三波長分光光度法測(cè)定復(fù)方蘆丁片中維生素C的含量

1、    三波長分光光度法測(cè)定復(fù)方蘆丁片中維生素C的含量        提要采用三波長分光光度新計(jì)算法(AS2)測(cè)定復(fù)方蘆丁片中VC的含量。其它成分不干擾測(cè)定，方法簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確。平均回收率為100.3%，RSD為0.79%(n=5)。 關(guān)鍵詞三波長分光光度法(AS2)維生素C復(fù)方蘆丁片復(fù)方蘆丁片含蘆丁和維生素C兩種組分，含量測(cè)定常采用碘量法1、HPLC法2和正交函數(shù)分光光度法3。結(jié)果雖好，但需較昂貴的儀器和較復(fù)雜的理論計(jì)算。采用三波長分光光度法可不受蘆丁干擾準(zhǔn)確測(cè)得維生素C的

2、含量。該法不需分離，儀器要求不高，操作簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確。1實(shí)驗(yàn)部分1.1儀器和試劑UV-260紫外分光光計(jì)(日本島津)。維生素C對(duì)照品(AR，碘量法測(cè)定其含量為100.4%)；蘆丁對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所)；其它試劑均為分析純。1.2方法與結(jié)果紫外吸收光譜按處方比例分別稱取蘆丁和維生素C對(duì)照品適量，用60%乙醇液溶解(取1%重亞硫酸鈉液1ml，乙醇60ml，加水至100ml)。用60%乙醇液為參比，繪制各樣品譜(1)。1紫外吸收光譜1 維生素C2 蘆丁3 混合物測(cè)定波長的選擇據(jù)1，用作法選擇2=261.8nm，1=214nm，3=292nm為粗選之三波長，固定1、2，改變3，測(cè)定干擾組分蘆

3、丁在1、2、3的吸光度，按三波長計(jì)算公式：A=A2-求出A，結(jié)果當(dāng)3=289.8nm時(shí)，A為零，由此確定214、261.8、289.8nm為測(cè)定所選的三個(gè)波長。不同濃度的干擾組分對(duì)測(cè)定的影響配制不同濃度的蘆丁干擾組分液，在選定的三波長處測(cè)定吸光度，并計(jì)算A，結(jié)果均接近于零(表1)。表明采用此三波長測(cè)定基本上能消除蘆丁組分的干擾。Table 1A data of different concentration of interference subslancesNo.A1A2A3A10.0750.0770.0777.3×10-420.1330.1420.1484.6×10-4

4、30.1860.1970.2026.1×10-440.2450.2560.263-3.6×10-450.3150.3300.3384×10-41.2.4計(jì)算方法按所選三波長求出常數(shù)B=(2-1)/(3-1)。制備不同濃度的維生素C對(duì)照液，分別測(cè)定A1S、A2S、A3S，按K1=A1S/A2S，K3=A3S/A2S求出K1和K3的平均值。求出維生素C對(duì)照液的濃度與最大吸收值A(chǔ)2S的回歸方程。將測(cè)出的樣供試液吸光度A1、A2、A3代入下面公式換算成標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值A(chǔ)2S。將求得的A2S值代入維生素C的回歸方程求得待測(cè)組分的含量。1.2.5維生素C標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱取維生

5、素C對(duì)照品5 mg，置50ml量瓶中，用60%的乙醇液稀釋溶解至刻度，作為貯備液。精密吸取0.10、0.20、0.30、0.40、0.50ml，置5ml量瓶中，以60%乙醇溶液稀釋定容，并以此液為隨行空白，在選定的三波長下，測(cè)吸光度A2S對(duì)濃度c和A2S進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為c=0.773A2S-0.0497，r=0.9980。在210g/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。1.2.6回收率的測(cè)定精稱已測(cè)知含量的復(fù)方蘆丁片適量，再精密加入10mg/ml 維生素C標(biāo)準(zhǔn)品不同量，按所選條件測(cè)吸光度，按公式計(jì)算維生素C的濃度及回收率，結(jié)果平均回收率為(100.3±0.8)%，RSD為0.79%。1

6、.2.7樣品的測(cè)定取本品10片，精密稱定，研細(xì)。稱適量(約相當(dāng)于蘆丁20mg及維生素C 50mg)，置50ml燒杯中，分次加少量60%乙醇液攪拌使溶解，并定量轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液。精取續(xù)濾液0.5ml置5ml量瓶中，用60%乙醇稀釋定容，按所選三波長測(cè)定并計(jì)算A2S代入回歸方程，計(jì)算濃度及含量(表2)。 Table 2Determination results of samples(n=5)MethodVitamin Camount(±SD)RSD%Tri-wavelength method95.9±0.70.73Standard method96.3±0.60.622討論 2.11中維生素C在波長260nm左右有一單峰，而復(fù)方蘆丁片中的蘆丁組分在此附近也有很強(qiáng)吸收，干擾維生素C含量的測(cè)定。在以上所選實(shí)驗(yàn)條件下，則可以消除蘆丁組分的影響，而準(zhǔn)確測(cè)得維生素C的含量。并與部標(biāo)法基本一致。2.2試驗(yàn)時(shí)要求水中含鈣量要低，否則在配制60%乙醇液時(shí)，將出現(xiàn)混濁或沉淀，影響試驗(yàn)結(jié)果，其原因可能是由于水中鈣離子與重亞硫酸根形成重亞硫酸鈣，該物質(zhì)在60%的酸介質(zhì)中溶解度低而析出。作者單位：遼寧省中醫(yī)研究院沈陽 110034參考文獻(xiàn)1中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn).1