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文檔簡介
1、菊花的組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng)一、細胞的全能性一、細胞的全能性1、植物學家將胡蘿卜的韌皮部細胞分離出來,將單個細胞放在特定的培養(yǎng)基中培養(yǎng),獲得了許多完整的植株,這些植株的特點是( ).彼此性狀極為相似.都是單倍體植株.植株的變異頻率較高 .都是純合體植株2、根據(jù)分裂潛能,干細胞可分為全能干細胞(可發(fā)育成完整的個體)、多能干細胞(可發(fā)育成多種組織和器官)和專能干細胞(發(fā)育成專門的組織和器官),則這些細胞在個體發(fā)育中的分化順序是( ).全能專能多能.全能多能專能.多能全能專能.專能全能多能、所謂細胞全能性細胞全能性,是指細胞如受精卵一樣,具有經(jīng)過分裂、分化形成各種組織和細胞,最終發(fā)育成一個完整的個體
2、的能力;細胞核全能性則細胞核全能性則指細胞雖不具備發(fā)育成一個完整個體的能力,但是當將其細胞核通過核移植等方法導入去核的卵細胞或受精卵,經(jīng)過受體卵細胞質(zhì)的誘導去分化、體細胞核和受體卵細胞質(zhì)共同作用,依然可能發(fā)育成一個完整的個體。因此,細胞全能性和細胞核全能性是兩個完全不同的概念,不能混為一談。細胞核的全能性并不代表細胞具有全能性。、植物體細胞具有全能性 低等動物的細胞和高等動物早期胚胎細胞具有發(fā)育全能性 高等動物的體細胞核具有發(fā)育全能性 高等動物的體細胞是否具有全能性?一個還沒有最后結論的話題 二、植物組織培養(yǎng)的過程二、植物組織培養(yǎng)的過程離體的植物組織或細胞愈傷組織根和芽完整的植物體脫分化再分化
3、三、影響植物組織培養(yǎng)的因素三、影響植物組織培養(yǎng)的因素1、外植體的選取不同植物的組織培養(yǎng)難度不同同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同2、培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基)大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有機物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等植物激素:生長素、細胞分裂素、赤霉素等3、植物激素生長素細胞分裂素 有利于根的形成4、消毒在培養(yǎng)的整個過程中,都需要是一個無菌環(huán)境原因:5、pH、溫度、光照菊花: pH=5.8 溫度控制在1822 每日光照12h植物組織培養(yǎng)用的培養(yǎng)基,含有植物生長發(fā)育所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì),這些營養(yǎng)物質(zhì)同樣為細菌等微小
4、的生物提供了適合的營養(yǎng)。在這種培養(yǎng)基上,細菌等微小的生物比植物細胞具有更強的新陳代謝能力,它們比植物細胞生長、繁殖得更快,而且它們會產(chǎn)生毒素,使培養(yǎng)的植物細胞很快中毒死亡。因此,植物組織培養(yǎng)要想取得成功,必須有效地防止細菌等的污染,保證培養(yǎng)材料、培養(yǎng)基、培養(yǎng)用具完全無菌。為了達到這一要求,就要在植物組織培養(yǎng)過程中進行一系列的消毒、滅菌,并且要求無菌操作。 制備MS固體培養(yǎng)基外 植 體 消毒接種培養(yǎng)移栽栽培四、實驗操作四、實驗操作思考:高等植物是光能自養(yǎng)型生物,為什么在植物組織培養(yǎng)過程中還需要提供有機物培養(yǎng)基?答案:此時的組織或細胞為離體的,即細胞所生活的環(huán)境為液體有機物營養(yǎng)環(huán)境,而不是能體現(xiàn)其
5、整個植物體的光能自養(yǎng)沖洗酒精無菌水沖洗氯化汞無菌水沖洗至少三次之上思考:培養(yǎng)過程中為什么需要進行光照?答案:在培養(yǎng)過程中,是脫分化、再分化的過程,隨著芽和根的形成,就具有了自養(yǎng)的能力,是由細胞到一個個體的演變過程思考:在整個操作過程中,是如何來實現(xiàn)無菌環(huán)境的?1、培養(yǎng)基的滅菌;(高壓蒸汽滅菌)2、外植體的消毒;(酒精、氯化汞)3、接種的無菌操作;(酒精、酒精燈灼燒)4、無菌箱中的培養(yǎng);5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。脫分化21.下圖是植物組織培養(yǎng)的簡略表示。據(jù)此回答:練習1、下圖是植物組織培養(yǎng)的簡略表示。據(jù)此回答:(1)表示_,它能被培養(yǎng)成為的根本原因是_。(2)表示_,它與相比分化程度
6、_,全能性_。(3)若想制成人工種子,應選用_。(4)若是花藥,則是_,繼續(xù)對其使用_處理可獲得_正常植株,該過程稱為_。(5)若是胡蘿卜根尖細胞,則培養(yǎng)成的葉片的顏色為_,這說明_。(6)若利用此項技術制造治療燙傷、割傷的藥物紫草素,培養(yǎng)將進行到_。脫分化再分化答案:答案:(1)離體的植物組織或器官)離體的植物組織或器官 植物細胞具有全能性植物細胞具有全能性 (2)愈傷組織)愈傷組織 低低 高高 (3) (4)單倍體植株)單倍體植株 秋水仙素秋水仙素 純合體純合體 單倍體育種單倍體育種 (5)綠色)綠色 含有表達葉綠含有表達葉綠體的基因體的基因 (6)練習2、 基因型為AaBb的水稻(含24
7、條染色體)的花藥通過無菌操作接入試管后,在一定條件下形成試管苗,問:(1)愈傷組織是花粉細胞不斷分裂后形成的不規(guī)則的細胞團,愈傷組織形成過程中,必須從培養(yǎng)基中獲得_等營養(yǎng)物質(zhì)。(2)要促進花粉細胞分裂生長,培養(yǎng)基中應有_和_兩類激素。(3)愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根,再由芽發(fā)育成葉和莖。這一過程必須給予光照,其原因是_能利用光能制造有機物,供試管苗生長發(fā)育。(4)試管苗的細胞核中含_條脫氧核糖核苷酸鏈。(5)培育成的試管苗可能出現(xiàn)的基因型有_。答案:答案:(1)水、無機鹽、維生素和小分子有機物)水、無機鹽、維生素和小分子有機物 (2)細胞分裂素)細胞分裂素 植物生長素植物生長素 (3)
8、葉綠體葉綠體 (4)24 (5)AB、aB、Ab、ab方法:酶解法在溫和條件下,用纖維素酶、果膠酶分解物理法:離心、振動、電刺激等化學法:用聚乙二醇(PEG)等試劑作為誘導劑包括膜融合和核融合形成多種雜種細胞AA、AB、BB等植物組織培養(yǎng)的過程練習:右圖為植物體細胞雜交過程示意圖。據(jù)圖回答:(1)步驟是_,最常用的方法是_。(2)步驟一般常用的化學試劑是_,目的是_。(3)在利用雜種細胞培育成為雜種植株的過程中,運用的技術手段是_,其中步驟相當于_,步驟相當于_。(4)植物體細胞雜交的目的是獲得新的雜種植株。使_能夠在新的植物體上有所表現(xiàn),其根本原因_。(5)若遠源雜交親本A和B都是二倍體,則雜種植株為_倍體。(6)從理論上講,雜種植株的育性為_。若運用傳統(tǒng)有性雜交方法能否實現(xiàn)?_。并說明理由_。因此,這項研究對于培養(yǎng)作物新品種方面的重大意義在于_。(7)利用植物體細胞雜交的方法培育作物新品種過程中,遺傳物質(zhì)的傳遞是否遵循孟德爾的遺傳規(guī)律?為什么?_。答案:答案:(1)去掉細胞壁,分離出有活力的原生質(zhì)體/酶解法 (2)聚乙二醇(PEG)/誘導不同植物體細胞的原生質(zhì)體的融合 (3)植物組織培養(yǎng)/脫分化/再分化
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