最新維生素C的定量測(cè)定—2,二氯酚靛酚滴定法

1、維生素C的定量測(cè)定一2, 6二氯酚靛酚滴定法實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 學(xué)習(xí)定量維生素C的原理和方法2. 掌握微量滴定技術(shù)實(shí)驗(yàn)原理維生素C是人類營(yíng)養(yǎng)中最重要的維生素之一，缺乏時(shí)會(huì)產(chǎn)生壞血病，因此, 乂稱為抗壞血酸。它對(duì)物質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)具有重要的作用，近年來(lái)發(fā)現(xiàn)它還能增強(qiáng) 機(jī)體對(duì)腫瘤的抵抗力，并具有對(duì)化學(xué)致癌物的阻斷作用。維生素C是具有L-系糖構(gòu)型的不飽和多疑基化合物，屬于水溶性維生素。 它分布很廣，植物的綠色部分及許多水果（桔類、草莓、山楂、辣椒等）的含量 都很豐富。維生素C具有很強(qiáng)的還原性，在堿性溶液中加熱并有氧化劑存在時(shí)，維生 素C易被氧化而破壞。在中性和微酸性環(huán)境中，維生素C能將染料2, 6二氯 酚靛酚

2、還原成無(wú)色的還原型的2, 6-二氯酚靛酚，同時(shí)將維生素C氧化成脫氫 維生素Co氧化型的2, 6-二氯酚靛酚在酸性溶液中呈現(xiàn)紅色，在中性或堿性 溶液中呈蘭色。當(dāng)用2, 6-二氯酚靛酚滴定含有維生素C的酸性溶液時(shí)，在維 生素C尚未全被氧化時(shí)，滴下的2, 6二氯酚靛酚立即被還原成無(wú)色。但當(dāng)溶 液中的維生素C剛好全部被氧化時(shí)，滴下的2, 6-二氯酚靛酚立即時(shí)溶液呈紅 色。所以，當(dāng)溶液山無(wú)色變?yōu)槲⒓t色時(shí)即表示溶液中的維生素C剛好全部被氧 化，此時(shí)即為滴定終點(diǎn)，從滴定時(shí)2, 6-二氯酚靛酚洛液的消耗量，可以計(jì)算 出被檢物質(zhì)中還原型維生素C的含量。儀器、試劑（-）儀器：研缽.天平、容量瓶（100ml）、量筒

3、、移液管、錐形瓶（50ml）. 微量滴定管、漏斗（二）材料、試劑1、新鮮蔬菜或新鮮水果2、1 %草酸溶液lg草酸溶于100ml蒸憎水中3、2%草酸溶液2g草酸溶于100ml蒸憎水中4、標(biāo)準(zhǔn)維生素C溶液準(zhǔn)確稱取20mg純維生素C粉狀結(jié)晶于1%草酸溶液中，稀釋至100ml, 再取其中10ml稀釋至lOOmh即得0.02mg/ml的維生素C溶液。在使用前臨時(shí) 配制。5、0.02%2, 6二氯酚靛酚溶液溶解50mg2, 6二氯酚靛酚于約200ml含有52mg的NaHCOs的熱水中， 冷后稀釋至250ml,過(guò)濾，裝于棕色瓶中，放入冰箱中保存。使用時(shí)用維生素C 標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)定其濃度。實(shí)驗(yàn)步驟（-）2, 6二氯

4、酚靛酚溶液的標(biāo)定：取5ml維生素C標(biāo)準(zhǔn)液及5mll%草酸溶液于50ml的錐形瓶中，用配制好的 2, 6二氯酚靛酚溶液于微量滴定管中滴定至粉紅色出現(xiàn)，并保持15s不褪色， 即滴定終點(diǎn)，此時(shí)所用染料的體積相當(dāng)于O.lmg維生素C, 111此可求出每ml2, 6二氯酚靛酚溶液相當(dāng)于維生素C的mg數(shù)。（二）稱取新鮮蔬菜或水果（要有大、中.小各部分的代表，洗凈，除去不 可食部分，切碎，混勻）約10克，于研缽中，加入等體積的2%草酸溶液研磨成 漿狀，得勻漿液。將勻漿液移入100ml容量瓶中，可用1%草酸溶液幫助轉(zhuǎn)移， 加入30%Zn （AC） 2和15%K4Fe （CN） 6溶液各5ml,脫色,然后用1%

5、的草酸 稀釋至刻度，充分搖勻,靜止兒分鐘后過(guò)濾。（棄去最初流出的兒毫升溶液）（三）用移液管吸取濾液5或10ml于50ml的錐形瓶中，立即用標(biāo)定過(guò)的2, 6-二氯酚靛酚溶液滴定，直至溶液呈淺粉紅色15s不褪色為止。記錄所用染 料的ml數(shù)。為了避免其它物質(zhì)的干擾，滴定過(guò)程不得超過(guò)2mino （此步驟平 行作2-3次）（一）計(jì)算維生素C含量（mg/100g樣品）二（VT/W） X100式中：V為滴定樣品所耗用的染料的平均ml數(shù)T為lml染料相當(dāng)于維生素C的mg數(shù)W為滴定時(shí)所用樣品稀釋液中含樣品的g數(shù)注意事項(xiàng)1整個(gè)滴定過(guò)程要迅速，防止還原型的維生素C被氧化。滴定過(guò)程一般不超 a 2mino滴定所用的染

6、料不應(yīng)少于lml或多于4ml,若滴定結(jié)果不在此范圍, 則必須增減樣品量或?qū)⑻崛∫合♂專?本實(shí)驗(yàn)必須在酸性條件下進(jìn)行，在此條件下，干擾物反應(yīng)進(jìn)行很慢；3提取液中尚含有其它還原性的物質(zhì)，均可與2, 6二氯酚靛酚反應(yīng)，但反 應(yīng)速度均較維生素C慢，因而，滴定開始時(shí)，染料要迅速加入，而后盡可能 一滴一滴地加入，并要不斷地?fù)u動(dòng)錐形瓶直至呈粉紅色15s不褪色為終點(diǎn)；4若提取液中色素很多時(shí)，滴定不易看岀顏色變化，需脫色，可用口陶土、30%Zn (AC) 2 和 15%K4Fe (CN) 6 溶液等,本實(shí)驗(yàn)用 30%Zn (AC) 2 和 15%K4Fe (CN) 6溶液脫色，若色素不多，可不脫色，直接滴定。5

7、在生物組織和組織提取液中，維生素C還能以脫氫維生素C及結(jié)合維生素C 的形式存在，它們同樣具有維生素C的生理作用，但不能將2, 6-二氯酚靛酚 還原脫色.6. 2%草酸有抑制抗壞血酸酶的作用，而1%的草酸無(wú)此作用思考題1. 指出3T 種維生素C含量豐富的物質(zhì)。2. 為了準(zhǔn)確測(cè)定維生素C的含量，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意哪些操作步驟？為什么？庭院設(shè)計(jì)的十大原則一、多樣統(tǒng)一的原則統(tǒng)一用在庭院中所指的方而很多，例如形式與風(fēng)格、造園材料、色彩、線條等，從整體 到局部都要講求統(tǒng)一，但過(guò)分統(tǒng)一則顯呆板，疏于統(tǒng)一則顯雜亂。所以常在統(tǒng)一之上加一個(gè) 多樣，意思是需要在變化之中求統(tǒng)一，免于成為大雜繪。目前世界上主要流行以下三

8、類庭院:1、自然式庭院一20世紀(jì)人們提出回歸自然的口號(hào)，衣食住行都狂熱地追求自然，庭院 的形式亦不例外。2、西式庭院一又稱規(guī)整式庭院。在現(xiàn)行經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)的社會(huì)里該庭院逐漸興盛起來(lái)，而且愈 潼愈烈，以致形成大面積人為造作的非自然景觀。3、混合式庭院一本來(lái)混合與統(tǒng)一是相互矛盾的，但目前自然式與西式在同一庭院內(nèi)混合 應(yīng)用已經(jīng)相當(dāng)流行，而且成為一式。二、均衡的原則均衡是人對(duì)其視覺(jué)中心兩側(cè)及前方景物具有相等趣味與感覺(jué)的份量。如前方是一對(duì)體量 與質(zhì)量相同的景物，一對(duì)石獅，即會(huì)產(chǎn)生均衡感。庭院設(shè)計(jì)中也要注意這一原則。三、比例的原則庭院中到處需要考慮比例的關(guān)系，大到局部與全局的比例，小到一木一石與環(huán)境的小局 部。一旦失去比例，品評(píng)者很容易發(fā)覺(jué)。正如人而部的五官，比例適當(dāng)就可尊稱為 美人, 反之可想而知。四、韻律的原則在音樂(lè)或詩(shī)詞中按一左的規(guī)律重復(fù)出現(xiàn)相近似的音韻即稱為韻律。設(shè)計(jì)庭院也是如此, 只有巧妙地運(yùn)用多種韻律的同步，才能使游人獲得韻律感。五、對(duì)比的原則在處院設(shè)汁中，為了突出園內(nèi)的某局部景觀，利用體形、色彩、質(zhì)地等與之相對(duì)立的景 物與英放在一起表現(xiàn)，以造成一種強(qiáng)烈的戲劇效果，同時(shí)也給游人一種鮮明的審美情趣。六、和諧的原則和諧是指庭院內(nèi)景物在變化統(tǒng)一的原則下色彩、體形、線