APE1在肝細(xì)胞癌組織芯片的表達(dá)及臨床病理意義 醫(yī)學(xué)論文

1、    APE1在肝細(xì)胞癌組織芯片的表達(dá)及臨床病理意義 醫(yī)學(xué)論文              本文由中國論文范文收集整理。          作者：鄭智華, 黃愛民, 劉景豐, 臧盛兵, 高凌云, 陳水平 【摘要】  目的 探討脫嘌呤/脫嘧啶核酸內(nèi)切酶1(APE1)基因在原發(fā)性肝細(xì)胞癌(HCC)的表達(dá)及其與臨床病理變化的關(guān)系。 方法 應(yīng)用

2、免疫組織化學(xué)方法,檢測包含HCC及轉(zhuǎn)移灶、癌旁肝硬化組織、癌旁慢性肝炎組織和正常肝組織的組織芯片中APE1的表達(dá)情況,結(jié)合臨床病理資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì) 分析 。 結(jié)果 APE1在癌旁肝硬化組織、癌旁慢性肝炎組織和正常肝組織以細(xì)胞核表達(dá)為主,在HCC和轉(zhuǎn)移灶組織以細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核聯(lián)合表達(dá)為主(P<0.01)。細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核染色強(qiáng)度均與HCC分級和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.01),細(xì)胞質(zhì)染色強(qiáng)度還與腫瘤包膜有無浸潤有關(guān)(P<0.01)。 結(jié)論 APE1蛋白表達(dá)與HCC惡性表型有關(guān),APE1蛋白過表達(dá)及細(xì)胞質(zhì)表達(dá)的出現(xiàn)可能成為HCC預(yù)后不良的指標(biāo)之一。 【關(guān)鍵詞】  癌,肝細(xì)胞; 內(nèi)切核

3、酸酶類; 芯片分析技術(shù); 免疫組織化學(xué); 預(yù)后    ABSTRACT:  Objective  To study the association of apurinc/apyrimidinic endonuclease1(APE1) expression with clinicopathologic parameters in hepatocelluar carcinoma(HCC).  Methods  APE1 protein was detected in seven tissue chips, which cont

4、ains HCC, para-carcinoma tissues, para-carcinoma choronic hepatitis tissues and normal liver tissues by immunohistochemistry.  Detailed analysis of APE1 expression with clinicopathologic parameters was performed.  Results  APE1 was mainly detected in nuclei of para-carcinoma tissues,

5、para-carcinoma chronic hepatitis tissues and normal liver tissues.  While APE1 expressed in both nucleus and cytoplasm only found in HCC and metastatic tumor(P<0.01).  A statistic significantty correlation between the positive degree of APE1 expression in both nucleus and cytoplasm with

6、 histological grade of HCC and metastasis(P<0.01).  Furthermore, the positive degree in cytoplasm was correlated with capsule invasion(P<0.01).  Conclusion  The expression of APE1 is associated with the malignant phenotype of HCC.  Overexpression and cytoplasm localization

7、of APE1 can be used as a poorly prognostic marker for HCC.    KEY WORDS:  carcinoma,hepatocelluar; endonucleases; microchip analytical procedures; immunohistochemistry; prognosis    肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我國最常見的惡性腫瘤之一,其癌變是一個多步驟的漸進(jìn)過程,與慢性肝臟損傷、肝炎和肝硬化有關(guān)。脫嘌呤

8、/脫嘧啶核酸內(nèi)切酶1(APE1)是一種多功能的堿基切除修復(fù)途徑的關(guān)鍵酶,具有脫嘌呤/脫嘧啶位點(diǎn)(AP位點(diǎn))核酸內(nèi)切酶(APE)活性,修復(fù)烷化劑、氧自由基、電離輻射等因素產(chǎn)生的DNA損傷。AP位點(diǎn)是DNA最常見的損傷位點(diǎn)之一,具有細(xì)胞毒性和基因毒性,若不能修復(fù),可阻礙DNA的復(fù)制,導(dǎo)致基因突變、染色體微衛(wèi)星不穩(wěn)定性或細(xì)胞凋亡,最終可導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。APE1又名氧化還原因子1(Ref-1),可調(diào)節(jié)許多轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合活性,參與細(xì)胞增殖、分化和細(xì)胞凋亡等多種關(guān)鍵的細(xì)胞反應(yīng)。筆者采用組織芯片技術(shù)檢測APE1在HCC、轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)情況,分析APE1表達(dá)與HCC臨床病理因素的關(guān)系。1  對

9、象與方法1.1  對象 收集福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一 醫(yī)院 19982006年手術(shù)切除標(biāo)本,其中HCC 126例,癌旁肝硬化組織(距癌組織<2 cm,鏡下無癌)95例,癌旁慢性肝炎組織(距癌組織>5 cm)46例,肝內(nèi)外轉(zhuǎn)移灶29例,術(shù)前均未化療及放療。男性114例,女性10例,60歲28例,60歲96例。根據(jù) 中國 常見腫瘤診治規(guī)范對腫瘤進(jìn)行組織學(xué)分類:梁狀型、假腺管型、實(shí)體型、硬化型。根據(jù)Edmondson組織學(xué)分級法進(jìn)行病 理學(xué) 分級分為I級,并判斷有無包膜癌浸潤和發(fā)生肝內(nèi)外轉(zhuǎn)移。根據(jù)腫瘤大小和數(shù)量分為3組:腫瘤直徑<3 cm,腫瘤直徑35 cm,腫瘤數(shù)

10、量>2個或直徑>5 cm。另收集正常肝組織5例,來源于1998-2006年福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院手術(shù)切除的肝血管瘤的瘤旁肝組織。1.2  方法 鼠抗人APE1 mAb(克隆號13B8E5C2,美國Novus Biologicals公司),工作濃度118 000;Elivision plus免疫組織化學(xué)試劑盒(Kit-9901,福州邁新生物 科技 有限公司)。按照免疫組織化學(xué)Elivision plus二步法試劑盒說明操作,DAB顯色。以PBS代替一抗作為陰性對照。1.3  制作組織芯片 根據(jù) 研究 目的設(shè)計(jì)點(diǎn)陣,選擇典型區(qū)域在玻片和相應(yīng)蠟塊做標(biāo)記。將本研究小組已制成的定位板蓋在受體蠟塊上1,按照定位板的點(diǎn)陣打孔,并從供體蠟塊已標(biāo)記的典型區(qū)域鉆取組織,每個區(qū)域3個組織孔,轉(zhuǎn)移到受體蠟塊的承載孔。將組織芯片和周圍蠟質(zhì)加熱融合。 關(guān)鍵詞:臨床,意義,表達(dá),芯片,細(xì)胞,組織,醫(yī)學(xué)論文,APE1在肝細(xì)胞癌組織芯片的表達(dá)及臨床病理意義 內(nèi)