醫(yī)院感染葡萄球菌分離鑒定及耐藥性分析

1、    醫(yī)院感染葡萄球菌分離鑒定及耐藥性分析         摘要： 目的了解葡萄球菌的致病性及藥敏情況，為醫(yī)院感染控制提供參考。方法對(duì)從醫(yī)院感染患者標(biāo)本中分離出的118株葡萄球菌進(jìn)行詳細(xì)鑒定，并進(jìn)行MRS檢測(cè)、-內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)MIC測(cè)定等，結(jié)合臨床相關(guān)資料進(jìn)行分析。結(jié)果在118株葡萄球菌中，共分離出10種，其中凝固酶陽(yáng)性者占43.2%，凝固酶陰性者占56.8%；從總體上看，葡萄球菌的耐藥性均比較強(qiáng)，特別是MRSA和MRCNS；不同菌種與疾病發(fā)生種類有明顯的相關(guān)關(guān)系。

2、 結(jié)論葡萄球菌是造成醫(yī)院感染的主要病原菌之一，合理使用抗生素對(duì)于有效治療疾病和控制醫(yī)院感染的發(fā)生至關(guān)重要。關(guān)鍵詞：醫(yī)院感染； 葡萄球菌； 藥敏試驗(yàn)中分類號(hào)：R378.1+1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A文章編號(hào)：1005-4529(2000)03-0166-03Study on the Identification and the Antimicrobial Susceptibility ofStaphylococci in Nosocomial InfectionsCAO Yue-sheng, REN Yu-xi, ZHANG Li-zhi, SUN Xiao-ju, LIU Zhu-mei(Hebei

3、People's Hospital, Shijiazhuang 050071)Abstract: OBJECTIVE To detect the pathogenicity of staphylococci and in vitro susceptibility with a view of offering references for controlling hospital infection.METHODS The authors identified 118 strains of staphylococci isolated from patients with hospit

4、al infection,and meanwhile detected meticillin-resistant Staphylococcus(MRS),-loctamase, minimal inhibitory concentration and so on,and analyzed the data.RESULTS There were 10 species of all 118 strains of staphylococci,and the coagulase positive and negative rates were 43.2% and 56.8%, respectively

5、. Staphylococci had high resistance to antimicrobial agents,especially MRSA and MRSE. The distribution of staphylococcal species varies in different diseases,and there was evident relationship between them. CONCLUSIONS Staphylococcus is one of the main pathogens leading to nosocomial infections.It i

6、s very important to use antibiotics properly for infection diseases control and hospital infection management.Key words: Nosocomial infection; Staphylococcus; Sensitivity tests醫(yī)院感染資料表明葡萄球菌所致醫(yī)院感染病例頗多，臨床治療較為棘手1，2。為有效控制該菌所致醫(yī)院感染的發(fā)生率，并為臨床用藥提供參考，我們將近兩年來(lái)本院發(fā)生醫(yī)院感染患者118例的標(biāo)本中分離出來(lái)的118株葡萄球菌，進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)分析，現(xiàn)將情況報(bào)告如下。1材料與

7、方法1.1材料1.2方法3462結(jié)果2.1細(xì)菌鑒定結(jié)果經(jīng)詳細(xì)的生理生化試驗(yàn)，分離出金黃色葡萄球菌23株，占19.5%，中間型葡萄球菌28株，占23.7%，表皮葡萄球菌19株，占16%，溶血葡萄球菌15株，占12.7%，里昂葡萄球菌9株，占7.6%，人葡萄球菌7株，占5.9%，耳葡萄球菌7株，占5.9%，華納葡萄球菌3株，占2.6%，其余為腐生和柯氏葡萄球菌7株，占5.9%，共10種。2.2MRS檢測(cè)結(jié)果3種表型方法檢測(cè)葡萄球菌對(duì)苯唑青霉素耐藥性測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1，從結(jié)果可看出瓊脂篩選出MRS檢出率要高于其他2種，MRSA 23株，MRCNS 34株，合計(jì)占48.3%。2.3-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)結(jié)果118

8、株葡萄球菌-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生率為51.1%，其中凝固酶陽(yáng)性的葡萄球菌產(chǎn)酶率高，為72.6%。具體分布情況：MRSA 17株，MSSA 20株，MRCNS 13株，MSCNS 11株。2.4藥敏檢測(cè)及耐藥率觀察按瓊脂篩選法將118株葡萄球菌分成MRSA，MSSA，MRCNS，MSCNS采用瓊脂稀釋法分別測(cè)定了它們對(duì)青霉素等11種抗生素的MIC(表2)。表13種方法MRS結(jié)果比較菌種株數(shù)K-B法(mm)瓊脂稀釋法(MIC mgml)瓊脂篩選法131112102424 h耐藥48 h耐藥凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌513012030212328凝固酶陰性葡萄球菌673622937303433  

9、;   表2118株葡萄球菌對(duì)11種抗生素最小抑菌濃度及耐藥率(%)抗生素MIC(gml)MRSAMSSAMSCNSMRCNS株數(shù)耐藥率株數(shù)耐藥率株數(shù)耐藥率株數(shù)耐藥率青霉素2.02087.01760.73191.22060.6氨芐西林2.01982.61657.12985.31854.5紅霉素18.01669.61450.02367.61751.5頭孢唑林32.01773.9932.12058.81545.5阿米卡星64.0521.727.11132.426.1諾氟沙星16.023100.02175.03294.13090.9環(huán)丙沙星4.02191.31864.23191.

10、22369.7復(fù)方新諾明76.02295.72278.63294.13193.9阿莫西林克拉維酸8.0730.4725.01132.4927.3頭孢哌酮舒巴坦50.0313.027.1720.6412.1去甲萬(wàn)古霉素0.500.000.000.000.02.5病歷資料收集根據(jù)標(biāo)本來(lái)源，共收集118份完整的住院患者資料，其中外科39份，腫瘤科28份，糖尿病患者24份，婦產(chǎn)科12份，小兒科15份。外科病歷系傷口、手術(shù)創(chuàng)面或引流感染，腫瘤患者大多為繼發(fā)呼吸道或插入性感染，糖尿病患者多為繼發(fā)泌尿系感染，婦產(chǎn)、小兒科多為化膿性或肺部感染。分析以上病歷可看出MRS的分離率與患者住院時(shí)間及抗生素使用成正相關(guān)

11、。 3討論3.1葡萄球菌是醫(yī)院感染的主要病原菌之一我室分離的118株葡萄球菌均來(lái)自醫(yī)院感染患者。其發(fā)生率約占我院醫(yī)院感染患者的五分之一到四分之一。有資料表明，血漿凝固酶陽(yáng)性的葡萄球菌(SA)，特別是其中耐苯唑西林(MRSA)者，與醫(yī)院感染關(guān)系極為密切。MRSA在歐美造成頑固性醫(yī)院感染，開(kāi)始流行于60年代后期到70年代，耐藥性逐年增加，目前遍及全球。血漿凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)屬人體正常菌群，80年代后，隨著介入性診療手段的廣泛應(yīng)用、免疫抑制劑的廣泛使用及腫瘤、糖尿病等復(fù)雜的疾病基礎(chǔ)，使其成為重要的機(jī)會(huì)致病菌，并出現(xiàn)多重耐藥菌株7，8。耐苯唑西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)比例也逐年升高

12、，均成為難以控制的醫(yī)院感染菌。因此，做好葡萄球菌的監(jiān)測(cè)與鑒定，對(duì)控制醫(yī)院感染意義重大。3.2從菌株的致病性看合理使用抗生素至關(guān)重要通過(guò)我們收集的118例病歷資料看，金黃色及中間型葡萄球菌主要致傷口和術(shù)后感染；表皮葡萄球菌主要致泌尿系感染；溶血葡萄球菌主要致呼吸道感染；其它葡萄球菌呈均勻分布。這些來(lái)自醫(yī)院感染患者的菌株，其耐藥性較強(qiáng)。隨著患者住院天數(shù)的增加，抵抗力的逐漸降低，病情亦日趨加重，從抗生素的用量不斷加大、品種不斷更新，隨之使分離的菌株耐藥性不斷上升，使不少病例形成了抗生素廣泛大量使用與耐藥菌株的頑強(qiáng)遞增這樣一個(gè)惡性循環(huán)。由此看來(lái)，從對(duì)患者的治療之初，就應(yīng)根據(jù)致病菌株的特性，藥敏試驗(yàn)，合

13、理使用抗生素，切不可有絲毫的隨意性。做好環(huán)境條件和各項(xiàng)操作的嚴(yán)格消毒亦很重要。3.3通過(guò)藥敏試驗(yàn)和-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)為臨床用藥提供參考本試驗(yàn)表明，MRSA(MRCNS)的耐藥性明顯高于MSSA(MSCNS)，表現(xiàn)為多重耐藥，除對(duì)萬(wàn)古霉素完全敏感、對(duì)阿米卡星(丁胺卡那霉素)較敏感外，對(duì)其余抗生素均不理想，所以對(duì)其治療抗生素選擇范圍相當(dāng)狹窄。細(xì)菌學(xué)檢測(cè)中，嚴(yán)格區(qū)分MRSA(MRCNS)與MSSA(MSCNS)對(duì)于指導(dǎo)臨床用藥，是非常必要的。從MRSA與MSSA的產(chǎn)-內(nèi)酰胺酶的檢測(cè)中，產(chǎn)酶率分別為73.9%和71.4%，二者相比無(wú)明顯差異；同樣，MRCNS與MSCNS的產(chǎn)酶率分別為38.2%和33.3%

14、，亦無(wú)明顯差異，說(shuō)明-內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生與耐苯唑西林無(wú)關(guān)。對(duì)產(chǎn)酶的葡萄球菌給予酶抑制劑效果較好。3.4MRS方法學(xué)問(wèn)題通過(guò)K-B、瓊脂稀釋MIC法、瓊脂篩選法3種方法結(jié)果比較看，瓊脂篩選法的檢出率高于其它兩種方法，與國(guó)內(nèi)報(bào)道相符。此種方法是目前國(guó)內(nèi)公認(rèn)的檢測(cè)MRS的簡(jiǎn)便、快速、有效的一種方法。曹月升（河北省人民醫(yī)院， 河北 石家莊 050051）任玉璽（河北省人民醫(yī)院， 河北 石家莊 050051）張立志（河北省人民醫(yī)院， 河北 石家莊 050051）孫笑菊（河北省人民醫(yī)院， 河北 石家莊 050051）劉朱梅（河北省人民醫(yī)院， 河北 石家莊 050051）參考文獻(xiàn)1，李勝利, 張嬰元, 吳菊芳,

15、 等. 葡萄球菌醫(yī)院感染的調(diào)查研究J. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 1998, 8(2): 65.2，靳桂明, 張曉珍, 王穎群, 等. 金黃色葡萄球菌醫(yī)院感染的臨床和基因遺傳聚類分析J. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 1999, 9(3): 135.3，Kloos WE, Lambe DW Jr. Staphylococcus. In: Albert B, ed. Manual of clinical microbiologyM. 5th ed. Washington: American Society for Microbiology, 1991. 222.4，葉應(yīng)嫵, 王毓三. 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程M. 南京: 東南大學(xué)出版社, 1991. 404406.5，李仲興, 鄭家齊, 李家宏. 診斷細(xì)菌學(xué)M.