芳酸及其酯類藥物鑒別試驗

1、藥品檢驗技術(shù)課程單元教學設(shè)計情境：芳酸及其酯類藥物的分析（06） 任務(wù)：芳酸及其酯類藥物鑒別試驗(02）教學目標設(shè)計序號5上課地點理實一體化教室授課形式講授、學生操作練習教 學 目 標技能目標知識目標能夠依據(jù)藥典，對水楊酸類典型藥物進行鑒別，對苯甲酸類典型藥物進行鑒別，對布洛芬類典型藥物進行鑒別掌握芳酸及其酯類藥物鑒別試驗方法教 學 重 點能夠依據(jù)藥典，對水楊酸類典型藥物進行鑒別，對苯甲酸類典型藥物進行鑒別，對布洛芬類典型藥物進行鑒別教 學 難 點掌握芳酸及其酯類藥物鑒別試驗方法能力訓練任務(wù)及案例結(jié)合案例分析讓同學們更好的掌握芳酸及其酯類藥物鑒別試驗方法。例如：阿司匹林的鑒別取本品約0.1g，

2、加水10mL，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。分析：對氨基水楊酸鈉 對氨基水楊酸鈉加稀鹽酸呈酸性后，與三氯化鐵試液反應(yīng)，呈紫紅色。教學進程設(shè)計（下面各格均可合并）步驟教學內(nèi)容教學方法教學手段學生活動時間分配理論知識的講解藥物鑒別原理教師舉例、點評、歸納概括引出知識點。任務(wù)引導做好課堂筆記，認真思考分析原理。20分鐘案例分析例如：二氟尼柳膠囊鑒別分組實驗研究，讓同學們更好的掌握操作技能25分鐘一、水楊酸類藥物的鑒別1三氯化鐵反應(yīng)此反應(yīng)為芳環(huán)上酚性羥基的反應(yīng)，水楊酸、阿司匹林與對氨基水楊酸鈉的結(jié)構(gòu)中都具有酚羥基，可與三氯化鐵試液作用顯色。（1）水楊酸及其鹽 具有酚羥基的水楊酸及其鹽在中

3、性或弱酸性條件下，可與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成紫堇色配位化合物。其反應(yīng)式為：反應(yīng)適宜的pH值為46，在強酸性溶液中此配位化合物可分解。本反應(yīng)靈敏度高，適宜在稀溶液進行試驗。例1：水楊酸的鑒別取本品的水溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。（2）阿司匹林 阿司匹林分子結(jié)構(gòu)中無游離的酚羥基，不能直接與三氯化鐵試液反應(yīng)，需加水煮沸，酯鍵受熱水解后生成水楊酸，與三氯化鐵試液反應(yīng)，呈紫堇色。例2：阿司匹林的鑒別取本品約0.1g，加水10mL，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。（3）對氨基水楊酸鈉 對氨基水楊酸鈉加稀鹽酸呈酸性后，與三氯化鐵試液反應(yīng)，呈紫紅色。例3：對氨基水楊酸的鑒別取本品約10m

4、g，加水10mL溶解后，加稀鹽酸2滴使成酸性，加三氯化鐵試液1滴，應(yīng)顯紫紅色；放置3h，不得產(chǎn)生沉淀（與5-氨基水楊酸鈉的區(qū)別）貝諾酯與雙水楊酯加氫氧化鈉試液煮沸水解后都能與三氯化鐵試液發(fā)生反應(yīng)呈紫堇色。二氟尼柳加乙醇溶解后，與三氯化鐵試液反應(yīng)，呈深紫色，均可用于鑒別。2水解反應(yīng)阿司匹林在碳酸鈉試液中加熱，酯鍵水解生成水楊酸鈉和醋酸鈉，加過量稀硫酸酸化后，析出水楊酸白色沉淀，并有醋酸臭氣。沉淀物于100105干燥后，熔點為156161。其反應(yīng)式為：例4：阿司匹林的鑒別取本品約0.5g，加碳酸鈉試液10mL，煮沸2min后放冷，加過量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并發(fā)生醋酸的臭氣。3重氮化-偶合反應(yīng)

5、該反應(yīng)為對氨基水楊酸鈉芳伯氨基的反應(yīng)。對氨基水楊酸鈉具有芳伯氨基結(jié)構(gòu)，在酸性溶液中，與亞硝酸鈉試液進行重氮化反應(yīng)，生成的重氮鹽與堿性-萘酚偶合產(chǎn)生橙紅色沉淀。其反應(yīng)式為： （橙紅色）貝諾酯分子結(jié)構(gòu)中無芳伯氨基，但加酸水解后可產(chǎn)生芳伯氨基，在酸性溶液中，亦可發(fā)生重氮偶合反應(yīng)，產(chǎn)生橙紅色沉淀。其反應(yīng)式為：例5：貝諾酯的鑒別取本品約0.1g，加稀鹽酸5mL，煮沸，放冷，濾過，濾液顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)。4紫外-可見分光光度法水楊酸類藥物具有特征的紫外吸收光譜，常用于鑒別。如二氟尼柳分子結(jié)構(gòu)中具有苯環(huán)和羧基，其紫外吸收光譜具有一定的特征性，可用于鑒別。例6：二氟尼柳鑒別取本品，加0.1mol/L的鹽

6、酸乙醇溶液溶解并稀釋制成每1mL中含有20g的溶液，照紫外-可見分光光度法測定，在251nm與315nm的波長處有最大吸收，吸光度比值應(yīng)為4.24.6。5紅外分光光度法在中國藥典（2010年版）中，水楊酸、阿司匹林、貝諾酯、對氨基水楊酸均采用紅外分光光度法鑒別，其紅外吸收圖譜應(yīng)依次與藥典所附標準圖譜（光譜集57圖、5圖、42圖、132圖）一致。水楊酸的紅外吸收光譜見圖6-1，阿司匹林的紅外吸收光譜見圖6-2。圖6-1 水楊酸紅外吸收圖譜圖6-2 阿司匹林紅外吸收圖譜6薄層色譜法薄層色譜法設(shè)備簡單、操作簡便，具有分離功能，可排除制劑中輔料的干擾，可用于水楊酸類相關(guān)藥物的鑒別。中國藥典2010年版

7、（二部）中二氟尼柳膠囊的鑒別即采用該法。例7：二氟尼柳膠囊鑒別取本品的內(nèi)容物適量（約相當于二氟尼柳50mg），加甲醇5mL，振搖使二氟尼柳溶解，濾過，濾液作為供試品溶液；另稱取二氟尼柳對照品適量，用甲醇溶解制成每1mL中約含10mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法（附錄V B）試驗，吸取上述兩種溶液各5L，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以正己烷-二氧六環(huán)-冰醋酸（85:10:5）為展開劑，展開，晾干，置紫外燈（254nm）下檢視，供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應(yīng)與對照品溶液的主斑點相同。二、苯甲酸類藥物的鑒別1與三氯化鐵反應(yīng)（1）苯甲酸 苯甲酸的堿性水溶液或苯甲酸鈉的中性溶液，與三

8、氯化鐵試液生成堿性苯甲酸鐵的赭色沉淀。其反應(yīng)式為：其鑒別試驗方法為：取本品約0.2g，加0.4%氫氧化鈉溶液15mL，振搖，濾過，濾液中加三氯化鐵試液2滴，即生成赭色沉淀。（2）丙磺舒 丙磺舒與氫氧化鈉試液反應(yīng)生成鈉鹽，在中性溶液中，可與三氯化鐵試液反應(yīng)，形成米黃色沉淀，可用于鑒別。其反應(yīng)式為：其鑒別試驗方法為：取本品約5mg，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液0.2mL，用水稀釋至2mL（pH約5.06.0），加三氯化鐵試液1滴，即生成米黃色沉淀。2硫酸鹽反應(yīng)丙磺舒具有磺酰胺結(jié)構(gòu)，與氫氧化鈉共熔融，可分解生成亞硫酸鈉，經(jīng)硝酸氧化成硫酸鹽，而顯硫酸鹽反應(yīng)。例10：丙磺舒的鑒別取本品約0.1g，加氫

9、氧化鈉1粒，小火加熱熔融數(shù)分鐘，放冷，殘渣加硝酸數(shù)滴，再加鹽酸溶解使成酸性，加水少許稀釋，濾過，濾液顯硫酸鹽的鑒別反應(yīng)（附錄III）。3氧化反應(yīng)甲芬那酸的硫酸溶液，加熱后顯黃色，并有綠色熒光；與重鉻酸鉀試液反應(yīng)，呈深藍色，隨即變?yōu)樽鼐G色。4紫外-可見分光光度法（1）丙磺舒 取本品，加含有鹽酸的乙醇取鹽酸溶液（91000）2mL，加乙醇制成100mL制成每1mL中含20g的溶液，照紫外-可見分光光度法（附錄IV A）測定，在225nm與249nm的波長處有最大吸收，在249nm波長處的吸光度約為0.67。（2）甲芬那酸 取本品，加1mol/L鹽酸溶液-甲醇（1:99）混合液溶解并稀釋制成每1mL

10、中含20g的溶液，照紫外-可見分光光度法（附錄IV5紅外分光光度法中國藥典2010年版（二部）采用紅外分光光度法鑒別苯甲酸、丙磺舒，其紅外吸收光譜應(yīng)依次與藥典所附標準圖譜（光譜集233圖、73圖）一致。苯甲酸的紅外吸收譜圖見圖6-3，丙磺舒的紅外吸收譜圖見6-4。圖6-3 苯甲酸紅外吸收光譜圖圖6-4 丙磺舒紅外吸收光譜圖三、布洛芬類藥物的鑒別1紫外-可見分光光度法（1）布洛芬 取本品，加0.4%氫氧化鈉溶液制成每1mL中含0.25mg的溶液，在265nm與273nm的波長處有最大吸收，在245nm與271nm的波長處有最小吸收，在259nm的波長處有一肩峰。其吸收曲線見圖6-5。波長/nm圖6-5 布洛芬的紫外吸收曲線（2）非諾洛芬鈣 取本品約0.1g，加冰醋酸5mL溶解后，