常用色譜柱簡介

1、常用色譜柱簡介氣相色譜毛細(xì)柱(鍵合,聚二甲基硅氧烷HP-1,DB-1,P-1,CP-SIL5CB,Ultra-1,007-1,RTx-1,AT-1類似固定相:SE-30,SP-2100,OV-1,OV-101,使用溫度:-60-320應(yīng)用范圍:烷烴,芳烴,多環(huán)芳烴,醇,酚,酮,酯,醛,胺,鹵代烴,吡啶,糖衍生物,氨基酸衍生物,維生素衍生物,鎮(zhèn)痛藥,農(nóng)藥,溶劑,膽固SPB-50型中等極性柱醇,香料,咖啡,食品添加劑等。(鍵合, 50%二苯基,50%二甲基聚硅氧烷對照品牌:HP-50,HP-17,DB-17,RTx-50,AT-50 SPB-5型弱極性柱類似固定相:OV-17, SP-2250,使

2、用溫度:30-310(鍵合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷應(yīng)用范圍:烷烴,低沸點芳烴,多環(huán)芳烴,醇,甘對照品牌:HP-5,DB-5,BP-5,CP-SIL 8CB,油三酸酯,喹啉,鹵素化合物,香料,農(nóng)藥,酯, Ultra-2, ,RTx-5,AT-5鎮(zhèn)痛藥,除草劑等。類似固定相:SE-54,SE-52,OV-73 使用溫度:-60-320PTE-5,PTE-5QTM型弱極性柱應(yīng)用范圍:烷基苯,多環(huán)芳烴,醇,酚,酮,脂肪(MS專用柱,鍵合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷酸酯,苯二甲酸酯,硝基芳烴,芳胺,烷基胺,聯(lián)對照品牌:HP-5 MS,DB-5 MS, DB-5.625,XTI-5,苯胺,鹵代烴,

3、多氯聯(lián)苯,糖類衍生物,維生素衍BPX625,半揮發(fā)污染物分析柱(US EPA方法525,生物,有機酸,鎮(zhèn)痛藥,農(nóng)藥,抗組胺藥,溶劑, 625.5,625生物堿,防腐劑,香料等。類似固定相:SE-54,SE-52 使用溫度:-60-320應(yīng)用范圍:多氯聯(lián)苯,胺,有機磷,有機氯農(nóng)藥, SUPELCOWAX 10型極性柱含氯除草劑,酚,苯胺,香料等。(鍵合,聚乙二醇二萬對照品牌:HP-Wax,DB-Wax,BP-20,CP-Wax 52CB, SPB-1701型中等極性柱HP-INNO Wax,AT-Wax(鍵合, 14%氰丙基,86%二甲基聚硅氧烷類似固定相:PEG-20M, CARBOWAX-2

4、0M,使用溫對照品牌:HP-1701,DB-1701,RTx-1701,AT-1701,度:35-280BP-10,CPSil19CB應(yīng)用范圍:低沸點芳烴,醇,酮,酸,酯,醛,醚,類似固定相:OV-1701,SP-2250 使用溫度:室溫-280乙二醇,丙二醇,甘油,吡啶,胺,亞硝胺,鹵代烴,膽汁酸衍生物,冰片,薄荷,精油,香料,酒,應(yīng)用范圍:醇,鹵素化合物,有機氯農(nóng)藥,酸性藥苯乙烯,茶,溶劑等。物,有機磷,除草劑等。Nukol型極性柱SPB-608型柱(鍵合, 改性聚乙二醇(農(nóng)殘/除草劑分析專用柱對照品牌:HP-FFAP,DB-FFAP,AT-1000,BP-21對照品牌:HP-608,DB

5、608,BP608類似固定相:FFAP,SP-1000,OV-351使用溫度:使用溫度:室溫-30060-200應(yīng)用范圍:多氯聯(lián)苯,有機磷農(nóng)藥,有機氯農(nóng)藥,應(yīng)用范圍:脂肪酸,低沸點芳烴,醇,酯,酚,腈,除草劑,擬除蟲菊酯等。固體固定相及分類,什么是固定液,對固定液有哪些要求指直接裝填到色譜柱中作為固定相的具有活性的多孔性固體物質(zhì)。固體固定相大體可分為三類:第一類是吸附劑。如:分子篩、硅膠、活性炭、氧化鋁等;第二類是高分子聚合物。如國內(nèi)的GDX型高分子多孔微球,國外P orapak系列等;第三類是化學(xué)鍵合固定相。在氣相色譜中,通常是將固定液涂敷在載體表面上。采用化學(xué)鍵合固定相分析極性或非極性物質(zhì)

6、通常都能夠得到對稱峰,柱效很高,固定相的熱穩(wěn)定性也有所改善。一般是一種高沸點的有機物的液膜,通過對不同組份的不同分子間的作用,使組份在色譜柱中得到分離。對氣相色譜用的固定液,一般有如下幾點要求:1、在操作溫度下蒸氣壓低,熱穩(wěn)定性好,與被分析物理或載氣不產(chǎn)生不可逆反應(yīng);2、在操作溫度下呈液態(tài),而且粘度愈低愈好。物質(zhì)在高粘度的固定液中傳質(zhì)速度慢,柱效率因而降低。這決定固定液的最低使用溫度;3、能牢固地附著在載體上,并形成均勻和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的薄層;4、被分離的物質(zhì)必須在其中有一定的溶解度,不然就會很快地被載氣帶走而不能在兩相之間進(jìn)行分配;5、對沸點相近而類型不同的物質(zhì)有分離能力,即保留一種類型化合物的能

7、力大于另一種類型。這種分離能力即是固定液的選擇性。使用擔(dān)體為何要進(jìn)行處理?一般處理的方法有哪些以及擔(dān)體的選擇常用的擔(dān)體表面并非惰性,它具有不同程度的催化作用和吸附性(特別是固定液含量低時和分離極性物質(zhì)時造成峰拖尾和柱效下降,保留值改變等影響,因而需要預(yù)處理。現(xiàn)將一般處理方法簡述如下:1、酸洗法:用濃鹽酸加熱處理擔(dān)體20-30分鐘,然后用自來水沖洗至中性,再用甲醇漂洗,烘干備用。此法主要除去擔(dān)體表面的鐵等無機物雜質(zhì)。2、堿洗法:用10%的氫氧化鈉或5%的氫氧化鉀-甲醇溶液浸泡或回流擔(dān)體,然后用水沖洗至中性,再用甲醇漂洗,烘干備用。堿洗的目的是除去表面的三氧化二鋁等酸性作用點,但往往在表面上殘留微

8、量的游離堿,它能分解或吸附一些非堿性物質(zhì),使用時要注意。3、硅烷化:用硅烷化試劑和擔(dān)體表面的硅醇、硅醚基團(tuán)起反應(yīng),除去表面的氫鍵結(jié)合能力,可以改進(jìn)擔(dān)體的性能。常用的硅烷化試劑有二甲基二氯硅烷和六甲基二硅胺。4、釉化:把欲處理的擔(dān)體在2、3%的碳酸鈉-碳酸鉀(1:1水溶液中浸泡一天,烘干后先在870度下煅燒3、5小時,然后升溫到980度煅燒約4 0分鐘。經(jīng)過這樣處理,擔(dān)體表面形成一層玻璃化的釉質(zhì),故稱“釉化擔(dān)體”。這種擔(dān)體的吸附性能小,強度大,當(dāng)固定液中加入少量的去尾劑后,能分析如醇、酸等極性較強的物質(zhì)。但對非極性物質(zhì)柱效能則稍有下降。此外甲醇和甲酸等物質(zhì)在釉化擔(dān)體上有一定的不可逆化學(xué)吸附,在定

9、量分析時應(yīng)予以注意。其他純化方法:凡是用化學(xué)反應(yīng)來除去活性作用點或用物理復(fù)蓋以達(dá)到純化擔(dān)體表面性質(zhì)的方法都可以使用。十六、常用的擔(dān)體目數(shù)為多少?答:常用的4-6毫米內(nèi)徑的色譜柱:對于較長色譜柱,選用擔(dān)體目數(shù)一般為40-80目;對于較短色譜柱選用擔(dān)體目數(shù)一般為80-100目(每英寸內(nèi)的篩孔數(shù)目為目各種擔(dān)體,名目繁多。在常用硅藻土擔(dān)體中: 紅色擔(dān)體(如6201、201,可用于非極性或弱極性物質(zhì)的分離。白色擔(dān)體(如101可用于極性物質(zhì)或堿性物質(zhì)。釉化紅色擔(dān)體(如301可用于中等極性物質(zhì)。硅烷化白色擔(dān)體可用于強極性氫鍵型物質(zhì)如廢水測定。分離酸性物質(zhì),如酚類,要用酸洗處理的擔(dān)體。分離堿性物質(zhì),如乙醇胺,

10、要用堿洗處理的擔(dān)體。微量分析要用硅烷化的擔(dān)體。有些特殊的情況下要用特殊的擔(dān)體,如氟擔(dān)體分離異氰酸酯類。但是在普通的常量分析中,對擔(dān)體可以不必過份講究,甚至如耐火磚粉粒,玻璃珠砂和海沙也可以使用氣相色譜中什么叫擔(dān)體?對擔(dān)體有哪些要求以及分類擔(dān)體是一種多孔性化學(xué)惰性固體,在氣相色譜中用來支撐固定液。對擔(dān)體有如下幾點要求:1、表面積較大,一般應(yīng)在0、5-2米/克之間;2、具有化學(xué)惰性和熱穩(wěn)定性;3、有一定的機械強度,使涂漬和填充過程不引起粉碎;4、有適當(dāng)?shù)目紫督Y(jié)構(gòu),利于兩相間快速傳質(zhì);5、能制成均勻的球狀顆粒,利于氣相滲透和填充均勻性好;6、有很好的浸潤性,便于固定液的均勻分布。完全滿足上述要求的擔(dān)

11、體是困難的,人們在實踐中只能找出性能比較優(yōu)良的擔(dān)體。擔(dān)體通常分為硅藻土和非硅藻土兩大類,每一類又有種種小類。1、硅藻土類型:(1白色的:表面積小,疏松,質(zhì)脆,吸附性能小,經(jīng)適當(dāng)處理,可分析強極性組分;(2紅色的:有較大的表面積和較好的機械強度,但吸附性較大。2、非硅藻土類型:(1氟擔(dān)體:表面惰性好,可用來分析高極性和腐蝕性物質(zhì),但裝柱不易,柱效率低些。(2玻璃微球:表面積小,用它做擔(dān)體柱溫可以大大降低,而分離完全且快速。但涂漬困難,柱效低。(3多孔性高聚物小球:機械強度高,熱穩(wěn)定性好,吸附性低,耐腐蝕,分離效率高,是一種性能優(yōu)良的新型色譜固定相。(4炭分子篩:中性,表面積大,強度高,祛壽命長,

12、在微量分析上有無比的優(yōu)越性。(5活性炭:可以單獨做為固定相。(6沙:主要用于分離金屬。常用擔(dān)體有:101擔(dān)體:為白色硅藻土擔(dān)體;102擔(dān)體:為白色硅藻土擔(dān)體;celite545:為白色硅藻土擔(dān)體;201擔(dān)體:為紅色硅藻土擔(dān)體;6201擔(dān)體:為紅色硅藻土擔(dān)體;C-22保溫磚:為紅色硅藻土擔(dān)體;chromosorb:為紅色硅藻土擔(dān)體。色譜柱管材料應(yīng)根據(jù)什么原則選擇?常用的柱管是由什么材質(zhì)制成的對色譜柱管材質(zhì),應(yīng)按如下要求選擇:1、應(yīng)與固定相、試樣、載氣不起化學(xué)反應(yīng)。2、要易于加工成型。管內(nèi)壁應(yīng)光滑,橫截面應(yīng)均勻呈圓形。一般色譜柱管形狀呈U型或螺旋形,大多由銅、不銹鋼,玻璃等材質(zhì)制成新柱管應(yīng)先用稀酸

13、或稀堿(1:1鹽酸或氫氧化鈉洗滌,以除去油污等臟垢,而后用自來水沖洗,繼而用蒸餾水沖洗至中性,再用干凈的空氣吹洗并烘干后,即可使用了。氣相色譜分析中柱長、柱內(nèi)徑、柱溫、載氣流速、固定相、進(jìn)樣等操作條件對分離的影響?操作條件對于色譜分離有很大影響。1、柱長,柱內(nèi)徑:一般講,柱管增長,可改善分離能力,短則組分餾出的快些;柱內(nèi)徑小分離效果好,柱內(nèi)徑大處理量大,但柱內(nèi)徑過大,將導(dǎo)致?lián)w不能均勻地分布在色譜柱中。分析用柱管一般內(nèi)徑為3-6毫米,柱長為1-4米。2、柱溫:是一個重要的操作變數(shù),直接影響分離效能和分析速度。選擇柱溫的根據(jù)是混合物的沸點范圍,固定液的配比和鑒定器的靈敏度。提高柱溫可縮短分析時間

14、;降低柱溫可使色譜柱選擇性增大,有利于組分的分離和色譜柱穩(wěn)定性提高,柱壽命延長。一般采用等于或高于數(shù)十度于樣品的平均沸點的柱溫為較合適,對易揮發(fā)樣用低柱溫,不易揮發(fā)的樣品采用高柱溫。3、載氣流速:載氣流速是決定色譜分離的重要原因之一。一般講流速高色譜峰狹,反之則寬些,但流速過高或過低對分離都有不利的影響。流速要求要平穩(wěn),常用的流速范圍每分鐘在10-100亳升之間。4、固定相:固定相是由固體吸附劑或涂有固定液的擔(dān)體構(gòu)成。(1固體吸附劑或擔(dān)體粗細(xì):一般采用40-60目、60-80目、80-100目。當(dāng)用同等長度的柱子,顆粒細(xì)的分離效率就要比粗的好些。(2固定液含量:固定液含量對分離效率的影響很大,

15、它與擔(dān)體的重量比一般用15%-25%。比例過大有損于分離,比例過小會使色譜峰拖尾。5、進(jìn)樣:一般講進(jìn)樣快,進(jìn)樣量小,進(jìn)樣溫度高其分離效果好。對進(jìn)液體樣,速度要快,汽化溫度要高于樣品中高沸點組分的沸點值,一次汽化,保證色譜峰形不致展寬、使柱效高。當(dāng)進(jìn)樣量在一定限度時,色譜峰的半峰寬是不變的。若進(jìn)樣量過多就會造成色譜柱超載。一般講柱長增加四倍,樣品的許可量增加一倍。對于常規(guī)分析,液體進(jìn)樣量為1-20微升;氣體進(jìn)樣量為0、1-5毫升。新裝填的色譜柱為什么要老化一段時間才能使用裝填好的色譜柱,連接于儀器上后,應(yīng)先試壓,試漏,而后在恒定的溫度下用載氣吹洗數(shù)小時后承受分析,一般稱此為柱子的老化過程。老化的

16、目的是把固定相的殘存溶劑,低沸點雜質(zhì),低分子量固定液等趕走,使記錄器基線平直,并在老化溫度下使固定液在擔(dān)體表面有一個再分布過程,從而涂得更加均勻牢固。裝填好的色譜柱,經(jīng)過老化一段時間后,柱效及性能均穩(wěn)定了,這樣才可使用。色譜柱失效主要表現(xiàn)為色譜分離不好和組分保留時間顯著變短。色譜柱失效的主要原因是:對氣固色譜來說是固定相的活性或吸附性能降低了,對氣液色譜來說,是使用過程中固定液逐漸流失所致。氣相色譜柱的檢定,柱效測定在線色譜柱的檢定:可以在每次分析產(chǎn)品時進(jìn)行檢定,主要考察峰對稱性、柱效、分離度、保留時間等內(nèi)容,具體參數(shù)可以在相應(yīng)產(chǎn)品的分析方法中規(guī)定,如果達(dá)不到分析方法中的規(guī)定指標(biāo),則該色譜柱不

17、能用做該產(chǎn)品的分析。標(biāo)準(zhǔn)試液檢定:檢定周期:在線檢定不合格時,再生處理前后,需要報廢前。檢定方法- 檢定溶液配制:乙二醇、對氯苯酚、壬酸甲酯、4-丙基苯胺、正十三烷、十一烷醇、十五烷的250ppm二氯甲烷溶液。- 分析條件:氣化室溫度為260,檢測器(FID溫度為320,恒流速為1.0ml/min,柱溫箱恒定為130,進(jìn)樣量為1,分流比為1:50,運行15分鐘。結(jié)果評價:每次進(jìn)樣一針,分析完畢打印出一張帶有系統(tǒng)評價的譜圖,其中柱效和對稱因子以十五烷峰計。其中最小分離度R>1.5;十五烷對稱因子S在0.80-1.50之內(nèi);十五烷柱效>3000m-1。氣相色譜柱再生方法常使用的氣相色譜

18、柱每半年或發(fā)現(xiàn)性能不佳時,對色譜柱進(jìn)行再生、老化處理。對于大多數(shù)色譜柱使用的是健合、交聯(lián)的固定相,可以用甲醇、二氯甲烷和己烷沖洗?；蛘咧匦掳凑涨笆龇椒ㄖ匦逻M(jìn)行色譜柱的老化處理。氣相色譜柱老化方法柱子第一次使用時,必須進(jìn)行色譜柱的老化。目的是徹底除去柱子中的殘留溶劑和某些揮發(fā)性物質(zhì),另一方面是促進(jìn)固定液均勻牢固地分布在但體的表面上。根據(jù)使用條件和固定液膜厚、極性等設(shè)置恒溫老化或程序升溫老化。一般來講,固定液膜厚越厚、極性越強,需要的老化時間越長。老化溫度要大于實際使用溫度而低于柱子的最高使用溫度20左右。項目經(jīng)理接到項目所需新柱子后,根據(jù)不同的柱子進(jìn)行適宜的老化,直至升到最高老化溫度,保持一段時

19、間后,色譜儀基線保持平穩(wěn)即可。怎樣選擇液相色譜柱現(xiàn)代高效液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,必須對此有一定的認(rèn)識和了解。一.硅膠基質(zhì)填料:1.正相色譜正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica以及其它具有極性官能團(tuán),如胺基團(tuán)(NH2,APS和氰基團(tuán)(CN,CPS的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH或其它極性基團(tuán)極性較強,因此,分離的次序是依據(jù)樣品中各組份的極性大小,即極性較弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,如:正己烷(Hexane、氯仿(Chloroform、二氯甲烷(Methylene Chloride等。2.反相色譜反相色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì)， 表面鍵合有極性相對較弱的官能團(tuán)的鍵合 相。反相色譜所使用的流動相極性較強，通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混 合物。 樣品流出色譜柱的順序是極性較