臨床基礎(chǔ)檢驗實驗室日常質(zhì)量控制方案

1、臨床基礎(chǔ)檢驗實驗室日常質(zhì)量控制方案日期:2016-02-28 10:25:36來源:中華檢驗醫(yī)學網(wǎng)實驗室對實驗活動中的所有環(huán)節(jié)如人員、試劑、校準、校準驗證、內(nèi)部質(zhì)控、室間質(zhì)控、儀器維護等等實行全面質(zhì)量控制，確保檢測結(jié)果的質(zhì)量。實驗室對下列各項活動均有相應(yīng)的程序與文件詳細規(guī)定如何操作及具體細節(jié)，現(xiàn)將主要控制要素及要點羅列如下：一、目的規(guī)范室內(nèi)、室間日常質(zhì)控工作，監(jiān)控和評價分析過程中的質(zhì)量，確保向服務(wù)對象提供的檢驗結(jié)果正確、可靠。二、檢測方法的選擇1、實驗室的檢測項目優(yōu)先使用國際、區(qū)域或國家標準發(fā)布的方法，或其他公認的檢驗方法（如權(quán)威教科書、書刊、雜志等），以及經(jīng)FDA批準的檢驗試劑盒或儀器所規(guī)定

2、的方法。2、 實驗室對所選定的試驗方法的各項技術(shù)參數(shù)如精密度、準確度、可報告范圍等進行驗證，以滿足檢測質(zhì)量的要求。3、 每項檢測均制定相應(yīng)的試驗標準操作規(guī)范(SOP),以指導工作人員正確操作。二、室內(nèi)質(zhì)量控制1、實驗室進行實驗操作時均進行室內(nèi)質(zhì)控，以控制檢測質(zhì)量。定量試驗每次至少二個濃度水平，定性試驗至少做一個陰性質(zhì)控和臨界值（或陽性）質(zhì)控。每個工作日至少做一次質(zhì)控。2、 質(zhì)控樣本應(yīng)與病人樣本同樣操作。在報告試驗結(jié)果之前，均評估質(zhì)控結(jié)果是否失控。只有在質(zhì)控結(jié)果驗證在可接受范圍時才可報告臨床試驗結(jié)果。3、 室內(nèi)質(zhì)控應(yīng)制定相應(yīng)的接受與拒絕標準，當質(zhì)控失控后，應(yīng)有相應(yīng)的糾正活動，并形成詳細的記錄。4

3、、 組長至少每月對臨檢組所有項目的質(zhì)控結(jié)果回顧一次。三、室間質(zhì)評1、實驗室檢測項目大部分參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心、浙江省臨檢中心和美國病理學家協(xié)會（CAP）組織的室間質(zhì)評。以驗證檢測結(jié)果的準確性。對不能參加室間質(zhì)評的項目，則采取與外部實驗室比對、內(nèi)部比對等措施來控制質(zhì)量。2、室間質(zhì)評樣本與病人樣本同樣操作，在室間質(zhì)評結(jié)果上報前禁止與其他實驗室進行室間質(zhì)評結(jié)果的交流活動或室間質(zhì)評物檢測。4、 室間質(zhì)評結(jié)果判斷為0或判斷為unacceptable（不可接受），此類結(jié)果表明實驗室該項檢測值離群。實驗室需評估實驗操作過程，探討可能的原因并予以糾正，并形成詳細記錄。5、 室間質(zhì)評結(jié)果未得分時亦應(yīng)采取自評等

4、形式判斷檢測結(jié)果是否離群，必要時采取相應(yīng)的糾正措施，并形成記錄。四、儀器1、實驗室主要檢測或輔助儀器設(shè)備應(yīng)驗收合格后才能投入使用，并單獨建立相應(yīng)的檔案。2、設(shè)備的使用、維護、校準和保養(yǎng)均按該設(shè)備的相關(guān)要求進行，并按廠商的推薦要求定期對關(guān)鍵操作參數(shù)進行檢查、校準、校準驗證和維護，并保留相應(yīng)的記錄。3、 進行標本檢測時儀器設(shè)備應(yīng)處于正常工作狀態(tài)。當設(shè)備發(fā)生故障時立即進行維修，不能立即維修的設(shè)備需貼上停用標識，警示其他工作人員不要操作該儀器。五、試劑1、實驗室試劑必須在有效期內(nèi)按廠商的推薦使用，試劑若發(fā)生變質(zhì)、過期、失效等應(yīng)立即報廢，不得用于臨床標本檢測。2、試劑按照試劑廠商推薦要求貯存。冰箱、冷柜

5、和烘箱的溫度都應(yīng)每天檢查并記錄，當溫度出控時，應(yīng)采取相應(yīng)的糾正預(yù)防措施。3、 不同批號試劑不能混用，除非廠商有特別說明。4、 試劑標簽至少包含以下要素：內(nèi)容和數(shù)量、濃度或滴度、貯存要求、配制日期、有效期。所有放進儀器的試劑都應(yīng)標明開啟日期。5、 新試劑批號在用于病人結(jié)果檢測前必先進行驗證。驗證的材料推薦用病人的標本，避免基質(zhì)效應(yīng)的產(chǎn)生。六、人員1、實驗室工作人員具備相應(yīng)的資質(zhì)和能力，滿足實驗檢測的需要。2、新員工入職后一般三個月內(nèi)、老員工輪崗到新科室后一般一個月內(nèi)需進行培訓和考評。3、培訓/考評內(nèi)容包括生物安全知識、文件體系構(gòu)架與內(nèi)容、儀器設(shè)備操作與維護、標本采集要求與標本狀態(tài)的識別、檢測項目

6、的操作、檢測結(jié)果報告等。4、 新員工正式錄用后半年內(nèi)，老員工工作一年內(nèi)至少進行一次工作能力評估。5、 評估方法有進行試驗操作、理論考核、觀察常規(guī)操作是否滿足作業(yè)指導書的要求、回顧關(guān)鍵要素的記錄等。6、 如果員工在評估中不合格，則需對該員工不合格的部分進行再培訓，并重新考核該部分，直至滿足要求。七、校準1、校準品的要求：校準的作用是為了減少或消除儀器、試劑等造成的系統(tǒng)誤差。實驗室所要求的校準品分為以下幾類：1.1 用于校正分析測量系統(tǒng)的校準品；1.2 由廠家提供的用于校準驗證的物質(zhì)（最佳選擇，因為這些物質(zhì)不僅具有靶值，而且方法也是一致的）；1.3 以前檢測過的沒有改變的臨床標本；1.4 具有基質(zhì)

7、和靶值適合的一級標準品、二級標準品或標準參考物質(zhì)；1.5 具有基質(zhì)和靶值適合的能力比對物質(zhì)或是能力比對驗證了的物質(zhì)；1.6 生產(chǎn)廠家特別聲明的可以用于校準驗證的質(zhì)控品。2、校準品的驗證：主要是針對不同批號的校準品進行驗證，在使用新批號的校準品前均對其進行校準驗證。3、當發(fā)生下列情況時進行校準3.1儀器安裝調(diào)試完畢，投入使用前必須對儀器進行校準，校準的過程應(yīng)參考生產(chǎn)廠家的要求進行校準。3.2當質(zhì)量控制資料提示需進行校準時，如質(zhì)控反映出異常的趨勢或偏移，或者超出了實驗室規(guī)定的接受限，或發(fā)現(xiàn)該方法/儀器/測量系統(tǒng)不穩(wěn)定時，而當采取一般性糾正措施后，這些問題不能得到正確的識別和糾正時。3.3試劑種類改

8、變，或者批號更換的情況下；實驗室如果能說明試劑批號的改變不影響結(jié)果的檢測，則可以不進行校準。3.4儀器或者檢驗系統(tǒng)進行一次大的預(yù)防性維護或者更換了重要部件。3.5當校準計劃需要時。4、校準頻率：至少半年進行一次有效的校準（包括校準、校準驗證、再校準（必要時）、AMR確認的全過程）。八、校準驗證實驗室校準驗證包含兩個方面的內(nèi)容，即AMR的確認和校準有效性確認。1、AMR的確認：是確認實驗系統(tǒng)是否能夠正確恢復(fù)超過AMR范圍的被分析物質(zhì)的濃度和活性的過程。1.1 如果校準品的濃度范圍包括接近AMR的低值、中間值和高值的濃度范圍，并且校準在實驗室的可接受范圍之內(nèi)，AMR就被確認了，而不需要其他的過程；

9、如果校準品沒有包括全部的AMR，或者實驗室超過了廠家所給予的AMR的范圍，則要用接近AMR的最低值和最高值的物質(zhì)進行確認。1.2 過程：直接使用商業(yè)化的線性標準品或?qū)ｉT用于線性評估的系列濃度樣本，至少三個樣本，且分別接近AMR的低值、中間值和高值。然后每個濃度測定兩次，取平均值構(gòu)建線性函數(shù)，如下圖所示。如果是線性，則表明期望的濃度已經(jīng)被恢復(fù)；如果是非線性的情況，只取線性部分進行分析。2、校準有效性確認2.1按照廠家提供的驗證過程進行驗證；2.2 將校準物質(zhì)作為未知樣本進行實驗，并確定是否恢復(fù)了正確的靶值；2.3 用基質(zhì)適合的具有靶值的物質(zhì)進行實驗；2.4 每種定量試驗方法均須在其校準文件中規(guī)定

10、表示校準有效性的可接受范圍以界定校準是否有效。分述臨檢常規(guī)實驗室室內(nèi)質(zhì)量控制方案，包括以下四類檢測系統(tǒng)1、血常規(guī):希森美康HST-302流水線（XE-2100全自動血液分析儀、SP-1000i全自動血液推片機）、貝克曼LH-780全自動血細胞分析儀檢測項目室內(nèi)質(zhì)量控制2、血涂片顯微鏡檢查室內(nèi)質(zhì)量控制3、尿常規(guī):尿干化學：京都尿干化學分析儀(AX-4280)檢測項目室內(nèi)質(zhì)量控制；尿有形成分：希森美康UF-1000i尿有形成分分析儀檢測項目室內(nèi)質(zhì)量控制4、尿沉渣顯微鏡檢查室內(nèi)質(zhì)量控制一、血常規(guī)日常質(zhì)量控制方案1、檢測系統(tǒng)血常規(guī)所有檢測項目均在全自動檢測儀器上進行檢測，主要檢測系統(tǒng)包括希森美康HST

11、-302流水線及配套試劑與校準品、貝克曼LH-780全自動血細胞分析儀及配套校準品與試劑等。所有這些檢測系統(tǒng)均進行了精密度、準確度、生物參考區(qū)間、分析測量范圍等的方法學驗證試驗。2、儀器維護嚴格按照廠家的要求對儀器進行維護,包括每日的維護、每周的維護、每月的的維護及每年廠家的巡回，每臺儀器均有相應(yīng)的維護程序來指導操作。3、質(zhì)量控制3.1質(zhì)控項目：血常規(guī)包括RBC, HGB, HCT, WBC, PLT，MCV，MCH，MCHC（紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、紅細胞容積、白細胞計數(shù)、血小板計數(shù)、平均紅細胞體積、平均血紅蛋白量、平均血紅蛋白濃度）八個項目。3.2校準：每個項目的校準都遵循制造商的建議進行,

12、每個項目都有其校準的周期及要求。每年至少進行一次血液分析儀校準，應(yīng)采用儀器配套校準品或經(jīng)溯源系統(tǒng)定值的新鮮血作校準，應(yīng)有校準報告并保留原始校準數(shù)據(jù)。3.3試劑要求：選用廠商配套試劑進行檢測，試劑的貯存、使用、標簽等嚴格遵照實驗室的試劑管理要求進行。3.4質(zhì)控品水平：所有項目每天做高、中、低三個濃度水平的質(zhì)控分析。3.5質(zhì)控頻次：3.5.1室內(nèi)質(zhì)控：每個工作日應(yīng)至少做一次室內(nèi)質(zhì)控樣本；應(yīng)及時查看質(zhì)控數(shù)據(jù)、觀察質(zhì)控圖，保留原始記錄。在每日常規(guī)標本檢測前，應(yīng)分析室內(nèi)質(zhì)控樣本，如果失控應(yīng)分析原因并采取糾正措施后繼續(xù)檢測。3.5.2室間質(zhì)評：每年參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心和浙江省臨檢中心的室間質(zhì)評，同時還參

13、加CAP的室間質(zhì)評。3.6質(zhì)控規(guī)則：3.6.1使用westgard多規(guī)則控制。3.6.2設(shè)定靶值：在開始室內(nèi)質(zhì)控時，首先要設(shè)定質(zhì)控品的靶值。質(zhì)控品的各個測定項目自行確定靶值。靶值必須在實驗室內(nèi)使用自己現(xiàn)行的測定系統(tǒng)進行。定值質(zhì)控品的標定值只能做為確定靶值的參考。3.6.3靶值的設(shè)定：為了確定靶值，新批號的質(zhì)控品應(yīng)與當前使用的質(zhì)控品一同進行測定。將同一批號的全血質(zhì)控物（穩(wěn)定性較短），每天重復(fù)分析每水平控制品至少4次,連續(xù)分析5天，收集至少20次數(shù)據(jù)后，計算均值、標準差和變異系數(shù)。剔除超過3s的數(shù)據(jù)，計算余下數(shù)據(jù)的均值和標準差。以此均值作為質(zhì)控圖的靶值?？刂葡薜脑O(shè)定，以標準差的倍數(shù)表示，采用前一批

14、號質(zhì)控品的變異系數(shù)（CV%）來估計新的標準差。標準差等于平均數(shù)乘以變異系數(shù)。3.7選擇質(zhì)控規(guī)則根據(jù)檢測項目的性能不同，選擇個體化的質(zhì)控規(guī)則，保證誤差檢出率0.90,假失控率0.9RBC0.0350.891.35.3213s00.9HGB1.1331.030.86.0913.5s00.9HCT0.3501.080.94.7512.5s0.030.9PLT5.2002.732.49.3913.5s00.9表2 XT-1800i分析性能及質(zhì)控方案項目SDCV%Bias%Sigma值應(yīng)用規(guī)則PfrPedWBC0.1251.672.77.8113.5s00.9RBC0.0270.741.36.4213.

15、5s00.9HGB0.7660.720.88.8313.5s00.9HCT0.2360.720.97.5713.5s00.9PLT6.863.702.47.4113.5s00.93.7.5 LH780室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則：12S為警告；13S為失控。3.8繪制質(zhì)控圖及記錄質(zhì)控結(jié)果根據(jù)質(zhì)控品的靶值和控制限，繪制Levey-Jennings質(zhì)控圖，以Y軸為質(zhì)控品的測定值，X軸為測定日期。Y軸提供X3s的濃度范圍，X軸刻度表示為時間。各水平線相應(yīng)為均值和質(zhì)控限。3.9失控處理:3.9.1初步分析判斷失控原因:3.92質(zhì)控品原因:保存不當、混勻時過于劇烈、混勻不充分等3.9.3儀器原因: 儀器電壓不穩(wěn)、管道不

16、清潔、日常保養(yǎng)不到位、操作不當、儀器檢測元件的老化和損壞等。3.9.4試劑原因: 保存不當、開箱時間過長、污染等。3.9.5環(huán)境因素: 環(huán)境的溫度、濕度過高或過低，室內(nèi)不清潔。3.9.6操作失誤: 操作人員在操作時沒有嚴格按SOP文件的要求去操作。3.97及時尋找失控原因并記錄失控處理情況，如無法解決，及時上報上一級領(lǐng)導。3.10數(shù)據(jù)的保存及分析：3.10.1每月室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理每月末，應(yīng)對當月的所有質(zhì)控數(shù)據(jù)進行匯總和統(tǒng)計處理，計算的內(nèi)容至少應(yīng)包括：當月每個測定項目原始質(zhì)控數(shù)據(jù)及除外失控數(shù)據(jù)后的平均數(shù)、標準差和變異系數(shù)；當月及以前每個測定項目所有在控數(shù)據(jù)的累積平均數(shù)、標準差和變異系數(shù)。3.

17、10.2每月室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)的保存每個月的月末，應(yīng)將當月的所有質(zhì)控數(shù)據(jù)匯總整理后存檔保存，存檔的質(zhì)控數(shù)據(jù)包括：當月所有項目原始質(zhì)控數(shù)據(jù)；當月所有項目質(zhì)控數(shù)據(jù)的質(zhì)控圖；上述所有計算的數(shù)據(jù)(包括平均數(shù)、標準差、變異系數(shù)及累積的平均數(shù)、標準差、變異系數(shù)等)；當月的失控報告單(包括違背哪一項質(zhì)控規(guī)則，失控原因，采取的糾正措施)。3.10.3每月上報的質(zhì)控數(shù)據(jù)圖表每個月的月末，將當月的所有質(zhì)控數(shù)據(jù)匯總整理后，應(yīng)將以下匯總表上報實驗室負責人：當月所有測定項目質(zhì)控數(shù)據(jù)匯總表；所有測定項目該月的失控情況匯總表。3.10.4室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)的周期性評價每個月的月末，都要對當月室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)的平均數(shù)、標準差、變異系數(shù)及累積

18、平均數(shù)、標準差、變異系數(shù)進行評價，查看與以往各月的平均數(shù)之間、標準差之間、變異系數(shù)之間是否有明顯不同。如果發(fā)現(xiàn)有顯著性的變異，就要對質(zhì)控圖的均值、標準差進行修改，并要對質(zhì)控方法重新進行設(shè)計。二、血涂片顯微鏡檢查日常質(zhì)量控制方案1、室內(nèi)質(zhì)控要求1.1 血涂片鏡下檢查必須使用油鏡。1.2 制作血涂片應(yīng)達到細胞分布均勻、結(jié)構(gòu)清晰、染色良好的要求。1.3 應(yīng)使用與推片機配套的彩色玻片。1.4 異常復(fù)查血片或疑難血片應(yīng)有明確的標識，應(yīng)保留兩年以備查。1.5 看片時，玻片應(yīng)由血膜邊緣向中央依次上下呈曲線移動。1.6 應(yīng)有高年資檢驗人員對看片結(jié)果進行核實，以減少誤差，保證質(zhì)量。2、室間質(zhì)評要求2.1 每年參

19、加衛(wèi)生部臨床檢驗中心組織的室間質(zhì)評活動，浙江省臨床檢驗中心組織的地區(qū)性質(zhì)量控制活動。同時參加CAP室間質(zhì)評活動。2.2 質(zhì)控標本和常規(guī)患者標本的檢測方法需一致，并由同一人完成。三、尿常規(guī)日常質(zhì)量控制方案1、檢測系統(tǒng)尿常規(guī)所有檢測項目均在全自動檢測儀器上進行檢測，主要檢測系統(tǒng)包括京都（AX-4280）尿干化學分析儀及配套試劑與校準品；希森美康UF-1000i尿有形成分分析儀及配套校準品與試劑等。所有這些檢測系統(tǒng)均進行了精密度、準確度、生物參考區(qū)間、分析測量范圍等的方法學驗證試驗。2、儀器維護嚴格按照廠家的要求對儀器進行維護,包括每日的維護、每周的維護、每月的的維護及每年廠家的巡回，每臺儀器均有相

20、應(yīng)的維護程序來指導操作。3、質(zhì)量控制3.1質(zhì)控項目：3.1.1尿干化學包括pH、SG、PRO、GLU、BLD、KET、BIL、UBG、NIT、LEU（尿酸堿度、比重、蛋白質(zhì)、葡萄糖、隱血、酮體、尿膽紅素、尿膽原、亞硝酸鹽、白細胞酯酶）十個項目。3.1.2尿有形成分包括WBC、RBC、EC、CAST、BACT、Cond（尿白細胞、紅細胞、上皮細胞、管型、細菌、電導率）六個項目。3.2校準：每個項目的校準都遵循制造商的建議進行,每個項目都有其校準的周期及要求。每年至少進行一次尿液分析儀校準，應(yīng)采用儀器配套校準品作校準，應(yīng)有校準報告并保留原始校準數(shù)據(jù)。3.3試劑要求：選用廠商配套試劑進行檢測，試劑的

21、貯存、使用、標簽等嚴格遵照實驗室的試劑管理要求進行。3.4質(zhì)控品水平：3.4.1尿干化學所有項目每天做一個濃度質(zhì)控分析。3.4.2尿有形成分所有項目每天做高、低兩個濃度質(zhì)控分析。3.5質(zhì)控頻次：3.5.1室內(nèi)質(zhì)控：每個工作日應(yīng)至少做一次室內(nèi)質(zhì)控樣本；應(yīng)及時查看質(zhì)控數(shù)據(jù)、觀察質(zhì)控圖，保留原始記錄。在每日進行常規(guī)標本檢測前，應(yīng)分析室內(nèi)質(zhì)控樣本，如果失控應(yīng)分析原因采取糾正措施后繼續(xù)檢測。3.5.2室間質(zhì)評：每年參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心組織的室間質(zhì)評活動，浙江省臨床檢驗中心組織的地區(qū)性質(zhì)量控制活動。同時參加CAP室間質(zhì)評活動。3.6質(zhì)控規(guī)則:3.6.1尿干化學3.6.1.1 任意一個試劑膜塊的檢測結(jié)果與

22、質(zhì)控尿液期望“靶值”允許有一個定性等級的差異，超過二個等級或結(jié)果在“正常”與“異?！敝g跳躍均判為失控。3.6.1.2 質(zhì)控結(jié)果與以往結(jié)果在同一等級或相鄰一個等級內(nèi),且不連續(xù)升高或下降4次內(nèi)，判為在控。3.6.1.3 質(zhì)控結(jié)果連續(xù)4次在同方向超出“靶值”一個等級，判為失控。3.6.1.4 當日結(jié)果比以往結(jié)果超過二個等級,質(zhì)控物可重復(fù)測定.如結(jié)果仍異常,可更換質(zhì)控品重新測定,如仍異常,應(yīng)查明原因,上報專業(yè)組技術(shù)負責人,或通知維修工程師。3.6.1.5 操作者應(yīng)重視室內(nèi)質(zhì)空品的測定,及時糾偏,以保證結(jié)果的準確性。3.6.1.6 專業(yè)組技術(shù)負責人將不定期進行室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果的檢查,統(tǒng)計每月質(zhì)控記錄,并算

23、出質(zhì)控值概率,發(fā)現(xiàn)問題及時解決3.6.2尿有形成分3.6.2.1 使用westgard多規(guī)則控制：12s，13ss。3.6.2.2 設(shè)定靶值：在開始室內(nèi)質(zhì)控時，首先要設(shè)定質(zhì)控品的靶值。質(zhì)控品的各個測定項目自行確定靶值。靶值必須在實驗室內(nèi)使用自己現(xiàn)行的測定系統(tǒng)進行。定值質(zhì)控品的標定值只能做為確定靶值的參考。3.6.2.3 靶值的設(shè)定：為了確定靶值，新批號的質(zhì)控品應(yīng)與當前使用的質(zhì)控品一同進行測定。每天重復(fù)分析同一批號的質(zhì)控物每水平至少4次,連續(xù)分析5天，收集至少20次數(shù)據(jù)后，計算均值、標準差和變異系數(shù)。剔除超過3s的數(shù)據(jù)，計算余下數(shù)據(jù)的均值和標準差。以此均值作為質(zhì)控圖的靶值?？刂葡薜脑O(shè)定，以標準差

24、的倍數(shù)表示，采用前一批號質(zhì)控品的變異系數(shù)（CV%）來估計新的標準差。標準差等于平均數(shù)乘以變異系數(shù)。3.6.2.4 12s：為警告，不是失控。若本批次質(zhì)控結(jié)果沒有超出2s，表示本批次檢測是可接受的，可以發(fā)出報告；若有一個質(zhì)控結(jié)果超出（不包括正好在限值線上的結(jié)果）2s，則該批次檢測不適合立即報告，需要作進一步分析，若再符合以下任何一條規(guī)則，才能判斷為失控。3.6.2.5 13s：若質(zhì)控結(jié)果不僅超出2s，還超出了（不包括正好在限值線上的結(jié)果）3s，判為失控。3.6.2.6 在用多規(guī)則判斷質(zhì)控結(jié)果時，只有在一個結(jié)果出現(xiàn)12s警告時，才可接下去檢查是否有符合其他規(guī)則的表現(xiàn)，如有才為失控，如沒有則表示這次12s的出現(xiàn)屬于正常的波動，不作