生物制品車間西林瓶無菌灌裝驗證方案知識講解

1、生物制品車間西林瓶無菌灌裝驗證方案標(biāo)題 :設(shè)備 / 系統(tǒng)編號 : 生物制品車間方案編號 :STP-QA-YZ019版本號 :08方案執(zhí)行前批準(zhǔn)注：簽名表示已對方案的準(zhǔn)確性、完整性和GMP的符合性進(jìn)行了審核并符合相關(guān)要求，同時承諾及時安排相應(yīng)的人力物力資源執(zhí)行該方案。同意批準(zhǔn)方案用于執(zhí)行。制訂職能頭銜簽名日期生產(chǎn)部生產(chǎn)一部生物制品車間主任審閱職能頭銜簽名日期系統(tǒng)所有者生產(chǎn)一部經(jīng)理質(zhì)管部QAT主任批準(zhǔn)職能頭銜簽名日期質(zhì)管部質(zhì)管部經(jīng)理驗證委員會副總經(jīng)理目錄方法執(zhí)行前批準(zhǔn) 21 目的 42 范圍 43 編訂依據(jù) 44 .部門職責(zé) 45 .驗證內(nèi)容 55.1 概述 55.1.1 生產(chǎn)所用主要設(shè)備 55.

2、1.2 生產(chǎn)工藝和品種情況 55.1.3 參加無菌灌裝驗證人員情況 65.2 驗證方法 65.3 再驗證周期 86 .附錄 91 目的此驗證方案的設(shè)計有助于證明采用此無菌灌裝工藝生產(chǎn)出的產(chǎn)品符合成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，尤其是無菌性的控制標(biāo)準(zhǔn)。無菌分裝過程的驗證是在人員進(jìn)行相關(guān)培訓(xùn)及水系統(tǒng)、空調(diào)系統(tǒng)、消毒系統(tǒng)及清洗等驗證合格基礎(chǔ)上進(jìn)行的。本次結(jié)合灌裝生產(chǎn)技術(shù)指標(biāo)和技術(shù)要求，確定無菌灌裝工藝的再驗證內(nèi)容。通過培養(yǎng)基無菌灌裝試驗考察無菌灌裝過程中環(huán)境是否達(dá)到要求，人員操作是否規(guī)范，灌裝工藝是否合理，為灌裝產(chǎn)品的無菌保證提供依據(jù)。2006 年 10 月西林瓶生產(chǎn)線完成改造后進(jìn)行了首次驗證， 2007 年生物制品

3、車間空調(diào)系統(tǒng)改造后進(jìn)行了西林瓶生產(chǎn)線無菌灌裝的再驗證， 2008 、 2009 年在設(shè)備連續(xù)正常運(yùn)行一年后分別進(jìn)行了再驗證，此次驗證為 2011 年凍干粉針投產(chǎn)前的再驗證。2 范圍適用于生物制品車間西林瓶無菌灌裝工藝的再驗證。3 依據(jù)3.1 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范 （2010 年修訂） 。3.2 藥品生產(chǎn)驗證指南 （ 2003 年） 。4 責(zé)任人4.1 驗證委員會4.1.1 負(fù)責(zé)驗證方案的審批。4.1.2 負(fù)責(zé)驗證的協(xié)調(diào)工作，以保證本驗證方案規(guī)定項目的順利實施。4.1.3 負(fù)責(zé)驗證數(shù)據(jù)及結(jié)果的審核。4.1.4 驗證報告的審批。4.1.5 再驗證周期的確認(rèn)。4.2 生產(chǎn)部4.2.1 負(fù)責(zé)驗證方案的

4、起草。4.2.2 負(fù)責(zé)驗證方案的實施和設(shè)備的操作。4.2.3 負(fù)責(zé)公用系統(tǒng)的操作及保養(yǎng)。4.3 設(shè)備部4.3.1 負(fù)責(zé)驗證所需儀器、儀表、量具的校驗。4.3.2 負(fù)責(zé)設(shè)備的維修保養(yǎng)。4.3.3 負(fù)責(zé)提供技術(shù)服務(wù)。4.4 質(zhì)管部4.4.1 負(fù)責(zé)取樣及對樣品的檢驗，負(fù)責(zé)環(huán)境監(jiān)測。4.4.2 負(fù)責(zé)驗證過程中的監(jiān)控。4.4.3 收集驗證試驗結(jié)果并對結(jié)果進(jìn)行分析評價。4.4.4 起草驗證報告并報驗證小組。5內(nèi)容生物制品車間目前生產(chǎn)品種有2個，重組人干擾素a 2b注射液和注射用重組人干擾素a2b,共用一條生產(chǎn)線，生產(chǎn)灌裝工藝參數(shù)如下：重組人干擾素a 2b注射液（小容量注射劑）注射用重組人干擾素a 2b（凍

5、干粉針劑）規(guī)格1ml: 100 萬IU1ml: 300萬IU1ml: 500 萬IU1ml: 600 萬IU300 萬 IU灌裝體積1ml1ml1ml1ml1ml從上表可以看出，灌裝工藝有 2種，一種為小容量注射劑（全壓塞） ，轉(zhuǎn)軋蓋；一種為凍干粉針劑（半加塞），轉(zhuǎn)凍干機(jī)凍干后壓塞，轉(zhuǎn)軋蓋。此次驗證工藝為凍干粉針劑，因其所有產(chǎn)品均為1ml,所以選擇灌裝體積為1ml。5.1 概述無菌分裝過程的驗證即培養(yǎng)基灌裝實驗，是在其它各系統(tǒng)如滅菌系統(tǒng)、公用系統(tǒng)、無菌環(huán)境保持系統(tǒng)及清洗等驗證合格基礎(chǔ)上進(jìn)行的。本方案實施時，其它配套系統(tǒng)均應(yīng)正常運(yùn)轉(zhuǎn)。此次驗證的無菌灌裝人員列表如下：人員名稱崗位人員名稱崗位5.2

6、 驗證方法5.2.1 概述：模擬生產(chǎn)無菌灌裝過程，無菌灌裝除菌過濾后的胰蛋白月東大豆肉湯培養(yǎng)基（TSB）,半加塞，轉(zhuǎn)凍干，軋蓋。生產(chǎn)過程中應(yīng)完全模擬真實生產(chǎn)過程，進(jìn)行裝量檢查。連續(xù)灌裝3次，每次正常灌裝 6000支，裝量1ml/支，半加塞，灌裝加塞后轉(zhuǎn)移至凍干機(jī)中放置至少30小時壓塞后軋蓋。灌裝完畢的培養(yǎng)基首先在20-25 C培養(yǎng)7天，然后在30-35 C培養(yǎng)7天，觀察西林瓶內(nèi)培養(yǎng)基長菌情況，并記錄。5.2.2 公用介質(zhì)的準(zhǔn)備5.2.2.1 純化水A.評價方法：按工藝用水管理制度規(guī)定的頻次和水質(zhì)檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程規(guī)定的檢驗方法對純化水進(jìn)行檢測。B.標(biāo)準(zhǔn):項目理化及微生物指標(biāo)TOC電導(dǎo)率標(biāo)準(zhǔn)中國藥

7、典2010年版二部& 500ppb見2010中國藥典5.2.2.2 注射用水A.評價方法：按工藝用水管理制度規(guī)定的頻次和水質(zhì)檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程規(guī)定的檢驗方法對純化水進(jìn)行檢測。B.標(biāo)準(zhǔn)：項目理化、細(xì)菌,內(nèi)毒素及微生物指標(biāo)TOC電導(dǎo)率標(biāo)準(zhǔn)中國藥典2010年版二部& 500ppb見2010中國藥典5.2.3 無菌環(huán)境控制與監(jiān)測5.2.3.1 潔凈區(qū)沉降菌、浮游菌和懸浮粒子測試A.評價方法：生產(chǎn)前按潔凈區(qū)沉降菌測試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、潔凈區(qū)浮游菌測試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和潔凈區(qū)懸浮粒子測試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程對潔凈區(qū)的沉降菌、浮游菌和懸浮粒子進(jìn)行測定，在生產(chǎn)過程中，在關(guān)鍵操作的全過程，包括設(shè)備組裝應(yīng)對百級灌裝

8、區(qū)進(jìn)行沉降菌的動態(tài)監(jiān)測。在灌裝前段、中段、后段對關(guān)鍵操作區(qū)分裝設(shè)備上方、理瓶機(jī)上方、凍干機(jī)門前上方進(jìn)行動態(tài)懸浮粒子的監(jiān)測。動態(tài)取樣應(yīng)避免對潔凈區(qū)造成不良影響。B.標(biāo)準(zhǔn):潔凈級別塵埃粒子數(shù)/立方米沉降菌菌落數(shù)浮游菌菌落數(shù)>0.5微米>5微米(90mm) cfu /4小時cfu/m3100級<3, 50001110000 級<350, 000W2, 000501005.2.3.2 操作間壓差測定A.評價方法：生產(chǎn)前測定，將所有門關(guān)閉，觀察安裝在各個相應(yīng)房間的壓差計，記錄，灌裝間與相臨 房間有傳輸口的地方做氣流流向測定以確保無菌狀況。B.標(biāo)準(zhǔn)：相鄰不同級別空間的靜壓差絕對值5

9、Pa;潔凈區(qū)與室外的壓差10Pa;灌裝間應(yīng)相對正壓。5.2.4 操作間、設(shè)備、操作人員表面微生物測定5.2.4.1 操作人員A.評價方法：對表面和操作人員的監(jiān)測，應(yīng)在關(guān)鍵操作完成后進(jìn)行。對百級灌裝區(qū)的操作人員的手套、胸前、手臂等部位的微生物進(jìn)行監(jiān)測，手套為接觸平皿，其它部位采用棉簽擦拭法進(jìn)行，取出事先準(zhǔn)備好 的浸泡在5ml滅菌注射用水中的無菌棉簽，從左到右擦拭面積25 cm2,然后將擦拭后的棉簽放回原盛裝容器中，振搖1min,吸取1ml浸出液于滅菌平皿中，將融化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，混勻，水平放 置，凝固后將培養(yǎng)皿倒置于3035c培養(yǎng)48小時，計算菌落數(shù)，每個棉簽做兩塊平皿。灌裝間的每

10、個人員包括現(xiàn)場QA均取樣，詳細(xì)標(biāo)記和記錄被取樣人、取樣時間、取樣部位。B.標(biāo)準(zhǔn)：手套全部檢出菌數(shù)v1個，操作者身上每個部位的兩個平皿檢出菌數(shù)之和v1個。5.2.4.2操作間、設(shè)備表面A.評價方法：取出事先準(zhǔn)備好的浸泡在5ml滅菌注射用水中的無菌棉簽，從左到右擦拭操作間及設(shè)備表面，擦拭面積為 25 cm2,然后將擦拭后的棉簽放回原盛裝容器中，振搖 1min,吸取1ml浸出液于滅菌平 皿中，將融化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，混勻，水平放置，凝固后將培養(yǎng)皿倒置于3035c培養(yǎng)48小時，計算菌落數(shù)，每個棉簽做兩塊平皿。操作間四面墻壁各取 1個點，兩臺旋轉(zhuǎn)理瓶機(jī)和灌裝機(jī)軌道表面、凍干機(jī)板層上各取2個點

11、。B.標(biāo)準(zhǔn)：百級區(qū)域表面微生物v1個/25cm2,即2個平皿檢出菌數(shù)之和v 1個。5.2.5原料和包裝材料確認(rèn)5.2.5.1 西林瓶的滅菌效果檢查A. 評價方法：任取滅菌后的西林瓶40支，分為兩份，20支/份，分別接種至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和改良馬丁培養(yǎng)基中，分別置30 35和 20 25培養(yǎng)14 天。B. 標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)無菌生長。5.2.5.2 膠塞的滅菌效果檢查A 評價方法：任取滅菌后的膠塞40 個，分為兩份，20個/ 份，分別接種至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和改良馬丁培養(yǎng)基中，置30 35和 20 25培養(yǎng) 14 天。B. 標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)無菌生長。5.2.6 培養(yǎng)基灌裝實驗5.2.6.1 液體培養(yǎng)基說明A

12、. 成份：胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的配制： 取脫水胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基， 按說明書上的配方配制， 按正常生產(chǎn)過程無菌過濾。5.2.6.2 模擬灌裝試驗按灌裝標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行灌裝，模擬生產(chǎn)過程進(jìn)行裝量等檢測。半加塞，裝載入凍干機(jī)板層上，關(guān)閉凍干機(jī)前箱大門，放置至少30 小時后在凍干機(jī)內(nèi)壓賽，取出軋蓋。5.2.6.3 合格標(biāo)準(zhǔn)將上述灌裝后的培養(yǎng)基50 正放，50倒放，先置20-25 培養(yǎng) 7 天，接著在 30-35 培養(yǎng) 7 天，分別于第 7 天、第 14 天觀察結(jié)果，灌裝少于5000 支時，不應(yīng)檢出污染品；灌裝在 5000 至 10000 時 ： 污染概率應(yīng)為0。有1 支污染需進(jìn)行調(diào)查，

13、并考慮重復(fù)培養(yǎng)基灌裝試驗； 2 支污染需進(jìn)行調(diào)查，并需要再驗證。發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)進(jìn)行調(diào)查。5.2.7 陽性對照和陰性對照的制備A. 方法：灌裝結(jié)束后，用滅菌后的試管從配制的除菌濾器后接取培養(yǎng)基， 15ml/ 管，共裝 4 支，分兩組，每組兩支，一組作為陽性，接種金黃葡萄球菌稀釋菌液(100CFU/ml) ，接種量1.0ml ，于 30-35 培養(yǎng) 48 小時，一組作為陰性，于30-35 培養(yǎng) 14 天。B.標(biāo)準(zhǔn)：24hr內(nèi)陽性應(yīng)有菌明顯生長，陰性在 14天內(nèi)無菌生長。5.3 再驗證周期：1)培養(yǎng)基模擬試驗的初始驗證每班次需要連續(xù)進(jìn)行3 次合格試驗。2)培養(yǎng)基模擬試驗通常按生產(chǎn)工藝每班

14、次半年進(jìn)行1 次，每次至少一批。停產(chǎn)半年后，再生產(chǎn)前，應(yīng)進(jìn)行再驗證3）設(shè)備、空調(diào)凈化系統(tǒng)有重大變更后，應(yīng)進(jìn)行再驗證4）當(dāng)產(chǎn)品的分裝工藝及人員或影響產(chǎn)品質(zhì)量的主要因素有重大變更后，應(yīng)進(jìn)行再驗證6驗證結(jié)果記錄及結(jié)果評價，見附件附件1液體灌裝工藝驗證結(jié)果及記錄（1）附件2液體灌裝工藝驗證結(jié)果及記錄（2）附件3液體灌裝工藝驗證結(jié)果及記錄（3）附件4液體灌裝工藝驗證結(jié)果及記錄（4）附件5液體灌裝工藝驗證結(jié)果及記錄（5）附件 6 無菌灌裝驗證培養(yǎng)基配制生產(chǎn)記錄附件7西林瓶無菌灌裝驗證生產(chǎn)記錄附件5液體灌裝工藝驗證結(jié)果及記錄（1）驗證項目名稱公用介質(zhì)的準(zhǔn)備第次 灌裝試驗項目標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果記錄人復(fù)核人日期1 .純化

15、水應(yīng)符合規(guī)定2.注射用水應(yīng)符合規(guī)定第二次灌裝1 .純化水應(yīng)符合規(guī)定2.注射用水應(yīng)符合規(guī)定第三次灌裝1 .純化水應(yīng)符合規(guī)定2.注射用水應(yīng)符合規(guī)定備注:液體灌裝工藝驗證結(jié)果及記錄（2）第 次驗證項目名稱 生產(chǎn)環(huán)境試驗項目標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果記錄 人復(fù)核 人日期1 .生產(chǎn)前操作間100 級：>5m：< 0 個/m3;>0.5 m： W3500個/m3;試懸浮粒子數(shù)10000 級：>0.5 m：w 350000 個/m3;3> 5m：& 2000 個/m 。驗2.生產(chǎn)前操作間100級：沉降菌1cfu/4 小時內(nèi)沉降菌數(shù)10000級：沉降菌 50cfu/4 小時容3.生產(chǎn)前操作

16、間100級：浮游菌1 cfu/m 3浮游菌平均數(shù)“一一、，.310000 級：浮游菌 100 cfu/m備注液體灌裝工藝驗證結(jié)果及記錄（3）第 次驗證項目名稱 生產(chǎn)環(huán)境試驗項目標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果記錄 人復(fù)核 人日期1 .操作間的溫度 及相對濕度溫度：18-26 C ；相對濕度45-65%。溫度： 濕度：試2.操作間壓差相鄰不同級別空間的靜壓差絕 對值 5Pa;潔凈區(qū)與室外的壓 差10Pa。對萬級走廊： 人流對走廊： 對軋蓋：驗內(nèi)3.生產(chǎn)操作間動 態(tài)懸浮粒子數(shù)100 級：>5m：< 0 個/m3;>0.5 m： W3500個/m3;4.灌裝中操作間 空氣動態(tài)沉降菌 （平均數(shù)）100級：沉

17、降菌1cfu/4 小時容10000級：沉降菌 50cfu/4 小時5 .操作間、設(shè)備、 操作人員表面微 生物計數(shù)100級區(qū)：百級區(qū)域表向微生物 最大允許數(shù) 1個/25cm：即2 個平皿檢出菌數(shù)之和V 1個。人員：手套全部檢出菌數(shù)v1個，操作者身上每個部位的兩 個平皿檢出菌數(shù)之和V 1個6.操作間清潔、 清場驗證前后的清潔清場應(yīng)符合工 藝衛(wèi)生要求。備注液體灌裝工藝驗證結(jié)果及記錄（4）驗證項目名稱包裝材料（西林瓶、膠塞）無菌檢查第一次灌裝試驗項目標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果記錄人復(fù)核人日期分裝前膠塞尢困檢查尢菌生長分裝前西林瓶尢園檢查尢菌生長第二次灌裝分裝前膠塞尢困檢查尢菌生長分裝前西林瓶尢園檢查尢菌生長第三次灌裝分

18、裝前膠塞尢困檢查尢菌生長分裝前西林瓶尢園檢查尢菌生長備注:液體灌裝工藝驗證結(jié)果及記錄（5）驗證項目名稱培養(yǎng)基灌裝實驗一一陰陽性對照陽性對昭八、灌裝次 數(shù)第一次灌裝第二次灌裝第三次灌裝24小時 培養(yǎng)結(jié) 果標(biāo)準(zhǔn)24小時內(nèi)模擬試驗用培養(yǎng)基中所接種的微生物明顯生長。結(jié)論記錄人復(fù)核人日期陰性對昭八、灌裝次 數(shù)第一次灌裝第二次灌裝第三次灌裝14天培 養(yǎng)結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)14天無菌生長結(jié)論記錄人復(fù)核人日期備注:附件6液體灌裝工藝驗證結(jié)果及記錄（6）培養(yǎng)基污染情況統(tǒng)計第一次灌裝總支數(shù)培養(yǎng)地點培養(yǎng)溫度培養(yǎng)溫度7天觀察結(jié)果觀察時間：月日14天觀察結(jié)果觀察時間：月日污染支數(shù)：污染支數(shù)：污染率：污染率：觀察人：觀察人：結(jié)論

19、第二次灌裝總支數(shù)培養(yǎng)地點培養(yǎng)溫度培養(yǎng)溫度7天觀察結(jié)果觀察時間：月日14天觀察結(jié)果觀察時間：月日污染支數(shù)：污染支數(shù)：污染率：污染率：觀察人：觀察人：結(jié)論第三次灌裝總支數(shù)培養(yǎng)地點培養(yǎng)溫度培養(yǎng)溫度7天觀察結(jié)果觀察時間：月日14天觀察結(jié)果觀察時間：月日污染支數(shù)：污染支數(shù)：污染率：污染率：觀察人：觀察人：結(jié)論結(jié)果評價及建議生產(chǎn)部：質(zhì)管部：日期：附件7無菌灌裝驗證培養(yǎng)基配制生產(chǎn)記錄產(chǎn)品名稱培養(yǎng)基灌裝實驗生產(chǎn)地點生物制品車間配液間、稀配間產(chǎn)品批號批量（瓶）規(guī) 格生產(chǎn)開始時間生產(chǎn)結(jié)束時間工 序操 作 內(nèi) 容結(jié)果記錄開 工刖 檢 查1 .確認(rèn)生產(chǎn)指令的內(nèi)容。2 .有無清場合格證，是否在有效期內(nèi)。3 .確認(rèn)設(shè)備性能完好，儀表有校驗合格證，并在有效期內(nèi)。4 .檢查水、電、氣（汽）供應(yīng)良好。符合規(guī)定（）符合規(guī)定（）符合規(guī)定（）符合規(guī)定（）時間：操作人：復(fù)核人：生產(chǎn)準(zhǔn)備操 作 內(nèi) 容結(jié) 果 記 錄1.取容、量器具用4% NaOH浸泡過夜后用注射用水沖洗干凈。不銹鋼桶 個；玻璃棒 個；立瓶;量筒;燒杯; 500ml鹽水瓶個；硅膠管個；293濾器個；其它：。日期：操作人：復(fù)核人：2.物料確認(rèn)名稱生產(chǎn)廠家批號含量符合要求日期：操作人：復(fù)