分光光度計(jì)的使用方法

1、分光光度計(jì)的使用方法主體內(nèi)容：1 使用儀器前，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理。以及各個(gè)操作旋鈕之功能。 在未接通電源前， 應(yīng)該對(duì)儀器的安全性進(jìn)行檢查， 電源線接線應(yīng)牢固。 通地要良好， 各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確， 然后再接通電源開關(guān)。儀器在使用前先檢查一下，放大器暗盒的硅膠干燥筒（在儀器的左側(cè)） ，如受潮 變色，應(yīng)更換干燥的藍(lán)色硅膠或者倒出原硅膠，烘干后再用。2 將靈敏度旋鈕調(diào)置“ 1檔（放大倍率最?。?。3 .開啟電源，指示燈亮，選擇開關(guān)置于“T”波長調(diào)至測(cè)試用波長。儀器預(yù)熱 20 分鐘。4 打開試樣室蓋（光門自動(dòng)關(guān)閉） ，調(diào)節(jié)“ 0旋鈕，使數(shù)字顯示為”“ 00.0，蓋”上試

2、樣室蓋，將比色皿架置與蒸餾水校正位置，使光電管受光，調(diào)節(jié)透過率“ 100%”旋鈕，使數(shù)字顯示為“ 100.0?！? 如果顯示不到“100.0，則可適當(dāng)增加微電流放大器的倍率檔數(shù)，但盡可”能置低倍率檔使用，這樣儀器將有更高的穩(wěn)定性。但改變倍率后必須按（4）重新校正“ 0和” “ 100%”。6 預(yù)熱后，按（4）連續(xù)幾次調(diào)整“0和” “100%”，儀器即可進(jìn)行測(cè)定工作。7 吸光度 A 的測(cè)量按（4）調(diào)整儀器的“00.0和” “100%”，將選擇開關(guān)置于“A，”調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為“ .000，然后將被測(cè)樣品移入光路，顯示”值即為被測(cè)樣品的吸光度值。8 .濃度C的測(cè)量：選擇開關(guān)由“做置

3、“C”將已標(biāo)定濃度的樣品放入光路， 調(diào)節(jié)濃度旋鈕， 使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值， 將被測(cè)樣品放入光路， 即可讀出被測(cè)樣 品的濃度值。9 如果大幅度改變測(cè)試波長時(shí)，在調(diào)整“0和” “ 100%”后稍等片刻， （因光能量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)緩慢，需一段光響應(yīng)平衡時(shí)間） ，當(dāng)穩(wěn)定后，重 新調(diào)整“ 0和” “ 100%”即可工作。10 每臺(tái)儀器所配套的比色皿，不能與其它儀器上的比色皿單個(gè)調(diào)換。11 .本儀器數(shù)字表后蓋，有信號(hào)輸出01000MV,插座1腳為正，2腳為負(fù)接地線。吸收池（即比色杯）使用注意事項(xiàng)： 要徹底清洗，尤其是盛過蛋白質(zhì)等溶液，干后形成一層膜，不易洗去，通常杯子不用時(shí)可放在1 洗潔凈液中

4、浸泡， 去污效果好， 使用時(shí)用水沖洗干凈，要求杯壁不掛水珠，還可以用綢布絲線或軟塑料制作一個(gè)小刷子清洗杯子。 嚴(yán)禁用手指觸摸透光面， 因指紋不易洗凈。 嚴(yán)禁用硬紙和布擦拭透光面，只能使用鏡頭紙和綢布。 嚴(yán)禁加熱烘烤。急用干的杯子時(shí)，可用酒精蕩洗后用冷風(fēng)吹干。決不可用超聲波清洗器清洗。 吸收池的校正： 要固定參比杯和樣品杯， 可在杯的毛玻璃面上寫上記號(hào)。用盛有參比液的參比杯和樣品杯測(cè)定吸光度“ A0，” 樣品杯換上樣品液后測(cè)定的吸光度為“A1；則校正后的實(shí)際吸光度 A為：A= A1A01. 分光光度法定義與應(yīng)用1.1 定義 : 分光光度法是利用物質(zhì)所特有的吸收光譜來鑒別物質(zhì)或測(cè)定其含量的分析檢測(cè)

5、技術(shù).1.2 特點(diǎn) : 靈敏 , 精確 , 快速和簡(jiǎn)便, 在復(fù)雜組分系統(tǒng)中 , 不需要分離, 即能檢測(cè)出其中所含的極少量物質(zhì).1.3 應(yīng)用 : 生物化學(xué)研究中廣泛使用的方法之一, 廣泛用于糖, 蛋白質(zhì), 核酸 ,酶等的快速定量檢測(cè) .2. 分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)和工作原理2.1 分光光度計(jì)的分類分光光度計(jì)的分類紅外分光光度計(jì): 測(cè)定波長范圍為大于760 nm 的紅外光區(qū)可見光分光光度計(jì): 測(cè)定波長范圍為 400760 nm 的可見光區(qū)紫外分光光度計(jì)：測(cè)定波長范圍為200400 nm的紫外光區(qū)2.2 分光光度計(jì)工作原理人眼可見的光只占電磁波譜的很小 部分 (400760nm) ，它是一種頻率 較大

6、的電磁波.電磁波按頻率大小，從頻率最小的無線電波到頻率最大的r射線排成一列,即組成電磁波的波譜,如下圖所示 .2.2.1 分光光度計(jì)的光譜范圍包括波長范圍為400760 nm的可見光區(qū)和波長范圍為 200400 nm的紫外光區(qū). 不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜, 因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源.鴇燈的發(fā)射光譜：鴇燈光源所發(fā)出的400760nm 波長的光譜，光通過三棱 鏡折射后 ,可得到由紅,橙,黃,綠 ,藍(lán),靛,紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計(jì)的光源.氫燈的發(fā)射光譜：氫燈能發(fā)出185400 nm 波長的光譜，可作為紫外光光 度計(jì)的光源.2.2.2 物質(zhì)的吸收光譜(1)如果在

7、光源和棱鏡之間放上某種物質(zhì)的溶液, 此時(shí)在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜, 它出現(xiàn)了幾條暗線, 即光源發(fā)射光譜中某些波長的光因溶液吸收而消失 ,這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜.不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的 . 因此根據(jù)吸收光譜, 可以鑒別溶液中所含的物質(zhì) .2.2.3 物質(zhì)的吸收光譜(2)當(dāng)光線通過某種物質(zhì)的溶液時(shí), 透過的光的強(qiáng)度減弱 . 因?yàn)橛幸徊糠止庠谌芤旱谋砻娣瓷浠蚍稚? 一部分光被組成此溶液的物質(zhì)所吸收 , 只有一部分光可透過溶液 .入射光= 反射光+ 分散光+ 吸收光 + 透過光如果我們用蒸餾水( 或組成此溶液的溶劑 ) 作為 " 空白 " 去校正

8、反射, 分散等因素造成的入射光的損失, 則 :入射光= 吸收光十 透過光2.2.4 物質(zhì)吸光度(A) 與透射比(T) 的關(guān)系設(shè) I0 為經(jīng)過空白校正后入射光的強(qiáng)度;I 為透過光的強(qiáng)度.根據(jù)實(shí)驗(yàn)得知I = I0 ?10- eel式中,c表示吸收物質(zhì)的摩爾濃度;1表示吸收物質(zhì)的光徑，用cm表示；e表示 吸收物質(zhì)的摩爾消光系數(shù)，它表示物質(zhì)對(duì)光的吸收特性，不同物質(zhì)的e數(shù)值不 同.所以 I / I0 = 10- eel令 T(透射比)=I / I 0 T = 10-£ cl若以 T 對(duì)吸收物質(zhì)的濃度作圖 , 則得圖 1-5-2 中的曲線 .由上式可得1g(1 / T) = eellg(l /

9、T) 為物質(zhì)的吸光度(A) A = 1g(1 / T)2.2.5 Lambert -Beer 定律(E = c cl)上式說明了物質(zhì)的吸光度與吸收物質(zhì)的濃度和液層的厚度成正比,這就是光吸收的基本定律-Lambert-Beer(朗伯 - 比耳 ) 定律 .2.3 分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)無論哪一類分光光度計(jì)都包括: 光源 ,單色器 , 吸收池 ,檢測(cè)器和測(cè)量儀表.分光光度計(jì)各部件的次序如圖所示:5 個(gè)基本部件分光光度計(jì)的基本部件 (1):光源 : 分光光度計(jì)上常用的光源有兩種 :鎢絲燈或氫燈 ,在可見光區(qū),近紫外光區(qū)和近紅外光區(qū)常用鎢絲燈作為光源; 在紫外光區(qū)多使用氫弧燈 .單色器 : 把混合光波分

10、解為單 波長光的裝置. 在分光光度計(jì)中多用 作為色散元件 .吸收池比色杯, 比色皿 , 比色池 ） 一般由玻璃 , 石英或熔凝石英制成,用來盛被測(cè)的溶液 .在低于 350 nm 的紫外光區(qū)工作時(shí),必須采用石英池或熔凝石英池.分光光度計(jì)的基本部件 （2）:吸收池 （ 比色皿 ） 必須與光束方向垂直.此外 , 每套比色皿的質(zhì)料,厚度應(yīng)完全相同 , 以免產(chǎn)生誤差. 比色皿上的指紋, 油污或壁上的沉積物都會(huì)顯著地影響其透光性 , 因此在使用前務(wù)必徹底清洗.常用光電池 ,光電管和光電倍增管三種 .測(cè)量裝置： 般常用的紫外光和可見光分光光度計(jì)有3 種測(cè)量裝置, 即電流表,記錄器和數(shù)字示值讀數(shù)單元 .現(xiàn)代的

11、儀器常附有自動(dòng)記錄器,可自動(dòng)描出吸收曲線 .檢測(cè)器棱鏡與光柵棱 鏡 : 光波通過棱鏡時(shí), 不同波長的光折射率不同 ; 因而能將不同波長的光分開 . 玻璃對(duì)紫外線的吸收力強(qiáng) , 故玻璃棱鏡多用于可見光分光光度計(jì). 石英棱鏡可在整個(gè)紫外光區(qū)傳播光,故在紫外光分光光度計(jì)中廣為應(yīng)用.衍 射 光柵 : 在石英或玻璃表面上刻劃許多平行線（每英寸約刻15 000 30 000 條）. 由于刻線處不透光,通過光的干涉和衍射使較長的光波偏折角度大 ,較短的光波偏折角度小 , 因而形成光譜.棱鏡單色器裝置示意圖光源照到棱鏡 （ 或光柵 ） 以前 , 先要經(jīng)過一個(gè)入射狹縫, 再通過平行光鏡使成為平行光束投到棱鏡上.

12、 透過棱鏡的光再經(jīng)另一聚光鏡, 在此聚光鏡的焦面內(nèi)可得一清 楚的光譜圖 . 如在焦線處放 出射狹縫 , 轉(zhuǎn)動(dòng)棱鏡使光譜移動(dòng),就可以從出射狹縫射出所需要的單色光.整個(gè)裝置稱為 "單色器 "檢測(cè)器 - 光電池光電池：裝在一個(gè)特制的匣子里面由 3 層物質(zhì)組成的圓形或長方形薄片 . 第 一層是一種導(dǎo)電性良好的金屬， 這是光電池的負(fù)極。 中間極薄的一層是半導(dǎo)體硒 , 第 3 層是鐵，這是光電池的正極 .當(dāng)光電池受光照射以后 ,半導(dǎo)體硒的表面逸出電子 , 這些電子只向負(fù)極方向移動(dòng) , 而不向正極移動(dòng), 因此在上下兩金屬片間產(chǎn)生一個(gè)電位差 ,線路 連通時(shí)即產(chǎn)生電流檢測(cè)器 - 光電管光電管

13、： 光電管是由封裝在真空透明封套里的一個(gè)半圓柱型陰極和一個(gè)絲陽極組成 . 陰極的凹畫上有一層光電發(fā)射材料, 此種物質(zhì)經(jīng)光照射可發(fā)射電子. 當(dāng)在兩極間加有電位時(shí),發(fā)射出來的電子就流向絲陽極而產(chǎn)生光電流.對(duì)于相同的輻射強(qiáng)度 , 它所產(chǎn)生的電流約為光電池所產(chǎn)生電流的 1/4. 由于光電管具有很高的電 阻 , 所以產(chǎn)生的電流容易放大.檢測(cè)器 - 光電倍增管光電倍增管：它比普通的光電管優(yōu)越 , 它可將第一次發(fā)射出的電子數(shù)目放大到數(shù)百萬倍. 當(dāng)電子打在兼性陽極上時(shí), 能引起更多的電子自表面射出 . 這些射出的電子又被第二個(gè)兼性陽極所吸引 , 同樣再產(chǎn)生更多的電子. 此過程重復(fù)9 次后 ,每個(gè)光子可形成10

14、6107 個(gè)電子 . 這些電子最后被收集在陽極上 . 所得到的倍增電流可進(jìn)一步加以放大和測(cè)量.2.4 分光光度法的測(cè)量誤差分光光度法的測(cè)量誤差選擇適宜波長的入射光控制吸光度A 的遍數(shù)范圍選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤簝x器測(cè)量誤差測(cè)量條件選擇2.4.1 儀器測(cè)量誤差由朗伯 -比爾定律可知 ,只有在一定的濃度范圍內(nèi) , 即一定的吸光度范圍同內(nèi) , 由分光光度計(jì)測(cè)量所引起的測(cè)定結(jié)果的相對(duì)誤差才是較小的 ; 當(dāng)透光率接近0或 1.0 時(shí),其相對(duì)誤差趨于無限大;一般在百分透光率在1080% 的范圍內(nèi) (即吸光度在 10.1), 濃度測(cè)量相對(duì)誤差較小; 對(duì)于精 密度高的儀器. 當(dāng)吸 度 A=0.7-0.2 時(shí)(百分透

15、光率約為20-60%, 測(cè)量誤差約為 1%.2.4.2 測(cè)量條件選擇(1) 選擇適宜波長的入射光 : 由于有色物質(zhì)對(duì)光有選擇性吸收 , 為了使測(cè)定 結(jié)果有較高的靈敏度, 必須選擇溶液最大吸收波長的入射光 .(2) 控制吸光度A 的準(zhǔn)確的讀數(shù)范圍 : 由朗伯-比耳定律可知,吸光度只有控制在 0.20.7 讀數(shù)范圍內(nèi)時(shí),測(cè)量的準(zhǔn)確度較高 .(3) 選擇參比溶液: 參比溶液是用來調(diào)節(jié)儀器工作零點(diǎn)的 .若樣品溶液,試劑 ,顯色劑無無色可用蒸餾水作參比溶液; 反之應(yīng)采用不加顯色劑的樣品液作參比溶液.2.5 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)一般要求影響顯色反應(yīng)因素選擇性好靈敏度高生成的有色

16、化合物性質(zhì)穩(wěn)定顯色劑與有色物顏色反差大顯色反應(yīng)要易于控制顯色劑用量反應(yīng)液的酸堿度(pH)反應(yīng)溫度顯色反應(yīng)時(shí)間干擾離子的影響2.5.1 顯色反應(yīng)一般要求(1) 選擇性好 : 顯色劑最好只與一種被測(cè)組分起顯色反應(yīng) ;(2) 靈敏度高 : 靈敏度高有笪微量組分的測(cè)定;(3) 有色化合物性質(zhì)穩(wěn)定: 確保前后測(cè)定準(zhǔn)確 .(4) 顯色劑與有色物顏色反差大: 兩者最大吸收波長之差應(yīng)大于 60nm;(5) 顯色反應(yīng)要易于控制 : 結(jié)果的確保實(shí)驗(yàn)再現(xiàn)性 .2.5.2 影響顯色反應(yīng)的主要因素(1) 顯色劑用量: 通過實(shí)驗(yàn)來確定最適用量;(2) 反應(yīng)液的酸堿度(pH) 溶液酸堿度直接影響金屬離子與顯色劑存在形式以及

17、有色化合物組成的穩(wěn)定性 .(3) 反應(yīng)溫度 : 不同的顯色反應(yīng)需要不同的反應(yīng)溫度, 一般顯色反應(yīng)可在室溫下完成 .(4) 顯色反應(yīng)時(shí)間 : 顯色反應(yīng)的速度有快有慢.(5) 干擾離子的影響: 應(yīng)采用適當(dāng)方法消除其影響.3. 7200 型分光光度計(jì)的正確使用方法3.1 結(jié)構(gòu)和工作原理3.1.1 儀器結(jié)構(gòu)3.1.2 工作原理3.1.3 特點(diǎn)3.2 使用方法3.3 注意事項(xiàng)3.1.1 7200 型分光光度計(jì)儀器結(jié)構(gòu)7200 型光柵分光光度計(jì)由光源 ,單色器 ,試樣室 ,光電管 ,線性運(yùn)算放大器,對(duì)數(shù)運(yùn)算放大器及數(shù)字顯示器等部件組成 ,基本結(jié)構(gòu)如下圖所示.1. 光源 ;2. 單色器 ;3. 試樣室 ;4

18、. 光電管 ;5. 線性運(yùn)算放大器;6. 對(duì)數(shù)運(yùn)算放大器 ;7. 數(shù)字顯示器3.1.2 7200 型分光光度計(jì)工作原理(圖)3.1.3 2 0 0 型光柵分光光度計(jì)光學(xué)系統(tǒng)示意圖1. 光源燈 ;2. 濾光片 ;3. 球面反射鏡;4. 入射狹縫 ;5. 保護(hù)玻璃 ;6. 平面反射鏡;7. 準(zhǔn)直鏡 ;8. 光柵 ;9. 保護(hù)玻璃 ;10. 出射狹縫 ; 11. 聚光鏡 ;12. 試樣室 ; 13. 光 門 ;14. 光電管 ;3.1.2 7200 型分光光度計(jì)工作原理(文)由光源燈 (1) 發(fā)出連續(xù)輻射光線, 經(jīng)濾光片 (2) 和球面反射鏡(3) 至單色器的入射狹縫 (4) 聚焦成像 , 光束通過

19、入射狹縫(4) 經(jīng)平面反射鏡(6) 到準(zhǔn)直 鏡 (7) 產(chǎn)生平行光 , 射至光柵 (8) 上色散后又以準(zhǔn)直鏡(7) 聚焦在出射狹縫(10) 上形成一連續(xù)光譜 , 由出射狹縫選擇射出一定波長的單色光 , 經(jīng)聚光鏡 (11) 聚光后 , 通過 試樣室 (12) 中的測(cè)試溶液部分吸收后,光經(jīng)光門(13) 再照射到光電管(14) 上.調(diào)整儀器 ,使透光度為 100%, 再移動(dòng)試樣架拉手,使同一單色光通過測(cè)試溶液后照射到光電管上. 如果被測(cè)樣品有光吸收現(xiàn)象, 光量減弱 , 由光電轉(zhuǎn)換元件將變化的光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào), 經(jīng)線性運(yùn)算放大器和對(duì)數(shù)運(yùn)算放大器處理, 將光能的變化程度通過數(shù)字顯示器顯示出來. 可根據(jù)

20、需要直接在數(shù)字顯示器上讀取透光度(T),吸光度 (A) 或濃度 (C).3.1.3 特點(diǎn)(1) 具有低雜色光, 高分辯率的單光束光路結(jié)構(gòu)的單色器;(2) 具有良好的穩(wěn)定性,重現(xiàn)性和精確的測(cè)量讀數(shù);(3) 明亮清晰的數(shù)字顯示器可顯示透射比, 吸光度 , 濃度和所設(shè)置的波長, 提高了儀器的讀數(shù)準(zhǔn)確性;(4) 采用最新微機(jī)處理技術(shù),儀器具有自動(dòng)設(shè)置0%T 和 100% 等控制功能;(5) 儀器配有標(biāo)準(zhǔn)的 RS-232 雙向通訊接口 , 不僅可向計(jì)算機(jī)發(fā)送測(cè)試參數(shù)還可接收計(jì)算機(jī)發(fā)出的指令.(6) 在已知標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度前提下, 測(cè)定未知樣品濃度;(7) 在已知標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度斜率前提下, 測(cè)定未知樣品濃度.4

21、.1 紫外分光光度計(jì)法概述4.1.1 定義 用紫外光源通過分光光度技術(shù)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定的方法叫作紫外分光光度法.所使用的儀器叫作紫外分光光度計(jì) .4.1.2 原理 因?yàn)樵S多化合物的分子結(jié)構(gòu)中存在共腕雙鍵，在200400nm的紫外光區(qū)具有吸收光的特性, 所以無需進(jìn)行顯色反應(yīng)便能直接測(cè)定.4.1.3 應(yīng)用 常用于對(duì)蛋白質(zhì)和核酸進(jìn)行定性,定量測(cè)定 .蛋白質(zhì)分子中所含酪氨酸 , 色氨酸和苯丙氨酸等芳香族氨基酸殘基在波長280nm 處具有最大吸收峰 .故常用波長280nm 處的吸光度測(cè)定蛋白質(zhì)的濃度.4.1.4 特點(diǎn)(1) 組成核酸的堿基也含有共軛雙鍵,其最大吸收峰的波長在260nm 處.但在 280nm

22、 處也有一定的光吸收 , 對(duì)蛋白質(zhì)的測(cè)定有一定的干擾作用 .若分別測(cè)定 280nm 和 260nm 處的吸光度,可通過經(jīng)驗(yàn)公式消除核酸對(duì)蛋白質(zhì)測(cè)定的影響 .(2)可對(duì)微量蛋白質(zhì)(110g/L)不需顯色，進(jìn)行直接定量測(cè)定.因此操作簡(jiǎn) 便,而且可回收樣品 .此外 ,鹽類在 280nm 處無光吸收 ,少量鹽類也不會(huì)影響測(cè)定 結(jié)果 .3 3) 紫外分光光度法完全符合Lambert-Beer 定律的基本原理.在其它條件保持一致的情況下 ,被測(cè)溶液的吸光度與被測(cè)溶液的濃度成正比 .4 .2 UV-754 型分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)和工作原理4.2.1 儀器結(jié)構(gòu) 由光源 (鎢燈或氚燈), 單色器 ,試樣室 ,接受器

23、 (光電管 ), 微電流放大器,A/C 轉(zhuǎn)換器 ,打印機(jī) ,鍵盤和顯示器等部件組成 .微處理機(jī) (CPU) 通過輸入 ,輸出口 (I/O) 對(duì)微電流放大器, 顯示器和打印機(jī)等部件進(jìn)行控制,實(shí)現(xiàn)儀器的整體功能.4.2.2 工作原理 ( 圖)UV-7 5 4 型紫外 -可見分光光度計(jì)光學(xué)系統(tǒng)示意圖1. 氚燈 ;2. 鎢燈 ;3. 濾光鏡 ;4. 聚光鏡 ;5. 入射狹縫 ;6. 平面 ;7. 準(zhǔn)直鏡 ; 8. 光柵 ; 9. 出射狹縫 ; 10. 聚光鏡 ; 11. 試樣室 ; 12. 光門 ; 13. 光電管4.2.2 工作原理(文)由光源氚燈或鎢燈 (1 或 2) 發(fā)出連續(xù)輻射光線經(jīng)濾光鏡(3

24、) 和聚光鏡 (4) 至單色器入射狹縫 (5) 處聚焦成像, 再經(jīng)平面反射鏡 (6) 反射至準(zhǔn)直鏡(7) 產(chǎn) 生平行光射至光柵 (8) 在光柵上色散后又經(jīng)準(zhǔn)直鏡(7) 聚焦在出射狹縫(9) 上成一連續(xù)光譜, 經(jīng)出射狹縫射出的光在聚光鏡(10) 聚光后分別通過試樣室 (11) 中的空白溶液(或?qū)φ杖芤?), 標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品溶液, 被部分吸收后光經(jīng)光門 (12) 再照射到光電管(13) 上.被光電管接收的光信號(hào)再被轉(zhuǎn)換成電信號(hào),后者通過輸入,輸出口 (I/O),見上圖 . 進(jìn)入微處理機(jī)進(jìn)行調(diào)零, 變換對(duì)數(shù) , 濃度計(jì)算以及打印數(shù)據(jù)等處理, 將檢測(cè)結(jié)果通過顯示器和打印系統(tǒng)顯示出來.4.3 UV-75

25、4 型分光光度計(jì)使用方法(外型 )4.3.1 UV-754 型紫外可見分光光度計(jì)的外觀圖1. 試樣架拉手;2. 鍵盤部分 ;3. 數(shù)據(jù)打印 ;4. 波長刻度盤; 5. 波長手輪 ;6. 電源汗關(guān) ;7. 氚燈觸發(fā)按鈕;8. 光源室 . .3 UV-754 型分光光度計(jì)使用方法（鍵盤 ）UV-754 型紫外-可見分光光度計(jì)的鍵盤示意圖鍵盤詳細(xì)內(nèi)容說明如下 : .3 UV-754 型分光光度計(jì)使用方法（鍵盤內(nèi)容 1） 功能鍵：F1F8,暫無功能，備擴(kuò)展使用. T 鍵 : 具有三種透光度狀態(tài)調(diào)節(jié)功能.A/C鍵:吸光度/濃度轉(zhuǎn)換鍵，按此鍵可分別表示“吸光度03A”,”吸光度 00.1A",&

26、quot;吸光度00.1A"和"濃度"四種狀態(tài). 送入鍵 : 只在 "A/C 鍵"處于 "濃度 "狀態(tài)時(shí)才起作用 . 打印鍵 : 手動(dòng)方式時(shí)有效, 每按一次 , 便打印一次數(shù)據(jù). 控制鍵 :在分別使用 "設(shè)定 +"," 設(shè)定一 "," 倍率 "," 顯示方式 "和"打印方式 " 各鍵時(shí) , 需與控制鍵分別聯(lián)合使用才起作用 .設(shè)定+鍵:在"A/C鍵"處于"濃度”狀態(tài)時(shí)才能設(shè)定"標(biāo)準(zhǔn)濃度值&

27、quot;,"斜率K 值"或"斜率 B 值"等數(shù)據(jù) .其功能是將設(shè)定數(shù)值增加.4.3 UV-754 型分光光度計(jì)使用方法（鍵盤內(nèi)容 2）（1） 設(shè)定 - 鍵 : 是使設(shè)定數(shù)值減小 , 操作與 " 設(shè)定 + 鍵 " 類同.（2） 倍率鍵 : 用來設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的放大倍數(shù).有"1","0.1" 和"0.01" 三檔 ,與"控制鍵" 同時(shí)按下 ,倍率便發(fā)生相應(yīng)的變化 .（3） 顯示方式鍵 : 可表示 "積分 "," 濃度 "和"樣品號(hào) "三種狀態(tài) .（11） 打印方式鍵 : 存在 " 自動(dòng) "（ 每移動(dòng)一次試樣架, 儀器自動(dòng)打印一次數(shù)據(jù)）," 方式 1"（ 手動(dòng)方式 ,每按一次此鍵 ,儀器打印一次數(shù)據(jù)）和"方式 2"（ 每分鐘定時(shí)打印一次數(shù)據(jù)）三種狀態(tài).每與 "控制鍵" 同時(shí)按一次此鍵便改變一個(gè)狀態(tài).（12） 送紙鍵 : 每按一次此鍵 , 儀器移動(dòng)一次打印紙.（13） TAC: 數(shù)字顯示器顯示測(cè)定結(jié)果或輸入的數(shù)據(jù).（14） 2