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文檔簡介
1、不規(guī)則抗體篩檢卡標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程一、 準(zhǔn)備工作(一)微柱凝膠試劑卡的準(zhǔn)備:觀察外觀,如有干膠、雜質(zhì)、氣泡不可使用,之后將卡放置室溫(1825)平衡,再用專用離心機離心5分鐘。(二)檢測標(biāo)本的準(zhǔn)備:1紅細(xì)胞懸液的制備:將篩檢紅細(xì)胞或譜細(xì)胞配成0.8%濃度的懸液。2血清標(biāo)本的制備:采集被檢對象靜脈血,放入含兔腦粉或其它促凝劑的試管中,10分鐘后離心,取上清;或者靜脈血采入無抗凝劑試管中,4放置 12小時,或37放置2小時后離心,2000r/min,10分鐘,取上清(該上清不得有絮狀物或沉淀)。二、操作步驟1. 將準(zhǔn)備好的不規(guī)則抗體篩檢卡做好標(biāo)記;2. 將配好的篩檢細(xì)胞或譜細(xì)胞懸液加入標(biāo)好的微管中,各一
2、滴(或50l);3. 分別立即加入被檢者血清1滴(或50l);4. 加樣后的試劑卡,置37孵育器中孵育15分鐘;5. 使用專用離心機離心5分鐘(900rpm2分鐘,1500 rpm3分鐘),取出肉眼觀察結(jié)果。結(jié)果判定:根據(jù)所提供的篩檢紅細(xì)胞或譜細(xì)胞的反應(yīng)格局來判定結(jié)果例:按(-、(4+、(-)的實驗結(jié)果及提供如下的篩檢紅細(xì)胞反應(yīng)格局來分析篩檢細(xì)胞反應(yīng)格局DCEceJkaJKbMNSsFyaFybDiaKkLeaLebP1+陰性結(jié)果用排除法,陽性結(jié)果用可能包含法。以前五種抗原為例:(-: 可排除D、C、e;(4+:判斷可能含有D、C、E、c、e;(-): 可排除D、C、c、e;綜上,可認(rèn)為:此樣
3、品血清中可能含有-E三、 注意事項1應(yīng)用直接抗人球蛋白微柱凝膠免疫試驗檢測病人紅細(xì)胞時,一定要用適量EDTA的試管采血液標(biāo)本,該標(biāo)本不能放入4-10冰箱保存,以避免紅細(xì)胞在病人體外致敏所致假陽性反應(yīng)。2紅細(xì)胞標(biāo)本一定不能被細(xì)菌污染,否則出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。盡可能應(yīng)用當(dāng)日采集的新鮮血做本試驗。如不得不用過夜血或陳舊血,則必須首先用該標(biāo)本做陰性對照試驗,以確定該標(biāo)本是否可以做本實驗。3血清標(biāo)本:血清標(biāo)本必須充分去纖維蛋白,否則標(biāo)本中纖維蛋白在微柱凝膠中析出,阻礙陰性紅細(xì)胞沉淀,呈假陽性反應(yīng)。4如在微柱凝膠管中出現(xiàn)溶血現(xiàn)象,強烈提示為紅細(xì)胞抗原抗體陽性反應(yīng),也不排除其他原因所致溶血,故對此標(biāo)本一定認(rèn)真分析,并向上級主管技術(shù)人員報告并討論其原因。5每日試驗前,先取出微柱凝膠卡放置至室溫。6試劑卡應(yīng)放在1
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