原理。3、穿心蓮片（1）本品為穿心蓮浸膏片（2）鑒別方法 取本品5片，除去包衣，研細，加乙醇10ml,置水浴中加熱至沸，加活性炭0. 5g,攪 拌，濾過。取濾液1ml,加二硝基苯甲酸試液與乙醇制氫氧化鉀試液的等 容混合溶液2滴，搖勻， 即顯紫色；另取濾液1ml,

3、加堿性三硝基苯酚試液3s5滴，顯橙紅色。取本品3片，除去包衣，研細，加無水乙醇25mL置水浴中加熱回流1小時，放冷，濾 過，濾液蒸干，加水5ml,再加2%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至1.0,在水浴上加熱30分鐘，濾過。取 濾液，力口 10%亞硝酸鈉溶液和10%硝酸鋁溶液各3滴，搖勻，再加氫氧化鈉試液0.5slml,顯 橙紅色。（3）思考題試述法的化學(xué)定性原理。4、銀黃口服液1）本品為金銀花提取物、黃苓提取物經(jīng)加工制成的口服液。（2）鑒別方法 取本品1ml,加5%硝酸鈉溶液與10%硝酸鋁溶液各0. 3ml,生成黃色沉淀，再加5%氫氧化 鈉溶液使成堿性，沉淀即溶解，溶液顯棕紅色。取本品0.1ml,加水10

4、ml,搖勻，取溶液2ml,加5%二氯氧化錯溶液12滴，溶液顯黃 色，再加鹽酸1”2滴，黃色不褪。（3）思考題試述法的化學(xué)定性原理。5、板藍根顆粒劑（1）本品為板藍根制成的顆粒劑。（2）鑒別方法 取本品0. 5g ,加5ml甲醇使溶解，靜置，取上清液點于濾紙上，晾干，置紫 外光燈 （365nn）下觀察，顯藍紫色。 取本品0.5g,加10ml甲醇使溶解，濾過，取濾液1ml,加黃三酮試液0.5ml,置水浴中 加熱數(shù)分鐘，顯藍紫色。（3）思考題試述第（2）點中法的鑒別原理。（二）薄層色譜鑒別1、牛黃解毒片（1）薄層板制備參看本書附錄。2）供試品溶液制備：取本品2片，粉碎，加氯仿10ml研磨，濾液蒸干，

5、加 乙醇0. 5ml 使溶解，作為供試品溶液。對照品溶液制備：取膽酸對照品，加乙醇制成每1ml中含Img的溶液，作 為對照品溶液。(4)點樣與展開：吸取上述兩種溶液各5 |J L分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷一 醋酸乙酯一醋酸一甲醇(20： 25： 2： 3)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫 酸乙醇溶液，在105c烘約10分鐘。置紫外光燈(365nn)下檢視。在供試品色譜中，在與對照品 色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(5)思考題:試述本法分析原理？是鑒別處方中何種中藥材？2、銀翹解毒片薄層色譜法。(1)薄層板制備：同1、( 1 )項。(2)供試液制備：取本品1

6、0片，研細，力口石油酸(60-90C)20ml,密塞，時時振搖，浸漬過夜，濾過，濾液揮散至1ml,作為供試品溶液。(3)對照溶液制備：取荊芥對照藥材0.8g,加石油醒(60s90C) 20mL 按供試品溶液制 備法制備。再取薄荷腦對照品，加乙醇，制成每1ml含2111g的溶 液，作為對照品溶液。(4)點樣、展開、顯色：吸取上述三種溶液各10 P 1,分別點于同一含按甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己浣一醋酸乙酯(17: 3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 茴香醛試液，于105c加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，分別在與對照品相應(yīng)的位置上，顯相同 顏色的斑點。(5)思考題:試述本法測

7、定原理，并說明本法與牛黃解毒片的薄層色譜法的區(qū)別要點實驗二甲苯法測定中藥制劑中水分含量（、目的要求掌握甲苯法測定中藥制劑中水分的原理和操作方法二、基本原理少含揮發(fā)性成分的藥品,中藥制劑水分測定的常用方法有烘干法和甲苯法，烘干法適用于不含或甲苯法用于含揮發(fā)性成分的藥品。香砂養(yǎng)胃丸是由應(yīng)選用圓底燒木香、砂仁、白術(shù)、陳皮、香附、廣蕾香、茯苓、半夏味中藥制成的水丸, 其中有多味中藥中含揮發(fā)性成分，甲苯法測定該制劑中水分的含量。2、電熱套、分析天平。三、儀器與試藥1、甲苯法水分測定裝備（見附圖）（包括500nli短頸瓶、水分測定管、直形冷凝管、外管長40cm）3、甲苯、亞甲藍（AR）4、銅絲5、香砂養(yǎng)胃

8、丸（市售品）苯法水分測定裝置四、操作步驟A瓶中，加甲苯約200ml ,必要時加入玻璃珠數(shù)粒，將儀器各部分連接，自冷凝管頂端加入甲苯,至充滿B管的狹細部分。將 A瓶置電熱套中或用其他適宜方法緩緩加熱，待甲苯開始沸騰時，調(diào)節(jié)溫度，使每秒鐘儲出2滴。待 水分完全儲出，即測定 管刻度部分的水量不再增加時，將冷凝管內(nèi)部先用甲苯?jīng)_洗，再用飽蘸甲苯的長刷或其他適宜的方法，將管壁上附著的甲苯推下，繼續(xù)蒸儲5分鐘，放冷至定溫，拆卸裝置，如有水黏附在B管的 管壁上，可用蘸甲苯的銅絲推下，放置，使水分與甲苯完全分離（可加亞甲藍粉末少量，使水染成藍色，以 便分離觀察）。檢讀水量，并計算供試品中的含水量（）。五、注意事

9、項1、用化學(xué)純甲苯直接測定，必要時甲苯可先加水少量，充分振搖后，將水層分離棄去，經(jīng)蒸儲 后使用。2、樣品應(yīng)先粉碎成直徑不超過3mm的顆粒。六、思考題1、實驗中所用儀器、器皿是否要烘干？為什么？2、為什么說本法適用于含揮發(fā)性成分的中藥制劑中水分的測定？實驗三礦物藥石膏與玄明粉中重金屬的檢查（4學(xué)時）一、目的要求1 、掌握重金屬檢查的方法與原理。2 、熟悉目視比色法的操作與判斷。二、基本原理目視比色法是以肉眼直接觀察比較樣品溶液與標準品溶液的顏色深淺，判斷樣 品所含雜質(zhì)是 否超出規(guī)定限度。重金屬在實驗條件下都能與硫代乙酰胺或硫化鈉反應(yīng)顯色，生成黑色硫化物沉淀，標準溶液常以PbT為代表，其原理為：在

10、酸性溶液中CH 3CSN2+CHCONHHSfPb 2+bbSpbS J （黑色）在堿性溶液中2+Pb +Na2 pbS J (黑色)+2Na三、儀器與試藥1 、電爐、25nli納氏比色管及比色管架。2 、萬分之一分析天平。3 、 量瓶、刻度吸管、燒杯、錐形瓶、量筒等。4、其他試劑均為AR級。5、石膏、玄明粉(市售品)。四、操作步驟1. 石膏重金屬檢查取樣品16g,加冰醋酸4ml與水96ml,煮沸10分鐘，放冷，濾過，用水洗滌并定容至 100mlo取25nli納氏比色管2支，甲管中加標準鉛溶液2ml與醋酸鹽緩沖液(pH=3. 5) 2ml后加水使成25ml。乙管加樣品濾液25ml,在甲乙兩管中

11、分別加硫代乙酰胺試液2ml,搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深。2. 玄明粉重金屬檢查 取25ml納氏比色管2支，甲管中加標準鉛溶液2ml與醋酸鹽緩沖液(pH=3. 5) 2nli后，加水使成25ml,乙管取玄明粉1. 0g,加醋酸鹽緩沖 液2ml與適量水溶解成25mL在甲乙兩管中分別加入硫代乙酰胺試液各2nd,搖勻，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深。附注1.標準鉛溶液的配制精密稱取在105c干燥至恒重的硝酸鉛0.1598g置1000ml量瓶中，加硝酸5ml,水50nli溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液。臨用前

12、，精密量取儲備液10ml,置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當于10 口 g的Pb） o2. 硫代乙酰胺試液的配制取硫代乙酰胺4g,加水使溶解成100ml,置冰箱中保存，臨用前 取混合液（由lmol/L氫氧化鈉溶液15ml,水5. 0ml及甘油20ml組成）5. 0ml,加上述硫代乙 酰胺溶液1.0ml,置水浴上加熱20秒鐘，冷卻，立即使用。3. 醋酸鹽緩沖液的配制（pH3.5）取醋酸鏤25g加水25nli溶解后，力口 7mol/L鹽酸溶液38ml,用2mol/L鹽酸溶液或5mol/L氨溶液準確調(diào)節(jié)pH值至3.5 （電位法指示），用水稀釋至 100mL即得。五、思考題4

13、. 膏及玄明粉的重金屬限量分別是多少？2在酸性溶液中重金屬能否用 NaS作顯色劑？為什么？實驗三 冰片中碎鹽限量檢查（4學(xué)時）一、 目的要求1、熟悉碎鹽檢查法的基本操作。2、了解碎鹽檢查的原理和方法（古蔡法）?；驹肀痉橹袊幍湟?guī)定碑鹽檢查第一法鋅和酸作用所產(chǎn)生的初生態(tài)氫與供試品中微量神鹽化合物反應(yīng)生成揮發(fā)性神化 氫，再與漠化汞試紙作用生成黃色至棕色碑斑。與同條件下一定量標準碑溶液所產(chǎn) 生的碎斑比較，以判定供試品的碑鹽限量。AsO3Zn+9HAsH f +3Zn2+3H0產(chǎn)生的碑化氫與漠化汞試紙作用。AsH+2HgB 2HBr+AsH (HgBr) 2 (黃色)AsH+3HgBr2f 3H

14、Br +As (HgBr) 3 (棕色)因為As(T在酸性溶液中被Zn還原的速度很慢，為提高反應(yīng)速度，常在反應(yīng)液中加入KI及酸 性SnCl將AsO,還原為AsO： KI被氧化生成以SnCl來還原，使反應(yīng)液中維持有KI的還原劑 存在。AsCT+21 -+2H tAsO3-+I 2+HOAsO 43-+SrT+2HiAsO3-+SrT+HO12+Sn t21 + Sn溶液中的碘離子，與反應(yīng)中產(chǎn)生的鋅離子能形成配合物，使生成碑化氫的反應(yīng)不斷進行。-2+241 +Zn2+t Znl 4 2供試品和鋅粒中可能含有少量硫化物，在酸性溶液中產(chǎn)生HS氣體，干擾實驗,故需采用醋酸鉛棉花吸收除去H2sHbS+Pb

15、 （CHCOO） t PbSj +2CHC00H3、 儀器與試藥1、古蔡法測碑裝置（見附圖）。2、標準碑試液（1 P gAs/ml ）；碘化鉀試液；酸性氯化亞錫試液；醋酸鉛棉花；鋅粒；漠化 汞試紙。3、冰片（市售品）。4、 操作步驟測試前，先于導(dǎo)氣管C中裝入醋酸鉛棉花60111g （裝管高度為60s80mm；再于 旋塞D的頂端 平面上放一片漠化汞試紙（試紙大小以能覆蓋孔徑而不露出平面為宜）蓋上旋塞E并旋緊，即得。1 .標準碑斑的制備精密量取標準碑溶液2ml,置A瓶中，加鹽酸5nli與水2ml,再加碘化鉀試液 5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g,立即將照上法裝妥的導(dǎo)氣

16、管 C密塞于A瓶上，并將A瓶置25s40c水浴中反應(yīng)45分鐘，取出漠化汞試紙，即得。2 .供試品的檢查 取冰片1g,加氫氧化鈣0.5g與水2ml,混勻，置水浴上加熱使 冰片揮發(fā)后，放 冷，加鹽酸中和，再加鹽酸5ml與水適量使成28ml,照標準碑斑的不得更深。五、注意事項1、標準碑斑的制備應(yīng)與樣品檢查法平行操作。2、制備標準碑斑應(yīng)與供試品檢查同時進行。因碑斑不穩(wěn)定，反應(yīng)中應(yīng)保持干燥及避 光，并立即比較。3、浸入乙醇制澳化汞試液的濾紙的質(zhì)量，對生成碑斑的色澤有影響，因此必須選用質(zhì)量較好，組織疏松的中速定量濾紙，漠化汞試紙一般宜新鮮制備。六、思考題1、碑鹽檢查第一法和第二法的異同何在？各自的關(guān)鍵環(huán)節(jié)

17、是什么？實驗四左金丸質(zhì)量標準制定（8學(xué)時）一、目的要求掌握中藥制劑質(zhì)量標準的主要內(nèi)容和制定方法學(xué)習(xí)設(shè)計實驗的思路和方法了解中藥制劑分析常用定性鑒別和含量測定方法二、提要1.處方黃連600g吳茱萸100g2.制法 以上二味，粉碎成細粉，過篩，混勻，用水泛丸，干燥，即得 性狀 本品為黃褐色的水 丸；氣特異，味苦、辛。功能與主治 瀉火，疏肝，和胃，止痛。用于肝火犯胃，腕脅疼痛，口苦嘈雜，嘔 吐酸水，不喜熱飲。三、方法1 .質(zhì)量標準方案設(shè)計：根據(jù)以上條件請學(xué)生設(shè)計本品的定性鑒別、檢查和含量測定分析方案。定性鑒別要寫明所用對照品或?qū)φ账幉?、鑒別方法。檢查要寫明檢查內(nèi)容及方法。含量測定要寫明樣品提取凈化方

18、法、所測成分、測定條件、測定方法及 含量計算方法。2 .在了解中藥制劑質(zhì)量標準制定基本方法和左金丸中各味藥的定性鑒別和含量測定方法基礎(chǔ)上，參照2000版藥典左金丸項下定性鑒別及含量測定方法擬定實驗方法供學(xué)生練習(xí)。四、實驗用品分析天平恒溫水浴鍋容量瓶、三角瓶、燒杯、量筒、色譜柱等中性氧化鋁（層析用）分光光度計 樣品：左金丸（市售品）其他試劑均為AR級五、實驗步驟1 .定性鑒別取左金丸1g,研細，加乙醇10ml,超聲處理20分鐘，放冷，濾過，濾液作為供試品溶液。另取吳茱 萸對照藥材0.1g、黃連對照藥材0.6g ,分別同法制成對照藥材溶液。再取鹽酸小集堿對照品， 加乙醇制成每1ml含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述四種溶液各2ml,