基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜及其應(yīng)用

1、基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜及其應(yīng)用熊少祥中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所北京質(zhì)譜中心Matrix Assisted Laser Desorption / Ionization Time of Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF-MS) Tanaka K,Waki H,Ido Y,Akita S,Yoshida Y,Yoshuda T. Rapid Comm. Mass Spectrom. 1988,2,151-153 Karas M, Hillenkamp F. Anal. Chem. 1988, 60, 2299-2301 有機(jī)質(zhì)譜儀的構(gòu)成 MALDI-TOF的

2、基本公式：MALDI-TOF質(zhì)譜儀的發(fā)展 線性TOF 反射TOF 離子延時(shí)引出(delay extraction) 正交式引出(主要用于ESI儀器) 源后裂解(PSD, post source decay ) 源內(nèi)裂解(ISD, in source decay) MS/MS- (TOF/TOF, Q-TOF,IT-TOF)MALDI-TOF質(zhì)譜儀的基本組成 Bruker公司儀器示意圖島津公司儀器示意圖MALDI 樣品制備步驟基質(zhì)是如何幫助樣品分子電離的？常用的基質(zhì)基質(zhì)的選擇MALDI-TOF 質(zhì)譜的特點(diǎn) 軟電離質(zhì)譜 碎片少 檢測(cè)質(zhì)量范圍寬 400kDa 靈敏度高 fmol 分析速度快 自動(dòng)化

3、數(shù)據(jù)容易解釋 可以測(cè)試混合物 可以測(cè)試高分子 儀器容易使用、維護(hù)反射檢測(cè)的譜圖線性檢測(cè)的譜圖BSA digest樣品的MS/MS分析部分化合物正、負(fù)離子均可檢測(cè)影響樣品信號(hào)靈敏度的因素 Preformed ions ionization of neutral molecules Smaller ions generally more intense than larger ions In mixtures, more basic molecules tend to have greater ion abundanceIon Suppression - contaminantsIon Suppr

4、ession - mixturesMALDI-TOF質(zhì)譜的應(yīng)用 蛋白質(zhì)與多肽- 常規(guī)蛋白質(zhì)組學(xué)- 醫(yī)學(xué)蛋白組學(xué)- MALDI影像- LC-MALDI及定量分析- 微生物的分類與鑒別 高分子化合物 富勒烯及富勒稀衍生物 配位化合物 核酸 多糖 線性模式檢測(cè)糖蛋白Polymers (e.g. PEG4000-Li)非極性高聚物聚苯乙烯藥物分子Sample (exp. Mass = 448.1086 Da). Matrix: DHBC60及其衍生物有機(jī)分子樹枝狀化合物 (Dendrimer)殼聚糖及其脫乙酰度分析金屬有機(jī)化合物AnchorChip 技術(shù)Myoglobin Digest 在 AnchorChip的測(cè)量結(jié)果MALDI -TOF鑒別與分類微生物MALDI-TOF分子影像技術(shù)原理流程圖MALDI-MS 分析小分子面臨的最大問題：基質(zhì)的干擾納米結(jié)構(gòu)的靶體表面四種小分子混合物的檢測(cè)情況修飾表面靶檢測(cè)單糖修飾表面靶檢測(cè)二肽利用主客體相互作用檢測(cè)小分子 儀器1 Apex II型FT-ICR質(zhì)譜儀儀器2 Biflex III型MALDI-TOF質(zhì)譜儀儀器3 GCT型GC-TOF質(zhì)譜儀儀器4 QP2010型GC/MS質(zhì)譜儀儀器